Name: an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules
Uploaded: 2022-11-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd door het National Key Research and Development Program van China (2017YFC1703904), het samenwerkingsproject van de universiteit (Chengdu University of TCM) - onderneming (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. LTD) (1052022040101); het regionale innovatie- en samenwerkingsproject van de afdeling Wetenschap en Technologie van de provincie Sichuan (2020YFQ0032); en het Key R&D and Transformation Program van de afdeling Science & Technology van de provincie Qinghai (2020-SF-C33).

1. Bereiding van de oplossing
<ol><li>Bereid de referentiestof-stockoplossing: Weeg 10,6 mg salidroside, 5,24 mg galluszuur en 5,21 mg ethylgalluszuur afzonderlijk af op een elektronische analytische balans en voeg ze afzonderlijk toe aan een maatkolf van 5 ml. Voeg vervolgens methanol van HPLC-kwaliteit toe om op te lossen en te verdunnen tot 5 ml. Schud ten slotte goed om de referentiestof-stamoplossing te verkrijgen met massaconcentraties van respectievelijk 2,120 mg/ml, 1,048 mg/ml en 1,042 mg/ml.<...

<ol>
	<li>Smith, S. C., Zheng, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impending+cardiovascular+pandemic+in+China.">The impending cardiovascular pandemic in China.</a> Circulation Cardiovascular Quality and Outcomes. 3 (3), 226-227 (2010).</li><li>Wang, D., Wang, P., Zhang, R., Xi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+Xuefu+Zhuyu+decoction+combined+with+Western+medicine+for+angina+pectoris+in+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+meta-analysis.">Efficacy and safety of Xuefu Zhuyu decoction combined with Western medicine for angina pectoris in coronary heart disease: A protocol for systematic review and meta-analysis.</a> Medicine. 99 (50), 23195 (2020).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+traditional+Chinese+medicine+in+the+regulation+of+stress+in+treating+coronary+heart+disease.">The role of traditional Chinese medicine in the regulation of stress in treating coronary heart disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 3231424 (2019).</li><li>Yang, J., Tian, S., Zhao, J., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+mechanism+of+TCM+formulae+in+the+treatment+of+different+types+of+coronary+heart+disease+by+network+pharmacology+and+machining+learning.">Exploring the mechanism of TCM formulae in the treatment of different types of coronary heart disease by network pharmacology and machining learning.</a> Pharmacological Research. 159, 105034 (2020).</li><li>Pu, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+Rhodiola+rosea+L.:+A+review.">Anti-inflammatory effects of Rhodiola rosea L.: A review.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 121, 109552 (2020).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+biochemical+basis+of+the+meridian+tropism+theory+for+the+qi-invigorating+traditional+Chinese+medicine+herb+Panax+ginseng.">Exploring the biochemical basis of the meridian tropism theory for the qi-invigorating traditional Chinese medicine herb Panax ginseng.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 26, 2515690 (2021).</li><li>Pang, Y., Liang, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Nordicam+on+hemodynamics+in+rats+with+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of Nordicam on hemodynamics in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Chinese Medicinal Materials. 36 (2), 276-279 (2013).</li><li>Nickerson, B., Kong, A., Gerst, P., Kao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+dissolution+and+disintegration+results+for+an+immediate-release+tablet.">Correlation of dissolution and disintegration results for an immediate-release tablet.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 150, 333-340 (2018).</li><li>Kambayashi, A., Yomota, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+clinically+relevant+dissolution+specifications+for+oral+solid+dosage+forms+of+weak+acid+drugs+using+an+in+silico+modeling+and+simulation+approach.">Exploring clinically relevant dissolution specifications for oral solid dosage forms of weak acid drugs using an in silico modeling and simulation approach.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 159, 105728 (2021).</li><li>Meng, S., Jiang, T. Y., Bu, C. J., Liu, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+on+the+dissolution+of+traditional+Chinese+medicine+preparations.">Research progress on the dissolution of traditional Chinese medicine preparations.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 8 (32), 180-181 (2015).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 4, (2020).</li><li>Lin, J. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Evaluation on Pre-Preparation of Rhodiola Extract. , (2013).</li><li>Zhou, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculation+of+drug+solubility+Weibull+distribution+parameters+by+Origin+software.">Calculation of drug solubility Weibull distribution parameters by Origin software.</a> Herald of Medicine. 30 (06), 721-723 (2011).</li><li>Hu, C. Q., Pan, R. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+evaluation/prediction+of+bioequivalence+of+solid+oral+preparations+by+dissolution+test.">Progress in evaluation/prediction of bioequivalence of solid oral preparations by dissolution test.</a> Chinese Journal of New Drugs. 23 (01), 44-51 (2014).</li><li>Zhang, H., Yu, L. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissolution+testing+for+solid+oral+drug+products:+Theoretical+considerations.">Dissolution testing for solid oral drug products: Theoretical considerations.</a> American Pharmaceutical Review. 7 (5), 26-30 (2004).</li><li>Ren, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+for+the+discovery+and+validation+of+quality-markers+of+traditional+Chinese+medicine.">Analytical strategies for the discovery and validation of quality-markers of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 67, 153165 (2020).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+modified+biopharmaceutics+classification+system+absorption+model+for+oral+Traditional+Chinese+Medicine+(Sanye+Tablet).">Establishment of modified biopharmaceutics classification system absorption model for oral Traditional Chinese Medicine (Sanye Tablet).</a> Journal of Ethnopharmacology. 244, 112148 (2019).</li><li>Song, X. Y., Li, Y. D., Shi, Y. P., Jin, L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+traditional+Chinese+medicines:+a+review.">Quality control of traditional Chinese medicines: a review.</a> Chinese Journal of Natural Medicines. 11 (6), 596-607 (2013).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+markers+based+on+biological+activity:+A+new+strategy+for+the+quality+control+of+traditional+Chinese+medicine.">Quality markers based on biological activity: A new strategy for the quality control of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 44, 103-108 (2018).</li><li>Wei, N. -. N., Wang, X., Su, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+of+dissolution+test+methodologies.">Progress of dissolution test methodologies.</a> Chinese Journal of New Drugs. 22 (10), 1119-1124 (2013).</li><li>Chi, Z., Azhar, I., Khan, H., Yang, L., Feng, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+dissolution+testing+with+high-temporal+resolution+for+both+immediate-release+and+fixed-combination+drug+tablets.">Automatic dissolution testing with high-temporal resolution for both immediate-release and fixed-combination drug tablets.</a> Scientific Reports. 9 (1), 17114 (2019).</li><li>Haidar, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioequivalence+approaches+for+highly+variable+drugs+and+drug+products.">Bioequivalence approaches for highly variable drugs and drug products.</a> Pharmaceutical Research. 25 (1), 237-241 (2008).</li></ol>

De oplostest is een ideale in vitro methode om de desintegratie en oplossing van vaste orale preparaten in het maagdarmkanaal te simuleren15. Het is een belangrijke index voor het evalueren en controleren van de kwaliteit van vaste orale preparaten. Daarom speelt de oplostest een essentiële rol bij de ontwikkeling van vaste orale preparaten van geneesmiddelen16. Met name met de ontwikkeling van de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) kwaliteitscontroletechnologi...

In China blijft de prevalentie van hart- en vaatziekten stijgen en de morbiditeit en sterftecijfers van hart- en vaatziekten staan op de eerste plaats onder Chinese inwoners1. Angina pectoris van coronaire hartziekte wordt veroorzaakt door luminale stenose als gevolg van coronaire atherosclerose, wat leidt tot relatief onvoldoende coronaire bloedtoevoer en myocardiale ischemie en hypoxie2. In de afgelopen jaren is het genezende effect van de traditionele Chinese geneeskunde bij de behandeling van coronaire hartziekten door veel artsen erkend3.
Traditionele Chinese geneeskunde speelt een belangrijke rol bij het verlichten van klinische symptomen en het verbeteren van de kwaliteit van leven van patiënten4. Rhodiola korrels (RG) worden geëxtraheerd en geraffineerd uit de Tibetaanse Plateau medicinale plant Rhodiola rosea L. De belangrijkste componenten van RG zijn salidroside, rhodiosine en flavonoïden 5,6. RG heeft het effect van het aanvullen van Qi7 en het activeren en bevorderen van de bloedcirculatie om pijn te verlichten. Klinisch wordt het gebruikt voor de behandeling van borstobstructies veroorzaakt door Qi-deficiëntie en bloedstasis, coronaire hartziekten, angina pectoris8. Inhoudsbepaling alleen weerspiegelt niet volledig de intrinsieke kwaliteit van de geneesmiddelen, omdat zowel de desintegratie als het oplossen in vitro de biologische beschikbaarheid en werkzaamheid van de geneesmiddelen kunnen beïnvloeden 9,10. De inspectiemethoden voor het oplossen van de Chinese geneeskunde omvatten de roterende mandmethode, de peddelmethode en de kleine bekermethode. Het nadeel van de roterende korfmethode is dat alleen het buitenste deel van de roterende korf tijdens het draaien in contact komt met het oplosmedium, wat niet het echte oplosgedrag weerspiegelt. De peddelmethode kan de bovenstaande tekortkoming verhelpen, waardoor deze geschikter is dan de mandmethode voor sommige solide Chinese medicijnpreparaten11. Op dit moment is er geen rapport over de in vitro ontbindingsanalyse van RG. Om de kwaliteit van RG beter te controleren, werd het oplosgedrag van de drie indexcomponenten (galluszuur, salidroside en ethylgallaat) in RG onderzocht. Deze studie levert gegevens voor de kwaliteitscontrole van RG en een methodologische referentie voor kwaliteitsevaluatie van andere etnische samengestelde preparaten.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromatographic column</td>
			<td>ZORBAX Eclipse&#160;&#160;</td>
			<td>XDB-C18</td>
			<td>4.6 mm x 250 mm, 5 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drug dissolution tester</td>
			<td>Shanghai Huanghai Pharmaceutical Inspection Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>RCZ-6B3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic analytical balance</td>
			<td>Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>FA1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl gallate (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM006301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Function drawing software</td>
			<td>OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA</td>
			<td>2022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM000802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd.</td>
			<td>Agilent 1260 Infinity <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64670/64670eq01.jpg" style="margin: auto;" /></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC grade methanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd.</td>
			<td>216565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injector</td>
			<td>Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus &#38; Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>0.7 (22 G)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millipore filter</td>
			<td>Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>&#966;13 0.22 Nylon66</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodiola granules</td>
			<td>Tibet Nodikang Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>210501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DST200425-037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure water systemic</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>Milli-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleansing machine</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200 DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules

De samenstelling van het Tibetaanse geneesmiddel Rhodiola granulaat (RG) is complex en de algehele kwaliteit van RG is moeilijk te bepalen. Daarom is het vaststellen van een methode om de meercomponenten in vitro oplossing van RG te bepalen van groot belang voor de kwaliteitscontrole. Deze studie maakt gebruik van de tweede paddle-methode van de vierde algemene regel 0931 uit de Chinese Farmacopee (editie 2020), conform apparaat 2 van de United States Pharmacopeia (USP). Het oplosapparaat werd ingesteld op een rotatiesnelheid van 100 tpm met ultrapuur water als oplosmedium. Op elk tijdstip werd een monstervolume van 1 ml verzameld. Bovendien werd het cumulatief oplossen van galluszuur, salidroside en ethylgalluszuur in RG op verschillende tijdstippen bepaald door high-performance vloeistofchromatografie (HPLC). Ten slotte werden de oplossingscurven getekend en werden de krommen aangepast aan de GompertzMod, de Gompertz, de Logistische en de Weibull-vergelijkingen. De resultaten toonden aan dat de cumulatieve oplossing van galluszuur in RG meer dan 80% was na 1 min, de cumulatieve oplossing van salidroside en ethylgalluszuur was meer dan 65% na 5 min, en de cumulatieve oplossing van elke indexcomponent nam af na 30 min. De curve fitting toonde aan dat de GompertzMod-vergelijking het best passende model was voor elke indexcomponent van RG. Kortom, de oplossingstestmethode die in dit protocol wordt beschreven, is eenvoudig, nauwkeurig en betrouwbaar. Het kan het oplosgedrag van de indexcomponenten in RG in vitro karakteriseren, wat een methodologische referentie biedt voor kwaliteitscontrole van RG en kwaliteitsevaluatie van andere etnische verbindingen.

In deze studie lagen de precisie, stabiliteit, herhaalbaarheid en monsterherstel van RG allemaal binnen het methodologische bereik gespecificeerd in de Chinese Farmacopee (Volume 4, 2020)12, wat aangeeft dat de methode haalbaar was. Na herhaalde foutopsporing werd vastgesteld dat de elutiegradiënt die in deze studie werd gebruikt een goede resolutie had (figuur 1) voor de drie indexcomponenten in RG. De drie indexcomponenten in RG hadden een goede lineaire relatie bi...

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules at JoVE.com

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Hier testen we het oplossen van Rhodiola-korrels (RG) in vitro, tekenen we oplossingscurven van salidroside, galluszuur en ethylgallaat in ultrapuur water en passen we de curven aan verschillende wiskundige modellen aan. Dit protocol biedt informatie en richtsnoeren voor in vivo bio-equivalentie en in vivo in vitro correlatiestudies van RG.

Een in vitro oplossing bepaling van multi-index componenten in de Tibetaanse geneeskunde Rhodiola korrels

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

In vitro maatregel is een geschikte maatregel voor het inspecteren van het oplossen van oplossingen van vast Chinees medicijnpreparaat die rekening houden met de effecten van desintegratie van geneesmiddelen, en het oplosgedrag en de inhoud van het actieve ingrediënt. De detectie van multi-index componenten kan de neutrale invloed en het oplossingsverschil van verschillende componenten beter weerspiegelen. De procedure wordt gedemonstreerd door Quinyun Du, een buitengewone student uit mijn laboratorium.Bereid om te beginnen de stamoplossing van de referentiestof door 10,6 milligram salidrocide, 5,24 milligram galluszuur en 5,21 milligram ethylgalluszuur afzonderlijk op een elektronische analytische balans te wegen. Voeg ze vervolgens afzonderlijk toe in een maatkolf van vijf milliliter. Voeg vervolgens methanol van HPLC-kwaliteit toe om op te lossen en verdun tot vijf milliliter.En ten slotte, schud goed om de referentiestof-stamoplossing te verkrijgen met massaconcentraties van respectievelijk 2,120, 1,048 en 1,042 milligram per milliliter. Om de testmonsteroplossing te bereiden, extraheert u 2,8 gram rhodiola-korrels met 10 milliliter methanol van HPLC-kwaliteit, met behulp van een ultrasone reinigingsmachine gedurende 30 minuten. Filter het vervolgens met een filter van 0,22 micrometer voor de systeemaanpassingstest.Bereid vervolgens een gemengde referentieoplossing die 0,590 milligram per milliliter salidrocide, 2,030 milligram per milliliter galluszuur en 1,930 milligram per milliliter ethylgallaat bevat. Om het theoretische gehalte van elk karakteristiek bestanddeel van rhodiola-korrels te verkrijgen, plaatst u 2,8 gram rhodiola-korrels in een erlenmeyer van 500 milliliter. Voeg 200 milliliter ultrapuur water toe en extraheer ultrasoon gedurende 60 minuten.Filter het vervolgens met een filter van 0,22 micrometer. Nadat de inhoud van de testoplossing is bepaald, stelt u de chromatografische voorwaarden in voor vloeistofchromatografie met hoge prestaties zoals beschreven in het manuscript. Om de lineaire relatie te onderzoeken, verdunt u de referentiestamoplossingen van galluszuur en ethylgallaat en de referentievoorraadoplossingen van salidrocide om de gradiëntconcentratieoplossing voor het tekenen van een standaardcurve te verkrijgen.Injecteer vervolgens zes keer per dag 10 microliter van de gemengde referentieoplossing in het HPLC-systeem en voer de monsters uit met dezelfde HPLC-omstandigheden, terwijl het piekoppervlak van elke functiecomponent wordt geregistreerd. Injecteer vervolgens 10 microliter van de bereide monsteroplossing en bepaal de piekgebieden van de HPLC volgens de chromatografische omstandigheden met verschillende tijdsintervallen. Neem zes monsters van dezelfde partij rhodiolakorrels om de testmonsteroplossing te bereiden zoals eerder gedemonstreerd, en injecteer 10 microliter van elk monster in het HPLC-systeem.Voer de monsters uit zoals eerder gedemonstreerd om de reproduceerbaarheid te bepalen. Na het bereiden van zes porties van dezelfde partij rhodiola-korrels voor de testoplossing, voegt u ongeveer 50% van het referentiesubstraat van elke indexcomponent toe. Voer deze monsters uit in het HPLC-systeem, zoals eerder gedemonstreerd, om het herstelpercentage te berekenen zoals beschreven in het manuscript.Om de oplostest uit te voeren, voegt u 100 milliliter ultrapuur water toe aan de oplosbeker van het oplosapparaat voor geneesmiddelen en houdt u de temperatuur op 37 graden Celsius met een rotatiesnelheid van 100 tpm. Voeg vervolgens 2,8 gram rhodiola-korrels toe aan een oplossingsbeker en begin onmiddellijk met het registreren van de duur van het oplossen. Verzamel in totaal één milliliter van het monster met een injector met verschillende tijdsintervallen en vul het volume in de oplosbeker onmiddellijk aan met een oplosmedium bij dezelfde temperatuur.Vul de verzamelde monsters onmiddellijk door een microporeus membraan van 0,22 micrometer en neem het daaropvolgende filtraat. Na het bepalen van de inhoud van elk onderdeel, op elk tijdstip door HPLC, berekent u de oplossing van elk tijdspunt en de cumulatieve oplossing zoals beschreven in het manuscript. Het chromatogram van het monster en de referentieoplossing werden verkregen.Drie verschillende pieken die overeenkomen met galluszuur, salidrocide en ethylgallaat laten zien dat de elutiegradiënt een goede resolutie had voor de drie indexcomponenten in rhodiolakorrels. De oplossingscurven van elke component laten zien dat de cumulatieve oplossing van galluszuur na één minuut meer dan 80% was. Terwijl het voor salidrocide en ethylgalluszuur na vijf minuten meer dan 65% was.De cumulatieve ontbinding van elke indexcomponent nam echter na 30 minuten af. Door het verdunningsprobleem van de standaardcurve aan te passen, moeten volgens het voorlopige experiment van de monsterbehandeling monsters snel worden verzameld om te voorkomen dat ze een speciaal verzameltijdstip missen.

Research

JoVE Journal

Medicine

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stamceltransplantatie in een In vitro Gesimuleerde ischemie / reperfusie model

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Met behulp van kwantitatieve real-time PCR voor donorcel Engraftment bepalen in een concurrerende Murine beenmergtransplantatie Model

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Een verbeterde werkwijze voor snelle intubatie van de trachea in muizen

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody (mAb) by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody mAb by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Bepaling van de relatieve sterkte van een Anti-TNF monoklonaal antilichaam (mAb) door Neutralizing TNF met behulp van een In Vitro Bioanalytical methode

This protocol shows the measurement of the apoptotic activity neutralization of TNF&#945; in a mouse fibroblast cell model (WEHI 164) using an ...

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Neonatale Murine Cochlear Explantietechniek als een<em&gt; In Vitro</em&gt; Screening Tool in Hearing Research

While there have been remarkable advances in hearing research over the past few decades, there is still no cure for Sensorineural Hearing Loss (SNHL), a ...

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

Een benadering In Vitro Fotodynamische therapie

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light ...

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Preparation Of Gushukang GSK Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Bereiding van Gushukang (GSK) granulaat voor in vivo en in vitro experimenten

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

Optimized Griess Reaction for UV-Vis and Naked-eye Determination of Anti-malarial Primaquine

Geoptimaliseerde Griess reactie voor UV-VIS en Naked-Eye bepaling van anti-malaria Primaquine

Primaquine (PMQ), an important anti-malarial drug, has been recommended by the World Health Organization (WHO) for the treatment of life-threatening ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

Met behulp van een chemische biopsie voor Graft Quality Assessment

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...

On-Site Sampling and Extraction of Brain Tumors for Metabolomics and Lipidomics Analysis

On-Site bemonstering en extractie van hersentumoren voor metabolomics en lipidomics analyse

Despite the variety of tools available for cancer diagnosis and classification, methods that enable fast and simple characterization of tumors are still ...