Name: high-resolution ultrasonography for the analysis of orthotopic atc tumors in a genetically engineered mouse model
Uploaded: 2022-10-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Resolution Ultrasonography for the Analysis of Orthotopic ATC Tumors in a Genetically Engineered Mouse Model at JoVE.com

لم يتلق هذا البحث أي منحة محددة من وكالات التمويل العامة أو التجارية أو غير الربحية.

أجريت الدراسة الحالية بموافقة لجنة رعاية واستخدام الحيوان بجامعة سيتشوان. TPO-cre / ERT2 ؛ برافCA / بالوزن ؛ Trp53 Δex2-10/ Δex2-10 الفئران المعدلة وراثيا10 تم استخدامها في هذه الدراسة (انظر جدول المواد). يمكن تعديل خطوات البروتوكول لأنواع الحيوانات المختلفة إذا لزم...

<ol>
	<li>Maniakas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+overall+survival+in+patients+with+anaplastic+thyroid+carcinoma,+2000-2019.">Evaluation of overall survival in patients with anaplastic thyroid carcinoma, 2000-2019.</a> JAMA Oncology. 6 (9), 1397-1404 (2020).</li><li>Molinaro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaplastic+thyroid+carcinoma:+From+clinicopathology+to+genetics+and+advanced+therapies.">Anaplastic thyroid carcinoma: From clinicopathology to genetics and advanced therapies.</a> Nature Reviews Endocrinology. 13 (11), 644-660 (2017).</li><li>Champa, D., Di Cristofano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+anaplastic+thyroid+carcinoma+in+the+mouse.">Modeling anaplastic thyroid carcinoma in the mouse.</a> Hormones and Cancer. 6 (1), 37-44 (2015).</li><li>Vitiello, M., Kusmic, C., Faita, F., Poliseno, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+lymph+node+volume+by+ultra-high-frequency+ultrasound+imaging+in+the+Braf/Pten+genetically+engineered+mouse+model+of+melanoma.">Analysis of lymph node volume by ultra-high-frequency ultrasound imaging in the Braf/Pten genetically engineered mouse model of melanoma.</a> Journal of Visualized Experiments. (175), e62527 (2021).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+intensity+focused+ultrasound+(LIFU)+triggered+drug+release+from+cetuximab-conjugated+phase-changeable+nanoparticles+for+precision+theranostics+against+anaplastic+thyroid+carcinoma.">Low intensity focused ultrasound (LIFU) triggered drug release from cetuximab-conjugated phase-changeable nanoparticles for precision theranostics against anaplastic thyroid carcinoma.</a> Biomaterials Science. 27 (1), 196-210 (2018).</li><li>Mohammed, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+detection+and+prevention+of+pancreatic+cancer:+Use+of+genetically+engineered+mouse+models+and+advanced+imaging+technologies.">Early detection and prevention of pancreatic cancer: Use of genetically engineered mouse models and advanced imaging technologies.</a> Current Medicinal Chemistry. 19 (22), 3701-3713 (2012).</li><li>Wege, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+ultrasound+including+elastography+and+contrast-enhanced+ultrasound+(CEUS)+for+early+detection+and+characterization+of+liver+lesions+in+the+humanized+tumor+mouse+model.">High resolution ultrasound including elastography and contrast-enhanced ultrasound (CEUS) for early detection and characterization of liver lesions in the humanized tumor mouse model.</a> Clinical Hemorheology and Microcirculation. 52 (2-4), 93-106 (2012).</li><li>Greco, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+imaging+for+the+study+of+mouse+models+of+thyroid+cancer.">Preclinical imaging for the study of mouse models of thyroid cancer.</a> International Journal of Molecular Sciences. 18 (12), 2731 (2017).</li><li>Renault, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+ultrasound+imaging+of+the+mouse.">High-resolution ultrasound imaging of the mouse.</a> Journal of Radiologie. 87, 1937-1945 (2006).</li><li>McFadden, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53+constrains+progression+to+anaplastic+thyroid+carcinoma+in+a+Braf-mutant+mouse+model+of+papillary+thyroid+cancer.">p53 constrains progression to anaplastic thyroid carcinoma in a Braf-mutant mouse model of papillary thyroid cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (16), 1600-1609 (2014).</li><li>Garassini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+principles+of+ultrasonic+diagnosis.">Basic principles of ultrasonic diagnosis.</a> GEN. 39 (4), 283-289 (1985).</li><li>Aldrich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+physics+of+ultrasound+imaging.">Basic physics of ultrasound imaging.</a> Critical Care Medicine. 35, 131-137 (2007).</li><li>Mancini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+ultrasound+microimaging+of+thyroid+in+living+mice.">Morphological ultrasound microimaging of thyroid in living mice.</a> Endocrinology. 150 (10), 4810-4815 (2009).</li><li>Ying, M., Yung, D. M., Ho, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-dimensional+ultrasound+measurement+of+thyroid+gland+volume:+a+new+equation+with+higher+correlation+with+3-D+ultrasound+measurement.">Two-dimensional ultrasound measurement of thyroid gland volume: a new equation with higher correlation with 3-D ultrasound measurement.</a> Ultrasound in Medicine &amp; Biology. 34 (1), 56-63 (2008).</li></ol>

يستخدم هذا البروتوكول التصوير بالموجات فوق الصوتية عالي الدقة لتحليل أورام ATC التقويمية في نموذج فأر معدل وراثيا. النموذج المعدل وراثيا ، مع النمط الجيني ل TPO-cre / ERT2 ؛ برافCA / بالوزن ؛ تم تطوير Trp53 Δex2-10/ Δex2-10 في مختبرنا. الحيوانات تفرط في التعبير عن BrafV600E وتفتقر إلى...

على الرغم من أن سرطان الغدة الدرقية الكشمي (ATC) يمثل أقل من 2٪ من سرطانات الغدة الدرقية ، إلا أنه يسبب أكثر من 50٪ من الوفيات المرتبطة بسرطان الغدة الدرقية سنويا. متوسط وقت البقاء على قيد الحياة بعد التشخيص مع ATC هو حوالي 6 أشهر فقط ، ولا توجد علاجات متاحة تحسن بشكل كبير البقاء على قيد الحياة 1,2.
وقد أعاقت ندرة ATC البحث الذي يدرس كيف يبدأ المرض ويتقدم بقوة. أصبحت نماذج الفئران المعدلة وراثيا التي تحاكي المرض متاحة مؤخرا ، والتي توفر نظرة ثاقبة للمرض واستجاباته للعلاجات الممكنة3،4،5. تتطلب مثل هذه الدراسات تصويرا دقيقا للورم للقياسات والمراقبة ، والتي يتم إجراؤها عادة باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي أو التصوير المقطعي المحوسب أو التصوير بالموجات فوق الصوتية عالي الدقة 6,7. وقد استخدم التصوير بالموجات فوق الصوتية على نطاق واسع في أعضاء الفأر. لها مزايا على التصوير بالرنين المغناطيسي والتصوير المقطعي المحوسب حيث يمكن إجراؤها في الوقت الفعلي ولا تعرض الموضوع للإشعاع ، والمعدات اللازمة صغيرة بما يكفي لتكون محمولة 8,9. ومع ذلك ، فإن الدراسات حول المراقبة المستمرة لنمو ATC باستخدام الموجات فوق الصوتية نادرة. لذلك ، يستكشف هذا العمل فائدة الموجات فوق الصوتية في هذا السياق.
هنا ، يتم تقديم بروتوكول لاستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة لمسح الأورام ومراقبتها وقياسها بدقة في نموذج الماوس من ATC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adhesive tape</td>
			<td>Winner</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia system</td>
			<td>RWDlifescience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brafflox/wt mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber for anesthesia induction</td>
			<td>RWDlifescience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Winner</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>Petbee</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>RWDlifescience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical gloves</td>
			<td>Winner</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper towels</td>
			<td>Breeze</td>
			<td>B914JY</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TPO-cre/ERT2 mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trp53flox/wt mice</td>
			<td>Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>Keppler</td>
			<td>KL-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound machine</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo 3100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-resolution ultrasonography for the analysis of orthotopic atc tumors in a genetically engineered mouse model

يرتبط سرطان الغدة الدرقية الكشمي (ATC) بسوء التشخيص وقصر متوسط وقت البقاء على قيد الحياة ، ولكن لا يوجد علاج فعال يحسن النتائج بشكل كبير. قد تساعد نماذج الفئران المعدلة وراثيا التي تحاكي تطور ATC الباحثين على دراسة علاجات هذا المرض. تهجين ثلاثة أنماط وراثية مختلفة من الفئران ، TPO-cre / ERT2 ؛ برافCA / بالوزن ؛ تم تطوير نموذج ATC المعدل وراثيا Trp53 Δex2-10 /Δex2-10. تم تحفيز نموذج الفئران ATC عن طريق الحقن داخل الصفاق من عقار تاموكسيفين مع الإفراط في التعبير عن BrafV600E وحذف Trp53 ، وتم إنشاء الأورام في غضون شهر 1 تقريبا. تم تطبيق الموجات فوق الصوتية عالية الدقة للتحقيق في بدء الورم وتطوره ، وتم الحصول على منحنى النمو الديناميكي عن طريق قياس أحجام الورم. بالمقارنة مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) والتصوير المقطعي المحوسب ، فإن الموجات فوق الصوتية لها مزايا في مراقبة نموذج الفئران ATC ، مثل كونها غير جراحية ومحمولة وفي الوقت الفعلي وبدون التعرض للإشعاع. الموجات فوق الصوتية عالية الدقة مناسبة للقياسات الديناميكية والمتعددة. ومع ذلك ، يتطلب الفحص بالموجات فوق الصوتية للغدة الدرقية في الفئران المعرفة والخبرة التشريحية ذات الصلة. توفر هذه المقالة إجراء مفصلا لاستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة لمسح الأورام في نموذج ATC المعدل وراثيا. وفي الوقت نفسه ، يتم سرد تعديل المعلمة بالموجات فوق الصوتية ، ومهارات المسح بالموجات فوق الصوتية ، والتخدير واستعادة الحيوانات ، وغيرها من العناصر التي تحتاج إلى عناية أثناء العملية.

كان متوسط حجم ATC الأيمن في بداية الدراسة 4.867 مم 2 ، وكان متوسط حجم ATC الأيسر 5.189 مم2. في القياس الرابع ، نما متوسط حجم ATC الأيمن إلى 11.844 مم 2 ، بينما نما حجم الورم في الفص الأيسر إلى 9.280 مم2. زاد إجمالي حجم ATC من 10.057 مم 2 إلى 15.843 مم2. في المرحلة اللاحقة من الدراسة ، ن...

Watch this Scientific Journal Video about High-Resolution Ultrasonography for the Analysis of Orthotopic ATC Tumors in a Genetically Engineered Mouse Model at JoVE.com

High-Resolution Ultrasonography for the Analysis of Orthotopic ATC Tumors in a Genetically Engineered Mouse Model

يصف البروتوكول الحالي التصوير بالموجات فوق الصوتية عالي التردد لتصور الغدة الدرقية للفأر بالكامل ومراقبة نمو سرطان الغدة الدرقية الكشمي.

التصوير بالموجات فوق الصوتية عالية الدقة لتحليل أورام ATC التقويمية في نموذج فأر مهندس وراثيا

Anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is associated with a poor prognosis and short median survival time, but no effective treatment improves the outcomes ...

يساعد هذا البروتوكول المستخدمين على استخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية عالي الدقة لمسح الأورام ومراقبتها وقياسها في نموذج الماوس لسرطان الغدة الدرقية الكشمي. ثبت أن التصوير بالموجات فوق الصوتية موثوق به في الفئران لتصوير الأنسجة التي تشغل مواقع مماثلة لأنسجة الجسم مثل الأنسجة البشرية ، بما في ذلك الكبد والغدة الدرقية والجنين. للبدء ، قم بتشغيل نظام الموجات فوق الصوتية ، وإنشاء مجلد جديد لالتقاط الصور وجمع البيانات.بعد ذلك ، حدد مسبار الخط 40 ميجاهرتز ، وانقر فوق نمط الأنسجة السطحية لتنشيط محول الأنسجة السطحي ، واستخدم الوضع B الناتج لتصوير الغدة الدرقية. قم بتنظيف منصة تصوير الحيوانات ، وقم بتشغيل زر التسخين حتى تصل درجة حرارة المنصة إلى 38 إلى 40 درجة مئوية قبل وضع الحيوان عليها. تخدير الماوس ، ووضعه على منصة ساخنة.قم بتغطية الخطم بمخروط أنف متصل بمخرج التخدير. ثم ، مع الماوس في وضع ضعيف ، استخدم شريطا لاصقا لتثبيت أطرافه على المنصة الساخنة. لتصوير الورم، اضبط نظام التصوير لتحسين الدقة.اضبط الكسب ثنائي الأبعاد على 25 إلى 30 ديسيبل ، وعمق الصورة على 10 ملم ، والمركز على ثلاثة إلى ستة ملليمترات. بعد تحديد المعلمات ، قم بتطبيق جل الموجات فوق الصوتية بحرية على منطقة الجلد العاري الذي تم تحقيقه باستخدام كريم مزيل الشعر. عقد التحقيق ، ووضعه في اتصال مع هلام الموجات فوق الصوتية على الصدر.ثم ، قم بالمسح من الصدر باتجاه الرقبة لتحديد موقع الغدة الدرقية. تحديد أورام سرطان الغدة الدرقية الكشمية من القصبة الهوائية وعضلات الشريط اعتمادا على الموقع التشريحي وصدى الموجات فوق الصوتية. بناء على انطباع الورم الكلي ، قم بتأكيد قسم الصورة بأكبر قطر للورم من اليسار إلى اليمين.ثم اضغط على زر التجميد ، وقم بقياس أقطار الورم الأمامية الخلفية واليسرى إلى اليمنى باستخدام الفرجار بالموجات فوق الصوتية. بعد الانتهاء من عمليات الفحص ، امسح هلام الموجات فوق الصوتية ، وقم بإزالة الشريط المقيد من أطراف الحيوان. تم قياس حجم ورم ATC للفصين الأيمن والأيسر على مدى أربع فترات زمنية.في القياس الرابع ، نما متوسط حجم ATC الأيمن إلى 11.844 ملم مربع ، بينما نما حجم الورم في الفص الأيسر إلى 9.280 ملم مربع ، مما يجعل المجموع زيادة متوسط الحجم إلى 15.843 ملم مربع. ومن المثير للاهتمام ، في الفأر المسمى P92 ، نما حجم الورم إلى ما يقرب من أربع مرات أكبر من الحجم في القياس الأولي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الموجات فوق الصوتية مرنة ويمكن إجراؤها في الوقت الفعلي دون أي إشعاع.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

فلوري مثلي نموذج الفأر من سرطان البنكرياس

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

عزل الخلايا السرطانية المتداولة في نموذج الفأر المثلي لسرطان القولون والمستقيم

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Genetically Engineered Mouse Model of Sporadic Colorectal Cancer

نموذج الفأر المهندسة وراثيا لسرطان القولون والمستقيم المتفرقة

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations ...

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

استخدام الموجات فوق الصوتية عالية الدقة لرصد ظهور ورم والنمو في نماذج سرطان البنكرياس المهندسة وراثيا

The LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mouse model represents an established and frequently used transgenic model to evaluate novel ...

In Vitro Establishment of a Genetically Engineered Murine Head and Neck Cancer Cell Line using an Adeno-Associated Virus-Cas9 System

In Vitro Establishment of a Genetically Engineered Murine Head and Neck Cancer Cell Line using an Adeno-Associated Virus-Cas9 System (Video) | JoVE

في المختبر إنشاء خط الخلايا السرطانية للراس والرقبة المهندسة جينيا باستخدام نظام كاس 9 الفيروسات المرتبطة Adeno

The use of primary normal epithelial cells makes it possible to reproducibly induce genomic alterations required for cellular transformation by ...

Ultrasound-Guided Orthotopic Implantation of Murine Pancreatic Ductal Adenocarcinoma

Ultrasound-Guided Orthotopic Implantation of Murine Pancreatic Ductal Adenocarcinoma (Video) | JoVE

الموجات فوق الصوتية غرس العظام البنكرياس الاقنيه اللحمية

The recent success of immune checkpoint blockade in melanoma and lung adenocarcinoma has galvanized the field of immuno-oncology as well as revealed the ...

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity (Video) | JoVE

توليد أورام البنكرياس التقويمية وتوصيف الجسم السابق للخلايا التي تتسلل إلى الخلايا T

In vivo models of pancreatic cancer provide invaluable tools for studying disease dynamics, immune infiltration and new therapeutic strategies. The ...

Orthotopic Transplantation of Breast Tumors as Preclinical Models for Breast Cancer

زرع العظام لأورام الثدي كنماذج ما قبل السريرية لسرطان الثدي

Preclinical models that faithfully recapitulate tumor heterogeneity and therapeutic response are critical for translational breast cancer research. ...

An Orthotopic Resectional Mouse Model of Pancreatic Cancer

نموذج الماوس استئصال العظام لسرطان البنكرياس

There is a lack of satisfactory animal models to study adjuvant and/or neoadjuvant therapy in patients being considered for surgery of pancreatic cancer ...

Analysis of Lymph Node Volume by Ultra-High-Frequency Ultrasound Imaging in the Braf/Pten Genetically Engineered Mouse Model of Melanoma

تحليل حجم العقدة الليمفاوية بواسطة التصوير بالموجات فوق الصوتية فائقة التردد في نموذج الفأر المصمم وراثيا Braf/Pten لسرطان الجلد

Tyr::CreER+,BrafCA/+,Ptenlox/lox&#160;genetically engineered mice (Braf/Pten mice) are widely used as an in vivo model of metastatic melanoma. Once a ...