Name: three-dimensional culture of vascularized thermogenic adipose tissue from microvascular fragments
Uploaded: 2023-02-03T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments at JoVE.com

Dr. Acosta wordt ondersteund door de National Institutes of Health subsidies CA148724 en TL1TR002647. Dr. Gonzalez Porras wordt ondersteund door het National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases van de National Institutes of Health, onder awardnummer F32-0DK122754. Dit werk werd gedeeltelijk ondersteund door de National Institutes of Health (5SC1DK122578) en de Universiteit van Texas in San Antonio Department of Biomedical Engineering. De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijkerwijs de officiële standpunten van de National Institutes of Health. Figuren zijn deels gemaakt met Biorender.com.

Dit onderzoek is uitgevoerd in overeenstemming met de Dierenwelzijnswet en de Uitvoeringsverordening Dierenwelzijn conform de uitgangspunten van de Handreiking Verzorging en Gebruik Proefdieren. Alle dierprocedures werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee van de Universiteit van Texas in San Antonio.
OPMERKING: Voor de hieronder beschreven stappen worden mannelijke Lewis Rats gebruikt. Kleine protocolaanpassingen moeten worden aangebracht voor een vrouwtje, evena...

Het gebied van bruin / beige vetweefseltechnologie is grotendeels onvolwassen 22,23,24,25,26,27,28, waarbij het grootste deel van de vetmodellen wordt ontwikkeld voor wit vetweefsel 8,22,31. Gemanip...

Het doel van dit protocol is om een aanpak te beschrijven voor het ontwikkelen van gevasculariseerd beige vetweefsel uit een enkele, potentieel autologe bron, microvasculair fragment (MVF). Van bruine en beige vetweefsels is aangetoond dat ze gunstige eigenschappen vertonen die verband houden met metabole regulatie; Het kleine volume van deze vetweefseldepots bij volwassenen beperkt echter de potentiële impact op het systemische metabolisme, met name bij zieke aandoeningen zoals obesitas of diabetes type 2 1,2,3,4,5,6,7. Er is aanzienlijke belangstelling voor bruin / beige vet als een therapeutisch doelwit voor het voorkomen van de schadelijke metabole effecten in verband met obesitas en de comorbiditeiten ervan 8,9,10,11,12.
MVF's zijn vaatstructuren die direct kunnen worden geïsoleerd uit vetweefsel, gekweekt en gedurende langere tijd in een driedimensionale configuratie kunnen worden gehouden13,14,15. Eerder werk van onze groep, en anderen, zijn begonnen met het exploiteren van de meercellige en multipotente capaciteit van MVF's, met name als het gaat om de vorming van vetweefsel16,17,18. Als een opbouw van dit werk hebben we onlangs aangetoond dat MVF's afgeleid van knaagdiermodellen van gezonde en type 2 diabetes19 en van menselijke proefpersonen (volwassenen ouder dan 50 jaar)20 cellen bevatten die kunnen worden geïnduceerd om thermogeen of beige vetweefsel te vormen.
Hierin is een innovatieve aanpak van waaruit een enkele bron MVF wordt gebruikt, niet alleen in staat om beige vetweefsel te creëren, maar ook de bijbehorende en kritische vasculaire component21. Het gebruik van deze techniek kan van grote waarde zijn voor studies die op zoek zijn naar een eenvoudige weefselmanipulatiebenadering voor de vorming van thermogene vetweefsels. In tegenstelling tot andere methoden die gericht zijn op het engineeren van beige vetweefsel 22,23,24,25,26,27,28, vereist het proces dat in deze studie wordt beschreven niet het gebruik van meerdere celtypen of complexe inductieregimes. Gevasculariseerde beige en witte vetmodellen kunnen worden gemaakt met MVF's afkomstig van knaagdieren en menselijke bronnen, wat een groot vertaalpotentieel aantoont. Het eindproduct van dit protocol is een beige thermogeen vetweefsel met een structuur en metabole functie vergelijkbaar met bruin vetweefsel. Over het algemeen presenteert dit protocol het idee dat een gemakkelijk toegankelijke en mogelijk autologe bron MVF een waardevolle therapeutische interventie en hulpmiddel kan zijn voor het bestuderen van metabole stoornissen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aminocaproic Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A2504-100G</td>
			<td>Added in DMEM at the concentration of 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt-Tipped Scissors</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-000-172</td>
			<td>Sterilize in autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovin Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>126575-10GM</td>
			<td>Diluted in PBS to 4 mg/mL and 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type 1</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC9633623</td>
			<td>Diluted to 6 mg/mL in BSA 4 mg/mL, Digestion of minced fat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>AC230302500</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 2 mg/ml stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable underpads</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>23-666-062</td>
			<td>For fluid absorption during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>08-951-5</td>
			<td>Sterilize in autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8242;s Modified Eagle&#8242;s Medium (DMEM)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11885092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8242;s Modified Eagle&#8242;s Medium/Nutrient Mixture F-12 Ham (DMEM/F12)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>16140089</td>
			<td>Added in DMEM to 20% v/v.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F8630-25G</td>
			<td>Solubilized in DMEM at the concentration of 20 mg/mL, Protein found in blood plasma and main component of hydrogel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask, 250 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>FB500250</td>
			<td>Allows for digestion of fat using a large surface area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>50-264-21</td>
			<td>Sterilize in autoclave, For handling of tissue and filters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forskolin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F6886</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 10 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human MVF</td>
			<td>Advanced Solutions Life Scienes, LLC</td>
			<td>https://www.advancedsolutions.com/microvessels</td>
			<td>Human MVFs (hMVFs) isolated from three different patients (52-, 54-, and 56-year old females) were used in the current study.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Indomethacine&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I7378</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 12.5 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I5523</td>
			<td>Diluted in 0.01 N HCl at a 5 mg/ml stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MycoZap</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC9023832</td>
			<td>Added in DMEM to 0.2% w/v, Mycoplasma Prophylactic&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pennycilin/Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>Added in DMEM to 1% v/v.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene (100 mm x 15 mm).</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>351029</td>
			<td>3 for removal of blood vessels and mincing, 8 (lid) for presoaking of screens &#38; 8 (dish) for use when filtering with 500 or 37 &#181;M screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene (35 mm x 10 mm).</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>50-202-036</td>
			<td>For counting fragments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline (PBS)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>14-190-250</td>
			<td>Diluted to 1x with sterile deionized water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Clippers (Andwin Mini Arco Pet Trimmer)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC0854141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rosiglitazone</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>R0106200MG</td>
			<td>Diluted in DMSO at a 10 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14059-11</td>
			<td>1 for initial incision, 1 for epididymal incision, 1 for tip clipping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screen&#160; 37 &#181;M&#160;</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>652222R</td>
			<td>Cut into 3&#34; rounded squares and sterilized in ethylene oxide, Fragment entrapment and removal of very small fragments/single cells and debris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screen 500 &#181;M&#160;</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>652222F</td>
			<td>Cut into 3&#34; rounded squares and sterilized in ethylene oxide, Removes larger fragments/debris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serrated Hemostat</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-000-171</td>
			<td>Sterilize in autoclave, For clamping of skin before incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip Filter 0.22 &#956;m&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SE1M179M6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>6051601KU</td>
			<td>Diluted in deionzed water to 10 U/mL, Used as a clotting agent turning fibrinogen to fibrin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thyroid hormone (T3)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T2877</td>
			<td>Diluted in 1N NaOH at a 0.02 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zucker diabetic fatty (ZDF) rats - obese (FA/FA) or lean (FA/+) male&#160;</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-lean-fa?region=3611 
			https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-obese?region=3611</td>
			<td>Obtained from Charles River (Wilmington, MA). Rats were acquired at 4 weeks of age and fed Purina 5008 until euthanasia (15-19 weeks of age). Glucose levels (blood from the lateral saphenous vein) were greater than 300 mg/dL in all FA/FA rats used in the study. All animals were housed in a temperature-controlled environment with a 12-h light-dark cycle and fed ad libitum.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional culture of vascularized thermogenic adipose tissue from microvascular fragments

Engineering thermogeen vetweefsel (bijv. Beige of bruine vetweefsels) is onderzocht als een potentiële therapie voor metabole ziekten of voor het ontwerp van gepersonaliseerde microtissues voor gezondheidsscreening en medicijntests. De huidige strategieën zijn vaak vrij complex en slagen er niet in om de meercellige en functionele eigenschappen van thermogeen vetweefsel volledig weer te geven. Microvasculaire fragmenten, kleine intacte microvessels bestaande uit arteriol, venulen en haarvaten geïsoleerd uit vetweefsel, dienen als een enkele autologe bron van cellen die vascularisatie en vetweefselvorming mogelijk maken. Dit artikel beschrijft methoden voor het optimaliseren van kweekomstandigheden om het genereren van driedimensionale, gevasculariseerde en functionele thermogene vetweefsels uit microvasculaire fragmenten mogelijk te maken, inclusief protocollen voor het isoleren van microvasculaire fragmenten uit vetweefsel en kweekomstandigheden. Daarnaast worden best practices besproken, evenals technieken voor het karakteriseren van de gemanipuleerde weefsels, en monsterresultaten van zowel knaagdier als menselijke microvasculaire fragmenten worden verstrekt. Deze aanpak heeft het potentieel om te worden gebruikt voor het begrijpen en ontwikkelen van behandelingen voor obesitas en metabole ziekten.

Er zijn een paar belangrijke fenotypische morfologische kenmerken van beige / bruin vetweefsel: het is multiloculair / bevat kleine lipidedruppeltjes, bezit een groot aantal mitochondriën (de reden voor zijn karakteristieke "bruinachtige" uiterlijk in vivo), heeft dienovereenkomstig een hoog zuurstofverbruik / mitochondriale bio-energetica, is sterk gevasculariseerd, heeft een verhoogde lipolyse / insuline-gestimuleerde glucose-opname, en, het meest berucht, drukt hoge niveaus van ontkoppelingseiwit 1 (UCP1) u...

Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments at JoVE.com

Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments

Hier presenteren we een gedetailleerd protocol dat het gebruik van microvasculaire fragmenten geïsoleerd uit knaagdier- of menselijk vetweefsel schetst als een eenvoudige benadering om functioneel, gevasculariseerd beige vetweefsel te engineeren.

Driedimensionale kweek van gevasculariseerd thermogeen vetweefsel uit microvasculaire fragmenten

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for ...

Dit protocol beschrijft de generatie van driedimensionaal gevasculariseerd en functioneel thermogeen vet uit microvasculaire fragmenten, of MVF's. De huidige strategieën voor het ontwerpen van thermogeen vetweefsel zijn complex en geven de meercellige en functionele eigenschappen ervan niet volledig weer. MVF's zijn een enkele bron van cellen die vascularisatie en vetweefselvorming mogelijk maken.Omdat het een eenvoudige methode met één bron is om biologische imitaties van beige vet te creëren, hebben MVF's een aanzienlijk potentieel voor het bevorderen van het begrip of de ontwikkeling van behandelingen voor obesitas en metabole ziekten. Plaats het op de juiste manier geschoren en geëuthanaseerde dier behandeld met 70% ethanol in een liggende positie en begin met het isoleren van het liesvet. Til de huid onder de penis op met een schaar en voer de incisie uit, beginnend in het midden en zijdelings snijdend, een V-vorm vormend, voordat u naar de achterkant van het dier loopt om toegang te krijgen tot de volledige vetafzetting.Zorg tijdens het snijden voor de scheiding van de huid van het vet door het onderling verbonden fasciaweefsel te snijden. Zodra de fascia op de juiste manier is gesneden, moet u ervoor zorgen dat het liesvet van beide zijden, dat zich uitstrekt van de lies naar de achterkant, zichtbaar is. Verwijder vervolgens het vet van de twee zijden in afzonderlijke conische buizen met 10 milliliter BSA in PBS, met een concentratie van één milligram per milliliter.Om het epididymale vet te oogsten, snijdt u door de buikhuid, gevolgd door voorzichtig door de dunne laag rond de testikels te snijden. Trek voorzichtig aan het vetweefsel met een tang en knip het uit met een schaar, terwijl u de dissectie van belangrijke zichtbare bloedvaten vermijdt. Plaats nu het verwijderde vet in een conische buis van 50 milliliter met 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Om het achterste onderhuidse vet te isoleren, draait u de rat gevoelig en gebruikt u een grote schaar om de dikke huid van de rug helemaal tot aan de hoofdhuid te knippen, waarbij u ervoor zorgt dat u niet te diep onder de huid snijdt. Snijd de fascia die de huid met het weefsel verbindt. Onderscheid het onderhuidse vet, gelegen in het intrascapulaire gebied, van het bruine vet dat zich dichter bij de wervelkolom bevindt voordat u het onderhuidse vet isoleert en in een 50 milliliter conische buis plaatst met 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Gebruik tijdens het werken in een biohood een tang om het weggesneden vet in een standaard petrischaal van 100 milliliter te plaatsen met 0,5 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS. Verwijder alle zichtbare bloedvaten, spieren of vreemd weefsel uit het vet. Gebruik een schaar, hak het vet gedurende 10 minuten fijn en controleer op knobbels door wat meer BSA toe te voegen.Ga door met hakken, indien nodig, voordat u de gehakte vetsuspensie overbrengt naar een steriele kolf van 250 milliliter met een pipet van 10 milliliter. Maak het volume in de kolf tot 20 milliliter door voldoende BSA in PBS toe te voegen. Voeg nu BSA in PBS toe aan collagenase en homogeniseer de oplossing door deze voorzichtig te schudden voordat u deze steriel filtert door een nylon netfilter van 0,22 micron.Voeg onmiddellijk de vereiste hoeveelheid collagenase-oplossing toe aan de gehakte vetsuspensie en verteer het vet door de kolf in een cirkelvormige beweging in een waterbad van 37 graden Celsius gedurende de juiste tijd te schudden. Breng het verteerde vet over in een 50 milliliter conische buis met het label verteerd vet of gehakt vet. Centrifugeer de buis gedurende vier minuten op 400 G om de microvasculaire fragmenten, of MVF's, in een rode pellet te laten draaien.Decanteer het supernatant voorzichtig in een 50 milliliter conische buis met het label afval zonder de pellet te verstoren. Voeg vervolgens 10 milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS toe aan de buis met de pellet en meng de pelletsuspensie door deze twee keer voorzichtig op en neer te pipetteren zonder de fragmenten te verstoren. Neem nu het scherm van 500 micron dat vooraf is gedrenkt in een steriele petrischaal met vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS en plaats het over de plastic schermhouder die op een nieuwe petrischaal wordt bewaard.Pipetteer 10 milliliter suspensie uit de verteerde pelletbuis in concentrische cirkels op het scherm. Was het filter met nog eens vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS en gooi het weg, terwijl het filtraat in de petrischaal blijft. Plaats vervolgens het voorgeweekte scherm van 37 micron boven de plastic schermhouder op een nieuwe petrischaal.Breng met een verse pipet het filtraat van de eerste filtratie in concentrische cirkels over op het scherm. Zoals eerder beschreven, was het scherm met BSA in PBS en gooi het filter deze keer weg met behoud van het scherm van 37 micron. Schuif het scherm van 37 micron in een nieuwe petrischaal met vijf milliliter van één milligram per milliliter BSA in PBS.Maak de fragmenten los door de schaal zachtjes tegen een conische houder te tikken, zonder vloeistof te morsen. Spoel het filter af met nog eens vijf milliliter van de BSA in PBS. Breng vervolgens de vloeistof uit de petrischaal over in een steriele conische buis van 50 milliliter.Spoel het scherm van 37 micron nog een paar keer af en voeg de was toe aan de conische buis totdat het totale verzamelde volume 15 tot 20 milliliter is. Gooi het scherm na de laatste spoeling weg. Knip het uiteinde van een pipetpunt van 20 microliter met een schaar.Schud de buis met de vloeistof voorzichtig voordat u twee aliquots van 20 microliter trekt met behulp van de gesneden pipetpunt en pipetteer elk van de aliquots in een schone petrischaal van 35 millimeter. Tel het aantal fragmenten in het monster in elke petrischaal met behulp van een standaard lichtmicroscoop en verkrijg met behulp van de formule die in het manuscript wordt vermeld het totale aantal geïsoleerde microvasculaire fragmenten. Draai de resterende vloeistof in de conische buis van 50 milliliter op 400 G gedurende vier minuten om de MVF te verzamelen.Decanteer na het draaien het grootste deel van het supernatant uit de conische buis en gebruik een pipet om het kleine volume vloeistof dat op de rand van de buis achterblijft te verwijderen. Voeg vervolgens trombine toe aan de putten die zijn bestemd voor het gieten van gels. Snijd het uiteinde van een pipetpunt van 200 microliter en gebruik deze voorzichtig in fibrinogeen om de gewenste einddichtheid te verkrijgen.Pipetteer de suspensie in de trombineoplossing in de put en homogeniseer het mengsel snel door op en neer te pipetteren. Zodra alle gels zijn gegoten, plaatst u de putplaat in een incubator bij 37 graden Celsius en 5% koolstofdioxide gedurende ongeveer 15 minuten om gel-crosslinking mogelijk te maken. De lipiden en de gedifferentieerde adipocyten werden waargenomen door confocale microscopie beeldvorming van de hydrogels met BODIPY als de lipidekleuring.Het kweken van niet-gevasculariseerd vetweefsel met behulp van witte adipogene of beige adipogene media resulteerde in de vorming van niet-gevasculariseerd wit of beige vetweefsel, respectievelijk, van zowel mager als diabetisch knaagdier-afgeleide MVF's. Evenzo resulteerde het kweken van gevasculariseerd vetweefsel met behulp van witte adipogene of beige adipogene media in de vorming van gevasculariseerd wit of beige vetweefsel, respectievelijk, van de knaagdier-afgeleide MVF's. Niet-gevasculariseerd wit en beige vetweefsel verkregen uit menselijke MVF's werden ook waargenomen door confocale microscopie.Het vermogen van MVF's om te differentiëren in beige vetweefsel werd genetisch bevestigd met behulp van RT-qPCR. Magere en diabetische knaagdier-MFF's blootgesteld aan directe witte adipogene of beige adipogene media werden geëvalueerd op adipogenese, thermogenese en angiogenese. De expressie van ontkoppelingseiwit 1 was, zoals verwacht, significant hoger in beige adipogene weefsel.Een vergelijkbare trend werd waargenomen bij MVF's van knaagdieren die werden blootgesteld aan indirecte witte adipogene of beige adipogene media, evenals bij menselijke MVF's die werden blootgesteld aan directe witte adipogene of beige adipogene media. Ten slotte was het uit mitochondriale bio-energetica duidelijk dat het beige vetweefsel functioneel gezien in alle gevallen een karakteristiek hoger zuurstofverbruikspercentage of OCR-niveau had. De enzymatische vertering van het vetweefsel moet worden geoptimaliseerd om MVF's van vergelijkbare grootte en kwaliteit consistent te reproduceren.Na de spijsvertering moeten MVF's voorzichtig worden behandeld, met speciale zorg om verdere breuk van de fragmenten te voorkomen. Deze techniek hielp de balans van vaatgroei en adipocytendifferentiatie te bevorderen, waarvan bewezen is dat deze afhankelijk is van de geïntroduceerde factoren.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Drie-dimensionale Optische resolutie Fotoakoestisch Microscopie

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Alginate Hydrogels for Three-Dimensional Organ Culture of Ovaries and Oviducts

Alginaat Hydrogelen voor Three-Dimensional orgelcultuur van de eierstokken en eileiders

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer deaths in women and has a 63% mortality rate in the United States1. The cell type of origin for ...

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

Vlakke en Three-Dimensional Printing van geleidende inkten

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Drie-dimensionale Cultuur van de Cel Model voor het meten van de effecten van het interstitiële vocht Flow op tumorcel invasie

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Human kraakbeenweefsel Fabrication behulp van drie-dimensionale Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Analyse van cel-migratie binnen Driedimensionale Collagen Matrix

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

Genereren van een drie-dimensionale volledige dikte huidequivalent en Automated Verwonden

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Polyethylene glycol Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Fabricage van Inverted Colloïdaal Crystal Poly (ethyleen glycol) Steiger: Een drie-dimensionale Cultuur van de Cel Platform for Liver Tissue Engineering

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Isolation of Murine Adipose Tissue-derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Tissue Engineering

Isolatie Murine vetweefsel afgeleide microvasculaire fragmenten als Vascularisatie eenheden voor Tissue Engineering

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Three-dimensional Tissue Engineered Aligned Astrocyte Networks to Recapitulate Developmental Mechanisms and Facilitate Nervous System Regeneration

Drie-dimensionale weefsel ontworpen uitgelijnd Astrocyt netwerken vergemakkelijken zenuwstelsel regeneratie te recapituleren Developmental mechanismen

Neurotrauma and neurodegenerative disease often result in lasting neurological deficits due to the limited capacity of the central nervous system (CNS) to ...