Name: an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules
Uploaded: 2022-11-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules at JoVE.com

Bu çalışma, Çin Ulusal Anahtar Araştırma ve Geliştirme Programı (2017YFC1703904), Üniversite (Chengdu University of TCM) - kurumsal (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. LTD) işbirliği projesi (1052022040101) tarafından finanse edilmiştir; Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Bölümü Bölgesel İnovasyon ve İşbirliği Projesi (2020YFQ0032); ve Qinghai Eyaleti Bilim ve Teknoloji Departmanının Anahtar Ar-Ge ve Dönüşüm Programı (2020-SF-C33).

1. Çözelti hazırlama
<ol><li>Referans madde stok çözeltisini hazırlayın: Elektronik analitik terazide 10,6 mg salidrosid, 5,24 mg gallik asit ve 5,21 mg etil gallik asidi ayrı ayrı tartın ve bunları ayrı ayrı 5 mL hacimsel şişeye ekleyin. Daha sonra, çözünmesi ve 5 mL'ye seyreltilmesi için HPLC sınıfı metanol ekleyin. Son olarak, sırasıyla 2.120 mg / mL, 1.048 mg / mL ve 1.042 mg / mL kütle konsantrasyonlarına sahip referans madde stok çözeltisini elde etmek için iyice çal...

<ol>
	<li>Smith, S. C., Zheng, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impending+cardiovascular+pandemic+in+China.">The impending cardiovascular pandemic in China.</a> Circulation Cardiovascular Quality and Outcomes. 3 (3), 226-227 (2010).</li><li>Wang, D., Wang, P., Zhang, R., Xi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+Xuefu+Zhuyu+decoction+combined+with+Western+medicine+for+angina+pectoris+in+coronary+heart+disease:+A+protocol+for+systematic+review+and+meta-analysis.">Efficacy and safety of Xuefu Zhuyu decoction combined with Western medicine for angina pectoris in coronary heart disease: A protocol for systematic review and meta-analysis.</a> Medicine. 99 (50), 23195 (2020).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+traditional+Chinese+medicine+in+the+regulation+of+stress+in+treating+coronary+heart+disease.">The role of traditional Chinese medicine in the regulation of stress in treating coronary heart disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 3231424 (2019).</li><li>Yang, J., Tian, S., Zhao, J., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+mechanism+of+TCM+formulae+in+the+treatment+of+different+types+of+coronary+heart+disease+by+network+pharmacology+and+machining+learning.">Exploring the mechanism of TCM formulae in the treatment of different types of coronary heart disease by network pharmacology and machining learning.</a> Pharmacological Research. 159, 105034 (2020).</li><li>Pu, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+Rhodiola+rosea+L.:+A+review.">Anti-inflammatory effects of Rhodiola rosea L.: A review.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 121, 109552 (2020).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+biochemical+basis+of+the+meridian+tropism+theory+for+the+qi-invigorating+traditional+Chinese+medicine+herb+Panax+ginseng.">Exploring the biochemical basis of the meridian tropism theory for the qi-invigorating traditional Chinese medicine herb Panax ginseng.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 26, 2515690 (2021).</li><li>Pang, Y., Liang, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Nordicam+on+hemodynamics+in+rats+with+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Effect of Nordicam on hemodynamics in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Chinese Medicinal Materials. 36 (2), 276-279 (2013).</li><li>Nickerson, B., Kong, A., Gerst, P., Kao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+dissolution+and+disintegration+results+for+an+immediate-release+tablet.">Correlation of dissolution and disintegration results for an immediate-release tablet.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 150, 333-340 (2018).</li><li>Kambayashi, A., Yomota, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+clinically+relevant+dissolution+specifications+for+oral+solid+dosage+forms+of+weak+acid+drugs+using+an+in+silico+modeling+and+simulation+approach.">Exploring clinically relevant dissolution specifications for oral solid dosage forms of weak acid drugs using an in silico modeling and simulation approach.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 159, 105728 (2021).</li><li>Meng, S., Jiang, T. Y., Bu, C. J., Liu, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+on+the+dissolution+of+traditional+Chinese+medicine+preparations.">Research progress on the dissolution of traditional Chinese medicine preparations.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 8 (32), 180-181 (2015).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Committee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 4, (2020).</li><li>Lin, J. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Evaluation on Pre-Preparation of Rhodiola Extract. , (2013).</li><li>Zhou, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculation+of+drug+solubility+Weibull+distribution+parameters+by+Origin+software.">Calculation of drug solubility Weibull distribution parameters by Origin software.</a> Herald of Medicine. 30 (06), 721-723 (2011).</li><li>Hu, C. Q., Pan, R. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+evaluation/prediction+of+bioequivalence+of+solid+oral+preparations+by+dissolution+test.">Progress in evaluation/prediction of bioequivalence of solid oral preparations by dissolution test.</a> Chinese Journal of New Drugs. 23 (01), 44-51 (2014).</li><li>Zhang, H., Yu, L. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissolution+testing+for+solid+oral+drug+products:+Theoretical+considerations.">Dissolution testing for solid oral drug products: Theoretical considerations.</a> American Pharmaceutical Review. 7 (5), 26-30 (2004).</li><li>Ren, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analytical+strategies+for+the+discovery+and+validation+of+quality-markers+of+traditional+Chinese+medicine.">Analytical strategies for the discovery and validation of quality-markers of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 67, 153165 (2020).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+modified+biopharmaceutics+classification+system+absorption+model+for+oral+Traditional+Chinese+Medicine+(Sanye+Tablet).">Establishment of modified biopharmaceutics classification system absorption model for oral Traditional Chinese Medicine (Sanye Tablet).</a> Journal of Ethnopharmacology. 244, 112148 (2019).</li><li>Song, X. Y., Li, Y. D., Shi, Y. P., Jin, L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+control+of+traditional+Chinese+medicines:+a+review.">Quality control of traditional Chinese medicines: a review.</a> Chinese Journal of Natural Medicines. 11 (6), 596-607 (2013).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+markers+based+on+biological+activity:+A+new+strategy+for+the+quality+control+of+traditional+Chinese+medicine.">Quality markers based on biological activity: A new strategy for the quality control of traditional Chinese medicine.</a> Phytomedicine. 44, 103-108 (2018).</li><li>Wei, N. -. N., Wang, X., Su, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+of+dissolution+test+methodologies.">Progress of dissolution test methodologies.</a> Chinese Journal of New Drugs. 22 (10), 1119-1124 (2013).</li><li>Chi, Z., Azhar, I., Khan, H., Yang, L., Feng, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+dissolution+testing+with+high-temporal+resolution+for+both+immediate-release+and+fixed-combination+drug+tablets.">Automatic dissolution testing with high-temporal resolution for both immediate-release and fixed-combination drug tablets.</a> Scientific Reports. 9 (1), 17114 (2019).</li><li>Haidar, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioequivalence+approaches+for+highly+variable+drugs+and+drug+products.">Bioequivalence approaches for highly variable drugs and drug products.</a> Pharmaceutical Research. 25 (1), 237-241 (2008).</li></ol>

Çözünme testi, gastrointestinal sistemde katı oral preparatların parçalanmasını ve çözünmesini simüle etmek için ideal bir in vitro yöntemdir15. Katı oral preparatların kalitesini değerlendirmek ve kontrol etmek için önemli bir indekstir. Bu nedenle, çözünme testi, katı ilaç oral preparatlarının geliştirilmesinde önemli bir rol oynar16. Özellikle geleneksel Çin tıbbı (TCM) kalite kontrol teknolojisinin gelişmesiyle birlikte, çözü...

Çin'de, kardiyovasküler hastalıkların prevalansı artmaya devam ediyor ve kardiyovasküler hastalıkların morbidite ve mortalite oranları Çin sakinleri arasında ilk sırada yer alıyor1. Koroner kalp hastalığının anjina pektorisi, koroner ateroskleroza bağlı luminal darlıktan kaynaklanır ve bu da nispeten yetersiz koroner kan akımına ve miyokard iskemisi ve hipoksiye yol açar2. Son yıllarda, geleneksel Çin tıbbının koroner kalp hastalığının tedavisinde iyileştirici etkisi birçok doktor tarafından kabul edilmiştir3.
Geleneksel Çin tıbbı, klinik semptomların hafifletilmesinde ve hastaların yaşam kalitesinin iyileştirilmesinde önemli bir rol oynamaktadır4. Rhodiola granülleri (RG), Tibet Platosu şifalı bitkisi Rhodiola rosea L'den ekstrakte edilir ve rafine edilir. RG'nin ana bileşenleri salidrosid, rodosin ve flavonoidler 5,6'dır. RG, Qi7'yi destekleme ve ağrıyı hafifletmek için kan dolaşımını aktive etme ve teşvik etme etkisine sahiptir. Klinik olarak, Qi eksikliği ve kan stazı, koroner kalp hastalığı, anjina pektoris8'in neden olduğu göğüs tıkanıklıklarını tedavi etmek için kullanılır. İçerik tayini tek başına ilaçların içsel kalitesini tam olarak yansıtmaz, çünkü in vitro olarak hem parçalanma hem de çözünme ilaçların biyoyararlanımını ve etkinliğini etkileyebilir 9,10. Çin tıbbının çözülmesi için muayene yöntemleri arasında dönen sepet yöntemi, kürek yöntemi ve küçük fincan yöntemi bulunur. Dönen sepet yönteminin dezavantajı, dönen sepetin yalnızca dış kısmının, gerçek dünyadaki çözünme davranışını yansıtmayan dönme sırasında çözünme ortamıyla temas etmesidir. Kürek yöntemi, yukarıdaki eksikliğin üstesinden gelebilir, bu da onu bazı katı Çin tıbbı preparatları için sepet yönteminden daha uygun hale getirir11. Şu anda, RG'nin in vitro çözünme analizi hakkında bir rapor bulunmamaktadır. RG'nin kalitesini daha kapsamlı bir şekilde kontrol etmek için, RG'deki üç indeks bileşeninin (gallik asit, salidrosid ve etil gallat) çözünme davranışı araştırılmıştır. Bu çalışma, RG'nin kalite kontrolü için veri ve diğer etnik bileşik preparatlarının kalite değerlendirmesi için metodolojik bir referans sunmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromatographic column</td>
			<td>ZORBAX Eclipse&#160;&#160;</td>
			<td>XDB-C18</td>
			<td>4.6 mm x 250 mm, 5 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drug dissolution tester</td>
			<td>Shanghai Huanghai Pharmaceutical Inspection Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>RCZ-6B3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic analytical balance</td>
			<td>Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>FA1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl gallate (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM006301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Function drawing software</td>
			<td>OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA</td>
			<td>2022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DSTDM000802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent Technologies Singapore (International) Pte. Ltd.</td>
			<td>Agilent 1260 Infinity <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64670/64670eq01.jpg" style="margin: auto;" /></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC grade methanol</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd.</td>
			<td>216565</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injector</td>
			<td>Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus &#38; Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>0.7 (22 G)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millipore filter</td>
			<td>Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>&#966;13 0.22 Nylon66</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodiola granules</td>
			<td>Tibet Nodikang Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>210501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside (HPLC, &#8805;98%)</td>
			<td>Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>DST200425-037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra pure water systemic</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>Milli-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleansing machine</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200 DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vitro dissolution determination of multi-index components in tibetan medicine rhodiola granules

Tibet tıbbı Rhodiola granüllerinin (RG) bileşimi karmaşıktır ve RG'nin genel kalitesini belirlemek zordur. Bu nedenle, RG'nin çok bileşenli in vitro çözünmesini belirlemek için bir yöntem oluşturmak, kalite kontrol için büyük önem taşımaktadır. Bu çalışma, Amerika Birleşik Devletleri Farmakopesi'nin (USP) 2. aparatı ile uyumlu olan Çin Farmakopesi'nden (2020 baskısı) dördüncü genel kural 0931'in ikinci kürek yöntemini kullanmaktadır. Çözünme aparatı, çözünme ortamı olarak ultra saf su ile 100 rpm'lik bir dönme hızına ayarlandı. Her zaman noktasında 1 mL'lik bir örnek hacmi toplandı. Ayrıca, gallik asit, salidrosid ve etil gallik asidin RG'de farklı zaman noktalarında kümülatif çözünmesi, yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) ile belirlenmiştir. Son olarak, çözülme eğrileri çizildi ve eğriler GompertzMod, Gompertz, Lojistik ve Weibull denklemlerine takıldı. Sonuçlar, RG'deki gallik asidin kümülatif çözünmesinin 1 dakikada% 80'in üzerinde olduğunu, salidrosid ve etil gallik asidin kümülatif çözünmesinin 5 dakikada% 65'in üzerinde olduğunu ve her bir indeks bileşeninin kümülatif çözünmesinin 30 dakika sonra azaldığını göstermiştir. Eğri uyumu, GompertzMod denkleminin RG'nin her bir indeks bileşeni için en uygun model olduğunu gösterdi. Sonuç olarak, bu protokolde açıklanan çözünme testi yöntemi basit, doğru ve güvenilirdir. RG'deki indeks bileşenlerinin in vitro çözünme davranışını karakterize edebilir, bu da RG'nin kalite kontrolü ve diğer etnik bileşiklerin kalite değerlendirmesi için metodolojik bir referans sağlar.

Bu çalışmada, RG'nin hassasiyeti, stabilitesi, tekrarlanabilirliği ve numune geri kazanımı, Çin Farmakopesinde (Cilt 4, 2020)12'de belirtilen metodolojik aralıkta olup, yöntemin uygulanabilir olduğunu göstermektedir. Tekrarlanan hata ayıklamadan sonra, bu çalışmada kullanılan elüsyon gradyanının RG'deki üç indeks bileşeni için iyi çözünürlüğe sahip olduğu belirlenmiştir (Şekil 1). RG'deki üç indeks bileşeni, belirli bir konsantrasyon...

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules at JoVE.com

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Burada, Rhodiola granüllerinin (RG) in vitro çözünmesini test ediyoruz, ultra saf suda salidrosid, gallik asit ve etil galatın çözünme eğrilerini çiziyoruz ve eğrileri farklı matematiksel modellere uyguluyoruz. Bu protokol, RG'nin in vivo biyoeşdeğerliği ve in vivo-in vitro korelasyon çalışmaları için bilgi ve rehberlik sağlar.

Tibet Tıbbında Rhodiola Granüllerinde Çok İndeksli Bileşenlerin In Vitro Çözünme Tayini

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

In vitro ölçü, ilaç parçalanmasının etkilerini, çözünme davranışını ve aktif bileşenin içeriğini dikkate alan katı Çin tıbbı preparatının çözeltilerinin çözünmesini incelemek için uygun bir önlemdir. Çok indeksli bileşenin algılanması, nötr etkiyi ve farklı bileşenlerin çözünme farkını daha iyi yansıtabilir. Prosedürü gösterecek olan Quinyun Du, laboratuvarımdan olağanüstü bir öğrenci olacak.Başlamak için, referans madde stok çözeltisini elektronik analitik terazide ayrı ayrı 10,6 miligram salidrosit, 5,24 miligram gallik asit ve 5,21 miligram etil gallik asit tartarak hazırlayın. Daha sonra bunları ayrı ayrı beş mililitrelik hacimsel bir şişeye ekleyin. Daha sonra çözünmesi için HPLC sınıfı metanol ekleyin ve beş mililitreye kadar seyreltin.Ve son olarak, sırasıyla mililitre başına 2.120, 1.048 ve 1.042 miligram kütle konsantrasyonlarına sahip referans madde stok çözeltisini elde etmek için iyice çalkalayın. Test numunesi çözeltisini hazırlamak için, 30 dakika boyunca ultrasonik temizleme makinesi kullanarak 10 mililitre HPLC sınıfı metanol ile 2.8 gram rhodiola granülü çıkarın. Ardından, sistem uyarlanabilirlik testi için 0,22 mikrometrelik bir filtre ile filtreleyin.Daha sonra mililitre salidrosit başına 0.590 miligram, mililitre gallik asit başına 2.030 miligram ve mililitre etil galat başına 1.930 miligram içeren karışık bir referans çözeltisi hazırlayın. Rhodiola granüllerinin her bir karakteristik bileşeninin teorik içeriğini elde etmek için, 500 mililitre konik şişeye 2.8 gram rhodiola granülü yerleştirin. 200 mililitre ultra saf su ekleyin ve 60 dakika boyunca ultrasonik olarak ekstrakte edin.Ardından 0,22 mikrometre filtre ile filtreleyin. Test çözeltisinin içeriğini belirledikten sonra, makalede açıklandığı gibi yüksek performanslı sıvı kromatografisi için kromatografik koşulları ayarlayın. Doğrusal ilişkiyi araştırmak için, gallik asit ve etil galatın referans stok çözeltilerini ve standart bir eğri çizmek için gradyan konsantrasyon çözeltisini elde etmek üzere salidrositin referans stok çözeltilerini seyreltin.Ardından, karışık referans çözeltisinin 10 mikrolitresini HPLC sistemine günde altı kez enjekte edin ve her bir özellik bileşeninin tepe alanını kaydederken numuneleri aynı HPLC koşullarıyla çalıştırın. Daha sonra hazırlanan numune çözeltisinden 10 mikrolitre enjekte edin ve HPLC'nin tepe bölgelerini farklı zaman aralıklarında kromatografik koşullara göre belirleyin. Daha önce gösterildiği gibi test numunesi çözeltisini hazırlamak için aynı rhodiola granül grubundan altı numune alın ve her numunenin 10 mikrolitresini HPLC sistemine enjekte edin.Tekrarlanabilirliği belirlemek için örnekleri daha önce gösterildiği gibi çalıştırın. Test çözeltisi için aynı rhodiola granül partisinin altı porsiyonunu hazırladıktan sonra, her bir indeks bileşeninin referans substratının yaklaşık% 50'sini ekleyin. Bu örnekleri, makalede açıklandığı gibi iyileşme oranını hesaplamak için daha önce gösterildiği gibi HPLC sisteminde çalıştırın.Çözünme testini gerçekleştirmek için, ilaç çözünme aparatının çözünme kabına 100 mililitre ultra saf su ekleyin ve sıcaklığı 100 rpm'lik bir dönme hızıyla 37 santigrat derecede tutun. Daha sonra bir çözünme kabına 2.8 gram rhodiola granülü ekleyin ve çözünme süresini hemen kaydetmeye başlayın. Farklı zaman aralıklarında bir enjektör ile numunenin toplam bir mililitresini toplayın ve çözünme kabındaki hacmi hemen aynı sıcaklıkta bir çözünme ortamı ile oluşturun.Toplanan numuneleri derhal 0.22 mikrometre mikro gözenekli bir membrandan doldurun ve sonraki filtratı alın. Her bileşenin içeriğini belirledikten sonra, HPLC ile her zaman noktasında, her zaman noktasının çözünmesini ve makalede açıklandığı gibi kümülatif çözünmeyi hesaplayın. Numunenin kromatogramı ve referans çözeltisi elde edildi.Gallik asit, salidrosit ve etil gallatına karşılık gelen üç farklı pik, elüsyon gradyanının rodiola granüllerindeki üç indeks bileşeni için iyi bir çözünürlüğe sahip olduğunu göstermektedir. Her bileşenin çözünme eğrileri, gallik asidin kümülatif çözünmesinin bir dakika sonra% 80'in üzerinde olduğunu göstermektedir. Salidrosit ve etil gallik asit için, beş dakika sonra% 65'in üzerindeydi.Bununla birlikte, her bir indeks bileşeninin kümülatif çözünmesi 30 dakika sonra azalmıştır. Standart eğrinin seyreltme sorununu ayarlayarak, numune işleminin ön deneyine göre, özel toplama zaman noktasını kaçırmalarını önlemek için numuneler hızlı bir şekilde toplanmalıdır.

Research

JoVE Journal

Medicine

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Bir Kök Hücre Nakli In vitro Simüle İskemi / Reperfüzyon Modeli

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Rekabetçi bir mürin Kemik İliği Transplantasyon Modelinde Donör Hücre Aşı belirleme Kantitatif Gerçek-zamanlı PCR kullanarak

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody (mAb) by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Determination of the Relative Potency of an Anti-TNF Monoclonal Antibody mAb by Neutralizing TNF Using an In Vitro Bioanalytical Method

Göreceli güç, bir Anti-TNF Monoklonal antikor (mAb) Neutralizing In Vitro Bioanalytical yöntemini kullanarak TNF tarafından belirlenmesi

This protocol shows the measurement of the apoptotic activity neutralization of TNF&#945; in a mouse fibroblast cell model (WEHI 164) using an ...

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Neonatal Murine Cochlear Explant Technique as an In Vitro Screening Tool in Hearing Research

Yenidoğan Murin Koklear Explant Tekniği<em&gt; In vitro</em&gt; İşitme Araştırmalarında Tarama Aracı

While there have been remarkable advances in hearing research over the past few decades, there is still no cure for Sensorineural Hearing Loss (SNHL), a ...

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

An In Vitro Approach to Photodynamic Therapy

Fotodinamik Tedavi bir Vitro yaklaşım

Photodynamic therapy (PDT) is a medical procedure that involves incubation of an exogenously applied photosensitizer (PS) followed by visible light ...

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Preparation Of Gushukang GSK Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

In vivo ve In vitro deneyler için Gushukang (GSK) granül hazırlanması

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

Optimized Griess Reaction for UV-Vis and Naked-eye Determination of Anti-malarial Primaquine

Anti-sıtma Primaquine UV-Vis ve Çıplak Göz Tayini için Optimize Griess Reaksiyon

Primaquine (PMQ), an important anti-malarial drug, has been recommended by the World Health Organization (WHO) for the treatment of life-threatening ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

Greft Kalite Değerlendirmesi için Kimyasal Biyopsi Kullanımı

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...

On-Site Sampling and Extraction of Brain Tumors for Metabolomics and Lipidomics Analysis

Metabolomik ve Lipidomik Analizler için Beyin Tümörlerinin Yerinde Örnekleme sivesi ve ekstraksiyonu

Despite the variety of tools available for cancer diagnosis and classification, methods that enable fast and simple characterization of tumors are still ...