Name: hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis
Uploaded: 2022-11-11T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

Эта работа была поддержана Проектом Администрации традиционной китайской медицины провинции Сычуань (No 2020JC0088, No 2021MS203).

1. Методы химического обнаружения отпечатков пальцев
<ol><li>Хроматографические условия<ol><li>Подготовьте подвижную фазу ацетонитрила (А)/воды (В). Установите градиентную программу следующим образом в программном обеспечении ВЭЖХ: 0-20 мин, 3%А-10%А; 20-25 мин, 10%А-13%А; 25-65 мин, 13%А-25%А; 65-75 ми?...

<ol>
	<li>Chen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chinese Medicine Specimen Picture Book. , 116 (1935).</li><li>Xiong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lignans+from+the+stems+of+Clematis+armandii+(&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;)+and+their+anti-neuroinflammatory+activities.">Lignans from the stems of Clematis armandii (&amp;#34;Chuan-Mu-Tong&amp;#34;) and their anti-neuroinflammatory activities.</a> Journal of Ethnopharmacology. 153 (3), 737-743 (2014).</li><li>Pan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+lignan+from+the+Chinese+medicinal+plant+Clematis+armandii,+inhibits+A431+cell+growth+via+blocking+p70S6/S6+kinase+pathway.">a lignan from the Chinese medicinal plant Clematis armandii, inhibits A431 cell growth via blocking p70S6/S6 kinase pathway.</a> Integrative Cancer Therapies. 16 (3), 351-359 (2017).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of The People's Republic of China: (Edition 2020). , 38 (2020).</li><li>Wang, D. G., Guo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Textual+research+on+the+materia+medica+and+authenticity+of+Clematidis+armandii.">Textual research on the materia medica and authenticity of Clematidis armandii.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medicine Research. 18 (11), 2696 (2007).</li><li>Fang, Q. M., Zhang, M., Zhong, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+natural+resources+and+exploitation+of+Caulis+Clematidis+Armandii+in+Sichuan.">The natural resources and exploitation of Caulis Clematidis Armandii in Sichuan.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 20 (5), 404-406 (2005).</li><li>Bai, M. N., Dai, Y. X., Wang, Y., Ren, Y. Y., Tan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+the+identi&#64257;cation+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on the identi&#64257;cation of Caulis Clematidis Armandii.</a> Research and Practice on Chinese Medicines. 31 (3), 13-16 (2017).</li><li>Zhou, P. J., Li, X. F., Fu, D. H., Pu, X. Y., Zhu, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacognosy+identification+of+Ethnomedicine+Clematis+ranunculoides+Franchet.">Pharmacognosy identification of Ethnomedicine Clematis ranunculoides Franchet.</a> Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 34 (3), 432-436 (2017).</li><li>Guo, J. L., Tang, Y., Pei, J., Wang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+random+amplified+polymorphic+DNA+and+sequence+characterized+amplified+regions+of+Caulis+Clematidis+Armandii.">Study on random amplified polymorphic DNA and sequence characterized amplified regions of Caulis Clematidis Armandii.</a> Journal of Chengdu Medical College. 6 (4), 283-286 (2011).</li><li>Liu, M. Z., Li, M. N., Yao, H., Liu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+identification+of+Clematidis+Armandii+Caulis+and+its+adulterants+and+closely+related+species+by+ITS2+sequence.">Molecular identification of Clematidis Armandii Caulis and its adulterants and closely related species by ITS2 sequence.</a> Global Traditional Chinese Medicine. 4 (6), 446-450 (2011).</li><li>Liu, J. J., Chen, X., Wei, Z. Q., Li, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+and+identification+of+the+caules+of+Clematis+armandii+Franch.and+Clematis+montana+Buch.-Ham.">Chemical constituents and identification of the caules of Clematis armandii Franch.and Clematis montana Buch.-Ham.</a> Natural Product Research and Development. 22 (6), 998-1000 (2010).</li><li>Yang, T. R., Xu, Z., Shi, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+four+compounds+from+Clematis+Montana.">Studies on four compounds from Clematis Montana.</a> Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. 10 (4), 142-143 (2008).</li><li>Yan, L. H., Xu, L. Z., Zhou, Z. M., Yang, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+constituents+from+stems+of+Clematis+armandii(I).">Chemical constituents from stems of Clematis armandii(I).</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 38 (3), 340-342 (2007).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+uses,+phytochemistry,+pharmacology,+and+toxicology+of+Akebiae+Caulis+and+its+synonyms:+A+review.">Traditional uses, phytochemistry, pharmacology, and toxicology of Akebiae Caulis and its synonyms: A review.</a> Journal of Ethnopharmacology. 277, 114245 (2021).</li><li>Ye, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diuretic+effect+and+material+basis+of+Clematidis+Armandii+Caulis+in+rats.">Diuretic effect and material basis of Clematidis Armandii Caulis in rats.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 44 (9), 1889-1894 (2019).</li><li>Kuang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consistency+study+of+Caulis+Clematidis+Armandii+and+its+traditionally+used+products+and+counterfeit+species+based+on+efficacy+and+pharmacognosy.">Consistency study of Caulis Clematidis Armandii and its traditionally used products and counterfeit species based on efficacy and pharmacognosy.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 36 (3), 115-121 (2020).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+assessment+of+Asarum+heterotropoides+var.+mandshuricum+based+on+HPLC+multi-component+determination+and+multiple+pattern+recognition+method+of+fingerprint.">Quality assessment of Asarum heterotropoides var. mandshuricum based on HPLC multi-component determination and multiple pattern recognition method of fingerprint.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 238-243 (2022).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+multi-components+of+Paeoniae+Alba+Radix+based+on+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Determination of multi-components of Paeoniae Alba Radix based on fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 231-237 (2022).</li><li>Li, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+investigation+for+raw+and+processed+products+of+Euodiae+Fructus+based+on+high-performance+liquid+chromatography+fingerprints+and+chemical+pattern+recognition.">Comparative investigation for raw and processed products of Euodiae Fructus based on high-performance liquid chromatography fingerprints and chemical pattern recognition.</a> Chemistry &amp; Biodiversity. 18 (8), 2100281 (2021).</li><li>Dong, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+suitable+distribution+areas+of+Kawa+Kimichi+produced+in+Sichuan+province-based+on+remote+sensing+and+GIS-A+case+study+of+Clematis+Armandii.">Study on suitable distribution areas of Kawa Kimichi produced in Sichuan province-based on remote sensing and GIS-A case study of Clematis Armandii.</a> Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology. 17 (11), 2398-2404 (2015).</li><li>Tang, S. W., Pei, J., Li, F. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+histological+identification+of+Chuanmutong.">Morphological and histological identification of Chuanmutong.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 15 (1), 19-21 (2000).</li><li>Li, B., Chen, X., Fang, Q. M., Zhang, B. J., Wei, Z. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+Research+of+Chuanmutong.">Quality Research of Chuanmutong.</a> Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine. 27 (6), 58-60 (2009).</li><li>Wu, W. J., Wan, M. M., Cao, Y. H., Tan, R., Song, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+on+the+Quality+Standard+of+Chuanmutong.">Research on the Quality Standard of Chuanmutong.</a> Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 33 (2), 313-315 (2015).</li><li>Wei, Z. Q., Chen, X., Li, B., Dong, X. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+stigmasterol+in+Clematis+armandii+Franch+and+Clematis+montana+Buch-Ham.+by+HPLC.">Determination of stigmasterol in Clematis armandii Franch and Clematis montana Buch-Ham. by HPLC.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 20 (3), 574-575 (2009).</li><li>Qing, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+oleanolic+acid+in+Caulis+clematidis+armandii+by+HPLC.">Determination of oleanolic acid in Caulis clematidis armandii by HPLC.</a> West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 21 (3), 273-274 (2006).</li><li>Yang, S. D., Wang, R., Fu, D. Y., Guo, J. J., Tan, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+on+oleanolic+acid+in+caulis+clematidis+armandii+by+microwave+assisted+extraction-HPLC/MS.">Determination on oleanolic acid in caulis clematidis armandii by microwave assisted extraction-HPLC/MS.</a> Anhui Academy of Agricultural Sciences. 38 (13), 6929-6931 (2010).</li></ol>

Сбор образцов для исследований является первым ключевым шагом к построению многоконтактного распознавания в определении подлинности китайских лекарственных материалов. Благодаря исследованию рынка мы обнаружили, что Сычуань Яань, Ляншань и Лэшань являются основными районами добыч?...

Чуаньмутонг, сухой каулис клематиса армандии Франч. или Clematis montana Buch.-Ham., является традиционной китайской медициной, обычно используемой в клиниках 1,2,3. Он используется для лечения проблем с мочеиспусканием, отеков, язв на языке и во рту, снижения секреции молока, жесткости суставов и мышечной боли, вызваннойвлажным теплом 4. Чуаньмутонг всегда получали из диких сортов, в основном распространенных на юго-западе Китая, особенно в провинции Сычуань, где лучшее качество можно найти 5,6. Трудно отличить аутентичные сорта от их близкородственных фальсификаторов из-за их схожих характеристик 7,8,9,10. Стандарт качества Chuanmutong в издании Китайской фармакопеи 2020 года предусматривает только свойства, микроскопическую идентификацию и тонкослойную идентификацию без определения содержания, которая не может эффективно идентифицировать фальсификаторов и, следовательно, имеет потенциальные риски. Кроме того, существует мало сообщений, сравнивающих и идентифицирующих Чуаньмутонг и родственные растения. Следовательно, метод контроля качества для обеспечения подлинности Chuanmutong заслуживает дальнейшего изучения.
Химические компоненты Chuanmutong в основном состоят из пентациклических тритерпеноидов типа олеана и их гликозидов, флавоноидов и органических кислот 11,12,13,14. Среди них олеаноловая кислота, β-ситостерин, стигмастерин и эргостерин обладают мочегонным действием различной интенсивности, которые могут быть потенциальными фармакодинамическими веществами для стимулирования диуреза и облегчения странгурии15,16. Химические отпечатки пальцев получают путем разделения и обнаружения многих химических компонентов, содержащихся в образцах, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), газовой хроматографии (ГХ) и т.д. Принятие соответствующих методов статистического анализа для анализа характеристик Chuanmutong может определить общий контроль качества и научную идентификацию традиционной китайской медицины 17,18,19.
В этом исследовании было собрано 10 партий аутентичных сортов Чуаньмутонг и пять партий фальсификатов. Их качество сравнивалось и анализировалось методом отпечатков пальцев ВЭЖХ в сочетании с распознаванием нескольких образов, включая кластерный анализ (CA), анализ главных компонентов (PCA), ортогональный частичный анализ дискриминации наименьших квадратов (OPLS-CA) и определение содержания фармакодинамического компонента. Этот протокол устанавливает метод идентификации аутентичных сортов с высокой специфичностью, новую стратегию научной идентификации аутентичных сортов и фальсификатов китайских лекарственных материалов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017381038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD5243V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Sitosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;C18 column</td>
			<td>Yuexu Material Technology Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>Welch Ultimate LP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Guoqiang Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>19020103</td>
			<td>CMT-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongya Wawushan Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200701</td>
			<td>CMT-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Hongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210701</td>
			<td>CMT-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Haobo Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>210401</td>
			<td>CMT-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Xinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>200901</td>
			<td>CMT-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Wusheng Pharmaceutical Group Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201201</td>
			<td>CMT-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Limin Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Sichuan, China&#160;</td>
			<td>201001</td>
			<td>CMT-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuanmutong</td>
			<td>Yuhetang Pharmaceutical Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>210501</td>
			<td>CMT-10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis argentilucida (Levl. et Vant.) W. T. Wang</td>
			<td>Madzi Bridge, Sanlang Township, Tianquan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>CC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis apiifolia var. obtusidentata Rehd. et Wils.</td>
			<td>Heilin Village, Qiliping Township, Hongya County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis peterae Hand.-Mazz.</td>
			<td>Huangmu Village, Huangmu Township, Hanyuan County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>DE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis gouriana Roxb. Var. finetii Rehd. et Wils</td>
			<td>Mixedang Mountain, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>XS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clematis finetiana Levl. et Vaniot.</td>
			<td>Wannian Village, Huangwan Township, Emei County, Sichuan, China&#160;</td>
			<td>-</td>
			<td>SMT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Shanghai,&#160; China&#160;</td>
			<td>FA1204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ergosterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd, Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2021112602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2017042043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>2016062901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography</td>
			<td>Agilent, USA.</td>
			<td>1260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBM SPSS Statistics version 26.0</td>
			<td>International Business Machines Corporation, USA</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160; Trading Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>WXBD6409V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Kelon Chemical Co., Ltd., Chengdu, China</td>
			<td>202010302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-butyl alcohol</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020071047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petroleum ether</td>
			<td>Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>2020090125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid</td>
			<td>Comeo Chemical Reagent Co., Ltd., Tianjin, China</td>
			<td>20200110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SESCF-TCM version 2012</td>
			<td>National Pharmacopoeia Commission, China</td>
			<td>-</td>
			<td>http://114.247.108.158:8888/login</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stigmasterol</td>
			<td>Meisai Biological Technology Co., Ltd., Chongqing, China</td>
			<td>20210201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloromethane</td>
			<td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., Shanghai, China</td>
			<td>20200214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umetrics SIMCA version 14.1.0.2047</td>
			<td>Umetrics, Sweden</td>
			<td>-</td>
			<td>https://www.sartorius.com/en/products/process-analytical-technology/data-analytics-software/mvda-software/simca/simca-free-trial-download</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water machine</td>
			<td>Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd., Sichuan, China</td>
			<td>UPH-II-10T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>Kunshan Hechuang Ultrasound Instrument Co., Ltd., Jiangsu, China</td>
			<td>KH3200E</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

hplc coupled with chemical fingerprinting for multi-pattern recognition for identifying the authenticity of clematidis armandii caulis

Метод идентификации китайских лекарственных материалов и связанных с ними фаяльсий был построен на примере Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, повсеместно используемая традиционная китайская медицина). Десять партий подлинных сортов Чуаньмутонг и пять партий родственных фальсификатов были проанализированы и сопоставлены на основе высокоэффективных отпечатков пальцев жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с хемометрией, включая кластерный анализ (CA), анализ главных компонентов (PCA) и ортогональный частичный анализ дискриминации наименьших квадратов (OPLS-DA). Кроме того, определяли содержание β-ситостерина. Контрольный химический отпечаток Чуаньмутонга был установлен, и было идентифицировано 12 общих пиков. Сходство между отпечатком пальца 10 партий подлинных разновидностей Chuanmutong и контрольным отпечатком пальца составляло 0,910-0,989, в то время как сходство пяти партий фальсификатов составляло всего 0,133-0,720. Основываясь на общих пиках в хроматограмме, 15 партий образцов были классифицированы по трем уровням содержания PCA и были агрегированы в четыре категории CA, что позволило провести четкое различие между подлинными chuanmutong и фальсификатами Chuanmutong. Кроме того, семь дифференциальных компонентов, которые могут эффективно идентифицировать подлинный Чуаньмутонг и фальсификаторы Чуаньмутонга, были обнаружены с помощью OPLS-DA. Содержание β-ситостерина в 10 партиях подлинных сортов Чуаньмутонг составляло 97,53-161,56 мкг/г, в то время как содержание β-ситостерола в пяти партиях фальсификатов сильно варьировалось, среди которых содержание β-ситостерола в Клематис петера Хэнд.-Мазз. и Клематис гуриана Роксб. Var. finetii Rehd. и Уилс. был значительно ниже, чем у аутентичных сортов Чуаньмутонг. Содержание компонентов индекса ВЭЖХ и химический метод распознавания нескольких образов отпечатков пальцев, установленный в этом исследовании, обеспечивают новую стратегию эффективной идентификации подлинных китайских лекарственных материалов и связанных с ними фальсификатов.

Хроматографический отпечаток чуаньмутонга и анализ подобия (SA) Значения RSD относительного времени удержания точности, повторяемости и стабильности были ниже 0,46%, 1,65% и 0,53% соответственно; значения RSD относительной пиковой области были ниже 4,23%, 3,56% и 3,96% соответственно. Как пок?...

Watch this Scientific Journal Video about HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis at JoVE.com

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

Здесь мы представляем протокол для создания высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с химическим распознаванием отпечатков пальцев с несколькими образами, который обеспечивает новую стратегию эффективной идентификации подлинных сортов Clematidis Armandii Caulis и его фальсификаторов.

ВЭЖХ в сочетании с химическими отпечатками пальцев для распознавания нескольких образов для идентификации подлинности Clematidis Armandii Caulis

A method for identifying Chinese medicinal materials and their related adulterants was constructed by taking Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, a ...

Этот протокол может обеспечить новую стратегию для эффективной идентификации подлинных материалов Clematidis armandii caulis и его фальсификаторов. Этот метод может быть использован в исследованиях качества лекарственного материала и является справочным материалом для изучения стандартов качества других китайских лекарственных материалов. Для начала пробоподготовки сырье измельчают до однородного размера частиц, пропуская их через нейлоновую сетку с соответствующим внутренним диаметром.При переносе точно взвешивали два грамма молотого сырья в закупоренную коническую колбу объемом 50 миллилитров перед добавлением в колбу 50 миллилитров метанола. Поставьте пробку на колбу в ультразвуковом нагреве при 600 Вт и 40 килогерцах в течение 30 минут. В конце инкубации процедите раствор лекарственного экстракта через фильтровальную бумагу.После процеживания переложите четыре миллилитра раствора метанола, содержащего лекарственные экстракты, в объемную колбу объемом 10 миллилитров. Затем добавьте в него шесть миллилитров воды и перемешайте раствор. Дайте раствору отстояться в течение 10 минут.Для ВЭЖХ-анализа образцов. Начните с подготовки подвижных фаз и установите программу градиента ВЭЖХ, как описано в рукописи. Отфильтруйте образец через 0,45-микропористую фильтрующую мембрану и подвергните его анализу ВЭЖХ.Для каждого образца выполняйте анализ шесть раз в день. Чтобы оценить стабильность пробного раствора, анализируют тот же образец раствора, хранящегося при комнатной температуре в течение 0, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 часов после приготовления. Возьмите шесть реплик одного и того же образца и обнаружите его отпечаток пальца в ВЭЖХ.Импортируйте соответствующие данные в программное обеспечение под названием «Система оценки сходства хроматографических отпечатков пальцев традиционной китайской медицины» или SESCF TCM версии 2012 года. Импортируйте время хранения и пиковую зону для всех 10 партий подлинных образцов Chuanmutong, а также пяти партий фальсификатов в SESCF TCM для анализа. В главном меню нажмите на заданный эталонный спектр и перейдите в окно настроек параметров, чтобы установить эталонный хроматографический отпечаток аутентичного вида Chuanmutong в качестве эталона.Затем установите метод генерации контрольного спектра в качестве медианного метода с шириной временного окна 0,5. Затем щелкните многоточечную калибровку в главном меню, выберите пики, а затем выберите опцию сопоставления пиков как отмеченные пики. Наконец, нажмите «Рассчитать сходство», чтобы выполнить анализ сходства образцов на основе отпечатков пальцев эталонной хроматограммы Chuanmutong.Для выполнения системного кластерного анализа откройте соответствующее программное обеспечение для статистического анализа и нажмите на файл, чтобы импортировать данные 10 партий аутентичных образцов и пяти партий фальсификатов в программное обеспечение. В меню На вкладке Классификация выберите пункт Анализ и кластеризация системы. Выберите общие пиковые области из 10 партий подлинных образцов и пяти партий фальсификатов в качестве переменных.Задайте для числа кластеров значение четыре. Затем щелкните Метод, чтобы выбрать Метод кластеризации в качестве межгруппового соединения. Выберите интервал измерения в качестве корреляции Пирсона и используйте вкладку Okay для рисования карты кластерного анализа.Для анализа основных компонентов или PCA откройте программное обеспечение для анализа данных. Нажмите на файл в меню, и создайте новый обычный проект. Импортируйте пиковую область из 12 общих пиков в Excel или аналогичную электронную таблицу из системы ВЭЖХ.Нажмите кнопку Готово, чтобы завершить импорт данных. Чтобы задать тип модели с помощью PCA, нажмите кнопку Создать, чтобы создать новую модель, а затем поместите данные с помощью автоподбора и добавления вкладок. Перейдите к баллам, чтобы получить карту результатов PCA.Использовать ортогональный анализ дискриминации с частичными наименьшими квадратами или OPLSDA. Создайте карту оценок PCA, как показано ранее. Задайте тип модели с помощью OPLSDA, щелкнув New и New As model one Прежде чем перейти к масштабированию при выборе par для всех, затем нажмите AutoFit в оценках, чтобы создать карту оценок OPLSDA.Чтобы оценить важность переменной и проекцию, перейдите в меню программного обеспечения для анализа данных и перейдите в раздел Анализ, а затем установите число равным 200 под каждой мутацией. Получите значения квадрата R и квадрата Q из балла OPLSDA и нажмите на VIP и VIP прогноз, чтобы получить VIP-карту. Отпечатки ВЭЖХ 10 подлинных образцов Chuanmutong показали 12 различных общих пиков, из которых относительно большие и хорошо разрешенные.Пиковое число 10 использовалось в качестве эталонного пика для оценки относительного времени удержания остальных пиков. Подлинные образцы продемонстрировали степень сходства, очень близкую к той, которая подразумевает высокое сходство в хорошей консистенции. Однако степень сходства между пятью партиями фальсификатов и контрольным чуаньмутонгом была довольно низкой.Было отмечено, что отпечатки пальцев ВЭЖХ пяти фальсификаторов отличаются от подлинных образцов, главным образом в регионе, где время хранения составляет от 28 до 55 минут. PCA показал очевидное сходство между аутентичными разновидностями и их отличие от фальсификатов, за исключением фальсифицированного CC.Аналогичные результаты были также получены из кластерного анализа, когда классификационное расстояние составляло 20. Матрица баллов, полученная из OPLSDA, не показала пересечения между точками выборки подлинных образцов и фальсификатами.Опять же, фальсифицированный CC напоминал аутентичные сорта больше, чем другие фальсификаторы. Согласно VIP-карте, пики, имеющие значения больше единицы, были идентифицированы как основные маркерные компоненты, вызывающие разницу между подлинными образцами и фальсификатами. Содержание бета-ситостерина, активного компонента, обнаруженного в Чуаньмутонге, было обнаружено во всех пяти партиях фальсификатов, но содержание сильно варьировалось.Этот протокол устанавливает различные методы анализа, чтобы отразить всю информацию о лекарственных материалах с разных точек зрения и во всем способе оценки подлинности лекарственных материалов Chuanmutong.

Research

JoVE Journal

Chemistry

HPLC Coupled with Chemical Fingerprinting for Multi-Pattern Recognition for Identifying the Authenticity of Clematidis Armandii Caulis

Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides

Подготовка высоко пористый Координационного полимерных покрытий на макропористых полимерных монолитов для повышенного обогащения фосфопептидов

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous ...

Facile Synthesis of Worm-like Micelles by Visible Light Mediated Dispersion Polymerization Using Photoredox Catalyst

Facile Синтез червеобразных мицелл с помощью видимого света опосредованного дисперсионной полимеризации с использованием Photoredox Catalyst

Presented herein is a protocol for the facile synthesis of worm-like micelles by visible light mediated dispersion polymerization. This approach begins ...

Determining the Chemical Composition of Corrosion Inhibitor/Metal Interfaces with XPS: Minimizing Post Immersion Oxidation

Определение химического состава ингибитора коррозии / Metal Интерфейсы с XPS: Минимизация Сообщение Погружение Окисление

An approach for acquiring more reliable X-ray photoelectron spectroscopy data from corrosion inhibitor/metal interfaces is described. More specifically, ...

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography (HPLC)

A Straightforward Method for Glucosinolate Extraction and Analysis with High-pressure Liquid Chromatography HPLC

Прямолинейный метод глюкозинолатов экстракции и анализа с высоким давлением жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)

Glucosinolates are a well-studied and highly diverse class of natural plant compounds. They play important roles in plant resistance, rapeseed oil ...

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

Chemical Precipitation Method for the Synthesis of Nb2O5 Modified Bulk Nickel Catalysts with High Specific Surface Area

Метод химического осаждения для синтеза Nb2O5 изменение массовых никель катализаторов с высокой удельной площади поверхности

We demonstrate a method for the synthesis of NixNb1-xO catalysts with sponge-like and fold-like nanostructures. By varying the Nb:Ni ratio, a series of ...

Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery

Метионин функционально совместимые биосовместимые блок кополимеры для целевой плазмидной доставки ДНК

Reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization integrates the advantages of radical polymerization and living polymerization. This ...

Extraction of Lignin with High &#946;-O-4 Content by Mild Ethanol Extraction and Its Effect on the Depolymerization Yield

Извлечение лигнина с высоким содержанием β-O-4 мягкая этанола добычи и его влияние на урожайность деполимеризации

Lignin valorization strategies are a key factor for achieving more economically competitive biorefineries based on lignocellulosic biomass. Most of the ...

A Two-Step Pyrolysis-Gas Chromatography Method with Mass Spectrometric Detection for Identification of Tattoo Ink Ingredients and Counterfeit Products

Двухступенчатый пиролиза-газ хроматографии метод с масс спектрометрическое обнаружение для идентификации татуировки чернила ингредиенты и контрафактной продукции

Tattoo inks are complex mixtures of ingredients. Each of them possesses different chemical properties which have to be addressed upon chemical analysis. ...

Tuning the Acidity of Pt/ CNTs Catalysts for Hydrodeoxygenation of Diphenyl Ether

Настройка кислотности катализаторов Pt/ CNTs для гидродезоксигенации дифенилового эфира

We herein present a method for the synthesis of HNbWO6, HNbMoO6, HTaWO6 solid acid nanosheet modified Pt/CNTs. By varying the weight of various solid acid ...

Integrated Cell Manipulation Platform Coupled with the Single-probe for Mass Spectrometry Analysis of Drugs and Metabolites in Single Suspension Cells

Интегрированная платформа манипулирования ячейками в сочетании с однозондом для анализа масс-спектрометрии наркотиков и метаболитов в односуспевающих клетках

Single cell mass spectrometry (SCMS) enables sensitive detection and accurate analysis of broad ranges of cellular species on the individual-cell level. ...