Name: an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules
Uploaded: 2022-11-04T15:00:00
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Questo lavoro è stato finanziato dal National Key Research and Development Program of China (2017YFC1703904), dall'Università (Chengdu University of TCM) - impresa (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. LTD) progetto di cooperazione (1052022040101); il progetto regionale di innovazione e cooperazione del Dipartimento di scienza e tecnologia della provincia del Sichuan (2020YFQ0032); e il programma chiave di ricerca e sviluppo e trasformazione del Dipartimento di scienza e tecnologia della provincia del Qinghai (2020-SF-C33).

1. Preparazione della soluzione
<ol><li>Preparare la soluzione madre della sostanza di riferimento: pesare separatamente 10,6 mg di salidroside, 5,24 mg di acido gallico e 5,21 mg di acido etilgallico su una bilancia analitica elettronica e aggiungerli singolarmente in un matraccio tarato da 5 ml. Quindi, aggiungere metanolo di grado HPLC per sciogliere e diluire a 5 ml. Infine, agitare bene per ottenere la soluzione madre della sostanza di riferimento con concentrazioni di massa rispettivamente di 2,1...

<ol>
	<li>Smith, S. C., Zheng, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impending+cardiovascular+pandemic+in+China.">The impending cardiovascular pandemic in China.</a> Circulation Cardiovascular Quality and Outcomes. 3 (3), 226-227 (2010).</li><li>Wang, D., Wang, P., Zhang, R., Xi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+Xuefu+Zhuyu+decoction+combined+with+Western+medicine+for+angina+pectoris+in+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+meta-analysis.">Efficacy and safety of Xuefu Zhuyu decoction combined with Western medicine for angina pectoris in coronary heart disease: A protocol for systematic review and meta-analysis.</a> Medicine. 99 (50), 23195 (2020).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+traditional+Chinese+medicine+in+the+regulation+of+stress+in+treating+coronary+heart+disease.">The role of traditional Chinese medicine in the regulation of stress in treating coronary heart disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 3231424 (2019).</li><li>Yang, J., Tian, S., Zhao, J., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+mechanism+of+TCM+formulae+in+the+treatment+of+different+types+of+coronary+heart+disease+by+network+pharmacology+and+machining+learning.">Exploring the mechanism of TCM formulae in the treatment of different types of coronary heart disease by network pharmacology and machining learning.</a> Pharmacological Research. 159, 105034 (2020).</li><li>Pu, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+Rhodiola+rosea+L.:+A+review.">Anti-inflammatory effects of Rhodiola rosea L.: A review.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 121, 109552 (2020).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+biochemical+basis+of+the+meridian+tropism+theory+for+the+qi-invigorating+traditional+Chinese+medicine+herb+Panax+ginseng.">Exploring the biochemical basis of the meridian tropism theory for the qi-invigorating traditional Chinese medicine herb Panax ginseng.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 26, 2515690 (2021).</li><li>Pang, Y., Liang, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Nordicam+on+hemodynamics+in+rats+with+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of Nordicam on hemodynamics in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Chinese Medicinal Materials. 36 (2), 276-279 (2013).</li><li>Nickerson, B., Kong, A., Gerst, P., Kao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+dissolution+and+disintegration+results+for+an+immediate-release+tablet.">Correlation of dissolution and disintegration results for an immediate-release tablet.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 150, 333-340 (2018).</li><li>Kambayashi, A., Yomota, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+clinically+relevant+dissolution+specifications+for+oral+solid+dosage+forms+of+weak+acid+drugs+using+an+in+silico+modeling+and+simulation+approach.">Exploring clinically relevant dissolution specifications for oral solid dosage forms of weak acid drugs using an in silico modeling and simulation approach.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 159, 105728 (2021).</li><li>Meng, S., Jiang, T. Y., Bu, C. J., Liu, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+on+the+dissolution+of+traditional+Chinese+medicine+preparations.">Research progress on the dissolution of traditional Chinese medicine preparations.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 8 (32), 180-181 (2015).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 4, (2020).</li><li>Lin, J. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Evaluation on Pre-Preparation of Rhodiola Extract. , (2013).</li><li>Zhou, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculation+of+drug+solubility+Weibull+distribution+parameters+by+Origin+software.">Calculation of drug solubility Weibull distribution parameters by Origin software.</a> Herald of Medicine. 30 (06), 721-723 (2011).</li><li>Hu, C. Q., Pan, R. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+evaluation/prediction+of+bioequivalence+of+solid+oral+preparations+by+dissolution+test.">Progress in evaluation/prediction of bioequivalence of solid oral preparations by dissolution test.</a> Chinese Journal of New Drugs. 23 (01), 44-51 (2014).</li><li>Zhang, H., Yu, L. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissolution+testing+for+solid+oral+drug+products:+Theoretical+considerations.">Dissolution testing for solid oral drug products: Theoretical considerations.</a> American Pharmaceutical Review. 7 (5), 26-30 (2004).</li><li>Ren, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+for+the+discovery+and+validation+of+quality-markers+of+traditional+Chinese+medicine.">Analytical strategies for the discovery and validation of quality-markers of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 67, 153165 (2020).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+modified+biopharmaceutics+classification+system+absorption+model+for+oral+Traditional+Chinese+Medicine+(Sanye+Tablet).">Establishment of modified biopharmaceutics classification system absorption model for oral Traditional Chinese Medicine (Sanye Tablet).</a> Journal of Ethnopharmacology. 244, 112148 (2019).</li><li>Song, X. Y., Li, Y. D., Shi, Y. P., Jin, L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+traditional+Chinese+medicines:+a+review.">Quality control of traditional Chinese medicines: a review.</a> Chinese Journal of Natural Medicines. 11 (6), 596-607 (2013).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+markers+based+on+biological+activity:+A+new+strategy+for+the+quality+control+of+traditional+Chinese+medicine.">Quality markers based on biological activity: A new strategy for the quality control of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 44, 103-108 (2018).</li><li>Wei, N. -. N., Wang, X., Su, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+of+dissolution+test+methodologies.">Progress of dissolution test methodologies.</a> Chinese Journal of New Drugs. 22 (10), 1119-1124 (2013).</li><li>Chi, Z., Azhar, I., Khan, H., Yang, L., Feng, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+dissolution+testing+with+high-temporal+resolution+for+both+immediate-release+and+fixed-combination+drug+tablets.">Automatic dissolution testing with high-temporal resolution for both immediate-release and fixed-combination drug tablets.</a> Scientific Reports. 9 (1), 17114 (2019).</li><li>Haidar, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioequivalence+approaches+for+highly+variable+drugs+and+drug+products.">Bioequivalence approaches for highly variable drugs and drug products.</a> Pharmaceutical Research. 25 (1), 237-241 (2008).</li></ol>

Il test di dissoluzione è un metodo ideale in vitro per simulare la disintegrazione e la dissoluzione di preparati orali solidi nel tratto gastrointestinale15. È un indice importante per valutare e controllare la qualità delle preparazioni orali solide. Pertanto, il test di dissoluzione svolge un ruolo essenziale nello sviluppo di preparati orali di farmaci solidi16. In particolare, con lo sviluppo della tecnologia di controllo della qualità della medicina trad...

In Cina, la prevalenza delle malattie cardiovascolari continua ad aumentare e i tassi di morbilità e mortalità delle malattie cardiovascolari sono al primo posto tra i residenti cinesi1. L'angina pectoris della malattia coronarica è causata da stenosi luminale dovuta all'aterosclerosi coronarica, che porta a un apporto di sangue coronarico relativamente insufficiente e ischemia miocardica e ipossia2. Negli ultimi anni, l'effetto curativo della medicina tradizionale cinese nel trattamento della malattia coronarica è stato riconosciuto da molti medici3.
La medicina tradizionale cinese svolge un ruolo importante nell'alleviare i sintomi clinici e migliorare la qualità della vita dei pazienti4. I granuli di Rhodiola (RG) vengono estratti e raffinati dalla pianta medicinale dell'altopiano tibetano Rhodiola rosea L. I componenti principali di RG sono salidroside, rodiosina e flavonoidi 5,6. RG ha l'effetto di integrare Qi7 e attivare e promuovere la circolazione sanguigna per alleviare il dolore. Clinicamente, è usato per trattare le ostruzioni toraciche causate da carenza di Qi e stasi del sangue, malattia coronarica, angina pectoris8. La sola determinazione del contenuto non riflette pienamente la qualità intrinseca dei farmaci, poiché sia la disintegrazione che la dissoluzione in vitro possono influenzare la biodisponibilità e l'efficacia dei farmaci 9,10. I metodi di ispezione per la dissoluzione della medicina cinese includono il metodo del cesto rotante, il metodo della pagaia e il metodo della piccola tazza. Lo svantaggio del metodo del cestello rotante è che solo la parte esterna del cestello rotante entra in contatto con il mezzo di dissoluzione durante la rotazione, il che non riflette il comportamento di dissoluzione del mondo reale. Il metodo della pagaia può superare la carenza di cui sopra, il che lo rende più adatto del metodo del cesto per alcuni preparati solidi della medicina cinese11. Al momento, non esiste alcun rapporto sull'analisi di dissoluzione in vitro di RG. Al fine di controllare la qualità della RG in modo più completo, è stato studiato il comportamento di dissoluzione dei tre componenti dell'indice (acido gallico, salidroside ed etilgallato) nella RG. Questo studio fornisce dati per il controllo di qualità di RG e un riferimento metodologico per la valutazione della qualità di altri preparati composti etnici.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromatographic column</td>
			<td>ZORBAX Eclipse&#160;&#160;</td>
			<td>XDB-C18</td>
			<td>4.6 mm x 250 mm, 5 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drug dissolution tester</td>
			<td>Shanghai Huanghai Pharmaceutical Inspection Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>RCZ-6B3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic analytical balance</td>
			<td>Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>FA1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl gallate (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM006301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Function drawing software</td>
			<td>OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA</td>
			<td>2022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM000802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd.</td>
			<td>Agilent 1260 Infinity <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64670/64670eq01.jpg" style="margin: auto;" /></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC grade methanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd.</td>
			<td>216565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injector</td>
			<td>Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus &#38; Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>0.7 (22 G)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millipore filter</td>
			<td>Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>&#966;13 0.22 Nylon66</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodiola granules</td>
			<td>Tibet Nodikang Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>210501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DST200425-037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure water systemic</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>Milli-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleansing machine</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200 DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules

La composizione della medicina tibetana Rhodiola granuli (RG) è complessa e la qualità complessiva di RG è difficile da determinare. Pertanto, stabilire un metodo per determinare la dissoluzione in vitro multicomponente di RG è di grande importanza per il controllo di qualità. Questo studio utilizza il secondo metodo a pale della quarta regola generale 0931 della Farmacopea cinese (edizione 2020), conforme all'apparato 2 della Farmacopea degli Stati Uniti (USP). L'apparato di dissoluzione è stato impostato su una velocità di rotazione di 100 giri / min con acqua ultrapura come mezzo di dissoluzione. Un volume campione di 1 mL è stato raccolto in ogni punto temporale. Inoltre, la dissoluzione cumulativa di acido gallico, salidroside e acido etilgallico in RG in diversi punti temporali è stata determinata mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC). Infine, le curve di dissoluzione sono state disegnate e le curve sono state adattate alle equazioni di GompertzMod, Gompertz, Logistic e Weibull. I risultati hanno mostrato che la dissoluzione cumulativa dell'acido gallico in RG era superiore all'80% a 1 minuto, la dissoluzione cumulativa di salidroside e acido etilgallico era superiore al 65% a 5 minuti e la dissoluzione cumulativa di ciascun componente indice diminuiva dopo 30 minuti. Il raccordo della curva ha dimostrato che l'equazione di GompertzMod era il modello più adatto per ogni componente dell'indice di RG. In conclusione, il metodo di test di dissoluzione descritto in questo protocollo è semplice, accurato e affidabile. Può caratterizzare il comportamento di dissoluzione delle componenti dell'indice in RG in vitro, che fornisce un riferimento metodologico per il controllo di qualità di RG e la valutazione della qualità di altri composti etnici.

In questo studio, la precisione, la stabilità, la ripetibilità e il recupero del campione di RG erano tutti all'interno dell'intervallo metodologico specificato nella Farmacopea cinese (Volume 4, 2020)12, indicando che il metodo era fattibile. Dopo ripetuti debug, è stato determinato che il gradiente di eluizione utilizzato in questo studio aveva una buona risoluzione (Figura 1) per le tre componenti dell'indice in RG. Le tre componenti dell'indice in RG avevano un...

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An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Qui, testiamo la dissoluzione dei granuli di Rhodiola (RG) in vitro, disegniamo curve di dissoluzione di salidroside, acido gallico e gallato di etile in acqua ultrapura e adattiamo le curve a diversi modelli matematici. Questo protocollo fornisce informazioni e indicazioni per studi di bioequivalenza in vivo e di correlazione in vivo-in vitro di RG.

Una determinazione della dissoluzione in vitro di componenti multi-indice nella medicina tibetana Rhodiola granuli

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

La misura in vitro è una misura adatta per ispezionare la dissoluzione di soluzioni di preparati solidi di medicina cinese che tengono conto degli effetti della disintegrazione del farmaco, del comportamento di dissoluzione e del contenuto del principio attivo. Il rilevamento di componenti multi-indice può riflettere meglio l'influenza neutra e la differenza di dissoluzione di diversi componenti. A dimostrare la procedura sarà Quinyun Du, uno studente straordinario del mio laboratorio.Per iniziare, preparare la soluzione madre della sostanza di riferimento pesando separatamente 10,6 milligrammi di salidrocida, 5,24 milligrammi di acido gallico e 5,21 milligrammi di acido etilgallico su una bilancia analitica elettronica. Quindi aggiungerli singolarmente in un matraccio tarato da cinque millilitri. Quindi aggiungere metanolo di grado HPLC per dissolvere e diluire a cinque millilitri.E infine, agitare bene per ottenere la soluzione madre della sostanza di riferimento con concentrazioni di massa di 2,120, 1,048 e 1,042 milligrammi per millilitro, rispettivamente. Per preparare la soluzione del campione di prova, estrarre 2,8 grammi di granuli di rhodiola con 10 millilitri di metanolo di grado HPLC, utilizzando una macchina per la pulizia ad ultrasuoni per 30 minuti. Quindi filtrarlo con un filtro da 0,22 micrometri per il test di adattabilità del sistema.Quindi preparare una soluzione di riferimento mista che contiene 0,590 milligrammi per millilitro di salidrocida, 2,030 milligrammi per millilitro di acido gallico e 1,930 milligrammi per millilitro di gallato di etile. Per ottenere il contenuto teorico di ciascun componente caratteristico dei granuli di rhodiola, posizionare 2,8 grammi di granuli di rhodiola in un matraccio conico da 500 millilitri. Aggiungere 200 millilitri di acqua ultrapura ed estrarre ad ultrasuoni per 60 minuti.Quindi filtrarlo con un filtro da 0,22 micrometri. Dopo aver determinato il contenuto della soluzione di prova, impostare le condizioni cromatografiche per la cromatografia liquida ad alte prestazioni come descritto nel manoscritto. Per studiare la relazione lineare, diluire le soluzioni madre di riferimento di acido gallico e gallato di etile e le soluzioni madre di riferimento di salidrocida per ottenere la soluzione di concentrazione del gradiente per disegnare una curva standard.Quindi iniettare 10 microlitri della soluzione di riferimento mista nel sistema HPLC sei volte al giorno ed eseguire i campioni con le stesse condizioni HPLC, registrando l'area di picco di ciascun componente della caratteristica. Quindi iniettare 10 microlitri della soluzione campione preparata e determinare le aree di picco dell'HPLC in base alle condizioni cromatografiche a diversi intervalli di tempo. Prelevare sei campioni dello stesso lotto di granuli di rhodiola per preparare la soluzione del campione di prova come dimostrato in precedenza e iniettare 10 microlitri di ciascun campione nel sistema HPLC.Eseguire i campioni come dimostrato in precedenza per determinare la riproducibilità. Dopo aver preparato sei porzioni dello stesso lotto di granuli di rhodiola per la soluzione di prova, aggiungere circa il 50% del substrato di riferimento di ciascun componente indice. Eseguire questi campioni nel sistema HPLC, come illustrato in precedenza, per calcolare il tasso di recupero come descritto nel manoscritto.Per eseguire il test di dissoluzione, aggiungere 100 millilitri di acqua ultrapura nella tazza di dissoluzione dell'apparato di dissoluzione del farmaco e mantenere la temperatura a 37 gradi Celsius con una velocità di rotazione di 100 giri / min. Quindi aggiungere 2,8 grammi di granuli di rhodiola in una tazza di dissoluzione e iniziare a registrare immediatamente la durata della dissoluzione. Raccogliere un totale di un millilitro del campione con un iniettore a diversi intervalli di tempo e recuperare immediatamente il volume nel bicchiere di dissoluzione con un mezzo di dissoluzione alla stessa temperatura.Riempire immediatamente i campioni raccolti attraverso una membrana microporosa da 0,22 micrometri e prelevare il successivo filtrato. Dopo aver determinato il contenuto di ciascun componente, in ogni punto temporale mediante HPLC, calcolare la dissoluzione di ciascun punto temporale e la dissoluzione cumulativa come descritto nel manoscritto. Sono stati ottenuti il cromatogramma del campione e la soluzione di riferimento.Tre diversi picchi corrispondenti all'acido gallico, al salidrocida e al gallato di etile mostrano che il gradiente di eluizione aveva una buona risoluzione per i tre componenti dell'indice nei granuli di rhodiola. Le curve di dissoluzione di ciascun componente mostrano che la dissoluzione cumulativa dell'acido gallico era superiore all'80% dopo un minuto. Mentre per il salidrocida e l'acido etilgallico, era superiore al 65% dopo cinque minuti.Tuttavia, la dissoluzione cumulativa di ciascun componente dell'indice è diminuita dopo 30 minuti. Regolando il problema della diluizione della curva standard, in base all'esperimento preliminare del trattamento del campione, i campioni devono essere raccolti rapidamente per evitare che manchino il punto temporale di raccolta speciale.

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