Name: hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis
Uploaded: 2022-11-11T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

تم دعم هذا العمل من قبل مشروع إدارة الطب الصيني التقليدي في سيتشوان (رقم 2020JC0088 ، رقم 2021MS203).

1. طرق الكشف عن بصمات الأصابع الكيميائية
<ol><li>الظروف الكروماتوغرافية<ol><li>تحضير الأسيتونيتريل (A) / الماء (B) المرحلة المتنقلة. قم بتعيين برنامج تدرج على النحو التالي في برنامج HPLC: 0-20 دقيقة ، 3٪ A-10٪ A ؛ 20-25 دقيقة ، 10٪ أ -13٪ أ ؛ 25-65 دقيقة ، 13٪ أ -25٪ أ ؛ 65-75 دقيقة ، 25٪ أ -40٪ أ ؛ 75-76 دقيقة ، 40٪ أ -3٪ ...

<ol>
	<li>Chen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chinese Medicine Specimen Picture Book. , 116 (1935).</li><li>Xiong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lignans+from+the+stems+of+Clematis+armandii+(&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;)+and+their+anti-neuroinflammatory+activities.">Lignans from the stems of Clematis armandii (&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;) and their anti-neuroinflammatory activities.</a> Journal of Ethnopharmacology. 153 (3), 737-743 (2014).</li><li>Pan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+lignan+from+the+Chinese+medicinal+plant+Clematis+armandii,+inhibits+A431+cell+growth+via+blocking+p70S6/S6+kinase+pathway.">a lignan from the Chinese medicinal plant Clematis armandii, inhibits A431 cell growth via blocking p70S6/S6 kinase pathway.</a> Integrative Cancer Therapies. 16 (3), 351-359 (2017).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of The People's Republic of China: (Edition 2020). , 38 (2020).</li><li>Wang, D. G., Guo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Textual+research+on+the+materia+medica+and+authenticity+of+Clematidis+armandii.">Textual research on the materia medica and authenticity of Clematidis armandii.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medicine Research. 18 (11), 2696 (2007).</li><li>Fang, Q. M., Zhang, M., Zhong, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+natural+resources+and+exploitation+of+Caulis+Clematidis+Armandii+in+Sichuan.">The natural resources and exploitation of Caulis Clematidis Armandii in Sichuan.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 20 (5), 404-406 (2005).</li><li>Bai, M. N., Dai, Y. X., Wang, Y., Ren, Y. Y., Tan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+the+identi&#64257;cation+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on the identi&#64257;cation of Caulis Clematidis Armandii.</a> Research and Practice on Chinese Medicines. 31 (3), 13-16 (2017).</li><li>Zhou, P. J., Li, X. F., Fu, D. H., Pu, X. Y., Zhu, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacognosy+identification+of+Ethnomedicine+Clematis+ranunculoides+Franchet.">Pharmacognosy identification of Ethnomedicine Clematis ranunculoides Franchet.</a> Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 34 (3), 432-436 (2017).</li><li>Guo, J. L., Tang, Y., Pei, J., Wang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+random+amplified+polymorphic+DNA+and+sequence+characterized+amplified+regions+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on random amplified polymorphic DNA and sequence characterized amplified regions of Caulis Clematidis Armandii.</a> Journal of Chengdu Medical College. 6 (4), 283-286 (2011).</li><li>Liu, M. Z., Li, M. N., Yao, H., Liu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+identification+of+Clematidis+Armandii+Caulis+and+its+adulterants+and+closely+related+species+by+ITS2+sequence.">Molecular identification of Clematidis Armandii Caulis and its adulterants and closely related species by ITS2 sequence.</a> Global Traditional Chinese Medicine. 4 (6), 446-450 (2011).</li><li>Liu, J. J., Chen, X., Wei, Z. Q., Li, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+and+identification+of+the+caules+of+Clematis+armandii+Franch.and+Clematis+montana+Buch.-Ham.">Chemical constituents and identification of the caules of Clematis armandii Franch.and Clematis montana Buch.-Ham.</a> Natural Product Research and Development. 22 (6), 998-1000 (2010).</li><li>Yang, T. R., Xu, Z., Shi, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+four+compounds+from+Clematis+Montana.">Studies on four compounds from Clematis Montana.</a> Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. 10 (4), 142-143 (2008).</li><li>Yan, L. H., Xu, L. Z., Zhou, Z. M., Yang, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+from+stems+of+Clematis+armandii(I).">Chemical constituents from stems of Clematis armandii(I).</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 38 (3), 340-342 (2007).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+uses,+phytochemistry,+pharmacology,+and+toxicology+of+Akebiae+Caulis+and+its+synonyms:+A+review.">Traditional uses, phytochemistry, pharmacology, and toxicology of Akebiae Caulis and its synonyms: A review.</a> Journal of Ethnopharmacology. 277, 114245 (2021).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diuretic+effect+and+material+basis+of+Clematidis+Armandii+Caulis+in+rats.">Diuretic effect and material basis of Clematidis Armandii Caulis in rats.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 44 (9), 1889-1894 (2019).</li><li>Kuang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consistency+study+of+Caulis+Clematidis+Armandii+and+its+traditionally+used+products+and+counterfeit+species+based+on+efficacy+and+pharmacognosy.">Consistency study of Caulis Clematidis Armandii and its traditionally used products and counterfeit species based on efficacy and pharmacognosy.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 36 (3), 115-121 (2020).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+assessment+of+Asarum+heterotropoides+var.+mandshuricum+based+on+HPLC+multi-component+determination+and+multiple+pattern+recognition+method+of+fingerprint.">Quality assessment of Asarum heterotropoides var. mandshuricum based on HPLC multi-component determination and multiple pattern recognition method of fingerprint.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 238-243 (2022).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+multi-components+of+Paeoniae+Alba+Radix+based+on+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Determination of multi-components of Paeoniae Alba Radix based on fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 231-237 (2022).</li><li>Li, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+investigation+for+raw+and+processed+products+of+Euodiae+Fructus+based+on+high-performance+liquid+chromatography+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Comparative investigation for raw and processed products of Euodiae Fructus based on high-performance liquid chromatography fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chemistry &amp; Biodiversity. 18 (8), 2100281 (2021).</li><li>Dong, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+suitable+distribution+areas+of+Kawa+Kimichi+produced+in+Sichuan+province-based+on+remote+sensing+and+GIS-A+case+study+of+Clematis+Armandii.">Study on suitable distribution areas of Kawa Kimichi produced in Sichuan province-based on remote sensing and GIS-A case study of Clematis Armandii.</a> Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology. 17 (11), 2398-2404 (2015).</li><li>Tang, S. W., Pei, J., Li, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+histological+identification+of+Chuanmutong.">Morphological and histological identification of Chuanmutong.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 15 (1), 19-21 (2000).</li><li>Li, B., Chen, X., Fang, Q. M., Zhang, B. J., Wei, Z. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+Research+of+Chuanmutong.">Quality Research of Chuanmutong.</a> Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine. 27 (6), 58-60 (2009).</li><li>Wu, W. J., Wan, M. M., Cao, Y. H., Tan, R., Song, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+on+the+Quality+Standard+of+Chuanmutong.">Research on the Quality Standard of Chuanmutong.</a> Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 33 (2), 313-315 (2015).</li><li>Wei, Z. Q., Chen, X., Li, B., Dong, X. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+stigmasterol+in+Clematis+armandii+Franch+and+Clematis+montana+Buch-Ham.+by+HPLC.">Determination of stigmasterol in Clematis armandii Franch and Clematis montana Buch-Ham. by HPLC.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 20 (3), 574-575 (2009).</li><li>Qing, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+oleanolic+acid+in+Caulis+clematidis+armandii+by+HPLC.">Determination of oleanolic acid in Caulis clematidis armandii by HPLC.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 21 (3), 273-274 (2006).</li><li>Yang, S. D., Wang, R., Fu, D. Y., Guo, J. J., Tan, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+on+oleanolic+acid+in+caulis+clematidis+armandii+by+microwave+assisted+extraction-HPLC/MS.">Determination on oleanolic acid in caulis clematidis armandii by microwave assisted extraction-HPLC/MS.</a> Anhui Academy of Agricultural Sciences. 38 (13), 6929-6931 (2010).</li></ol>

يعد جمع العينات للبحث الخطوة الرئيسية الأولى لبناء التعرف على الأنماط المتعددة في تحديد أصالة المواد الطبية الصينية. من خلال أبحاث السوق ، وجدنا أن سيتشوان يان وليانغشان وليشان هي مناطق الإنتاج الرئيسية للموارد البرية في تشوانموتونغ. الأصناف ذات الصلة من نفس الجنس لها أيضا نفس التوزيع ا?...

تشوانموتونغ ، كوليس جاف من ياسمين أرماندي فرانش. أو Clematis montana Buch.-Ham. ، هو دواء صيني تقليدي شائع الاستخدام في العيادات1،2،3. يتم استخدامه لعلاج مشاكل المسالك البولية ، وذمة ، وتقرحات على اللسان والفم ، وانخفاض إفراز الحليب ، وتصلب المفاصل ، وآلام العضلات الناجمة عن الحرارة الرطبة4. تم الحصول على Chuanmutong دائما من الأصناف البرية ، الموزعة بشكل رئيسي في جنوب غرب الصين ، وخاصة في سيتشوان ، حيث يمكن العثور على أفضل جودة 5,6. من الصعب التمييز بين الأصناف الأصيلة والغش المرتبط ارتباطا وثيقا بسبب خصائصها المتشابهة7،8،9،10. ينص معيار جودة Chuanmutong في إصدار 2020 من دستور الأدوية الصيني فقط على الخصائص والتعريف المجهري وتحديد الطبقة الرقيقة دون تحديد المحتوى ، والذي لا يمكنه تحديد الغش بشكل فعال ، وبالتالي له مخاطر محتملة. علاوة على ذلك ، هناك عدد قليل من التقارير التي تقارن وتحدد Chuanmutong والنباتات ذات الصلة. وبالتالي ، فإن طريقة مراقبة الجودة لضمان أصالة Chuanmutong تستحق مزيدا من الدراسة.
تتكون المكونات الكيميائية ل Chuanmutong بشكل أساسي من ترايتيربينويدس خماسي الحلقات من نوع الأوليانان وجليكوسيدات وفلافونويد وأحماض عضوية11،12،13،14. من بينها ، حمض الأوليانوليك ، β-سيتوستيرول ، ستيغماستيرول ، وإرغوستيرول لها تأثيرات مدرة للبول ذات شدة مختلفة ، والتي قد تكون مواد دوائية محتملة لتعزيز إدرار البول وتخفيف بيلة الخنق15,16. يتم الحصول على البصمات الكيميائية عن طريق فصل واكتشاف العديد من المكونات الكيميائية الموجودة في العينات بواسطة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) ، كروماتوغرافيا الغاز (GC) ، إلخ. اعتماد أساليب التحليل الإحصائي المناسبة لتحليل خصائص Chuanmutong يمكن أن تحدد مراقبة الجودة الشاملة والتحديد العلمي للطب الصيني التقليدي17،18،19.
في هذه الدراسة ، تم جمع 10 دفعات من أصناف Chuanmutong الأصلية وخمس دفعات من الغش. تمت مقارنة جودتها وتحليلها بواسطة طريقة بصمة HPLC جنبا إلى جنب مع التعرف على الأنماط المتعددة ، بما في ذلك التحليل العنقودي (CA) ، وتحليل المكون الرئيسي (PCA) ، وتحليل التمييز الجزئي المتعامد للمربعات الصغرى (OPLS-CA) ، وتحديد محتوى المكون الدوائي. يحدد هذا البروتوكول طريقة لتحديد الأصناف الأصلية ذات الخصوصية العالية ، وهي استراتيجية جديدة للتحديد العلمي للأصناف الأصلية والغش للمواد الطبية الصينية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017381038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD5243V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Sitosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;C18 column</td>
			<td>Yuexu Material Technology Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>Welch Ultimate LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Guoqiang Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>19020103</td>
			<td>CMT-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongya Wawushan Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210701</td>
			<td>CMT-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Haobo Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210401</td>
			<td>CMT-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Wusheng Pharmaceutical Group Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201201</td>
			<td>CMT-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Limin Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201001</td>
			<td>CMT-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Yuhetang Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>210501</td>
			<td>CMT-10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis argentilucida (Levl. et Vant.) W. T. Wang</td>
			<td>Madzi Bridge, Sanlang Township, Tianquan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>CC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis apiifolia var. obtusidentata Rehd. et Wils.</td>
			<td>Heilin Village, Qiliping Township, Hongya County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis peterae Hand.-Mazz.</td>
			<td>Huangmu Village, Huangmu Township, Hanyuan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis gouriana Roxb. Var. finetii Rehd. et Wils</td>
			<td>Mixedang Mountain, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>XS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis finetiana Levl. et Vaniot.</td>
			<td>Wannian Village, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>SMT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Shanghai,&#160; China&#160;</td>
			<td>FA1204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ergosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd, Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2021112602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017042043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2016062901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent, USA.</td>
			<td>1260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBM SPSS Statistics version 26.0</td>
			<td>International Business Machines Corporation, USA</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD6409V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>202010302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-butyl alcohol</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020071047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petroleum ether</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020090125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid</td>
			<td>Comeo Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>20200110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SESCF-TCM version 2012</td>
			<td>National Pharmacopoeia Commission, China</td>
			<td>-</td>
			<td>http://114.247.108.158:8888/login</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stigmasterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloromethane</td>
			<td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>20200214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umetrics SIMCA version 14.1.0.2047</td>
			<td>Umetrics, Sweden</td>
			<td>-</td>
			<td>https://www.sartorius.com/en/products/process-analytical-technology/data-analytics-software/mvda-software/simca/simca-free-trial-download</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water machine</td>
			<td>Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>UPH-II-10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Kunshan Hechuang Ultrasound Instrument Co., Ltd., Jiangsu, China</td>
			<td>KH3200E</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis

تم إنشاء طريقة لتحديد المواد الطبية الصينية والزناة ذات الصلة بها عن طريق أخذ Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong ، وهو دواء صيني تقليدي مستخدم عالميا) كمثال. تم تحليل ومقارنة عشر دفعات من أصناف Chuanmutong الأصلية وخمس دفعات من الغش ذي الصلة بناء على بصمات الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) جنبا إلى جنب مع القياسات الكيميائية ، بما في ذلك التحليل العنقودي (CA) ، وتحليل المكونات الرئيسية (PCA) ، وتحليل التمييز الجزئي المتعامد للمربعات الصغرى (OPLS-DA). بالإضافة إلى ذلك ، تم تحديد محتوى β-سيتوستيرول. تم إنشاء البصمة الكيميائية للتحكم في Chuanmutong ، وتم تحديد 12 قمة مشتركة. كان التشابه بين بصمة 10 دفعات من أصناف Chuanmutong الأصلية وبصمة التحكم 0.910-0.989 ، في حين أن تشابه خمس دفعات من الغش كان 0.133-0.720 فقط. استنادا إلى القمم الشائعة في مخطط الكروماتوجرام ، تم تصنيف 15 دفعة من العينات إلى ثلاثة مستويات محتوى بواسطة PCA ، وتم تجميعها في أربع فئات بواسطة CA ، مما حقق تمييزا واضحا بين Chuanmutong الأصلي والغش في Chuanmutong. علاوة على ذلك ، تم العثور على سبعة مكونات تفاضلية يمكنها تحديد Chuanmutong الأصلي والغش من Chuanmutong بشكل فعال من خلال OPLS-DA. كان محتوى β-سيتوستيرول من 10 دفعات من أصناف Chuanmutong الأصلية 97.53-161.56 ميكروغرام / غرام ، في حين أن محتوى β-سيتوستيرول للدفعات الخمس من الغش يختلف اختلافا كبيرا ، من بينها محتوى β-سيتوستيرول من Clematis peterae Hand.-Mazz. وياسمين غوريانا روكسب. Var. finetii Rehd. وآخرون ويلس. كان أقل بكثير من الأصناف الأصلية من Chuanmutong. يوفر محتوى مكون مؤشر HPLC وطريقة التعرف على بصمات الأصابع الكيميائية متعددة الأنماط التي تم إنشاؤها في هذه الدراسة استراتيجية جديدة لتحديد المواد الطبية الصينية الأصلية والغش ذي الصلة بشكل فعال.

البصمة الكروماتوغرافية ل Chuanmutong وتحليل التشابه (SA) كانت قيم RSD لوقت الاحتفاظ النسبي للدقة والتكرار والاستقرار أقل من 0.46٪ و 1.65٪ و 0.53٪ على التوالي ؛ كانت قيم RSD لمنطقة الذروة النسبية أقل من 4.23٪ و 3.56٪ و 3.96٪ على التوالي. كما هو موضح في الأشكال 1A ، B ، كان هناك 12 ?...

Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

هنا ، نقدم بروتوكولا لإنشاء كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) ، إلى جانب التعرف على بصمات الأصابع الكيميائية متعددة الأنماط ، والتي توفر استراتيجية جديدة لتحديد الأصناف الأصلية من Clematidis Armandii Caulis وزناتها بشكل فعال.

HPLC إلى جانب البصمات الكيميائية للتعرف على الأنماط المتعددة لتحديد أصالة ياسمين أرماندي كوليس

A method for identifying Chinese medicinal materials and their related adulterants was constructed by taking Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, a ...

يمكن أن يوفر هذا البروتوكول استراتيجية جديدة لتحديد المواد الأصلية ل Clematidis armandii caulis وزناتها بشكل فعال. يمكن استخدام هذه الطريقة في أبحاث جودة المواد الطبية وتوفر مرجعا لدراسة معايير الجودة للمواد الطبية الصينية الأخرى. لبدء تحضير العينة ، قم بطحن المواد الخام إلى حجم جسيمات موحد عن طريق تمريرها عبر شبكة من النايلون بقطر داخلي مناسب.نقل وزن دقيقين من المادة الخام المطحونة إلى دورق مخروطي سعة 50 ملليلتر قبل إضافة 50 ملليلترا من الميثانول إلى الدورقة. ضع السدادة على القارورة في تسخين بالموجات فوق الصوتية عند 600 واط و 40 كيلو هرتز لمدة 30 دقيقة. في نهاية الحضانة ، صفي محلول المستخلص الطبي من خلال ورق الترشيح.بعد الإجهاد، انقل أربعة ملليلترات من محلول الميثانول الذي يحتوي على المستخلصات الطبية إلى دورق حجمي حجمي حجمه 10 ملليلتر. ثم أضف ستة ملليلتر من الماء إليها واخلط المحلول. اترك المحلول يستقر لمدة 10 دقائق.لتحليل HPLC للعينات. ابدأ بإعداد المراحل المتنقلة وقم بتعيين برنامج تدرج HPLC كما هو موضح في المخطوطة. قم بتصفية العينة من خلال غشاء مرشح مسامي صغير 0.45 ميكرون وإخضاعها لتحليل HPLC.لكل عينة ، قم بإجراء التحليل ست مرات في اليوم. لتقييم ثبات محلول العينة، قم بتحليل نفس محلول العينة المخزن في درجة حرارة الغرفة لمدة 0 و2 و4 و6 و8 و12 و24 ساعة بعد التحضير. خذ ست نسخ متماثلة من نفس العينة واكتشف بصمتها في HPLC.قم باستيراد البيانات ذات الصلة إلى البرنامج المسمى نظام تقييم التشابه للبصمات الكروماتوغرافية للطب الصيني التقليدي أو SESCF TCM الإصدار 2012. قم باستيراد وقت الاحتفاظ ومنطقة الذروة لجميع الدفعات ال 10 من عينات Chuanmutong الأصلية بالإضافة إلى خمس دفعات من الغش إلى SESCF TCM للتحليل. في القائمة الرئيسية ، انقر فوق الطيف المرجعي المحدد وانتقل إلى نافذة إعدادات المعلمات لتعيين البصمة الكروماتوغرافية المرجعية للأنواع الأصلية من Chuanmutong كمرجع.بعد ذلك ، قم بتعيين طريقة توليد طيف التحكم كطريقة وسيطة بعرض نافذة زمنية يبلغ 0.5. ثم ، انقر فوق معايرة متعددة النقاط في القائمة الرئيسية ، وحدد القمم ثم حدد خيار مطابقة الذروة كقمم محددة. أخيرا ، انقر فوق حساب التشابه لإجراء تحليل تشابه للعينات بناء على بصمات كروماتوجرام المرجعية ل Chuanmutong.لإجراء تحليل الكتلة النظامية ، افتح برنامج التحليل الإحصائي ذي الصلة ، وانقر فوق ملف لاستيراد بيانات 10 دفعات من العينات الأصلية وخمس دفعات من الغش إلى البرنامج. في القائمة ، ضمن علامة التبويب التصنيف ، انتقل إلى النقر فوق التحليل وتجميع النظام. حدد مناطق الذروة المشتركة المكونة من 10 دفعات من العينات الأصلية وخمس دفعات من المواد المغشوشة كمتغيرات.اضبط عدد المجموعات على أربعة. بعد ذلك ، انقر فوق الطريقة لتحديد طريقة التجميع كاتصال بين المجموعات. اختر الفاصل الزمني للقياس كارتباط Pearson واستخدم علامة التبويب Okay لرسم خريطة تحليل الكتلة.لتحليل المكونات الأساسية أو PCA ، افتح برنامج تحليل البيانات. انقر فوق ملف في القائمة ، وقم بإنشاء مشروع عادي جديد. قم باستيراد منطقة الذروة المكونة من 12 قمة شائعة في Excel أو جدول بيانات مشابه من نظام HPLC.اضغط على نهاية زر لإكمال استيراد البيانات. لتعيين نوع النموذج باستخدام PCA ، انقر فوق جديد لإنشاء نموذج جديد ثم قم بملاءمة البيانات باستخدام autofit وإضافة علامات تبويب. انتقل إلى الدرجات للحصول على خريطة نقاط PCA.لاستخدام تحليل تمييز المربعات الصغرى الجزئية المتعامدة أو OPLSDA. قم بإنشاء خريطة نقاط PCA كما هو موضح سابقا. قم بتعيين نوع النموذج باستخدام OPLSDA بالنقر فوق جديد وجديد كنموذج واحد قبل الانتقال إلى القياس في تحديد الاسمية للجميع ، ثم اضغط على AutoFit in عشرات لإنشاء خريطة نقاط OPLSDA.لتقدير الأهمية المتغيرة والإسقاط ، انتقل إلى قائمة برنامج تحليل البيانات وانتقل إلى تحليل متبوعا بتعيين الرقم على 200 تحت كل طفرة. احصل على قيم مربع R ومربع Q من درجة OPLSDA وانقر على تنبؤ VIP و VIP للحصول على خريطة VIP. أظهرت بصمات HPLC لعينات Chuanmutong ال 10 الأصلية 12 قمة مشتركة متميزة منها كبيرة نسبيا وتم حلها جيدا.تم استخدام رقم الذروة 10 كذروة مرجعية لتقدير أوقات الاحتفاظ النسبية للقمم المتبقية. أظهرت العينات الأصلية درجات تشابه قريبة جدا من واحدة مما يعني تشابها عاليا في تناسق جيد. ومع ذلك ، كانت درجات التشابه بين الدفعات الخمس من الزناة والتحكم Chuanmutong منخفضة للغاية.لوحظ أن بصمات HPLC للزناة الخمسة تختلف عن العينات الأصلية ، خاصة في المنطقة التي تتراوح أوقات الاحتفاظ بها من 28 إلى 55 دقيقة. أظهر PCA تشابها واضحا بين الأصناف الأصلية واختلافها عن الغش ، باستثناء CC المغشوشة ، كما تم الحصول على نتائج مماثلة من التحليل العنقودي عندما كانت مسافة التصنيف 20. أشارت مصفوفة الدرجات الناتجة عن OPLSDA إلى عدم وجود تقاطع بين نقاط العينة للعينات الأصلية والغش.مرة أخرى ، يشبه CC المغشوش الأصناف الأصلية أكثر من الزناة الأخرى. وفقا لخريطة VIP ، تم تحديد القمم التي لها قيم أكبر من واحد كمكونات العلامة الرئيسية مما تسبب في الاختلاف بين العينات الأصلية والغش. تم الكشف عن محتوى بيتا سيتوستيرول ، وهو مكون نشط موجود في Chuanmutong في جميع الدفعات الخمس من الغش ، ولكن المحتوى يختلف اختلافا كبيرا.يحدد هذا البروتوكول طرق تحليل مختلفة لتعكس جميع المعلومات حول المواد الطبية من زوايا متعددة وفي جميع أنحاء الطريق لتقدير صحة المواد الطبية Chuanmutong.

Research

JoVE Journal

Chemistry

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides

إعداد التنسيق المسامية العالية البوليمر طلاء البوليمر على ماكروبوروس كتل لتعزيز إثراء Phosphopeptides

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous ...

Facile Synthesis of Worm-like Micelles by Visible Light Mediated Dispersion Polymerization Using Photoredox Catalyst

توليف سطحي من المذيلات تشبه دودة من الضوء المرئي وساطة التشتت البلمرة عن طريق Photoredox محفز

Presented herein is a protocol for the facile synthesis of worm-like micelles by visible light mediated dispersion polymerization. This approach begins ...

Determining the Chemical Composition of Corrosion Inhibitor/Metal Interfaces with XPS: Minimizing Post Immersion Oxidation

تحديد التركيب الكيميائي لالمانع للتآكل واجهات / المعادن مع XPS: التقليل المشاركة الغمر الأكسدة

An approach for acquiring more reliable X-ray photoelectron spectroscopy data from corrosion inhibitor/metal interfaces is described. More specifically, ...

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography (HPLC)

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography HPLC

ومن الطرق المباشرة لGlucosinolate استخراج وتحليل مع الضغط العالي اللوني السائل (HPLC)

Glucosinolates are a well-studied and highly diverse class of natural plant compounds. They play important roles in plant resistance, rapeseed oil ...

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

تعديل أسلوب الترسيب الكيميائي لتوليف Nb2س5 محفزات النيكل الأكبر مع ارتفاع المساحة المحددة

We demonstrate a method for the synthesis of NixNb1-xO catalysts with sponge-like and fold-like nanostructures. By varying the Nb:Ni ratio, a series of ...

Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery

البوليمرات المركبة كتلة متوافقة بيولوجيا ً وظيفية من الميثيونين لتسليم الحمض النووي البلازميد المستهدف

Reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization integrates the advantages of radical polymerization and living polymerization. This ...

Extraction of Lignin with High &#946;-O-4 Content by Mild Ethanol Extraction and Its Effect on the Depolymerization Yield

استخراج اللجنين مع المحتوى العالي من β-س-4 استخراج الإيثانول معتدل وأثره على العائد ديبوليميريزيشن

Lignin valorization strategies are a key factor for achieving more economically competitive biorefineries based on lignocellulosic biomass. Most of the ...

A Two-Step Pyrolysis-Gas Chromatography Method with Mass Spectrometric Detection for Identification of Tattoo Ink Ingredients and Counterfeit Products

طريقه التحلل اللوني للغاز بخطوتين مع الكشف الطيفي الشامل لتحديد مكونات حبر الوشم والمنتجات المزيفة

Tattoo inks are complex mixtures of ingredients. Each of them possesses different chemical properties which have to be addressed upon chemical analysis. ...

Tuning the Acidity of Pt/ CNTs Catalysts for Hydrodeoxygenation of Diphenyl Ether

ضبط حموضة محفزات Pt/CNTs للإثير ثنائي الفينيل

We herein present a method for the synthesis of HNbWO6, HNbMoO6, HTaWO6 solid acid nanosheet modified Pt/CNTs. By varying the weight of various solid acid ...

Integrated Cell Manipulation Platform Coupled with the Single-probe for Mass Spectrometry Analysis of Drugs and Metabolites in Single Suspension Cells

منصة معالجة الخلية المتكاملة مقرونة بمسبار واحد لتحليل قياس الطيف الكتلي للأدوية والأيض في خلايا تعليق واحدة

Single cell mass spectrometry (SCMS) enables sensitive detection and accurate analysis of broad ranges of cellular species on the individual-cell level. ...