Name: hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis
Uploaded: 2022-11-11T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av prosjektet Sichuan Traditional Chinese Medicine Administration (nr. 2020JC0088, nr. 2021MS203).

1. Metoder for kjemisk fingeravtrykksdeteksjon
<ol><li>Kromatografiske forhold<ol><li>Forbered acetonitril (A) / vann (B) mobilfasen. Sett et gradientprogram som følger i HPLC-programvaren: 0-20 min, 3% A-10% A; 20-25 min, 10% A-13% A; 25-65 min, 13% A-25% A; 65-75 min, 25% A-40% A; 75-76 min, 40% A-3% A; 76-85 min, 3% A-3% A.</li>
		<li>Oppretthold strømningshastigheten til mobilfasen på 1,0 ml / min.</li>
		<li>Utfør kromatografisk separasjon på en C18-kolonne (250 mm x 4,6 mm, 5 μm) oppretthol...

<ol>
	<li>Chen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chinese Medicine Specimen Picture Book. , 116 (1935).</li><li>Xiong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lignans+from+the+stems+of+Clematis+armandii+(&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;)+and+their+anti-neuroinflammatory+activities.">Lignans from the stems of Clematis armandii (&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;) and their anti-neuroinflammatory activities.</a> Journal of Ethnopharmacology. 153 (3), 737-743 (2014).</li><li>Pan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+lignan+from+the+Chinese+medicinal+plant+Clematis+armandii,+inhibits+A431+cell+growth+via+blocking+p70S6/S6+kinase+pathway.">a lignan from the Chinese medicinal plant Clematis armandii, inhibits A431 cell growth via blocking p70S6/S6 kinase pathway.</a> Integrative Cancer Therapies. 16 (3), 351-359 (2017).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of The People's Republic of China: (Edition 2020). , 38 (2020).</li><li>Wang, D. G., Guo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Textual+research+on+the+materia+medica+and+authenticity+of+Clematidis+armandii.">Textual research on the materia medica and authenticity of Clematidis armandii.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medicine Research. 18 (11), 2696 (2007).</li><li>Fang, Q. M., Zhang, M., Zhong, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+natural+resources+and+exploitation+of+Caulis+Clematidis+Armandii+in+Sichuan.">The natural resources and exploitation of Caulis Clematidis Armandii in Sichuan.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 20 (5), 404-406 (2005).</li><li>Bai, M. N., Dai, Y. X., Wang, Y., Ren, Y. Y., Tan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+the+identi&#64257;cation+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on the identi&#64257;cation of Caulis Clematidis Armandii.</a> Research and Practice on Chinese Medicines. 31 (3), 13-16 (2017).</li><li>Zhou, P. J., Li, X. F., Fu, D. H., Pu, X. Y., Zhu, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacognosy+identification+of+Ethnomedicine+Clematis+ranunculoides+Franchet.">Pharmacognosy identification of Ethnomedicine Clematis ranunculoides Franchet.</a> Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 34 (3), 432-436 (2017).</li><li>Guo, J. L., Tang, Y., Pei, J., Wang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+random+amplified+polymorphic+DNA+and+sequence+characterized+amplified+regions+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on random amplified polymorphic DNA and sequence characterized amplified regions of Caulis Clematidis Armandii.</a> Journal of Chengdu Medical College. 6 (4), 283-286 (2011).</li><li>Liu, M. Z., Li, M. N., Yao, H., Liu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+identification+of+Clematidis+Armandii+Caulis+and+its+adulterants+and+closely+related+species+by+ITS2+sequence.">Molecular identification of Clematidis Armandii Caulis and its adulterants and closely related species by ITS2 sequence.</a> Global Traditional Chinese Medicine. 4 (6), 446-450 (2011).</li><li>Liu, J. J., Chen, X., Wei, Z. Q., Li, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+and+identification+of+the+caules+of+Clematis+armandii+Franch.and+Clematis+montana+Buch.-Ham.">Chemical constituents and identification of the caules of Clematis armandii Franch.and Clematis montana Buch.-Ham.</a> Natural Product Research and Development. 22 (6), 998-1000 (2010).</li><li>Yang, T. R., Xu, Z., Shi, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+four+compounds+from+Clematis+Montana.">Studies on four compounds from Clematis Montana.</a> Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. 10 (4), 142-143 (2008).</li><li>Yan, L. H., Xu, L. Z., Zhou, Z. M., Yang, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+from+stems+of+Clematis+armandii(I).">Chemical constituents from stems of Clematis armandii(I).</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 38 (3), 340-342 (2007).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+uses,+phytochemistry,+pharmacology,+and+toxicology+of+Akebiae+Caulis+and+its+synonyms:+A+review.">Traditional uses, phytochemistry, pharmacology, and toxicology of Akebiae Caulis and its synonyms: A review.</a> Journal of Ethnopharmacology. 277, 114245 (2021).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diuretic+effect+and+material+basis+of+Clematidis+Armandii+Caulis+in+rats.">Diuretic effect and material basis of Clematidis Armandii Caulis in rats.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 44 (9), 1889-1894 (2019).</li><li>Kuang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consistency+study+of+Caulis+Clematidis+Armandii+and+its+traditionally+used+products+and+counterfeit+species+based+on+efficacy+and+pharmacognosy.">Consistency study of Caulis Clematidis Armandii and its traditionally used products and counterfeit species based on efficacy and pharmacognosy.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 36 (3), 115-121 (2020).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+assessment+of+Asarum+heterotropoides+var.+mandshuricum+based+on+HPLC+multi-component+determination+and+multiple+pattern+recognition+method+of+fingerprint.">Quality assessment of Asarum heterotropoides var. mandshuricum based on HPLC multi-component determination and multiple pattern recognition method of fingerprint.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 238-243 (2022).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+multi-components+of+Paeoniae+Alba+Radix+based+on+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Determination of multi-components of Paeoniae Alba Radix based on fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 231-237 (2022).</li><li>Li, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+investigation+for+raw+and+processed+products+of+Euodiae+Fructus+based+on+high-performance+liquid+chromatography+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Comparative investigation for raw and processed products of Euodiae Fructus based on high-performance liquid chromatography fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chemistry &amp; Biodiversity. 18 (8), 2100281 (2021).</li><li>Dong, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+suitable+distribution+areas+of+Kawa+Kimichi+produced+in+Sichuan+province-based+on+remote+sensing+and+GIS-A+case+study+of+Clematis+Armandii.">Study on suitable distribution areas of Kawa Kimichi produced in Sichuan province-based on remote sensing and GIS-A case study of Clematis Armandii.</a> Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology. 17 (11), 2398-2404 (2015).</li><li>Tang, S. W., Pei, J., Li, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+histological+identification+of+Chuanmutong.">Morphological and histological identification of Chuanmutong.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 15 (1), 19-21 (2000).</li><li>Li, B., Chen, X., Fang, Q. M., Zhang, B. J., Wei, Z. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+Research+of+Chuanmutong.">Quality Research of Chuanmutong.</a> Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine. 27 (6), 58-60 (2009).</li><li>Wu, W. J., Wan, M. M., Cao, Y. H., Tan, R., Song, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+on+the+Quality+Standard+of+Chuanmutong.">Research on the Quality Standard of Chuanmutong.</a> Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 33 (2), 313-315 (2015).</li><li>Wei, Z. Q., Chen, X., Li, B., Dong, X. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+stigmasterol+in+Clematis+armandii+Franch+and+Clematis+montana+Buch-Ham.+by+HPLC.">Determination of stigmasterol in Clematis armandii Franch and Clematis montana Buch-Ham. by HPLC.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 20 (3), 574-575 (2009).</li><li>Qing, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+oleanolic+acid+in+Caulis+clematidis+armandii+by+HPLC.">Determination of oleanolic acid in Caulis clematidis armandii by HPLC.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 21 (3), 273-274 (2006).</li><li>Yang, S. D., Wang, R., Fu, D. Y., Guo, J. J., Tan, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+on+oleanolic+acid+in+caulis+clematidis+armandii+by+microwave+assisted+extraction-HPLC/MS.">Determination on oleanolic acid in caulis clematidis armandii by microwave assisted extraction-HPLC/MS.</a> Anhui Academy of Agricultural Sciences. 38 (13), 6929-6931 (2010).</li></ol>

Prøveinnsamlingen for forskning er det første viktige skrittet for å konstruere multimønstergjenkjenning for å identifisere ektheten av kinesiske medisinske materialer. Gjennom markedsundersøkelser fant vi at Sichuan Ya'an, Liangshan og Leshan er de viktigste produksjonsområdene for ville ressurser i Chuanmutong. De beslektede variantene av samme slekt har også samme geografiske utbredelse 6,20; CC, DC, DE, XS og SMT blir ofte misbrukt som Chuangmutong<su...

Chuanmutong, tørr Caulis av Clematis armandii Franch. eller Clematis montana Buch.-Ham., er en tradisjonell kinesisk medisin som vanligvis brukes i klinikker 1,2,3. Det brukes til behandling av urinproblemer, ødem, sår på tungen og munnen, redusert melkesekresjon, leddstivhet og muskelsmerter forårsaket av fuktig varme4. Chuanmutong har alltid blitt hentet fra ville varianter, hovedsakelig distribuert i sørvest-Kina, spesielt i Sichuan, hvor den beste kvaliteten finnes 5,6. Det er vanskelig å skille mellom autentiske varianter og deres nært beslektede adulterants på grunn av deres lignende egenskaper 7,8,9,10. Kvalitetsstandarden til Chuanmutong i 2020-utgaven av kinesisk farmakopé fastsetter bare egenskapene, mikroskopisk identifikasjon og tynnsjiktsidentifikasjon uten innholdsbestemmelse, som ikke effektivt kan identifisere adulteranter, og dermed har potensielle risikoer. Videre er det få rapporter som sammenligner og identifiserer Chuanmutong og relaterte planter. Følgelig er en kvalitetskontrollmetode for å sikre ektheten av Chuanmutong verdig videre studier.
De kjemiske bestanddelene i Chuanmutong består hovedsakelig av pentacykliske triterpenoider av oleanane-typen og deres glykosider, flavonoider og organiske syrer11,12,13,14. Blant dem har oleanolsyre, β-sitosterol, stigmasterol og ergosterol vanndrivende effekter av forskjellige intensiteter, noe som kan være potensielle farmakodynamiske stoffer for å fremme diurese og lindre stranguria15,16. Kjemiske fingeravtrykk oppnås ved å separere og oppdage mange kjemiske komponenter som finnes i prøver ved høyytelses væskekromatografi (HPLC), gasskromatografi (GC), etc. Vedta hensiktsmessige statistiske analysemetoder for å analysere egenskapene til Chuanmutong kan bestemme den generelle kvalitetskontroll og vitenskapelig identifikasjon av tradisjonell kinesisk medisin17,18,19.
I denne studien ble 10 partier Chuanmutong autentiske varianter og fem partier med adulterants samlet. Kvaliteten ble sammenlignet og analysert ved hjelp av HPLC-fingeravtrykksmetoden kombinert med multimønstergjenkjenning, inkludert klyngeanalyse (CA), hovedkomponentanalyse (PCA), ortogonal partiell minste kvadraters diskrimineringsanalyse (OPLS-CA) og innholdsbestemmelse av den farmakodynamiske komponenten. Denne protokollen etablerer en metode for å identifisere autentiske varianter med høy spesifisitet, en ny strategi for vitenskapelig identifisering av autentiske varianter og adulterants av kinesiske medisinske materialer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017381038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD5243V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Sitosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;C18 column</td>
			<td>Yuexu Material Technology Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>Welch Ultimate LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Guoqiang Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>19020103</td>
			<td>CMT-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongya Wawushan Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210701</td>
			<td>CMT-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Haobo Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210401</td>
			<td>CMT-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Wusheng Pharmaceutical Group Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201201</td>
			<td>CMT-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Limin Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201001</td>
			<td>CMT-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Yuhetang Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>210501</td>
			<td>CMT-10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis argentilucida (Levl. et Vant.) W. T. Wang</td>
			<td>Madzi Bridge, Sanlang Township, Tianquan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>CC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis apiifolia var. obtusidentata Rehd. et Wils.</td>
			<td>Heilin Village, Qiliping Township, Hongya County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis peterae Hand.-Mazz.</td>
			<td>Huangmu Village, Huangmu Township, Hanyuan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis gouriana Roxb. Var. finetii Rehd. et Wils</td>
			<td>Mixedang Mountain, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>XS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis finetiana Levl. et Vaniot.</td>
			<td>Wannian Village, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>SMT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Shanghai,&#160; China&#160;</td>
			<td>FA1204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ergosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd, Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2021112602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017042043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2016062901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent, USA.</td>
			<td>1260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBM SPSS Statistics version 26.0</td>
			<td>International Business Machines Corporation, USA</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD6409V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>202010302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-butyl alcohol</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020071047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petroleum ether</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020090125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid</td>
			<td>Comeo Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>20200110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SESCF-TCM version 2012</td>
			<td>National Pharmacopoeia Commission, China</td>
			<td>-</td>
			<td>http://114.247.108.158:8888/login</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stigmasterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloromethane</td>
			<td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>20200214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umetrics SIMCA version 14.1.0.2047</td>
			<td>Umetrics, Sweden</td>
			<td>-</td>
			<td>https://www.sartorius.com/en/products/process-analytical-technology/data-analytics-software/mvda-software/simca/simca-free-trial-download</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water machine</td>
			<td>Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>UPH-II-10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Kunshan Hechuang Ultrasound Instrument Co., Ltd., Jiangsu, China</td>
			<td>KH3200E</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis

En metode for å identifisere kinesiske medisinske materialer og deres relaterte adulterants ble konstruert ved å ta Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, en universelt brukt tradisjonell kinesisk medisin) som et eksempel. Ti partier med ekte Chuanmutong-varianter og fem batcher av relaterte adulteranter ble analysert og sammenlignet basert på høyytelses væskekromatografi (HPLC) fingeravtrykk kombinert med kjemometri, inkludert klyngeanalyse (CA), hovedkomponentanalyse (PCA) og ortogonal partiell minste kvadraters diskrimineringsanalyse (OPLS-DA). I tillegg ble innholdet av β-sitosterol bestemt. Det kontrollkjemiske fingeravtrykket til Chuanmutong ble etablert, og 12 vanlige topper ble identifisert. Likheten mellom fingeravtrykket til 10 partier ekte Chuanmutong-varianter og kontrollfingeravtrykket var 0,910-0,989, mens likheten mellom fem partier med adulterants bare var 0,133-0,720. Basert på de vanlige toppene i kromatogrammet, ble 15 batcher av prøver klassifisert i tre innholdsnivåer av PCA, og ble samlet i fire kategorier av CA, og oppnådde et klart skille mellom autentiske Chuanmutong og adulterants av Chuanmutong. Videre ble syv differensialkomponenter som effektivt kan identifisere autentiske Chuanmutong og adulterants av Chuanmutong funnet gjennom OPLS-DA. β-sitosterolinnholdet i 10 partier av ekte Chuanmutong-varianter var 97,53-161,56 μg / g, mens β-sitosterolinnholdet i de fem batchene av adulterants varierte sterkt, blant annet β-sitosterolinnholdet i Clematis peterae Hand.-Mazz. og Clematis gouriana Roxb. Var. finetii Rehd. et Wils. var betydelig lavere enn for autentiske varianter av Chuanmutong. HPLC-indekskomponentinnholdet og kjemisk fingeravtrykkgjenkjenningsmetode for flere mønstre etablert i denne studien gir en ny strategi for effektivt å identifisere autentiske kinesiske medisinske materialer og relaterte adulteranter.

Kromatografisk fingeravtrykk av Chuanmutong og likhetsanalyse (SA) RSD-verdiene for den relative retensjonstiden for presisjon, repeterbarhet og stabilitet var henholdsvis under 0,46 %, 1,65 % og 0,53 %. RSD-verdiene for det relative toppområdet var henholdsvis under 4,23 %, 3,56 % og 3,96 %. Som vist i figur 1A, B, var det 12 forskjellige vanlige topper (fra topp 1 til topp 12) i HPLC-fingeravtrykkene i de 10 autentiske Chuanmutong-prøvene. Siden toppo...

Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

Her presenterer vi en protokoll for å etablere høyytelses væskekromatografi (HPLC), kombinert med kjemisk fingeravtrykkgjenkjenning av flere mønstre, som gir en ny strategi for effektivt å identifisere de ekte varianter av Clematidis Armandii Caulis og dens adulterants.

HPLC kombinert med kjemisk fingeravtrykk for flermønstergjenkjenning for å identifisere ektheten til Clematidis armandii Caulis

A method for identifying Chinese medicinal materials and their related adulterants was constructed by taking Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, a ...

Denne protokollen kan gi en ny strategi for effektivt å identifisere de ekte materialene til Clematidis armandii caulis og dens adulterants. Denne metoden kan brukes i forskning på medisinsk materialekvalitet, og den gir en referanse for å studere kvalitetsstandardene til andre kinesiske medisinske materialer. For å begynne prøvepreparering slip råmaterialet til jevn partikkelstørrelse ved å føre dem gjennom et nylonnett med en passende indre diameter.Transfer veide nøyaktig to gram av bakken råmateriale til en stoppet 50 milliliter konisk kolbe før tilsetning 50 ml metanol i kolben. Sett proppen på kolben i ultralyd oppvarmet til 600 watt og 40 kilohertz i 30 minutter. På slutten av inkubasjonen, sil den medisinske ekstraktoppløsningen gjennom filterpapiret.Etter belastning, overfør fire milliliter av metanoloppløsningen som inneholder medisinske ekstrakter til en 10 milliliter volumetrisk kolbe. Tilsett deretter seks milliliter vann til det og bland løsningen. La løsningen slå seg ned i 10 minutter.For HPLC-analyse av prøvene. Start med å forberede mobilfasene og still inn HPLC-gradientprogrammet som beskrevet i manuskriptet. Filtrer prøven gjennom en 0,45 mikron mikro porøs filtermembran og utsett den for HPLC-analyse.For hver prøve, utfør analyse seks ganger om dagen. For å evaluere stabiliteten til prøveløsningen, analyser den samme prøveløsningen som er lagret ved romtemperatur i 0, 2, 4, 6, 8, 12 og 24 timer etter tilberedning. Ta seks kopier av den samme prøven og oppdag fingeravtrykket i HPLC.Importer relevante data til programvaren som heter Similarity Evaluation System of Chromatographic Fingerprints of Traditional Chinese Medicine eller SESCF TCM versjon 2012. Importer oppbevaringstid og toppområde for alle 10 batcher av autentiske Chuanmutong-prøver, samt fem batcher med adulterants til SESCF TCM for analyse. I hovedmenyen klikker du på det angitte referansespekteret og går til parameterinnstillingsvinduet for å angi referansekromatografisk fingeravtrykk av den autentiske arten Chuanmutong som referanse.Deretter angir du kontrollspektrumgenereringsmetode som medianmetode med tidsvindubredden på 0,5. Klikk deretter på flerpunktskalibrering i hovedmenyen, velg toppene og velg deretter alternativet for toppmatching som merkede topper. Til slutt klikker du på Beregn likhet for å utføre en likhetsanalyse av prøvene basert på referansekromatogramfingeravtrykkene til Chuanmutong.For å utføre systemisk klyngeanalyse, åpne relevant statistisk analyseprogramvare, og klikk på filen for å importere dataene fra 10 batcher med autentiske prøver og fem batcher med adulterants til programvaren. I menyen, under kategorien Klassifisering, gå for å klikke Analyse og systemklynger. Velg de vanlige toppområdene med 10 grupper med autentiske prøver og fem grupper med adulterants som variabler.Sett antall klynger til fire. Deretter klikker du på Metode for å velge Clustering Method som intergruppeforbindelse. Velg måleintervallet som Pearson-korrelasjon, og bruk kategorien OK til å tegne klyngeanalysekartet.For prinsippkomponentanalyse eller PCA, åpne dataanalyseprogramvaren. Klikk på fil på menyen, og opprett et nytt vanlig prosjekt. Importer toppområdet på 12 vanlige topper i et Excel-regneark eller lignende regneark fra HPLC-systemet.Trykk på Fullfør-knappen for å fullføre dataimporten. For å angi modelltypen med PCA, klikk på Ny for å opprette en ny modell og deretter tilpasse dataene ved hjelp av autotilpasning og legge til faner. Gå til poengsummer for å få PCA-poengsumkartet.For å bruke Orthogonal Partial Least Squares Discrimination Analysis eller OPLSDA. Generer PCA-resultatkartet som vist tidligere. Angi modelltypen med OPLSDA ved å klikke Ny og Ny som modell én Før du går til skalering ved å velge par for alle, Trykk deretter på Autotilpassing i poengsummer for å generere OPLSDA-poengsumkartet.For å estimere variabel viktighet og projeksjon, gå til programvaremenyen for dataanalyse og gå til Analyser etterfulgt av å sette tallet til 200 under per mutasjoner. Hent R-kvadrat- og Q-kvadratverdiene fra OPLSDA-poengsummen, og klikk på VIP- og VIP-prediktiv for å få VIP-kartet. HPLC-fingeravtrykk av de 10 autentiske Chuanmutong-prøvene viste 12 forskjellige vanlige topper, hvorav de relativt store og godt løste seg.Topp nummer 10 ble brukt som referansetopp for å estimere de relative retensjonstidene for resten topper. De autentiske prøvene viste likhetsgrader svært nær en, noe som innebærer høy likhet i god konsistens. Imidlertid var likhetsgradene mellom de fem partiene med adulterants og kontrollen Chuanmutong ganske lave.HPLC-fingeravtrykkene til de fem adulterantene ble observert å avvike fra de autentiske prøvene, hovedsakelig i regionen med retensjonstider fra 28 til 55 minutter. PCA viste en åpenbar likhet mellom de autentiske variantene og deres forskjell fra adulterantene, bortsett fra adulteranten CC.Lignende resultater ble også hentet fra klyngeanalyse da klassifikasjonsavstanden var 20. Skårmatrisen generert fra OPLSDA indikerte ikke noe skjæringspunkt mellom prøvepunktene til autentiske prøver og adulterantene.Igjen lignet adulterant CC de autentiske varianter mer enn de andre adulterants. I følge VIP-kartet ble toppene med verdier større enn én identifisert som hovedmarkørkomponentene som forårsaket forskjellen mellom autentiske prøver og adulterantene. Innholdet av beta-sitosterol, en aktiv komponent funnet i Chuanmutong, ble påvist i alle fem batchene av adulterants, men innholdet varierte sterkt.Denne protokollen etablerer ulike analysemetoder for å gjenspeile all informasjon om medisinske materialer fra flere vinkler og i hele veien for å estimere ektheten av Chuanmutong medisinske materialer.

Research

JoVE Journal

Chemistry

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides

Utarbeidelse av svært porøs Coordination Polymer Belegg på macroporous Polymer Monoliths for økt berikelse av fosforpeptidene

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous ...

Facile Synthesis of Worm-like Micelles by Visible Light Mediated Dispersion Polymerization Using Photoredox Catalyst

Facile Synthesis of Worm-lignende Miceller av synlig lys mediert dispersjonspolymeriseringen Bruke Photoredox Catalyst

Presented herein is a protocol for the facile synthesis of worm-like micelles by visible light mediated dispersion polymerization. This approach begins ...

Determining the Chemical Composition of Corrosion Inhibitor/Metal Interfaces with XPS: Minimizing Post Immersion Oxidation

Bestemme den kjemiske sammensetningen av korrosjonsinhibitor / Metal grensesnitt med XPS: Minimere Post Immersion Oksidasjon

An approach for acquiring more reliable X-ray photoelectron spectroscopy data from corrosion inhibitor/metal interfaces is described. More specifically, ...

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography (HPLC)

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography HPLC

En grei metode for glucosinolate Utvinning og analyse med høyt trykk væskekromatografi (HPLC)

Glucosinolates are a well-studied and highly diverse class of natural plant compounds. They play important roles in plant resistance, rapeseed oil ...

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

Kjemisk nedbør metoden for syntese av Nb2O5 endret Bulk nikkel katalysatorer med høy bestemt areal

We demonstrate a method for the synthesis of NixNb1-xO catalysts with sponge-like and fold-like nanostructures. By varying the Nb:Ni ratio, a series of ...

Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery

Metionin Funksjonalisert biokompatible Block Kopolymerer for målrettet plasmider DNA levering

Reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization integrates the advantages of radical polymerization and living polymerization. This ...

Extraction of Lignin with High &#946;-O-4 Content by Mild Ethanol Extraction and Its Effect on the Depolymerization Yield

Utvinning av Lignin med høy β-O-4 innhold av Mild etanol utvinning og dens effekt på Depolymerization avkastningen

Lignin valorization strategies are a key factor for achieving more economically competitive biorefineries based on lignocellulosic biomass. Most of the ...

A Two-Step Pyrolysis-Gas Chromatography Method with Mass Spectrometric Detection for Identification of Tattoo Ink Ingredients and Counterfeit Products

En to-trinns pyrolyse-gass kromatografi metode med MASS Spectrometric Detection for identifisering av Tattoo Ink ingredienser og forfalskede produkter

Tattoo inks are complex mixtures of ingredients. Each of them possesses different chemical properties which have to be addressed upon chemical analysis. ...

Tuning the Acidity of Pt/ CNTs Catalysts for Hydrodeoxygenation of Diphenyl Ether

Tuning Surhet av PT/CNTs katalysatorer for Hydrodeoxygenation av difenyleter Eter

We herein present a method for the synthesis of HNbWO6, HNbMoO6, HTaWO6 solid acid nanosheet modified Pt/CNTs. By varying the weight of various solid acid ...

Integrated Cell Manipulation Platform Coupled with the Single-probe for Mass Spectrometry Analysis of Drugs and Metabolites in Single Suspension Cells

Integrert Cell manipulasjon Platform sammen med single-probe for Mass massespektrometri analyse av narkotika og metabolitter i single suspensjon celler

Single cell mass spectrometry (SCMS) enables sensitive detection and accurate analysis of broad ranges of cellular species on the individual-cell level. ...