Name: analysis of raw and processed cyperi rhizoma samples using liquid chromatography-tandem mass spectrometry in rats with primary dysmenorrhea
Uploaded: 2022-12-23T14:40:00
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इस काम को चोंगकिंग नगरपालिका स्वास्थ्य और परिवार नियोजन आयोग चीनी चिकित्सा विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना (परियोजना संख्या: ZY201802297), चोंगकिंग प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन की सामान्य परियोजना (परियोजना संख्या: cstc2019jcyj-msxmX065), चोंगकिंग आधुनिक पर्वत क्षेत्र विशेषता उच्च दक्षता कृषि प्रौद्योगिकी प्रणाली नवाचार टीम बिल्डिंग प्लान 2022 [10], और चोंगकिंग नगरपालिका स्वास्थ्य आयोग चीनी मटेरिया की प्रमुख अनुशासन निर्माण परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था। मेडिका प्रोसेसिंग।

सभी पशु-संबंधित प्रयोगों को टीसीएम के चोंगकिंग संस्थान की प्रयोग आचार समिति से अनुमोदन के साथ आयोजित किया गया था। चौबीस मादा स्प्राग डॉवले चूहों (एसडी) जो 8-10 सप्ताह के थे और जिनका वजन 200 ग्राम ± 20 ग्राम था, ...

टीसीएम की विस्तृत विविधता और विभिन्न प्रकृति के कारण, ये जड़ी-बूटियां कभी-कभी नैदानिक अभ्यास में काम नहीं करती हैं, और यह टीसीएम के अनुचित प्रसंस्करण और काढ़ा के कारण हो सकता है। टीसीएम के तंत्र समकाली?...

प्राथमिक डिसमेनोरिया (पीडी) नैदानिक स्त्री रोग में सबसे प्रचलित स्थिति है। यह प्रजनन प्रणाली में श्रोणि विकृति के बिना मासिक धर्म से पहले या दौरान पीठ दर्द, सूजन, पेट दर्द या असुविधा की विशेषताहै। इसके प्रसार पर एक रिपोर्ट से पता चला है कि 85.7% छात्र पीडी2 से पीड़ित हैं। कम खुराक वाले मौखिक गर्भ निरोधक मानक चिकित्सा हैं, लेकिन उनके प्रतिकूल दुष्प्रभाव, जैसे कि गहरी नस घनास्त्रता, ने बढ़ते ध्यान को आकर्षितकिया है। मौखिक गर्भनिरोधक उपयोगकर्ताओं के बीच गहरी नस घनास्त्रता का प्रसार प्रति 1,000 महिलाओं में >1 है, और जोखिम पहले 6-12 महीनों के दौरान और 40वर्ष से अधिक उम्र के उपयोगकर्ताओं में सबसे अधिक है।
पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में लंबे समय तक उपयोग किया जाता है, साइपरी राइजोमा (सीआर) साइपरेसी परिवार के साइपरस रोटुंडस एल के सूखे राइजोम से लिया गया है। सीआर मासिक धर्म विकारों को नियंत्रित करता है और अवसाद और दर्द से राहतदेता है। सीआर का व्यापक रूप से स्त्री रोग में उपयोग किया जाता है और महिलाओं की बीमारियों के इलाज के लिए एक सामान्य दवा मानाजाता है। सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर आमतौर पर चिकित्सकीय रूप से उपयोग किया जाता है। सीआर की तुलना में, सीआरवी मासिक धर्म और दर्द से राहत के बढ़े हुए विनियमन को दर्शाता है। आधुनिक अध्ययनों से पता चला है कि सीआर साइक्लोऑक्सीजिनेज -2 (सीओएक्स -2) और प्रोस्टाग्लैंडिंस (पीजी) के बाद के संश्लेषण को रोकता है, इस प्रकार एक विरोधी भड़काऊ प्रभाव प्राप्त करता है। इस बीच, सीआर साइड इफेक्ट्स7 के बिना एक एनाल्जेसिक प्रभाव प्रदर्शित करता है, जिससे सीआर डिसमेनोरिया रोगियों के लिए एक अच्छा विकल्प बन जाता है। हालांकि, मासिक धर्म के विनियमन और सीआरवी द्वारा दर्द से राहत के प्रावधान में अंतर्निहित तंत्र स्पष्ट नहीं है। सीआर अनुसंधान ने मुख्य रूप से अपने सक्रिय रासायनिक घटकों और फार्माकोलॉजिकल गतिविधियों में परिवर्तन पर ध्यान केंद्रित किया है, जैसे कि इसके विरोधी भड़काऊ, एंटीडिप्रेसेंट और एनाल्जेसिक प्रभाव 8,9,10,11,12।
यद्यपि टीसीएम के तत्व जटिल हैं, वे रक्त में अवशोषित होते हैंऔर प्रभावी होने के लिए एक विशिष्ट रक्त एकाग्रता तक पहुंचना चाहिए। रक्त में घटक निर्धारण की रणनीति का उपयोग करके टीसीएम के सक्रिय अवयवों की जांच के दायरे को सीमित किया जा सकता है। विट्रो में रासायनिक घटकों का अध्ययन करने में अंधापन से बचा जा सकता है, और व्यक्तिगत घटकोंका अध्ययन करने में एकतरफापन से बचा जा सकता है। रक्त में सीआर और सीआरवी की रचनाओं की तुलना करके, संसाधित सीआर के सक्रिय अवयवों में परिवर्तन का प्रभावी ढंग से और जल्दी से पता लगाया जा सकता है। दवा प्रभावकारिता वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा एक दवा शरीर को प्रभावित करती है। शरीर की चयापचय प्रतिक्रिया के कारण दवा घटकों में परिवर्तन, जो दवा के क्रिया तंत्र से संबंधित हो सकता है, मेटाबोनोमिक्स के साथ निर्धारित किया जा सकता है। मेटाबोनोमिक्स का उद्देश्य समग्र और गतिशील चयापचय प्रतिक्रियाओं को मापना है, जो पारंपरिक चीनी चिकित्सा15 की समग्र प्रभावकारिता को निर्धारित करने के अनुरूप है। इसके अलावा, मेटाबोलाइट्स जीन अभिव्यक्ति का अंतिम उत्पाद हैं, जो फेनोटाइप16 से सबसे निकटता से संबंधित है। तरल क्रोमैटोग्राफी-उच्च-रिज़ॉल्यूशन टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस / एमएस) -आधारित अलक्षित मेटाबोलॉमिक्स को उच्च थ्रूपुट, उच्च संवेदनशीलता और उच्च रिज़ॉल्यूशन की विशेषता है और इसका उपयोग कई अलग-अलग छोटे आणविकघटकों को मापने के लिए किया जा सकता है 17,18 . यह विधि एक साथ रक्त में अवशोषित अंतर्जात मेटाबोलाइट्स और बहिर्जात घटकों को निर्धारित कर सकती है। मेटाबोनॉमिक्स का व्यापक रूप से टीसीएम19, ड्रग टॉक्सिकोलॉजी20, स्वास्थ्य प्रबंधन21, स्पोर्ट्स 22, फूड23 और अन्य क्षेत्रों पर अध्ययन में उपयोग किया गया है।
इस अध्ययन में, रक्त में अवशोषित बहिर्जात घटकों और अंतर्जात मेटाबोलाइट्स में अंतर को सीआरवी के एनाल्जेसिक प्रभावों के तंत्र को प्रकट करने के लिए एलसी-एमएस / एमएस-आधारित अलक्षित मेटाबोलॉमिक्स का उपयोग करके सीआर-उपचारित और सीआरवी-उपचारित डिसमेनोरिया मॉडल चूहों के बीच मापा गया था।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetonitrile&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA</td>
			<td>197164</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BECKMAN COULTER Microfuge 20</td>
			<td>Beckman&#160;Coulter, Inc.</td>
			<td>MRZ15K047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Estradiol benzoate</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd</td>
			<td>C10042616</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>formic acid</td>
			<td>Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA</td>
			<td>177799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LC 30A system</td>
			<td>Shimadzu, Kyoto, Japan</td>
			<td>228-45162-46</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olive oil</td>
			<td>Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>H25A11P111909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxytocin synthetic</td>
			<td>Zhejiang peptide biology Co., Ltd&#160;</td>
			<td>2019092001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat PGF2&#945; ELISA kit</td>
			<td>Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd</td>
			<td>202101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat PGFE2 ELISA kit</td>
			<td>Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd</td>
			<td>EDL202006217</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPF Sprague-Dawley rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd</td>
			<td>Certificate number SCXK (Hunan) 2019-0004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan Infinite 200 PRO&#160;&#160;</td>
			<td>Tecan Austria GmbH, Austria</td>
			<td>1510002987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triple TOF 4600 system</td>
			<td>SCIEX, Framingham, MA, USA</td>
			<td>BK20641402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>water</td>
			<td>Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA</td>
			<td>152720</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of raw and processed cyperi rhizoma samples using liquid chromatography-tandem mass spectrometry in rats with primary dysmenorrhea

साइपेरी राइजोमा (सीआर) का व्यापक रूप से स्त्री रोग में उपयोग किया जाता है और चीन में महिलाओं की बीमारियों के इलाज के लिए एक सामान्य दवा है। चूंकि सिरका के साथ प्रसंस्करण के बाद सीआर के एनाल्जेसिक प्रभाव को बढ़ाया जाता है, सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर आमतौर पर चिकित्सकीय रूप से उपयोग किया जाता है। हालांकि, जिस तंत्र द्वारा एनाल्जेसिक प्रभाव को सिरका प्रसंस्करण द्वारा बढ़ाया जाता है, वह स्पष्ट नहीं है। इस अध्ययन में, अल्ट्रा-हाई प्रेशर लिक्विड क्रोमैटोग्राफीटेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (यूपीएलसी-एमएस /एमएस) तकनीक का उपयोग एक्सोजेनस घटकों और मेटाबोलाइट्स के रक्त स्तर में परिवर्तन की जांच करने के लिए किया गया था। परिणामों से इन चूहों के रक्त में 15 घटकों और दो मेटाबोलाइट्स के अलग-अलग स्तर का पता चला। उनमें से, सीआरवी समूह में (-)-माइर्टेनोल और [(1आर, 2 एस, 3 आर, 4 आर)-3-हाइड्रॉक्सी-1,4,7,7-टेट्रामेथिलबिसाइक्लो[2.2.1]हेपटी-2-वाईएल] एसिटिक एसिड का स्तर सीआर समूह की तुलना में काफी अधिक था। सीआरवी ने प्रोइन्फ्लेमेटरी, प्लेटलेट एकत्रीकरण और वाहिकासंकीर्णन गतिविधियों के साथ 2-श्रृंखला प्रोस्टानोइड्स और 4-श्रृंखला ल्यूकोट्रिएन के स्तर को कम किया और एराकिडोनिक एसिड और लिनोलिक एसिड चयापचय और असंतृप्त फैटी एसिड के जैवसंश्लेषण को संशोधित करके एनाल्जेसिक प्रभाव प्रदान किया। इस अध्ययन से पता चला है कि सिरका प्रसंस्करण सीआर के एनाल्जेसिक प्रभाव को बढ़ाता है और सीआरवी की कार्रवाई के तंत्र की हमारी समझ में योगदान देता है।

डिसमेनोरिया मॉडल प्रयोग का विश्लेषण नियंत्रण समूह में 30 मिनट के भीतर कोई रिटिंग प्रतिक्रिया नहीं थी क्योंकि इन चूहों को दर्द पैदा करने के लिए ऑक्सीटोसिन और एस्ट्राडियोल बेंजोएट के साथ इंट्रा?...

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Analysis of Raw and Processed Cyperi Rhizoma Samples Using Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry in Rats with Primary Dysmenorrhea

यहां, प्राथमिक डिसमेनोरिया वाले चूहों में अल्ट्रा-हाई परफॉर्मेंस लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-हाई-रिज़ॉल्यूशन टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (यूपीएलसी-एमएस / एमएस) का उपयोग करके कच्चे और संसाधित साइपरी राइजोमा (सीआर) नमूनों का तुलनात्मक विश्लेषण प्रस्तुत किया जाता है। मेटाबोलाइट्स और नमूना घटकों के रक्त स्तर में परिवर्तन की जांच सिरका (सीआरवी) के साथ संसाधित सीआर और सीआर के साथ इलाज किए गए चूहों के बीच की गई थी।

प्राथमिक डिसमेनोरिया वाले चूहों में तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री का उपयोग करके कच्चे और संसाधित साइपेरी राइजोमा नमूनों का विश्लेषण

Cyperi rhizoma (CR) is widely used in gynecology and is a general medicine for treating women's diseases in China. Since the analgesic effect of CR is ...

मेटाबोनोमिक्स समग्र और गतिशील चयापचय प्रतिक्रियाओं को मापता है और पारंपरिक चीनी चिकित्सा की समग्र प्रभावकारिता को निर्धारित करने के अनुरूप है। शरीर की चयापचय प्रतिक्रिया के कारण दवा घटकों में परिवर्तन मेटाबोनोमिक्स के साथ निर्धारित किया जा सकता है। इस तकनीक का उपयोग करके टीसीएम के सक्रिय अवयवों की स्क्रीनिंग के दायरे को कम किया जा सकता है।व्यक्तिगत घटकों का अध्ययन करके एकतरफापन से बचा जा सकता है। यह विधि एक साथ हो सकती है, रक्त में अवशोषित अंतर्जात मेटाबोलाइट्स और बहिर्जात घटकों को निर्धारित करती है। मेटाबोनोमिक्स का व्यापक रूप से टीसीएम, ड्रग टॉक्सिकोलॉजी, स्वास्थ्य प्रबंधन, खेल, भोजन और अन्य क्षेत्रों पर अध्ययन में उपयोग किया गया है।शुरू करने के लिए, तीन दिनों के लिए छह स्प्राग डॉवले चूहों के एक समूह का इलाज करने के लिए सिरका, या सीआरवी के साथ संसाधित साइपरी राइजोमा, या साइपेरी राइजोमा के आवश्यक अर्क को निर्धारित करें। इस समीकरण का उपयोग करके प्रति चूहे लागू होने वाले सीआर या सीआरवी की मात्रा की गणना करें। सीआरवी को संसाधित करने के लिए, 100 ग्राम सीआर और 20 ग्राम सिरका को अच्छी तरह से मिलाएं, जिसमें प्रति 100 मिलीलीटर में 5.5 ग्राम से अधिक एसिटिक एसिड होता है, और 12 घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।इनक्यूबेशन के बाद, मिश्रण को लोहे के पैन में 110 से 120 डिग्री सेल्सियस पर 10 मिनट के लिए भूनें। फिर, मिश्रण को हटा दें, और इसे कमरे के तापमान पर ठंडा होने दें। सीआर अर्क तैयार करने के लिए, सीआर को सीआर की मात्रा से 10 गुना शुद्ध पानी के साथ दो घंटे के लिए भिगोदें, यह सुनिश्चित करें कि औषधीय सामग्री तरल स्तर से नीचे है।इसके बाद, पानी और दवा के मिश्रण को उच्च गर्मी पर उबालने के लिए लाएं, और इसे 20 मिनट के लिए कम गर्मी पर उबलने के लिए रखें। फिर, सामग्री को 100 जाल फिल्टर कपड़े के माध्यम से फ़िल्टर करें, और छानना एकत्र करें। फिर, एकत्रित छानने को रोटरी बाष्पीकरणकर्ता के साथ एक अर्क में एक ग्राम प्रति मिलीलीटर पर केंद्रित करें।सीआरवी अर्क तैयार करने के लिए, सीआर निष्कर्षण के लिए दिखाए गए अनुसार भिगोने, उबालने और ध्यान केंद्रित करने के चरणों का प्रदर्शन करें। सीआर और सीआरवी अर्क का परीक्षण करने के लिए, 1.5-मिलीलीटर माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में मेथनॉल के 500 माइक्रोलीटर तक अर्क के 500 माइक्रोलीटर और मिश्रण करने के लिए 30 सेकंड के लिए भंवर। नमूनों को 15 मिनट के लिए 16,500 ग्राम पर चार डिग्री सेल्सियस पर सेंट्रीफ्यूज करें।फिर, सतह पर तैरने वाले को हटा दें, और इसे परीक्षण के लिए नमूना शीशी में स्थानांतरित करें। नमूने का परीक्षण करने के बाद, विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके प्रमुख घटक विश्लेषण, या पीसीए, और मॉडलिंग करें। मेटाबोलाइट्स के मानकीकृत डेटा को सॉफ़्टवेयर में आयात करें, और फिर विश्लेषण मॉडल बनाने के लिए ऑटोफिट का उपयोग करें।अंत में, पीसीए के स्कोर स्कैटर प्लॉट प्राप्त करने के लिए स्कोर का उपयोग करें। ऑर्थोगोनल आंशिक कम से कम वर्ग भेदभाव विश्लेषण, या ओपीएलएस-डीए करने के लिए, मेटाबोलाइट्स और सीआर और सीआरवी समूहों पर मानकीकृत डेटा को सॉफ्टवेयर में आयात करें। फिर, CR और CRV डेटा को उनके संबंधित समूहों में आयात करें।फिर, विश्लेषण मॉडल बनाने के लिए ऑटोफिट का उपयोग करें, और ओपीएलएस-डीए के स्कोर स्कैटर प्लॉट प्राप्त करने के लिए स्कोर का उपयोग करें। अंत में, ओपीएलएस-डीए में प्रक्षेपण या वीआईपी मूल्य में परिवर्तनीय महत्व प्राप्त करने के लिए वीआईपी का उपयोग करें। संभावित अंतर मेटाबोलाइट्स की पहचान करने के लिए, मेटाबोलाइट्स को एक से अधिक वीआईपी मानों के साथ स्क्रीन करें।फिर, छात्र के टी-टेस्ट द्वारा स्क्रीन किए गए मेटाबोलाइट्स के पी-वैल्यू की गणना करने के लिए सांख्यिकीय सॉफ़्टवेयर का उपयोग करें। इसके बाद, अंतर मेटाबोलाइट्स की पहचान करने के लिए, एनोटेटेड मेटाबोलाइट्स का उपयोग करें, और केईजीजी डेटाबेस में मिलान किए जाने वाले अंतर मेटाबोलाइट्स को स्क्रीन करें। एक गर्मी मानचित्र खींचकर सीआर और सीआरवी समूहों में अंतर मेटाबोलाइट्स में परिवर्तन दिखाएं।संभावित चयापचय मार्गों की जांच करने के लिए, मेटाबोएनालिस्ट डेटाबेस पर जाएं। संभावित चयापचय मार्गों को प्राप्त करने के लिए विभिन्न मेटाबोलाइट्स को अपलोड करने के लिए पाथवेज विश्लेषण का उपयोग करें। संभावित चयापचय मार्गों का विश्लेषण करने के लिए केईजीजी डेटाबेस में विभिन्न मेटाबोलाइट्स अपलोड करें।विश्लेषण किए गए डिसमेनोरिया मॉडल प्रयोग ने प्रोस्टाग्लैंडीन के स्तर में महत्वपूर्ण अंतर दिखाया। मॉडल सीआर और सीआरवी समूहों में चूहों ने ऑक्सीटोसिन इंजेक्शन के बाद पर्याप्त रिटिंग प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन किया। पीसीए विश्लेषण परिणामों से पता चला है कि मॉडल समूहों की तुलना में सीआर और सीआरवी के क्लस्टर सकारात्मक और नकारात्मक आयन मोड दोनों में काफी अलग थे।ओपीएलएस-डीए का उपयोग चयापचय मतभेदों के लिए स्क्रीन करने के लिए किया गया था, और स्कैटर प्लॉट परिणामों ने प्रदर्शित किया कि सीआर और सीआरवी समूह अलग हो गए थे। चयापचय विविधताओं की पहचान करने के लिए अनौपचारिक सांख्यिकीय विश्लेषण किए गए थे। एक ज्वालामुखी प्लॉट दिखाया गया है, जिसमें प्रत्येक बिंदु एक अलग मेटाबोलाइट से मेल खाता है।सकारात्मक मोड में 63 मेटाबोलाइट्स और नकारात्मक मोड में 30 मेटाबोलाइट्स में महत्वपूर्ण परिवर्तन देखे गए। विभेदक मेटाबोलाइट्स को केईजीजी और एचडीएमबी डेटाबेस का उपयोग करके निर्धारित किया गया था, और सटीक रूप से मिलान किए गए यौगिकों को सूचीबद्ध किया गया था। सीआर और सीआरवी समूहों के बीच अंतर मेटाबोलाइट्स के मात्रात्मक मूल्यों की गणना और क्लस्टरिंग की गई थी।रंग पैच इंगित करते हैं कि प्रत्येक मेटाबोलाइट को दूसरों के सापेक्ष कैसे व्यक्त किया जाता है। सीआर समूह की तुलना में, सीआरवी समूह में चार अंतर मेटाबोलाइट्स के स्तर में वृद्धि हुई जबकि सकारात्मक आयन मोड में 11 मेटाबोलाइट्स में कमी आई। नकारात्मक आयन मोड के मामले में, चार अंतर मेटाबोलाइट्स में वृद्धि हुई, और सात मेटाबोलाइट्स में कमी आई।केईजीजी मार्ग विश्लेषण परिणामों से पता चला है कि अंतर मेटाबोलाइट्स सकारात्मक और नकारात्मक मोड में नौ मार्गों से जुड़े थे। जितने अधिक अंतर मेटाबोलाइट्स होंगे, परिणाम उतने ही बेहतर होंगे, इसलिए पर्याप्त चयापचय मार्गों को जोड़ा जा सकता है और जांच किए गए प्रमुख चयापचय मार्ग अधिक सटीक होंगे।

Research

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Medicine

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