Name: an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules
Uploaded: 2022-11-04T15:00:00
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Este trabajo fue financiado por el Programa Nacional Clave de Investigación y Desarrollo de China (2017YFC1703904), la Universidad (Universidad de Chengdu de TCM) - proyecto de cooperación empresarial (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. LTD) (1052022040101); el Proyecto Regional de Innovación y Cooperación del Departamento de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Sichuan (2020YFQ0032); y el Programa Clave de Investigación y Desarrollo y Transformación del Departamento de Ciencia y Tecnología de la provincia de Qinghai (2020-SF-C33).

1. Preparación de la solución
<ol><li>Preparar la solución madre de la sustancia de referencia: Pesar 10,6 mg de salidroside, 5,24 mg de ácido gálico y 5,21 mg de ácido etílico gálico por separado en una balanza analítica electrónica y añadirlos individualmente en un matraz aforado de 5 ml. Luego, agregue metanol de grado HPLC para disolver y diluir a 5 ml. Finalmente, agitar bien para obtener la solución madre de la sustancia de referencia con concentraciones másicas de 2,120 mg/ml, 1,048...

<ol>
	<li>Smith, S. C., Zheng, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impending+cardiovascular+pandemic+in+China.">The impending cardiovascular pandemic in China.</a> Circulation Cardiovascular Quality and Outcomes. 3 (3), 226-227 (2010).</li><li>Wang, D., Wang, P., Zhang, R., Xi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+Xuefu+Zhuyu+decoction+combined+with+Western+medicine+for+angina+pectoris+in+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+meta-analysis.">Efficacy and safety of Xuefu Zhuyu decoction combined with Western medicine for angina pectoris in coronary heart disease: A protocol for systematic review and meta-analysis.</a> Medicine. 99 (50), 23195 (2020).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+traditional+Chinese+medicine+in+the+regulation+of+stress+in+treating+coronary+heart+disease.">The role of traditional Chinese medicine in the regulation of stress in treating coronary heart disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 3231424 (2019).</li><li>Yang, J., Tian, S., Zhao, J., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+mechanism+of+TCM+formulae+in+the+treatment+of+different+types+of+coronary+heart+disease+by+network+pharmacology+and+machining+learning.">Exploring the mechanism of TCM formulae in the treatment of different types of coronary heart disease by network pharmacology and machining learning.</a> Pharmacological Research. 159, 105034 (2020).</li><li>Pu, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+Rhodiola+rosea+L.:+A+review.">Anti-inflammatory effects of Rhodiola rosea L.: A review.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 121, 109552 (2020).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+biochemical+basis+of+the+meridian+tropism+theory+for+the+qi-invigorating+traditional+Chinese+medicine+herb+Panax+ginseng.">Exploring the biochemical basis of the meridian tropism theory for the qi-invigorating traditional Chinese medicine herb Panax ginseng.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 26, 2515690 (2021).</li><li>Pang, Y., Liang, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Nordicam+on+hemodynamics+in+rats+with+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of Nordicam on hemodynamics in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Chinese Medicinal Materials. 36 (2), 276-279 (2013).</li><li>Nickerson, B., Kong, A., Gerst, P., Kao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+dissolution+and+disintegration+results+for+an+immediate-release+tablet.">Correlation of dissolution and disintegration results for an immediate-release tablet.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 150, 333-340 (2018).</li><li>Kambayashi, A., Yomota, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+clinically+relevant+dissolution+specifications+for+oral+solid+dosage+forms+of+weak+acid+drugs+using+an+in+silico+modeling+and+simulation+approach.">Exploring clinically relevant dissolution specifications for oral solid dosage forms of weak acid drugs using an in silico modeling and simulation approach.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 159, 105728 (2021).</li><li>Meng, S., Jiang, T. 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B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculation+of+drug+solubility+Weibull+distribution+parameters+by+Origin+software.">Calculation of drug solubility Weibull distribution parameters by Origin software.</a> Herald of Medicine. 30 (06), 721-723 (2011).</li><li>Hu, C. Q., Pan, R. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+evaluation/prediction+of+bioequivalence+of+solid+oral+preparations+by+dissolution+test.">Progress in evaluation/prediction of bioequivalence of solid oral preparations by dissolution test.</a> Chinese Journal of New Drugs. 23 (01), 44-51 (2014).</li><li>Zhang, H., Yu, L. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+for+the+discovery+and+validation+of+quality-markers+of+traditional+Chinese+medicine.">Analytical strategies for the discovery and validation of quality-markers of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 67, 153165 (2020).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+modified+biopharmaceutics+classification+system+absorption+model+for+oral+Traditional+Chinese+Medicine+(Sanye+Tablet).">Establishment of modified biopharmaceutics classification system absorption model for oral Traditional Chinese Medicine (Sanye Tablet).</a> Journal of Ethnopharmacology. 244, 112148 (2019).</li><li>Song, X. Y., Li, Y. D., Shi, Y. P., Jin, L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+traditional+Chinese+medicines:+a+review.">Quality control of traditional Chinese medicines: a review.</a> Chinese Journal of Natural Medicines. 11 (6), 596-607 (2013).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+markers+based+on+biological+activity:+A+new+strategy+for+the+quality+control+of+traditional+Chinese+medicine.">Quality markers based on biological activity: A new strategy for the quality control of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 44, 103-108 (2018).</li><li>Wei, N. -. N., Wang, X., Su, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+of+dissolution+test+methodologies.">Progress of dissolution test methodologies.</a> Chinese Journal of New Drugs. 22 (10), 1119-1124 (2013).</li><li>Chi, Z., Azhar, I., Khan, H., Yang, L., Feng, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+dissolution+testing+with+high-temporal+resolution+for+both+immediate-release+and+fixed-combination+drug+tablets.">Automatic dissolution testing with high-temporal resolution for both immediate-release and fixed-combination drug tablets.</a> Scientific Reports. 9 (1), 17114 (2019).</li><li>Haidar, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioequivalence+approaches+for+highly+variable+drugs+and+drug+products.">Bioequivalence approaches for highly variable drugs and drug products.</a> Pharmaceutical Research. 25 (1), 237-241 (2008).</li></ol>

La prueba de disolución es un método in vitro ideal para simular la desintegración y disolución de preparaciones orales sólidas en el tracto gastrointestinal15. Es un índice importante para evaluar y controlar la calidad de las preparaciones orales sólidas. Por lo tanto, la prueba de disolución juega un papel esencial en el desarrollo de preparaciones orales de fármacos sólidos16. En particular, con el desarrollo de la tecnología de control de calidad de...

En China, la prevalencia de enfermedades cardiovasculares sigue aumentando, y las tasas de morbilidad y mortalidad de las enfermedades cardiovasculares ocupan el primer lugar entre los residentes chinos1. La angina de pecho de la enfermedad coronaria es causada por estenosis luminal debido a aterosclerosis coronaria, que conduce a un suministro de sangre coronaria relativamente insuficiente e isquemia miocárdica e hipoxia2. En los últimos años, el efecto curativo de la medicina tradicional china en el tratamiento de la enfermedad coronaria ha sido reconocido por muchos médicos3.
La medicina tradicional china juega un papel importante en el alivio de los síntomas clínicos y la mejora de la calidad de vida de los pacientes4. Los gránulos de Rhodiola (RG) se extraen y refinan de la planta medicinal de la meseta tibetana Rhodiola rosea L. Los principales componentes de RG son salidroside, rhodiosin, y flavonoides 5,6. RG tiene el efecto de complementar Qi7 y activar y promover la circulación sanguínea para aliviar el dolor. Clínicamente, se utiliza para tratar obstrucciones torácicas causadas por deficiencia de Qi y estasis sanguínea, enfermedad coronaria, angina de pecho8. La determinación del contenido por sí sola no refleja completamente la calidad intrínseca de los medicamentos, ya que tanto la desintegración como la disolución in vitro pueden afectar la biodisponibilidad y eficacia de los medicamentos 9,10. Los métodos de inspección para la disolución de la medicina china incluyen el método de la cesta giratoria, el método de la paleta y el método de la taza pequeña. La desventaja del método de la cesta giratoria es que solo la parte exterior de la cesta giratoria entra en contacto con el medio de disolución durante la rotación, lo que no refleja el comportamiento de disolución del mundo real. El método del remo puede superar las deficiencias anteriores, lo que lo hace más adecuado que el método de la canasta para algunas preparaciones sólidas de medicina china11. En la actualidad, no hay ningún informe sobre el análisis de disolución in vitro de RG. Con el fin de controlar la calidad de RG de manera más integral, se investigó el comportamiento de disolución de los tres componentes del índice (ácido gálico, salidroside y galato de etilo) en RG. Este estudio proporciona datos para el control de calidad de RG y una referencia metodológica para la evaluación de la calidad de otras preparaciones de compuestos étnicos.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromatographic column</td>
			<td>ZORBAX Eclipse&#160;&#160;</td>
			<td>XDB-C18</td>
			<td>4.6 mm x 250 mm, 5 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drug dissolution tester</td>
			<td>Shanghai Huanghai Pharmaceutical Inspection Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>RCZ-6B3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic analytical balance</td>
			<td>Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>FA1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl gallate (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM006301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Function drawing software</td>
			<td>OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA</td>
			<td>2022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM000802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd.</td>
			<td>Agilent 1260 Infinity <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64670/64670eq01.jpg" style="margin: auto;" /></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC grade methanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd.</td>
			<td>216565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injector</td>
			<td>Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus &#38; Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>0.7 (22 G)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millipore filter</td>
			<td>Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>&#966;13 0.22 Nylon66</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodiola granules</td>
			<td>Tibet Nodikang Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>210501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DST200425-037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure water systemic</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>Milli-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleansing machine</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200 DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules

La composición de la medicina tibetana Rhodiola granules (RG) es compleja, y la calidad general de RG es difícil de determinar. Por lo tanto, establecer un método para determinar la disolución in vitro multicomponente de RG es de gran importancia para el control de calidad. Este estudio utiliza el segundo método de remo de la cuarta regla general 0931 de la Farmacopea China (edición 2020), compatible con el aparato 2 de la Farmacopea de los Estados Unidos (USP). El aparato de disolución se ajustó a una velocidad de rotación de 100 rpm con agua ultrapura como medio de disolución. Se recogió un volumen de muestra de 1 ml en cada punto temporal. Además, la disolución acumulativa de ácido gálico, salidrosido y ácido gálico etílico en RG en diferentes puntos de tiempo se determinó mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Finalmente, se dibujaron las curvas de disolución y las curvas se ajustaron a las ecuaciones de GompertzMod, Gompertz, Logistic y Weibull. Los resultados mostraron que la disolución acumulada del ácido gálico en RG fue superior al 80% a 1 min, la disolución acumulada de salidroside y ácido etil gálico fue superior al 65% a los 5 min, y la disolución acumulada de cada componente del índice disminuyó después de 30 min. El ajuste de curva demostró que la ecuación de GompertzMod era el modelo de mejor ajuste para cada componente de índice de RG. En conclusión, el método de prueba de disolución descrito en este protocolo es simple, preciso y confiable. Se puede caracterizar el comportamiento de disolución de los componentes del índice en RG in vitro, lo que proporciona una referencia metodológica para el control de calidad de RG y la evaluación de la calidad de otros compuestos étnicos.

En este estudio, la precisión, estabilidad, repetibilidad y recuperación de la muestra de RG estaban dentro del rango metodológico especificado en la Farmacopea China (Volumen 4, 2020)12, lo que indica que el método era factible. Después de repetidas depuraciones, se determinó que el gradiente de elución utilizado en este estudio tenía buena resolución (Figura 1) para los tres componentes del índice en RG. Los tres componentes índice en RG tuvieron una buen...

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An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Aquí, probamos la disolución de gránulos de Rhodiola (RG) in vitro, dibujamos curvas de disolución de salidroside, ácido gálico y galato de etilo en agua ultrapura, y ajustamos las curvas a diferentes modelos matemáticos. Este protocolo proporciona información y orientación para la bioequivalencia in vivo y los estudios de correlación in vivo-in vitro de RG.

Una determinación de disolución in vitro de componentes de múltiples índices en gránulos de Rhodiola de medicina tibetana

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

La medida in vitro es una medida adecuada para inspeccionar la disolución de soluciones de preparación sólida de medicina china que tienen en cuenta los efectos de la desintegración del fármaco, el comportamiento de disolución y el contenido del ingrediente activo. La detección del componente multiíndice puede reflejar mejor la influencia neutral y la diferencia de disolución de los diferentes componentes. Demostrando el procedimiento estará Quinyun Du, un estudiante extraordinario de mi laboratorio.Para empezar, prepare la solución madre de la sustancia de referencia pesando 10,6 miligramos de salidrocida, 5,24 miligramos de ácido gálico y 5,21 miligramos de ácido ílico por separado en una balanza analítica electrónica. A continuación, añádalos individualmente en un matraz aforado de cinco mililitros. Luego agregue metanol de grado HPLC para disolver y diluir a cinco mililitros.Y finalmente, agite bien para obtener la solución madre de sustancia de referencia con concentraciones de masa de 2.120, 1.048 y 1.042 miligramos por mililitro, respectivamente. Para preparar la solución de muestra de prueba, extraiga 2,8 gramos de gránulos de rhodiola con 10 mililitros de metanol de grado HPLC, utilizando una máquina de limpieza ultrasónica durante 30 minutos. Luego fíjelo con un filtro de 0.22 micrómetros para la prueba de adaptabilidad del sistema.Luego prepare una solución de referencia mixta que contenga 0.590 miligramos por mililitro de salidrocida, 2.030 miligramos por mililitro de ácido gálico y 1.930 miligramos por mililitro de galato de etilo. Para obtener el contenido teórico de cada componente característico de los gránulos de rhodiola, coloque 2,8 gramos de gránulos de rhodiola en un matraz cónico de 500 mililitros. Agregue 200 mililitros de agua ultrapura y extraiga ultrasónicamente durante 60 minutos.Luego fílvelo con un filtro de 0,22 micrómetros. Después de determinar el contenido de la solución de ensayo, establezca las condiciones cromatográficas para la cromatografía líquida de alta resolución como se describe en el manuscrito. Para investigar la relación lineal, diluir las soluciones madre de referencia de ácido gálico y galato de etilo, y las soluciones madre de referencia de salidrocida para obtener la solución de concentración de gradiente para dibujar una curva estándar.Luego inyecte 10 microlitros de la solución de referencia mixta en el sistema HPLC seis veces al día y ejecute las muestras con las mismas condiciones de HPLC, mientras registra el área pico de cada componente de la característica. A continuación, inyecte 10 microlitros de la solución de muestra preparada y determine las áreas pico de la HPLC de acuerdo con las condiciones cromatográficas en diferentes intervalos de tiempo. Tome seis muestras del mismo lote de gránulos de rhodiola para preparar la solución de muestra de prueba como se demostró anteriormente, e inyecte 10 microlitros de cada muestra en el sistema de HPLC.Ejecute los ejemplos como se demostró anteriormente para determinar la reproducibilidad. Después de preparar seis porciones del mismo lote de gránulos de rhodiola para la solución de prueba, agregue aproximadamente el 50% del sustrato de referencia de cada componente índice. Ejecute estas muestras en el sistema HPLC, como se demostró anteriormente, para calcular la tasa de recuperación como se describe en el manuscrito.Para llevar a cabo la prueba de disolución, agregue 100 mililitros de agua ultrapura en la taza de disolución del aparato de disolución del medicamento y mantenga la temperatura a 37 grados centígrados con una velocidad de rotación de 100 rpm. A continuación, agregue 2,8 gramos de gránulos de rhodiola en una taza de disolución y comience a registrar la duración de la disolución inmediatamente. Recoja un total de un mililitro de la muestra con un inyector en diferentes intervalos de tiempo y enrase el volumen en la taza de disolución con un medio de disolución a la misma temperatura inmediatamente.Llene inmediatamente las muestras recolectadas a través de una membrana microporosa de 0,22 micrómetros y tome el filtrado posterior. Después de determinar el contenido de cada componente, en cada punto de tiempo por HPLC, calcule la disolución de cada punto de tiempo y la disolución acumulativa como se describe en el manuscrito. Se obtuvo el cromatograma de la muestra y la solución de referencia.Tres picos diferentes correspondientes al ácido gálico, salidrocida y galato de etilo muestran que el gradiente de elución tenía una buena resolución para los tres componentes del índice en los gránulos de rhodiola. Las curvas de disolución de cada componente muestran que la disolución acumulada del ácido gálico fue superior al 80% después de un minuto. Mientras que para salidrocida y ácido gálico etílico, fue superior al 65% después de cinco minutos.Sin embargo, la disolución acumulada de cada componente del índice disminuyó después de 30 minutos. Ajustando el problema de dilución de la curva estándar, de acuerdo con el experimento preliminar del tratamiento de la muestra, las muestras deben recolectarse rápidamente para evitar que pierdan un punto de tiempo de recolección especial.

Research

JoVE Journal

Medicine

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