Name: single-cell suspension preparation from nile tilapia intestine for single-cell sequencing
Uploaded: 2023-02-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing at JoVE.com

يرغب المؤلفون في الاعتراف بالدعم المقدم من مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة هاينان في الصين (رقم 320QN211) وبرنامج صندوق الأبحاث التابع للمختبر الرئيسي لمقاطعة قوانغدونغ لمكافحة أمراض الحيوانات المائية والزراعة الصحية في الصين (NO. PBEA2021ZD01).

تمت الموافقة على جميع بروتوكولات الحيوانات خلال هذه الدراسة من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية بجامعة هاينان (رقم البروتوكول: HNUAUCC-2022-00063; تاريخ الموافقة: 2022-03-03). يمكن العثور على قائمة بالمعدات واللوازم المستخدمة في هذه التجربة في جدول المواد. ويرد ملخص للبروتوكول الحالي...

يصف هذا البروتوكول تحضير معلق أحادي الخلية عالي الجودة لأمعاء البلطي النيلي. قبل التفكك ، من الضروري إزالة الدهون والمساريق من الأمعاء ، خاصة بالنسبة لأمعاء الأسماك آكلة اللحوم التي تحتوي على الكثير من الدهون. استخدام حقنة بدلا من الكشط الصلب لغسل محتويات الأمعاء يقلل من الأضرار الميكان?...

الخلايا هي الوحدات الأساسية للكائنات الحية. مقارنة بدراسات الأنسجة السائبة ، يمكن أن تعكس الدراسات على مستوى الخلية الواحدة عدم تجانس الخلية وتوفر معلومات عالية الدقة1. في السنوات الأخيرة ، طبق الباحثون تقنيات تسلسل الخلية الواحدة لدراسات الجينوم أو النسخ أو epigenome أو multi-omic على مستوى الخلية الواحدة في الثدييات وأسماك الزرد والكائنات النموذجية الأخرى وأبلغوا عن اختراقات كبيرة2،3،4،5،6،7. وفي حين ركزت معظم الدراسات على الكائنات النموذجية، إلا أن هناك عددا قليلا من البروتوكولات المرجعية أو مجموعات التفكك التجارية لتسلسل الخلية الواحدة في أنواع الأسماك الاقتصادية، مما يحد من تطبيق تسلسل الخلية الواحدة في بحوث تربية الأحياء المائية. لذلك ، فإن تطوير بروتوكولات تفكك الأنسجة التي تنتج معلقات أحادية الخلية عالية الجودة مع قابلية عالية للخلية وسلامة الحمض النووي أمر بالغ الأهمية.
من الضروري تحسين بروتوكول تفكك الأنسجة باستخدام الإنزيم المناسب أو تركيبة الإنزيم للحصول على خلايا قابلة للحياة كافية بأقل قدر من الضرر. يختلف الإنزيم الأكثر فعالية لتفكك الأنسجة حسب نوع الأنسجة. في الثدييات ، تم استخدام العديد من الإنزيمات لإعداد معلقات أحادية الخلية للأنسجة الصلبة للثدييات ، بما في ذلك كولاجيناز ، ديسباز ، تربسين ، غراء ، إيلاستاز ، هيالورونيداز ، ليبراز ، أكوتاز ، و trypLE 8,9. يشيع استخدام هضم التربسين جنبا إلى جنب مع الاضطراب الميكانيكي لفصل الأنسجة لزراعة الخلايا في الأسماك10،11،12،13،14. كما تم استخدام التربسين أو إضافته إلى كوكتيل الهضم لتفكك الأنسجة في أمعاء الفئران15 والأنسجة الخيشومية الزرد16. ومع ذلك ، لعدة أسباب ، التربسين ليس الخيار الأفضل لتسلسل خلية واحدة. التربسين وحده عادة ما يكون غير فعال لتفكك الأنسجة. بالإضافة إلى ذلك ، يحفز التربسين فواصل حبلا الحمض النووي 17,18 وتدهور الحمض النوويالريبي 19.
غراء يحلل البروتينات التي تشكل الوصلات الضيقة بين الخلايا. في خلايا الأعصاب والعضلات الملساء في الثدييات ، يكون غراء أكثر كفاءة وأقل تدميرا من البروتياز الأخرى20,21. ومع ذلك ، مثل التربسين ، ينتج عن غراء تجميع الخلايا الحر الناجم عن الحمض النووي بسبب تحلل الخلايا الذي يحدث أثناء الهضم الأنزيمي9. يكسر الإيلاستاز الإيلاستين ، والذي يوجد عادة في الجلد والرئتين والأربطة والأوتار والأنسجة الوعائية22. غالبا ما يستخدم مع كولاجيناز أو ديسباز أو تربسين لفصل أنسجة الرئة8. يشق الهيالورونيداز الروابط الجليكوسيدية للهيالورونان ، مما يساهم في هضم المصفوفة خارج الخلية في مختلف الأنسجة الضامة والجلد 9,23.
بشكل عام ، يعد كولاجيناز وديسباز خيارات جيدة لانهيار المصفوفة خارج الخلية. تم استخدامها في تفكك أمعاء الإنسان والفأر وسمك الزرد24،25،26،27. يدمر كولاجيناز رابطة الببتيد في الكولاجين ، ويعزز هضم المصفوفة خارج الخلية ، ويطلق الخلايا في تعليق ، وبالتالي ، غالبا ما يستخدم كولاجيناز لتفكك الأنسجة الصلبة للإنسان والفأر ، بما في ذلك الكبد28،29 ، الطحال 30 ، البنكرياس31 ، والأمعاء 25. Dispase هو بروتياز يحلل روابط الببتيد N-terminal لبقايا الأحماض الأمينية غير القطبية وهو أكثر اعتدالا من الكولاجيناز. إنه يشق مكونات المصفوفة خارج الخلية ، مثل الفبرونيكتين ، والكولاجين من النوع الرابع ، وبدرجة أقل ، الكولاجين من النوع الأول ، دون التأثير على تقاطعات الخلايا الخلوية. يستخدم Dispase بشكل منفصل أو مع إنزيمات أخرى لتفكك الأنسجة ، مثل الأمعاء25,32 ، الدماغ33 ، الكبد 34 ، إلخ. بالإضافة إلى ذلك ، فإن كوكتيلات الهضم المتاحة تجاريا ، بما في ذلك liberase و accutase و trypLE ، هي أيضا بدائل جيدة لتفكك الأنسجة الصلبة ، خاصة للجلد والكبد والكلى 8,9.
ينتمي البلطي النيلي (Oreochromis niloticus) إلى عائلة Cichlidae من رتبة Perciformes. وهي واحدة من أكثر أنواع أسماك المياه العذبة استزراعا في المناطق الاستوائية وشبه الاستوائية ، حيث يبلغ إنتاجها السنوي 4.5 مليون طن في عام 202235. إنه أحد أفضل أنواع أسماك الاستزراع المائي التي تمت دراستها مع جينوم مشروح جيدا. يعتبر البلطي النيلي نموذجا بحثيا مثاليا لأنواع أسماك الاستزراع المائي نظرا لقصر وقت توليده، وسهولة تربيته، وقدرته على التكيف مع مجموعة واسعة من بيئات التربية. الأمعاء ذات أهمية بحثية كبيرة لأنها عضو التغذية الهضم والامتصاص والتمثيل الغذائي والمناعة المخاطية. الأمعاء هي موطن السكان الميكروبية وهي نسيج مناعي أساسي36. وهو نشط مناعيا بسبب وجود العديد من أنواع الخلايا المناعية ، بما في ذلك الضامة والخلايا البائية والخلايا المحببة والخلايا التائية.
في الدراسة الحالية، قمنا بتطوير بروتوكول لإعداد معلق أحادي الخلية عالي الجودة من أمعاء البلطي النيلي لتسهيل الدراسات على مستوى الخلية الواحدة في أنواع أسماك الاستزراع المائي. وفقا لخصائص هذه الإنزيمات الخاصة بالأنسجة والعمل الأولي ، فإن كولاجيناز / ديسباز مناسب لفصل أنسجة أمعاء البلطي. النوع الأخير من الإنزيم الذي يجب مراعاته عند تحضير معلقات الخلية الواحدة هو DNase-I ، الذي يمنع تراكم الخلايا عن طريق تحلل الحمض النووي الحر المنطلق من خلال تحلل الخلايا الميتة أثناء الهضم الأنزيمي دون بدء مسارات موت الخلايا المبرمج9 ويزيد من إنتاجية الخلايا الحية36. بالإضافة إلى ذلك ، يضاف ألبومين مصل الأبقار (BSA) إلى المخزن المؤقت للغسيل لتقليل تكتل الخلايا وتحسين صلاحية الخلية. تصف العديد من شركات الكواشف BSA بأنها مثبت للإنزيم. تم استخدام إضافة 0.04٪ -1٪ BSA إلى PBS (محلول ملحي مخزن بالفوسفات) لتطوير محلول غسيل لإعداد معلقات تسلسل أحادية الخلية دون آثار ضارة38. يمكن أن تساعد إضافة نسبة منخفضة من BSA في الحفاظ على صلاحية الخلية وتجنب التجميع الحر للخلايا الناجم عن الحمض النووي بسبب تحلل الخلايا. يمكن أن يوفر هذا البروتوكول أيضا مرجعا قيما لتطوير بروتوكولات تفكك الخلايا من أمعاء أنواع أسماك الاستزراع المائي الأخرى.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22-&#956;m Sterile Filter</td>
			<td>Solarbio Life Sciences</td>
			<td>SLGV033RB</td>
			<td>It is used to filter and sterilize the enzyme solution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40-&#956;m Cell Strainer</td>
			<td>Solarbio Life Sciences</td>
			<td>F8200</td>
			<td>Cell Strainer is applied to eliminate undigested tissue pieces.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SRE0098</td>
			<td>Powder; dilute 0.04 g BSA with 100 mL 1&#215; DPBS to prepare 0.04% BSA-DPBS washing bffer. Store at 2 - 8 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase II</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A004202</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 1 mg/mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase/dispase</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10269638-001</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 1 mg/mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D4818</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 1 mg/mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>AMPD1</td>
			<td>DNase I helps reduce cell clumping.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate-buffered saline (DPBS), Ca2+/Mg2+-free</td>
			<td>Solarbio Life Sciences</td>
			<td>E607009-0500</td>
			<td>Store at room temperature.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elastase</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A600438</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 0.5 mg/mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000-044</td>
			<td>Serum, used at volume of 5% in digetstion solution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted&#160;Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>qTOWER3G</td>
			<td>It is used to examine cell viability.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liberase</td>
			<td>Roche</td>
			<td>5401119001</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 0.25 mg/mL.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nile tilpia (Oreochromis niloticus)</td>
			<td>ProGift Aquaculture Technology Co. Ltd.</td>
			<td>NA</td>
			<td>Healthy fish with no disease signs (Mean body weight: 100 g).&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td>Solarbio Life Sciences</td>
			<td>P1020</td>
			<td>Store at room temperature.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerated Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424</td>
			<td>It is used to spin down the tissue and cell petet.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNase inhibitor</td>
			<td>NEB</td>
			<td>M0314L</td>
			<td>Inhibit RNase activity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid-phase RNase-Be-Gone Reagent</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>B644201-0050</td>
			<td>It is used to remove the RNase from tools such as dissecting scissors and glass pipettes. Store at room temperature.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine methanesulfonate (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521</td>
			<td>For fish euthanasia.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C0040</td>
			<td>It is used for staining dead cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>E607001</td>
			<td>Dilute with PBS to a final concentration of 1 mg/mL.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

single-cell suspension preparation from nile tilapia intestine for single-cell sequencing

البلطي النيلي هو واحد من أكثر أنواع أسماك المياه العذبة شيوعا في جميع أنحاء العالم، وهو نموذج بحثي يستخدم على نطاق واسع لدراسات أسماك الاستزراع المائي. يعد تحضير معلقات أحادية الخلية عالية الجودة أمرا ضروريا للدراسات على مستوى الخلية الواحدة مثل الحمض النووي الريبي أحادي الخلية أو تسلسل الجينوم. ومع ذلك، لا يوجد بروتوكول جاهز للاستخدام لأنواع أسماك الاستزراع المائي، وخاصة لأمعاء البلطي. تختلف إنزيمات التفكك الفعالة حسب نوع الأنسجة. لذلك ، من الضروري تحسين بروتوكول تفكك الأنسجة عن طريق اختيار تركيبة الإنزيم أو الإنزيم المناسبة للحصول على خلايا قابلة للحياة كافية بأقل قدر من الضرر. توضح هذه الدراسة بروتوكولا محسنا لإعداد معلق أحادي الخلية عالي الجودة من أمعاء البلطي النيلي مع مزيج إنزيم من كولاجيناز / ديسباز. هذا المزيج فعال للغاية للتفكك باستخدام ألبومين مصل البقر و DNase لتقليل تراكم الخلايا بعد الهضم. يلبي إخراج الخلية متطلبات تسلسل الخلية الواحدة ، مع قابلية بقاء الخلية بنسبة 90٪ وتركيز الخلية العالي. يمكن أيضا تعديل هذا البروتوكول لإعداد تعليق أحادي الخلية من أمعاء أنواع الأسماك الأخرى. يوفر هذا البحث بروتوكولا مرجعيا فعالا ويقلل من الحاجة إلى تجارب إضافية في تحضير معلقات وحيدة الخلية لأنواع أسماك الاستزراع المائي.

يصف هذا البروتوكول تحضير معلق عالي الجودة أحادي الخلية لأمعاء البلطي النيلي لتسلسل الخلية الواحدة (الشكل 1). يظهر هذا البحث أن مزيج كولاجيناز / ديسباز له تأثير تفكك جيد وهو خفيف لأنسجة الأمعاء. يعد اختيار إنزيم الهضم الأمثل أمرا ضروريا لإعداد تعليق أحادي الخلية عالي الجودة....

Watch this Scientific Journal Video about Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing at JoVE.com

Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing

هنا ، نوضح إعداد تعليق أحادي الخلية عالي الجودة لأمعاء البلطي لتسلسل الخلية الواحدة.

تحضير معلق أحادي الخلية من أمعاء البلطي النيلي لتسلسل الخلية الواحدة

Nile tilapia is one of the most commonly cultured freshwater fish species worldwide and is a widely used research model for aquaculture fish studies. The ...

يوفر هذا البروتوكول مرجعا موثوقا لإعداد معلق عالي الجودة أحادي الخلية من أمعاء البلطي النيلي لتسهيل الدراسات على مستوى الخلية الواحدة في أنواع أسماك الاستزراع المائي. التكنولوجيا عالية الكفاءة ويمكن تنفيذها في معظم ظروف المختبر. وهو يقلل من الحاجة إلى تجارب إضافية لإعداد معلقات وحيدة الخلية لأنواع أسماك الاستزراع المائي.ابدأ بشطف أسماك البلطي النيلي البالغة من العمر ستة أشهر في ماء معقم جيد التهوية لمدة 15 دقيقة لغسل البكتيريا غير المرتبطة من السطح. لتحضير كاشف تفكك الخلايا الأنزيمية ، قم بتخفيف كولاجيناز ديسباز في برنامج تلفزيوني إلى تركيز نهائي قدره ملليغرام واحد لكل ملليلتر. امزج 95٪ حجم من المحلول الأنزيمي المحضر و 5٪ حجم FBS.ثم قم بتبريد جهاز الطرد المركزي مسبقا إلى أربع درجات مئوية قبل الاستخدام. لتشريح الأنسجة ، ضع السمك الرحيم على الجليد واجمع ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات من منتصف الأمعاء. استئص الدهون والمساريق باستخدام الملقط.إزالة الدهون تعلق على سطح الأمعاء والغشاء المخاطي واضحة مرنة ومرنة. شطف بلطف جزء الأمعاء مع برنامج تلفزيوني بارد الجليد المعقم باستخدام حقنة لغسل محتويات الأمعاء والمخاط. بعد عدة غسلات ، قم بتشريح الجزء إلى قطع صغيرة ونقلها إلى أنبوب سعة 1.5 ملليلتر يحتوي على ملليلتر واحد من الجليد البارد PBS.الطرد المركزي الخليط في 300 × غرام في أربع درجات مئوية لمدة خمس دقائق. واستبدل المادة الطافية بمليلتر واحد من الثلج البارد 0.08٪ BSA-DPBS. باستخدام ماصة زجاجية نضح بلطف لإعادة تعليق شظايا الأنسجة.بعد غسل القطع مرة أخرى ، قم بإزالة المادة الطافية وإضافة ملليلتر واحد من كاشف التفكك الأنزيمي المحضر. قم أيضا بخلط خمسة ميكرولترات من مثبطات الحمض النووي الريبي مع كاشف التفكك لتسلسل الحمض النووي الريبي أحادي الخلية. ضع الأنبوب في حمام مائي مقسى 37 درجة مئوية واقلب الأنبوب يدويا كل خمس دقائق خلال فترة الحضانة من 30 إلى 60 دقيقة.بمجرد تدوير الأنابيب ، قم بإزالة كاشف تفكك الخلايا الأنزيمية باستخدام أطراف واسعة التجويف. أضف ملليلتر واحد من الثلج البارد 0.08٪ BSA-DPBS وقم بامتصاص الخلايا برفق لأعلى ولأسفل لمنع تعطل الخلايا. بعد الانصهار المركزي وتعليق الخلايا مرة أخرى ، ضع مصفاة الخلايا 40 ميكرومتر مبللة مسبقا بنسبة 0.08٪ BSA-DPBS على أنبوب مخروطي 50 ملليلتر.مرر تعليق الخلية من خلال المصفاة. اضغط على المصفاة ، ثم اشطفها ب 200 ميكرولتر DPBS واجمع التعليق في أسفل الأنبوب. بعد نقل التعليق إلى أنبوب سعة 1.5 ملليلتر ، أضف خمسة ميكرولترات من الحمض النووي واحتضن التعليق لمدة 15 دقيقة عند 15 إلى 20 درجة مئوية.بمجرد الطرد المركزي ، قم بإزالة المادة الطافية وإعادة تعليق حبيبات الخلية في 400 ميكرولتر من DPBS البارد المثلج بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم. ثم ماصة بلطف صعودا وهبوطا مع نصائح واسعة التجويف لخلط الخلايا وتكرار هذه العملية مرة أخرى. للتلطيخ ، قم بخلط تعليق الخلية في محلول أزرق 0.4٪ بنسبة متساوية واحتضانه لمدة ثلاث دقائق في درجة حرارة الغرفة.ثم أضف 10 ميكرولتر من الخليط على الشريحة الزجاجية. عد الخلايا القابلة للحياة والميتة تحت المجهر في ثلاثة حقول واحسب نسبة بقاء الخلية. تمت مقارنة كفاءات التفكك للعديد من الإنزيمات شائعة الاستخدام.تم التحقق من أن مزيج كولاجيناز ديسباز له تأثير تفكك أفضل من كولاجيناز ديسباز أو تربسين وحده والعديد من مخاليط الإنزيم الأخرى. أظهر الفحص المجهري أن الخلايا المعوية تتمتع بقدرة عالية على البقاء ومشتتة كخلايا مفردة. كانت معظم الخلايا قابلة للحياة ، في حين أن القليل منها كان ملطخا ميتا بسبب غشاء الخلية المتغلغل.انتبه إلى نوع برنامج تلفزيوني المستخدم. لا يمكن استخدام محلول الهضم الأنزيمي مع برنامج تلفزيوني خال من الكالسيوم / المغنيسيوم لأن الإنزيم يتطلب أيونات الكالسيوم / المغنيسيوم ليعمل بفعالية. يسهل الإجراء الدراسات على مستوى الخلية الواحدة في أنواع أسماك الاستزراع المائي مما يوفر مرجعا قيما لتطوير بروتوكولات تفكك الخلايا لأنواع أسماك الاستزراع المائي.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

إعداد وحيدة الخلية معلقات من الطحال ماوس مع Dissociator gentleMACS

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

إعداد موحدة وحيدة الخلية معلقات من أنسجة الرئة باستخدام الماوس Dissociator gentleMACS

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

جيل وحيدة الخلية معلقات من الأنسجة العصبية ماوس

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

تسجيلات شفط وحيدة الخلية المستقبلة من المخروط ماوس

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes

التنميط واحدة من الخلايا العضلية الترانسكربتي ماوس الكبار

While numerous studies have examined gene expression changes from homogenates of heart tissue, this prevents studying the inherent stochastic variation ...

Single-cell Microinjection for Cell Communication Analysis

حقن مكروي وحيدة الخلية لتحليل الاتصالات خلية

Gap junctions are intercellular channels that allow the communication of neighboring cells. This communication depends on the contribution of a ...

Isolation of Nuclei from Flash-Frozen Liver Tissue for Single-Cell Multiomics

عزل النوى من أنسجة الكبد المجمدة بالفلاش من أجل Multiomics أحادية الخلية

The liver is a complex and heterogenous tissue responsible for carrying out many critical physiological functions, such as the maintenance of energy ...

Isolation and Transcriptome Analysis of Plant Cell Types

عزل وتحليل النسخ لأنواع الخلايا النباتية

In multicellular organisms, developmental programming and environmental responses can be highly divergent in different cell types or even within cells, ...

Fluorescence-Activated Single-Cell Sorting of Human Mesenchymal Stem Cells

Single-Cell Sorting of Immunophenotyped Mesenchymal Stem Cells from Human Exfoliated Deciduous Teeth

Importance of Single Cell Sorting in Isolating Purified Populations of Mesenchymal Stem Cells (Video) | JoVE

فرز الخلية الواحدة للخلايا الجذعية الوسيطة المناعية من الأسنان اللبنية المقشرة البشرية

The mesenchymal stem cells (MSCs) of an organism possess an extraordinary capacity to differentiate into multiple lineages of adult cells in the body and ...

Two-Step Cell Digestion of Mouse Carotid Artery

Preparation of a Single-Cell Suspension from Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Sequencing

Vascular Tissue Dissociation and Exploring Single-Cell Subclusters for Targeted Therapy (Video) | JoVE

تحضير معلق أحادي الخلية من الشرايين السباتية للفأر لتسلسل الخلية الواحدة

Carotid arteries are major blood vessels in the neck that supply blood and oxygen to the brain, but carotid stenosis occurs when carotid arteries are ...