Name: three-dimensional culture of vascularized thermogenic adipose tissue from microvascular fragments
Uploaded: 2023-02-03T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments at JoVE.com

Dr. Acosta, Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından CA148724 ve TL1TR002647 hibeleri ile desteklenmektedir. Dr. Gonzalez Porras, Ulusal Sağlık Enstitüleri Ulusal Diyabet ve Sindirim ve Böbrek Hastalıkları Enstitüsü tarafından F32-0DK122754 Ödül Numarası altında desteklenmektedir. Bu çalışma, kısmen, Ulusal Sağlık Enstitüleri (5SC1DK122578) ve San Antonio'daki Teksas Üniversitesi Biyomedikal Mühendisliği Bölümü tarafından desteklenmiştir. İçerik yalnızca yazarların sorumluluğundadır ve Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir. Rakamlar kısmen Biorender.com ile oluşturulmuştur.

Bu çalışma, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu ilkelerine uygun olarak Hayvan Refahı Yasası ve Hayvan Refahı Yönetmeliğinin Uygulanmasına uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Tüm hayvan prosedürleri, San Antonio'daki Teksas Üniversitesi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
NOT: Aşağıda açıklanan adımlar için erkek Lewis Sıçanları kullanılmıştır. Bir dişi için hafif protokol ayarlamaları yap...

Kahverengi/bej yağ dokusu mühendisliği alanı büyük ölçüde olgunlaşmamış 22,23,24,25,26,27,28 olup, beyaz yağ dokusu için yağ modellerinin büyük kısmıgeliştirilmektedir 8,22,31. M...

Bu protokolün amacı, potansiyel olarak otolog tek bir kaynaktan, mikrovasküler fragmandan (MVF) vaskülarize bej yağ dokusu geliştirmek için bir yaklaşımı tanımlamaktır. Kahverengi ve bej yağ dokularının metabolik regülasyon ile ilgili faydalı özellikler gösterdiği gösterilmiştir; Bununla birlikte, yetişkinlerde bu yağ dokusu depolarının küçük hacmi, özellikle obezite veya tip 2 diyabet 1,2,3,4,5,6,7 gibi hastalıklı durumlarda, sistemik metabolizma üzerindeki potansiyel etkiyi sınırlar. Obezite ve komorbiditeleri ile bağlantılı zararlı metabolik etkilerin önlenmesinde terapötik bir hedef olarak kahverengi / bej yağa önemli bir ilgi vardır 8,9,10,11,12.
MVF'ler, yağ dokusundan doğrudan izole edilebilen, kültürlenebilen ve uzun süre üç boyutlu bir konfigürasyonda tutulabilen damar yapılarıdır13,14,15. Grubumuzun ve diğerlerinin önceki çalışmaları, MVF'lerin çok hücreli ve çok güçlü kapasitesini, özellikle yağ dokusu oluşumu16,17,18 ile ilgili olarak kullanmaya başlamıştır. Bu çalışmanın bir birikimi olarak, yakın zamanda sağlıklı ve tip 2 diyabet19'un kemirgen modellerinden ve insan deneklerden (50 yaşın üzerindeki yetişkinler)20 türetilen MVF'lerin, termojenik veya bej yağ dokusu oluşturmak için indüklenebilen hücreler içerdiğini gösterdik.
Burada, sadece bej yağ dokusu oluşturmakla kalmayıp aynı zamanda ilişkili ve kritik vasküler bileşenini de oluşturabilen tek bir kaynak MVF'nin kullanıldığı yenilikçi bir yaklaşımbulunmaktadır 21. Bu tekniğin kullanımı, termojenik yağ dokusu oluşumu için basit bir doku mühendisliği yaklaşımı arayan çalışmalar için büyük değer taşıyabilir. Bej yağ dokusu 22,23,24,25,26,27,28'in mühendisliğini amaçlayan diğer yöntemlerin aksine, bu çalışmada açıklanan süreç çoklu hücre tiplerinin veya karmaşık indüksiyon rejimlerinin kullanılmasını gerektirmez. Kemirgen ve insan kaynaklarından kaynaklanan MVF'ler ile vaskülarize bej ve beyaz yağ modelleri oluşturulabilir ve bu da büyük çeviri potansiyeli gösterir. Bu protokolün son ürünü, kahverengi yağ dokusu ile karşılaştırılabilir bir yapıya ve metabolik fonksiyona sahip, tasarlanmış bir bej termojenik yağ dokusudur. Genel olarak, bu protokol, kolayca erişilebilen ve muhtemelen otolog bir kaynak MVF'nin metabolik bozuklukları incelemek için değerli bir terapötik müdahale ve araç olabileceği fikrini sunmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aminocaproic Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A2504-100G</td>
			<td>Added in DMEM at the concentration of 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt-Tipped Scissors</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-000-172</td>
			<td>Sterilize in autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovin Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>126575-10GM</td>
			<td>Diluted in PBS to 4 mg/mL and 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type 1</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC9633623</td>
			<td>Diluted to 6 mg/mL in BSA 4 mg/mL, Digestion of minced fat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>AC230302500</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 2 mg/ml stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable underpads</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>23-666-062</td>
			<td>For fluid absorption during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>08-951-5</td>
			<td>Sterilize in autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8242;s Modified Eagle&#8242;s Medium (DMEM)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11885092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8242;s Modified Eagle&#8242;s Medium/Nutrient Mixture F-12 Ham (DMEM/F12)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>16140089</td>
			<td>Added in DMEM to 20% v/v.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F8630-25G</td>
			<td>Solubilized in DMEM at the concentration of 20 mg/mL, Protein found in blood plasma and main component of hydrogel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask, 250 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>FB500250</td>
			<td>Allows for digestion of fat using a large surface area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>50-264-21</td>
			<td>Sterilize in autoclave, For handling of tissue and filters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forskolin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F6886</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 10 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human MVF</td>
			<td>Advanced Solutions Life Scienes, LLC</td>
			<td>https://www.advancedsolutions.com/microvessels</td>
			<td>Human MVFs (hMVFs) isolated from three different patients (52-, 54-, and 56-year old females) were used in the current study.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Indomethacine&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I7378</td>
			<td>Diluted in ethanol at a 12.5 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I5523</td>
			<td>Diluted in 0.01 N HCl at a 5 mg/ml stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MycoZap</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC9023832</td>
			<td>Added in DMEM to 0.2% w/v, Mycoplasma Prophylactic&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pennycilin/Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>Added in DMEM to 1% v/v.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene (100 mm x 15 mm).</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>351029</td>
			<td>3 for removal of blood vessels and mincing, 8 (lid) for presoaking of screens &#38; 8 (dish) for use when filtering with 500 or 37 &#181;M screens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene (35 mm x 10 mm).</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>50-202-036</td>
			<td>For counting fragments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline (PBS)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>14-190-250</td>
			<td>Diluted to 1x with sterile deionized water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Clippers (Andwin Mini Arco Pet Trimmer)</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>NC0854141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rosiglitazone</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>R0106200MG</td>
			<td>Diluted in DMSO at a 10 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14059-11</td>
			<td>1 for initial incision, 1 for epididymal incision, 1 for tip clipping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screen&#160; 37 &#181;M&#160;</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>652222R</td>
			<td>Cut into 3&#34; rounded squares and sterilized in ethylene oxide, Fragment entrapment and removal of very small fragments/single cells and debris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screen 500 &#181;M&#160;</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>652222F</td>
			<td>Cut into 3&#34; rounded squares and sterilized in ethylene oxide, Removes larger fragments/debris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serrated Hemostat</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-000-171</td>
			<td>Sterilize in autoclave, For clamping of skin before incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steriflip Filter 0.22 &#956;m&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SE1M179M6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>6051601KU</td>
			<td>Diluted in deionzed water to 10 U/mL, Used as a clotting agent turning fibrinogen to fibrin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thyroid hormone (T3)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T2877</td>
			<td>Diluted in 1N NaOH at a 0.02 mM stock concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zucker diabetic fatty (ZDF) rats - obese (FA/FA) or lean (FA/+) male&#160;</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-lean-fa?region=3611 
			https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-obese?region=3611</td>
			<td>Obtained from Charles River (Wilmington, MA). Rats were acquired at 4 weeks of age and fed Purina 5008 until euthanasia (15-19 weeks of age). Glucose levels (blood from the lateral saphenous vein) were greater than 300 mg/dL in all FA/FA rats used in the study. All animals were housed in a temperature-controlled environment with a 12-h light-dark cycle and fed ad libitum.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional culture of vascularized thermogenic adipose tissue from microvascular fragments

Mühendislik termojenik yağ dokusu (örneğin, bej veya kahverengi yağ dokuları), metabolik hastalıklar için potansiyel bir tedavi olarak veya sağlık taraması ve ilaç testi için kişiselleştirilmiş mikrodokuların tasarımı için araştırılmıştır. Mevcut stratejiler genellikle oldukça karmaşıktır ve termojenik yağ dokusunun çok hücreli ve fonksiyonel özelliklerini tam olarak tam olarak tasvir edememektedir. Yağ dokusundan izole edilen arteriol, venüller ve kılcal damarlardan oluşan küçük bozulmamış mikrodamarlar olan mikrovasküler fragmanlar, vaskülarizasyon ve yağ dokusu oluşumunu sağlayan tek bir otolog hücre kaynağı olarak işlev görür. Bu makalede, mikrovasküler fragmanların yağ dokusu ve kültür koşullarından izole edilmesine yönelik protokoller de dahil olmak üzere, mikrovasküler fragmanlardan üç boyutlu, vaskülarize ve fonksiyonel termojenik yağ dokularının üretilmesini sağlamak için kültür koşullarını optimize etme yöntemleri açıklanmaktadır. Ek olarak, mühendislik dokularını karakterize etme teknikleri gibi en iyi uygulamalar tartışılmakta ve hem kemirgen hem de insan mikrovasküler fragmanlarından numune sonuçları sağlanmaktadır. Bu yaklaşım, obezite ve metabolik hastalıklara yönelik tedavilerin anlaşılması ve geliştirilmesi için kullanılma potansiyeline sahiptir.

Bej / kahverengi yağ dokusunun birkaç önemli fenotipik morfolojik özelliği vardır: multilokülerdir / küçük lipit damlacıkları içerir, çok sayıda mitokondriye sahiptir (karakteristik olarak "kahverengimsi" görünümünün nedeni in vivo), buna bağlı olarak yüksek oksijen tüketim oranına / mitokondriyal biyoenerjetik özelliklere sahiptir, yüksek vaskülarize olmuş, lipoliz / insülin ile uyarılmış glikoz alımını arttırmıştır ve en ünlüsü, termojenik solunumda rol oynayan mitok...

Watch this Scientific Journal Video about Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments at JoVE.com

Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments

Burada, kemirgen veya insan yağ dokusundan izole edilen mikrovasküler fragmanların işlevsel, vaskülarize bej yağ dokusunun mühendisliğine basit bir yaklaşım olarak kullanımını özetleyen ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

Mikrovasküler Fragmanlardan Vaskülarize Termojenik Yağ Dokusunun Üç Boyutlu Kültürü

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for ...

Bu protokol, mikrovasküler fragmanlardan veya MVF'lerden üç boyutlu vaskülarize ve fonksiyonel termojenik yağın oluşumunu tanımlar. termojenik yağ dokusunun mühendisliği için mevcut stratejiler karmaşıktır ve çok hücreli ve fonksiyonel özelliklerini tam olarak tasvir etmemektedir. MVF'ler vaskülarizasyon ve yağ dokusu oluşumunu sağlayan tek bir hücre kaynağıdır.Bej yağın biyolojik taklitlerini oluşturmak için basit bir tek kaynaklı yöntem olan MVF'ler, obezite ve metabolik hastalıklara yönelik tedavilerin anlaşılmasını veya geliştirilmesini teşvik etmek için önemli bir potansiyele sahiptir. % 70 etanol ile muamele edilmiş uygun şekilde traş edilmiş ve ötenazi edilmiş hayvanı sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve kasık yağının izolasyonuna başlayın. Cildi penisin altına bir çift makasla kaldırın ve tüm yağ birikintisine erişmek için hayvanın arka tarafına ilmek atmadan önce, merkezden başlayıp yanal olarak keserek, bir V şekli oluşturarak insizyonu gerçekleştirin.Kesim yaparken, birbirine bağlı fasya dokusunu keserek cildin yağdan ayrılmasını sağlayın. Fasya uygun şekilde kesildikten sonra, kasıklardan arkaya doğru uzanan her iki taraftan da kasık yağının görülebildiğinden emin olun. Daha sonra, PBS'de 10 mililitre BSA içeren ve mililitre başına bir miligram konsantrasyonuna sahip ayrı konik tüplerde yağı iki taraftan çıkarın.Epididim yağını toplamak için, karın derisini kesin, ardından testisleri çevreleyen ince tabakayı dikkatlice kesin. Forseps kullanarak yağ dokusunu yavaşça çekin ve herhangi bir büyük görünür kan damarının diseksiyonundan kaçınırken makas kullanarak kesin. Şimdi, çıkarılan yağı PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram içeren 50 mililitrelik bir konik tüpe yerleştirin.Posterior subkutan yağını izole etmek için, sıçanı eğilimli hale getirin ve sırtın kalın derisini kafa derisine kadar kesmek için büyük makas kullanın, cildin altında çok derin kesmemeye dikkat edin. Cildi dokuya bağlayan fasyayı kesin. İntraskapular bölgede bulunan subkutan yağını, PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram içeren 50 mililitrelik bir konik tüpe izole etmeden ve yerleştirmeden önce omurgaya daha yakın bulunan kahverengi yağdan ayırt edin.Bir biyodavlumbazın içinde çalışırken, eksize edilen yağı PBS'de mililitre BSA başına 0.5 mililitre bir miligram içeren standart bir 100 mililitre Petri kabına yerleştirmek için forseps kullanın. Görünür kan damarlarını, kasları veya yabancı dokuları yağdan çıkarın. Makas kullanarak, yağı 10 dakika boyunca kıyın ve biraz daha BSA ekleyerek topakları kontrol edin.Gerekirse, kıyılmış yağ süspansiyonunu 10 mililitrelik pipetle steril 250 mililitrelik bir şişeye aktarmadan önce kıymaya devam edin. PBS'ye yeterli BSA ekleyerek şişedeki hacmi 20 mililitreye kadar çıkarın. Şimdi BSA'yı PBS'ye kollajenaza ekleyin ve çözeltiyi 0,22 mikronluk naylon bir net filtreden steril olarak filtrelemeden önce hafifçe çalkalayarak homojenize edin.Hemen gerekli miktarda kollajenaz çözeltisini kıyılmış yağ süspansiyonuna ekleyin ve şişeyi uygun bir süre boyunca 37 santigrat derecede bir su banyosunda dairesel bir hareketle sallayarak yağı sindirin. Sindirilmiş yağı, sindirilmiş yağ veya kıyılmış yağ etiketli 50 mililitrelik konik bir tüpe aktarın. Mikrovasküler parçaları veya MVF'leri kırmızı bir pelet haline getirmek için tüpü dört dakika boyunca 400 G'de santrifüj edin.Süpernatantı pelet rahatsız etmeden atık etiketli 50 mililitrelik konik bir tüpe yavaşça boşaltın. Daha sonra, pelet içeren tüpe PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram ekleyin ve pelet süspansiyonunu, parçaları bozmadan hafifçe yukarı ve aşağı iki kez pipetleyerek karıştırın. Şimdi, PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre bir miligram içeren steril bir Petri kabına önceden batırılmış 500 mikronluk ekranı alın ve yeni bir Petri kabında tutulan plastik ekran tutucunun üzerine yerleştirin.Pipet, sindirilmiş pelet tüpünden eşmerkezli daireler halinde ekrana 10 mililitre süspansiyon. Filtreyi PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre ilave bir miligram ile yıkayın ve Petri kabının içindeki filtratı korurken atın. Ardından, önceden ıslatılmış 37 mikronluk ekranı yeni bir Petri kabı üzerindeki plastik ekran tutucunun üzerine yerleştirin.Yeni bir pipet kullanarak, filtratı ilk filtrasyondan eşmerkezli daireler halinde ekrana aktarın. Daha önce açıklandığı gibi, ekranı PBS'de BSA ile yıkayın ve bu sefer 37 mikronluk ekranı korurken filtreyi atın. 37 mikronluk ekranı, PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre bir miligram içeren yeni bir Petri kabına kaydırın.Herhangi bir sıvı dökmeden, çanağı konik bir tutucuya hafifçe vurarak parçaları yerinden çıkarın. Filtreyi PBS'de ilave beş mililitre BSA ile durulayın. Daha sonra, sıvıyı Petri kabından steril 50 mililitrelik bir konik tüpe aktarın.37 mikronluk ekranı birkaç kez daha durulayın, toplanan toplam hacim 15 ila 20 mililitre olana kadar yıkamayı konik tüpe ekleyin. Son durulamadan sonra ekranı atın. 20 mikrolitrelik pipet ucunun ucunu makas kullanarak kesin.Kesilmiş pipet ucunu kullanarak 20 mikrolitrelik iki alikot çekmeden önce sıvıyı içeren tüpü yavaşça çalkalayın ve alikotların her birini temiz bir 35 milimetrelik Petri kabına pipetin. Standart bir ışık mikroskobu kullanarak her Petri kabındaki numunedeki fragman sayısını sayın ve makalede belirtilen formülü kullanarak, izole edilmiş mikrovasküler fragmanların toplam sayısını elde edin. MVF'yi toplamak için 50 mililitrelik konik tüpte kalan sıvıyı dört dakika boyunca 400 G'de döndürün.Eğirme işleminden sonra, süpernatantın çoğunu konik tüpten boşaltın ve tüpün kenarında kalan küçük hacimli sıvıyı çıkarmak için bir pipet kullanın. Daha sonra, jelleri dökmek için belirlenen kuyucuklara trombin ekleyin. 200 mikrolitrelik pipet ucunun ucunu kesin ve bunu kullanarak, istenen son yoğunluğu elde etmek için MVF'leri fibrinojen içinde nazikçe askıya alın.Süspansiyonu kuyucuktaki trombin çözeltisine pipetleyin ve yukarı ve aşağı pipetleyerek karışımı hızlı bir şekilde homojenize edin. Tüm jeller döküldükten sonra, jelin çapraz bağlanmasına izin vermek için kuyu plakasını 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte yaklaşık 15 dakika boyunca bir inkübatöre yerleştirin. Lipidler ve farklılaşmış adipositler, lipid boyası olarak BODIPY kullanılarak hidrojellerin konfokal mikroskopi görüntülemesi ile gözlendi.Beyaz adipojenik veya bej adipojenik medya kullanılarak vaskülarize edilmemiş yağ dokusunun kültürlenmesi, hem yağsız hem de diyabetik kemirgen kaynaklı MVF'lerden sırasıyla vaskülarize olmayan beyaz veya bej yağ dokusunun oluşmasına neden olmuştur. Benzer şekilde, beyaz adipojenik veya bej adipojenik medya kullanılarak vaskülarize yağ dokusunun kültürlenmesi, kemirgen kaynaklı MVF'lerden sırasıyla vaskülarize beyaz veya bej yağ dokusunun oluşmasına neden olmuştur.MVF'lerin bej yağ dokusuna farklılaşma kabiliyeti RT-qPCR kullanılarak genetik olarak doğrulandı. Doğrudan beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan yağsız ve diyabetik Kemirgen MVF'ler adipogenez, termojenez ve anjiyogenez açısından değerlendirildi. Beklendiği gibi çözülen protein 1'in ekspresyonu, bej adipojenik dokuda anlamlı derecede yüksekti.Benzer bir eğilim, dolaylı beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan kemirgen MVF'lerde ve ayrıca doğrudan beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan insan MVF'lerinde gözlenmiştir. Son olarak, mitokondriyal biyoenerjetik olarak, fonksiyonel olarak, bej yağ dokusunun her durumda karakteristik olarak daha yüksek oksijen tüketim oranına veya OCR seviyesine sahip olduğu açıktı. Yağ dokusunun enzimatik sindirimi, benzer boyut ve kalitede MVF'leri tutarlı bir şekilde çoğaltmak için optimize edilmelidir.Sindirim sonrası, MVF'ler, parçaların daha fazla parçalanmasını önlemek için özel bir özenle nazikçe ele alınmalıdır. Bu teknik, tanıtılan faktörlere bağlı olduğu kanıtlanan damar büyümesi ve adiposit farklılaşması dengesini daha da ileri götürmeye yardımcı oldu.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Üç boyutlu optik çözünürlük foto akustik Mikroskopi

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Alginate Hydrogels for Three-Dimensional Organ Culture of Ovaries and Oviducts

Yumurtalıklar ve fallop borularında Üç Boyutlu Organ Kültür Aljinatta Hidrojeller

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer deaths in women and has a 63% mortality rate in the United States1. The cell type of origin for ...

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

İletken Mürekkepler düzlemsel ve Üç Boyutlu Baskı

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Tümör Hücre Invasion üzerine İnterstisyel Akışkan Etkilerinin Ölçülmesi için üç boyutlu Hücre Kültürü Modeli

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Üç boyutlu Mürekkep Püskürtmeli Baskı Teknolojisi Kullanımı İnsan Kıkırdak Doku Fabrikasyon

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Bir Üç boyutlu Kollajen Matrix içindeki Hücre Göç Analizi

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

Üç-boyutlu Tam Kalınlığı Deri Üretimi Eşdeğer ve Otomatik Yaralama

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Polyethylene glycol Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Ters Kolloidal Kristal Poli (etilen glikol) İskele imalatı: Karaciğer Doku Mühendisliği için Üç boyutlu Hücre Kültürü Platformu

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Isolation of Murine Adipose Tissue-derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Tissue Engineering

Doku Mühendisliği vaskülarizasyon Birimleri olarak Kemirgen Yağ Dokusu kaynaklı Mikrovasküler Parçalarının İzolasyonu

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Three-dimensional Tissue Engineered Aligned Astrocyte Networks to Recapitulate Developmental Mechanisms and Facilitate Nervous System Regeneration

Astrocyte ağlar gelişimsel mekanizmaları özetlemek ve sinir sistemi yeniden oluşturma işlemi kolaylaştırmak için tasarlanmış üç boyutlu doku uyumlu

Neurotrauma and neurodegenerative disease often result in lasting neurological deficits due to the limited capacity of the central nervous system (CNS) to ...