Name: surgery and behavioral testing in the tibial neuroma transposition model in rats
Uploaded: 2023-01-06T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgery and Behavioral Testing in the Tibial Neuroma Transposition Model in Rats at JoVE.com

Mikrocerrahi sırasında yardımcı oldukları için Sabine Versteeg'e ve Ortak Hayvan Laboratuvarı'ndan (Gemeenschappelijk Dieren Laboratorium) Anja van der Sar ve Trudy Oosterveld-Romijn'e mikroskop ve ameliyathanenin hazırlanmasında ve hayvanlara bakmadaki yardımları için teşekkür ederiz.
Bu araştırma Axogen tarafından finanse edildi.

Bu araştırma IVD (Instantie voor Dierenwelzijn Utrecht) ve AVD1150020198824 proje numaralı hayvan araştırmaları kılavuzuna uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Von Frey taban çizgisi ölçümleri
<ol><li>Ameliyattan önce, aşağıda bölüm 5 ve bölüm 6'da açıklanan Von Frey test prosedürüne göre temel ölçümleri yapın.</li>
</ol>2. Anestezi ve hazırlık
NOT: Bu çalışma, 12 haftalı...

<ol>
	<li>Stokvis, A., vander Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+neuroma+pain:+a+prospective+follow-up+study.">Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study.</a> Pain. 151 (3), 862-869 (2010).</li><li>Domeshek, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+treatment+of+neuromas+improves+patient-reported+pain,+depression,+and+quality+of+life.">Surgical treatment of neuromas improves patient-reported pain, depression, and quality of life.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 139 (2), 407-418 (2017).</li><li>Lame, I. E., Peters, M. L., Vlaeyen, J. W., Kleef, M., Patijn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+of+life+in+chronic+pain+is+more+associated+with+beliefs+about+pain,+than+with+pain+intensity.">Quality of life in chronic pain is more associated with beliefs about pain, than with pain intensity.</a> European Journal of Pain. 9 (1), 15-24 (2005).</li><li>Koch, H., Haas, F., Hubmer, M., Rappl, T., Scharnagl, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+painful+neuroma+by+resection+and+nerve+stump+transplantation+into+a+vein.">Treatment of painful neuroma by resection and nerve stump transplantation into a vein.</a> Annals of Plastic Surgery. 51 (1), 45-50 (2003).</li><li>Fisher, G. T., Boswick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroma+formation+following+digital+amputations.">Neuroma formation following digital amputations.</a> Journal of Trauma. 23 (2), 136-142 (1983).</li><li>Bowen, J. B., Ruter, D., Wee, C., West, J., Valerio, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+muscle+reinnervation+technique+in+below-knee+amputation.">Targeted muscle reinnervation technique in below-knee amputation.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 143 (1), 309-312 (2019).</li><li>Jensen, T. S., Krebs, B., Nielsen, J., Rasmussen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phantom+limb,+phantom+pain+and+stump+pain+in+amputees+during+the+first+6+months+following+limb+amputation.">Phantom limb, phantom pain and stump pain in amputees during the first 6 months following limb amputation.</a> Pain. 17 (3), 243-256 (1983).</li><li>Woo, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+peripheral+nerve+interfaces+for+the+treatment+of+postamputation+neuroma+pain:+a+pilot+study.">Regenerative peripheral nerve interfaces for the treatment of postamputation neuroma pain: a pilot study.</a> Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 4 (12), 1038 (2016).</li><li>Arnold, D. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+criteria+for+symptomatic+neuroma.">Diagnostic criteria for symptomatic neuroma.</a> Annals of Plastic Surgery. 82 (4), 420-427 (2019).</li><li>Liedgens, H., Obradovic, M., De Courcy, J., Holbrook, T., Jakubanis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+burden+of+illness+study+for+neuropathic+pain+in+Europe.">A burden of illness study for neuropathic pain in Europe.</a> Clinicoeconomics and Outcomes Research. 8, 113-126 (2016).</li><li>Langley, P. C., Van Litsenburg, C., Cappelleri, J. C., Carroll, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+burden+associated+with+neuropathic+pain+in+Western+Europe.">The burden associated with neuropathic pain in Western Europe.</a> Journal of Medical Economics. 16 (1), 85-95 (2013).</li><li>Dworkin, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interpreting+the+clinical+importance+of+group+differences+in+chronic+pain+clinical+trials:+IMMPACT+recommendations.">Interpreting the clinical importance of group differences in chronic pain clinical trials: IMMPACT recommendations.</a> Pain. 146 (3), 238-244 (2009).</li><li>Mackinnon, S. E., Dellon, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+treatment+of+recurrent+dorsoradial+wrist+neuromas.">Results of treatment of recurrent dorsoradial wrist neuromas.</a> Annals of Plastic Surgery. 19 (1), 54-61 (1987).</li><li>Harden, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+neuropathic+pain.+Mechanisms,+diagnosis,+and+treatment.">Chronic neuropathic pain. Mechanisms, diagnosis, and treatment.</a> Neurologist. 11 (2), 111-122 (2005).</li><li>Poppler, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+interventions+for+the+treatment+of+painful+neuroma:+a+comparative+meta-analysis.">Surgical interventions for the treatment of painful neuroma: a comparative meta-analysis.</a> Pain. 159 (2), 214-223 (2018).</li><li>Eberlin, K. R., Ducic, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+algorithm+for+neuroma+management:+a+changing+treatment+paradigm.">Surgical algorithm for neuroma management: a changing treatment paradigm.</a> Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 6 (10), 1952 (2018).</li><li>Dorsi, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tibial+neuroma+transposition+(TNT)+model+of+neuroma+pain+and+hyperalgesia.">The tibial neuroma transposition (TNT) model of neuroma pain and hyperalgesia.</a> Pain. 134 (3), 320-334 (2008).</li><li>Tork, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+porcine+small+intestine+submucosa+nerve+cap+for+prevention+of+neuromas+and+associated+pain.">Application of a porcine small intestine submucosa nerve cap for prevention of neuromas and associated pain.</a> Tissue Engineering Part A. 26 (9-10), 503-511 (2020).</li><li>Miyazaki, R., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficacy+of+morphine,+pregabalin,+gabapentin,+and+duloxetine+on+mechanical+allodynia+is+different+from+that+on+neuroma+pain+in+the+rat+neuropathic+pain+model.">The efficacy of morphine, pregabalin, gabapentin, and duloxetine on mechanical allodynia is different from that on neuroma pain in the rat neuropathic pain model.</a> Anesthesia and Analgesia. 115 (1), 182-188 (2012).</li><li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swimming+training+reduces+neuroma+pain+by+regulating+neurotrophins.">Swimming training reduces neuroma pain by regulating neurotrophins.</a> Medicine and Science in Sports Exercise. 50 (1), 54-61 (2018).</li><li>Decosterd, I., Woolf, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spared+nerve+injury:+an+animal+model+of+persistent+peripheral+neuropathic+pain.">Spared nerve injury: an animal model of persistent peripheral neuropathic pain.</a> Pain. 87 (2), 149-158 (2000).</li><li>Poublon, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anatomical+relationship+of+the+superficial+radial+nerve+and+the+lateral+antebrachial+cutaneous+nerve:+A+possible+factor+in+persistent+neuropathic+pain.">The anatomical relationship of the superficial radial nerve and the lateral antebrachial cutaneous nerve: A possible factor in persistent neuropathic pain.</a> Journal of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery. 68 (2), 237-242 (2015).</li><li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+analysis+of+experimental+observations.">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20 (1), 441-462 (1980).</li><li>Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+constriction+of+the+sciatic+nerve+and+pain+hypersensitivity+testing+in+rats.">Chronic constriction of the sciatic nerve and pain hypersensitivity testing in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (61), e3393 (2012).</li></ol>

Protokoldeki kritik adımlar TNT modeli, tibial sinirin kesilmesini ve sural sinir üzerindeki plantar hiperaljeziye ek olarak, nöromun duyarlılık testini sağlamak için lateral ve subkutan olarak pretibial bir bölgeye transpoze edilmesini içerir. TNT modelinde, nöromun yerinin araştırmacılar tarafından görülebilmesi anahtardır. Bu nedenle, bir albino sıçan suşu tercih edilir, çünkü deri altı dikişler deriden kolayca görülebilir ve dikişin rengi tercihen koyu mavi veya siyah o...

Basit yırtılmalardan tüm ekstremite amputasyonuna kadar değişen her yaraya değişen derecelerde periferik sinir hasarı eşlik eder. Bu tür sinir hasarı, filizlenen sinir liflerinin düzensiz bir dolaşıklığı olan bir nörom oluşumuna neden olabilir. Nöromlar hastaların %8-30'unda ağrılı hale gelir ve yaşam kalitelerini ciddi şekilde etkiler1,2,3,4,5. Ekstremite amputasyonundan sonra hastaların %50'sinde nöroma ağrısı gelişir6,7,8. Bildirilen semptomlar arasında hassasiyet, spontan ağrı, allodini, hiperaljezi ve innerve bölgede mekanik veya termal aşırı duyarlılık bulunur9. 1 yıl içinde yeterince tedavi edilmediğinde, nöroma ağrısı kronik bir ağrı durumuna ilerleyebilir ve bu da yüksek toplumsal yüke ve buna bağlı tıbbi maliyetlere neden olabilir 10,11,12,13,14. Mevcut farmakolojik girişimlerin etkinliğinin zayıf olması nedeniyle, nöroma ağrısı tercihen ağrılı nöromun cerrahi olarak çıkarılması ve literatürde açıklandığı gibi sinirin çeşitli cerrahi tekniklerle tedavi edilmesi ile tedavi edilmektedir15. Tam ağrı kesicinin nadir olduğunu, ağrının genellikle zamanla kötüleştiğini ve hastaların% 40'ının ameliyattan fayda görmediğini ve yeni tedavilere ihtiyaç duyulduğunu belirtmek önemlidir 1,16.
Nöroma ağrısının standartlaştırılmış bir sıçan modeli, nöroma ağrısını yönlendiren mekanizmaları anlamada yardımcı olur ve yeni tedavilerin belirlenmesine veya klinikte kullanılanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir. Tibial nöroma transpozisyonu (TNT) modeli ilk olarak Dorsi ve ark. tarafından 2008yılında tanımlanmıştır 17 ve farklı araştırma grupları tarafından kullanılmıştır18,19,20. Bu yöntemin genel amacı, nöroma ağrısı için farklı tedavi tekniklerini test edebilmektir. Modelin, örneğin, korunmuş sinir hasarı (SNI) model21'e göre avantajı, nöroma bölgesinde allodiniyi test etmesine izin vermesidir. Bunun nedeni, modelin tibial sinirin proksimal sinir ucunu, von Frey monofilamentleri ile araştırılabileceği deri altı pretibial bir pozisyona aktarmayı içermesidir. Dahası, allodinya, aynı hayvandaki nöroma ağrısından bağımsız olarak değerlendirilebilen sağlam sural sinir tarafından innerve edilen arka pençenin plantar yüzeyinde gelişir. Bu, ağrılı bir nöromun çıkarılmasından sonra kalıcı nöropatik ağrının bazen komşu sinirlerden kaynaklandığı hastalarda nöroma ağrısı semptomlarına benzer22. Dahası, nöroma ile kopmuş bir sinir üzerindeki allodinya, sağlam komşu sinir üzerindeki allodinyadan farklı bir ağrı modalitesidir. Bu nedenle, bu model, yeni tedavilerin hem nöroma bölgesinde bulunan allodini hem de arka pençenin plantar yüzeyinde test edilen daha yaygın nöropatik ağrı üzerindeki etkisinin değerlendirilmesini kolaylaştırır. TNT modelini oluşturmak için yapılan ameliyat zor olabileceğinden, bu makale modeli tesislerinde uygulayan araştırmacıları destekleme prosedürünü detaylandırmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aesthesio</td>
			<td>Linton Instrumentation</td>
			<td>514007 until 514015</td>
			<td>0.6 g until 15 g monofilaments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Local Veterinary Pharmacy</td>
			<td>n/a</td>
			<td>The local veterinary pharmacy makes caprofen dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Nobamed</td>
			<td>974255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>Interchema BV</td>
			<td>400406</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 4.0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>1854G</td>
			<td>IMPORTANT: the color should be blue or black</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 8.0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>BV130-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflo, isoflurane Zoetis</td>
			<td>Dechra Veterinary Products</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh bottom cages</td>
			<td>StoeltingCo</td>
			<td>57816 and 57824</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12076-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15019-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro tweezers</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>Trademed</td>
			<td>H7 1000-FRE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12004-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment&#160;</td>
			<td>Local Veterinary Pharmacy</td>
			<td>n/a</td>
			<td>The local veterinary pharmacy makes the ophthalmic ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14001-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo surgical microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>A60 F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile sheet with hole</td>
			<td>Evercare OneMed</td>
			<td>1555-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blade nr.15</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11617-12</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgery and behavioral testing in the tibial neuroma transposition model in rats

Tibial nöroma transpozisyonu (TNT), nöroma bölgesindeki (tibial sinir) allodininin, sağlam sural sinir tarafından innerve edilen arka pençenin plantar yüzeyindeki allodinyadan bağımsız olarak değerlendirilebildiği bir sıçan modelidir. Bu TNT modeli, klinikte halihazırda kullanılan bazı cerrahi tedavilerin potansiyel üstünlüğü gibi nöroma ağrısı için tedavileri test etmek veya yeni ilaçları ve bunların aynı hayvandaki her iki ağrı modalitesi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için uygundur. Bu modelde, tibial sinirde distal bir lezyon (nörotmesis) yapılır ve proksimal sinir ucu, 15 g'lık bir Von Frey monofilamenti ile nöroma bölgesinin değerlendirilmesini sağlamak için deri altından ve pretibiyal olarak transpoze edilir ve sabitlenir. Sural sinir üzerindeki allodiniyi değerlendirmek için, Von Frey monofilamentleri arka pençenin plantar lateral bölgesinde yukarı-aşağı yöntemle kullanılabilir. Tibial siniri kestikten sonra, ameliyattan sonraki 1 hafta içinde nöroma bölgesinde mekanik aşırı duyarlılık gelişir ve ameliyattan en az 12 hafta sonrasına kadar devam eder. Sural innerve plantar yüzeydeki allodinya, kontralateral ekstremite ile karşılaştırıldığında ameliyattan sonraki 3 hafta içinde gelişir. 12 haftada, kopmuş tibial sinirin proksimal ucunda, aksonların dağılması ve dönmesi ile gösterilen bir nöroma oluşur. TNT modeli cerrahi için çok sayıda kritik (mikro) cerrahi adımın izlenmesi gerekir ve terminal anestezi altında bazı cerrahi uygulamalar önerilmektedir. Korunmuş sinir hasarı modeli gibi diğer nöropatik ağrı modelleriyle karşılaştırıldığında, nöroma bölgesi üzerindeki allodinya, TNT modelinde sural sinir aşırı duyarlılığından bağımsız olarak test edilebilir. Bununla birlikte, nöroma bölgesi farelerde değil, sadece sıçanlarda test edilebilir. Bu protokolde verilen ipuçları ve talimatlar, ağrı üzerinde çalışan araştırma gruplarının TNT modelini tesislerinde başarıyla uygulamalarına yardımcı olabilir.

Nöroma bölgesinde yapılan değerlendirme, 15 g von Frey monofilamentinin uygulanmasına karşı artan duyarlılık göstermiştir. Başlangıçta, sıçanlar tipik olarak 15 g'lık bir monofilamentin 25 uygulamasının% 10-15'ine (±% 13) yanıt verdi. TNT cerrahisinden 1 hafta sonra yanıt oranı %45-50'ye (%24± yükselmiştir. Kontralateral tarafta, ameliyat sonrası yanıt sayısı başlangıçtakilere benzerdi (Şekil 2A). Sıçanların yaklaşık% 20'si ağrılı bir nöroma gelişt...

Watch this Scientific Journal Video about Surgery and Behavioral Testing in the Tibial Neuroma Transposition Model in Rats at JoVE.com

Surgery and Behavioral Testing in the Tibial Neuroma Transposition Model in Rats

Bu protokol, tibial sinirin lezyonunu ve ardından proksimal sinir ucunun subkutan pretibial veya lateral pozisyona doğru transpozisyonunu gerektiren tibial nöroma transpozisyon modelini tanımlar. Nöroma ağrısı ve plantar hiperaljezinin davranışsal testleri, Von Frey monofilamentleri kullanılarak ölçülür.

Sıçanlarda Tibial Nöroma Transpozisyon Modelinde Cerrahi ve Davranışsal Test

The tibial neuroma transposition (TNT) is a rat model in which allodynia at the neuroma site (tibial nerve) can be independently evaluated from allodynia ...

Bu yöntem, nöroma ağrısı için daha iyi tedaviler bulmaya yardımcı olur. Bu tekniğin avantajı, hem nöroma ağrısını hem de genelleştirilmiş ağrıyı aynı rep modelinde bağımsız olarak ölçebilmenizdir. TNT modeli özellikle nöroma ağrısının test edilmesine uygundur, çünkü nöromun kendisi Von Frey monofilamentleri ile mekanik olarak uyarılabilir.Anestezi uygulanan sıçanı sırtına, başı sola veya sağa gelecek şekilde yerleştirerek başlayın. Ameliyat edilecek bacağı cerrahın yanına yerleştirin. Alt arka ekstremiteyi ekzorotatee edin, böylece medial malleolus yukarı doğru bakar.Sıçanı 6x büyütmeli bir stereo cerrahi mikroskop altına yerleştirmeden önce, traş edilen alanı en az üç alternatif iyot bazlı ovma ve alkol turu ile dezenfekte edin. Dizini bulun ve bir neşter kullanarak arka pençenin medial tarafı üzerinde orta baldırdan ayak bileğine kadar iki ila üç santimetrelik uzunlamasına bir kesi yapın. Gerekirse, cildi açın ve kas katmanları görünene kadar mikromakasla daha fazla subkutis.Yüzeysel nörovasküler demeti, kas katmanları üzerinde serbestçe hareket edebilen iki ila üç beyaz, mor veya kırmızı çizgi olarak tanımlayın. Nörovasküler demetleri sağlam tutun. Posterior'u bu demetten ayırın.Daha sonra, gastroknemius kasları arasındaki fasyayı açmak için disseke edin. Kasların fasyası arasında, yüzeysel nörovasküler demetin yaklaşık üç katı büyüklüğünde olan tibial sinir ile daha derin nörovasküler demet bulunabilir. Tibial kemiği ek bir dönüm noktası olarak kullanın, çünkü tibial sinir tibial kemiğin hemen arkasından uçar.Tibial siniri çevreleyen vasküler demetlerden bağımsız olarak diseke etmek için, tibial siniri açıkça hareket ettirin ve tibial siniri hareket ettirirken bir miktar gerilme gösteren maruz kalan dokuyu kesin. Tüm tibial sinir açığa çıktıktan sonra, pretibial cildin deri altı kasından diseksiyonuna kadar sinirin dehidrasyonunu önlemek için kas katmanlarını geri yerleştirin. Pretibial cildi deri altı kas tabakasından diseke etmek ve deri altı tüneli yapmak için, cildi yukarı doğru tutun ve künt ucu künt bir mikrocerrahi aleti kullanarak cilde paralel dokuya itin.Nöromun test edilmesi için alanın kolay erişilebilirliği için tünelin ucunun pretibiyal veya lateral olarak yerleştirildiğinden emin olun. Tibial siniri ayak bileğinin yakınındaki distal uçta kestikten sonra, mikroskop büyütmesini 10x veya 16x olarak değiştirin ve tibial sinirin epineuriumunu ayak bileğinin yakınında yapılan kesime proksimal olarak tanımlayın. Veya, tibial sinirin daha proksimal bifurkasyonu durumunda, ayak bileğinin yakınında yapılan kesime proksimal olan hem medial hem de lateral ekici dalların epineuriumunu tanımlayın.Dikkatlice 8-0 yerleştirin Proksimal sinir ucunun epinöryumundan naylon sütür, epinöryumu cımbızla tutarak ve iğneyi sinir ile epineurium arasına yaklaşık 0.5 milimetrelik bir ısırıkla koyarak. Subkutan tünelin sonunda iğne ile deri altından bir ısırık alın ve siniri lateral olarak subkutan tünele aktarmak için dikişi çekin. Bir düğüm yaparak dikişi sabitleyin.Cilde nüfuz etmeden sabitlenmiş sinir ucuna kızarmış koyu renkli 4-0'lık daha kalın bir dikiş yerleştirin. Dikişin cildin dışında görünür olduğundan emin olun. Pençeyi ve kasları hareket ettirdikten sonra sinirin yerinde kalıp kalmadığını kontrol edin.Dikiş uçlarını 4-0'da biraz daha uzun bir dikiş ucu ile kesin, sonra 8-0'da Dikiş. Mikroskobun büyütmesini tekrar 6x'e değiştirin ve 8-0'ı kullanarak cildi intraepidermal dikişlerle kapatın Dikiş. Bir pamuklu çubukla cildinizi% 0.9 sodyum klorür ile nazikçe temizleyin.Oda soğuksa, temiz bir kafesin bir kısmının altına bir ısıtma yastığı yerleştirin ve sıçanı kafese bir kağıt havlunun altına rahat bir konumda yerleştirin. Yiyecek ve suya kolay erişim sağlayın. Steril siniri aşırı duyarlılık için uyarmak için, monofilamenti ayak pedlerine dokunmadan saç sınırına yakın yanal tarafa uygulayın.Tibial siniri hiposensitivite için uyarmak için, monofilamenti arka pençenin ekici yüzeyinin ortasına uygulayın. Nöroma bölgesi testi için, sıçanları burunları dirsek kıvrımına doğru bakacak şekilde tutun. Sıçan sağ elinde tutulursa, sol arka pençesi sağ baş parmak ile işaret parmağı arasında serbestçe asılmalıdır.Sıçanın tutarken sakin ve rahat olduğunu doğruladıktan sonra, başlangıçta, 15 gramlık monofilamenti yavaşça maruz kalan arka pençenin pretibial yüzeyine yerleştirin. Ameliyattan sonra, 15 gramlık monofilamenti görünür dikiş üzerine yerleştirin ve saçları bükmek ve bir saniye tutmak için monofilamente yeterli kuvvet uygulayın. Nöroma bölgesinden Von Frey, başlangıçta, sıçanların 15 gramlık bir monofilament uygulamasının% 10 ila% 15'ine yanıt verdiğini gösterdi.Tibial nöroma transpozisyon cerrahisinden bir hafta sonra, yanıt oranı% 45'ten% 50'ye yükseldiKontralateral tarafta, ameliyat sonrası yanıtlar taban çizgisine benzerdi. Sıçanların yaklaşık% 20'sinde ağrılı bir nöroma gelişmedi ve yanıt oranı taban çizgisine kıyasla artmadı. Ameliyattan 12 hafta sonra transekte ve transpoze tibial sinir güdüğünün sonunda, tüm sıçanlarda bir nöroma gelişti.Tibial sinirin transeksiyonu, tibial sinir tarafından innerve edilen arka pençenin ekici tarafının ortasındaki mekanik duyarlılığı azaltmıştır. Ameliyattan bir hafta sonra ortaya çıkan hiposensitivite, kontralateral taraftan ve ameliyattan üç hafta sonra başlayan hattan anlamlı olarak farklıydı ve ameliyattan 12 hafta sonrasına kadar kaldı. Sağlam sural sinir tarafından innerve edilen arka pençenin ekici tarafının lateral kısmında, sıçanlar ameliyattan bir hafta sonra kontralateral taraftan ve taban çizgisinden önemli ölçüde farklı mekanik aşırı duyarlılık geliştirdiler.Ameliyattan sonra 12 hafta boyunca devam etti. Kontralateral pençede, sural veya tibial sinir tarafından innerve edilen bölgelerde mekanik duyarlılık başlangıç çizgisine kıyasla etkilenmedi. Lateral transpozisyon için hareket açıklığı için tibial sinirin bir uzunluğunu oluşturmayı unutmayın.Ayrıca bu nöroma bölgesini koyu renkli bir dikişle işaretlemeyi unutmayın.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Davranış Endokrinoloji ve Deneysel İktisat birleştiren: Testosteron ve Sosyal Karar Verme

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Nörobilim

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

Sıçanlarda Sakkaroz Craving Kuluçka değerlendirilmesi için Genel Bir Yöntem

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Hippocampal Insulin Microinjection and In vivo Microdialysis During Spatial Memory Testing

Hippocampal Insulin Microinjection and In vivo Microdialysis During Spatial Memory Testing

Hipokampal İnsülin Mikroenjeksiyon ve<em&gt; In vivo</emMekansal Bellek Test sırasında&gt; mikrodivaliz

Glucose metabolism is a useful marker for local neural activity, forming the basis of methods such as 2-deoxyglucose and functional magnetic resonance ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Topikal Transgenik Rats nesil tarafından<em&gt; Utero</em&gt; Elektroporasyon ve<em&gt; In vivo</em&gt; Biyoparlaklık Eleme

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents

Kemirgenler Faaliyet teker Running kayıt ve Sirkadiyen Rhythms Analizi

When rodents have free access to a running wheel in their home cage, voluntary use of this wheel will depend on the time of day1-5. Nocturnal rodents, ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats

Sıçanlar Naif Şeker ve Yağ Yeme ardından mezolimbik ve mezokortikal Dopamin Ödül Siteleri c-Fos Aktivasyon Eşzamanlı Algılama

This study uses cellular c-fos activation to assess effects of novel ingestion of fat and sugar on brain dopamine (DA) pathways in rats. Intakes of sugars ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Dopamin D1-Alfa reseptör kemirgen Nucleus Accumbens bir yenilikçi RNA Situ içinde hafiye teknoloji tarafından içinde tanımlaması

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

The Power of Interstimulus Interval for the Assessment of Temporal Processing in Rodents

Interstimulus Aralık kemirgenler zamansal işleme değerlendirilmesi için güç

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Beyin Dilimlerinde ve Birincil Hücre Kültüründe Piramidal Nöronların Balistik Etiketlemesi

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...