Name: differentiation of functional osteoclasts from human peripheral blood cd14+ monocytes
Uploaded: 2023-01-27T13:15:00
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ओस्टियोक्लास्ट (ओसी) हेमटोपोइएटिक वंश की बहुराष्ट्रीय विशाल कोशिकाएं हैं जिनमें हड्डी को पुनर्जीवित करने की अनूठी क्षमता होती है। वे कंकाल 1,2 के विकास और निरंतर रीमॉडेलिंग के लिए जिम्मेदार हैं। विकास के कंकाल चरणों में, ओसी और ऊतक-निवासी मैक्रोफेज एरिथ्रो-माइलॉयड पूर्वजों से प्राप्त होते हैं और हड्डी के आला और अंग ऊतकों को उपनिवेशित करते हैं। शारीरिक स्थितियों में, एरिथ्रो-माइलॉयड पूर्वजों को सामान्य हड्डी के विकास और दांत विस्फोट के लिए आवश्यक होता है, जबकि अस्थि आला में परिसंचारी रक्त मोनोसाइट्स का प्रवाह ओसी, हड्डी द्रव्यमान और अस्थि मज्जा गुहा3 के प्रसवोत्तर रखरखाव प्रदान करता है। पैथोलॉजिकल स्थितियों के तहत, मोनोसाइट्स को सक्रिय सूजन की साइटों पर भर्ती किया जाता है और पैथोलॉजिकल हड्डी विनाश में योगदान कर सकता है 4,5.
गठिया के कई रूपों वाले रोगी संयुक्त सूजन का अनुभव करते हैं, जिससे ओसी6 के कारण प्रगतिशील संयुक्त विनाश होता है। उदाहरण के लिए, रुमेटीइड गठिया (आरए) में, अतिसक्रिय ओसी पैथोलॉजिकल हड्डी के क्षरण और संयुक्त विनाश7,8 के लिए जिम्मेदार हैं, और वर्तमान उपचार अक्सर हड्डी की क्षति में सुधार या रोक नहीं देते हैं 9,10,11. आरए रोगियों12,13,14 में जनसंख्या वितरण और ट्रांसक्रिप्टोमिक और एपिजेनेटिक हस्ताक्षर दोनों के संदर्भ में मोनोसाइट्स को प्रसारित करने में परिवर्तन की सूचना दी गई है। इसके अलावा, यह बताया गया है कि भड़काऊ उत्तेजना के लिए परिवर्तित मोनोसाइट प्रतिक्रियाएं सक्रिय रोग15,16,17 के साथ आरए रोगियों में ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस को प्रभावित करती हैं।
ओसी का भेदभाव एक जटिल मल्टीस्टेप प्रक्रिया है जिसमें ओसी अग्रदूतों में भेदभाव के लिए माइलॉयड अग्रदूत कोशिकाओं की प्रतिबद्धता शामिल है। ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस के दौरान, ओसी सेल-सेल संलयन, अपूर्ण साइटोकिनेसिस और एक परमाणु रीसाइक्लिंग प्रक्रिया के माध्यम से विशाल और बहुउद्देशीय हो जाते हैं जिसे विखंडन और संलयन 18,19,20 के रूप में वर्णित किया गया है। विट्रो में ओसी को अलग करने की क्षमता ने हड्डी जीव विज्ञान की समझ में महत्वपूर्ण प्रगति की अनुमति दीहै। मैक्रोफेज कॉलोनी-उत्तेजक कारक (एम-सीएसएफ) और परमाणु कारक कप्पा-बी लिगैंड (रैंकएल) के रिसेप्टर एक्टिवेटर के संपर्क में आने पर ओसी अग्रदूतों से अलग होते हैं। उत्तरार्द्ध विट्रो और विवो में ओसी के सामान्य विकास और कार्य के लिए आवश्यक है, यहां तक किभड़काऊ स्थितियों 6,22,23 के तहत भी। रैंकएल ओस्टियोब्लास्ट और ओस्टियोसाइट्स द्वारा प्रस्तुत किया जाता है, साथ ही सक्रिय टी कोशिकाओं और फाइब्रोब्लास्ट ्स द्वारा सूजन आरए सिनोवियम 2,24,25 में प्रस्तुत किया जाता है। ओसी भेदभाव प्रक्रिया के दौरान, एम-सीएसएफ के संपर्क में आने वाले मोनोसाइट्स अपने कोशिका झिल्ली पर परमाणु कारक कप्पा-बी (रैंक) अभिव्यक्ति के रिसेप्टर एक्टिवेटर को विनियमित करते हैं और रैंकएल के साथ बाद की उत्तेजना के तहत, टार्टरेट-प्रतिरोधी एसिड फॉस्फेट (टीआरएपी) -पॉजिटिव मोनोन्यूक्लियर प्री-ओसी और फिर मल्टीन्यूक्लियेटेड ओसी15,26 में अंतर करते हैं। ओसी कई एंजाइमों का उत्पादन करते हैं, उनमें से प्रमुख ट्रैप है, जो हड्डी27 के भीतर फॉस्फोप्रोटीन के क्षरण को सक्षम बनाता है। ओसी भेदभाव का एक नियामक और मार्कर ओसी-संबद्ध रिसेप्टर (ऑस्कर) है। यह ओसी वंश28 के लिए प्रतिबद्ध अग्रदूत कोशिकाओं में जल्दी से विनियमित होता है। परिपक्व विशाल काय बहुराष्ट्रीय ओसी एक बड़े सीलिंग ज़ोन को उत्पन्न करके कंकाल मैट्रिक्स को नीचा (पुनर्जीवित) कर सकते हैं, जो 21,29,30 की एक अशांत सीमा के आसपास एक एक्टिन रिंग से बना है। ओसी की हड्डी पुनर्जीवन क्षमता के लिए साइटोस्केलेटन पुनर्गठन और परिणामस्वरूप ध्रुवीकरण और एक जटिल झिल्ली के गठन की आवश्यकता होती है, जो तथाकथित उबड़-खाबड़ सीमा है। उबड़-खाबड़ सीमा एक एफ-एक्टिन-समृद्ध संरचना के एक बड़े गोलाकार बैंड से घिरी हुई है, जो एक्टिन रिंग या सीलिंग ज़ोन है। इन विट्रो और विवो दोनों में हड्डी को पुनर्जीवित करने के लिए ओसी के लिए एक्टिन रिंग अखंडता आवश्यक है, और दोषपूर्ण रफल्ड बॉर्डर गठन कम वैक्यूलर एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट (वी-एटीपीस) अभिव्यक्ति 31,32,33 से जुड़ा हुआ है। इसके अलावा, ओसी माइटोकॉन्ड्रिया-समृद्ध कोशिकाएं हैं, और एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट (एटीपी)31,32,33 की अशांत सीमा पर स्थानीयकृत ओसी में माइटोकॉन्ड्रियल जैसी संरचनाओं के साथ जुड़ता है। रोटेनोन माइटोकॉन्ड्रियल कॉम्प्लेक्स आई के एक मजबूत अवरोधक के रूप में कार्य करता है और एटीपी उत्पादन को प्रभावित करता है। रोटेनोन को ओसी भेदभाव और फ़ंक्शन34 को बाधित करने के लिए भी दिखाया गया है।
यह प्रोटोकॉल मानव परिधीय रक्त नमूनों से इन विट्रो ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस की एक कुशल और अनुकूलित विधि का वर्णन करता है। मानव परिधीय रक्त में, सीडी 14 + मोनोसाइट्स ओसी 15,35,36 का मुख्य स्रोत हैं। इस प्रोटोकॉल में, एक्सपोजर के कैनेटीक्स और एम-सीएसएफ और रैंकएल की सांद्रता को इष्टतम ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस के लिए समायोजित किया गया है। मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को पहले घनत्व ढाल द्वारा पूरे रक्त में मौजूद एरिथ्रोसाइट्स और ग्रैनुलोसाइट्स से अलग किया जाता है; फिर उन्हें चुंबकीय मोतियों द्वारा सकारात्मक चयन का उपयोग करके सीडी 14 + मोनोसाइट्स के लिए समृद्ध किया जाता है। पृथक सीडी 14+ मोनोसाइट्स को फिर एम-सीएसएफ के साथ रात भर इनक्यूबेट किया जाता है। यह मोनोसाइट्स को रैंक15,26 की अभिव्यक्ति को विनियमित करने के लिए प्रेरित करता है। रैंकएल का बाद का जोड़ ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस और मल्टीन्यूक्लियेशन को समय-निर्भर तरीके से प्रेरित करता है। सक्रिय-पुनर्जीवित ओसी कोशिका झिल्ली30,32 के किनारे पर एफ-एक्टिन रिंग्स का विशिष्ट वितरण दिखाते हैं और ट्रैप के लिए धुंधला हो जाते हैं। परिपक्व ओसी का विश्लेषण ट्रैप + मल्टीन्यूक्लियेटेड (तीन से अधिक नाभिक) कोशिकाओं की मात्रा निर्धारित करके किया जाता है। परिपक्व ओसी की कार्यात्मक क्षमता का मूल्यांकन उनके पुनरुत्थान, एक्टिन रिंग अखंडता और एटीपी उत्पादन द्वारा किया जा सकता है। इसके अलावा, विभेदित सीडी 14 − ऑस्कर + ओसी को समृद्ध किया जा सकता है और खनिज (या डेंटिन) पुनरुत्थान और एफ-एक्टिन संगठन के माध्यम से ओसी कार्यक्षमता पर कुछ यौगिकों के प्रभावों का आकलन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, इस काम में, एक ज्ञात ओसी अवरोधक, रोटेनोन, का उपयोग एक यौगिक के उदाहरण के रूप में किया जाता है जो ओसी की कार्यक्षमता को प्रभावित करता है। रोटेनोन के तहत कम ओसी पुनर्जीवन गतिविधि कम एटीपी उत्पादन और एक्टिन रिंग विखंडन से जुड़ी है। अंत में, यह प्रोटोकॉल एक मजबूत परख स्थापित करता है जिसका उपयोग इन विट्रो में ओसी भेदभाव और कार्य के कई जैविक पहलुओं का अध्ययन करने के लिए एक संदर्भ विधि के रूप में किया जा सकता है।
इस पद्धति का उपयोग (1) स्वास्थ्य और रोगों में ओसी में अंतर करने के लिए मोनोसाइट्स को प्रसारित करने की क्षमता का आकलन करने के लिए किया जा सकता है, साथ ही (2) ओसी भेदभाव और कार्य पर चिकित्सीय उम्मीदवारों का प्रभाव। यह मजबूत ओस्टियोक्लास्टोजेनेसिस प्रोटोकॉल अग्रदूत कोशिकाओं से ओसी भेदभाव और परिपक्व ओसी के कार्य दोनों पर हड्डी-लक्षित उपचारों की प्रभावकारिता और तंत्र के निर्धारण को सक्षम बनाता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#181;-Slide 18 well chamber slides</td>
			<td>ibidi</td>
			<td>81816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-well glass chamber slides&#160;</td>
			<td>Ibidi&#160;</td>
			<td>80807&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well TC plate&#160;</td>
			<td>Corning&#160;</td>
			<td>3596&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well osteo assay stripwell plate&#160;&#160;</td>
			<td>Corning&#160;</td>
			<td>3989&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetate solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>386-3</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone&#160;</td>
			<td>VWR&#160;</td>
			<td>20066.330&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acid phosphatase, Leukocyte (TRAP) kit&#160;</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH&#160;</td>
			<td>387A-1KT&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Theremo Fisher - Invitrogen&#160;</td>
			<td>A12379&#160;</td>
			<td>AF488&#160;&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 Phalloidin</td>
			<td>Thermo Fisher - Invitrogen</td>
			<td>A22287</td>
			<td>AF647</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfa Aesar 2-Deoxy-D-glucose&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>11321867&#160;</td>
			<td>2DG, 98%&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alpha minimum essential medium&#160;</td>
			<td>gibco&#160;</td>
			<td>22571-020&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATPlite 1step&#160;</td>
			<td>PerkinElmer&#160;</td>
			<td>6016731&#160;</td>
			<td>Luminiscence ATP detection assay system&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSAria III cell sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>A9418-100G&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture microplate, 96-well, PS, F-bottom&#160;</td>
			<td>Greiner bio-one&#160;</td>
			<td>655083&#160;</td>
			<td>White-bottom plates&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrate solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>91-5</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 6ml round-bottom polystyrene test tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>352054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning osteo assay surface multiple well plate</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>CLS3989</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning osteo assay Surface multiple well plate 1 x 8 stripwell</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3989-2EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Theremo Fisher &#160;</td>
			<td>D3571&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EasySep human CD14 positive selection kit&#160;</td>
			<td>STEMCELL Technologies&#160;</td>
			<td>17858&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EasySep red blood cell lysis buffer (10x)</td>
			<td>StemCell Technologies&#160;</td>
			<td>20110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eBioscience fixable viability dye eFluor 780</td>
			<td>Theremo Fisher - Invitrogen&#160;</td>
			<td>65-0865-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>E7889-100ML&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS FL auto imaging system</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A32678</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon round-bottom polypropylene test tubes with cap</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10314791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon tubes 15 mL</td>
			<td>Corning&#160;</td>
			<td>430790&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon tubes 50 mL&#160;</td>
			<td>Corning&#160;&#160;</td>
			<td>430828&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Garnet GBC base solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>387-2</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum&#160;</td>
			<td>gibco&#160;</td>
			<td>10500-064&#160;</td>
			<td>FBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus&#160;</td>
			<td>cytiva&#160;</td>
			<td>17144003&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>F-8775&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human sRANK ligand&#160;</td>
			<td>PEPROTECH&#160;</td>
			<td>310-01-100UG&#160;</td>
			<td>Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand&#160;(RANKL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ Image analysis software</td>
			<td>Image J</td>
			<td>version 2.9.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine&#160;</td>
			<td>gibco&#160;</td>
			<td>25030-024&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lithium heparin tubes (9 mL)&#160;</td>
			<td>VACUETTE&#160;</td>
			<td>455084&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macrophage colony-stimulating factor&#160;</td>
			<td>PEPROTECH&#160;</td>
			<td>300-25-100UG&#160;</td>
			<td>&#160;M-CSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Napthol AS-BI phosphoric acid solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>387-1</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neubauer hemacytometer counting chamber&#160;</td>
			<td>Camlab</td>
			<td>SKU 1127885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligomycin from Streptomyces Diastatochromogenes&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>Q4876-5MG&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OSCAR Antibody, anti-human, Vio Bright FITC, REAfinit</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-107-661 and 130-107-617</td>
			<td>Clone REA494</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE/Cyanine7 anti-human CD14 antibody</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>325618</td>
			<td>Clone HCD14&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin/streptomycin&#160;</td>
			<td>SIGMA&#160;</td>
			<td>P0781&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHERAstar machine and software</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (DPBS, 1x)&#160;</td>
			<td>gibco&#160;</td>
			<td>14190-094&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>REA control antibody (S), human IgG1, Vio Bright FITC, REAfinity</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-113-443</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hypochlorite solution&#160;&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>425044-1L&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium nitrite solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>91-4</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tartrate solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>387-3</td>
			<td>from kit Cat No. 387A-1KT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>9002-93-1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>T8154-100ML&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

differentiation of functional osteoclasts from human peripheral blood cd14+ monocytes

ओस्टियोक्लास्ट (ओसी) हड्डी-पुनर्जीवित कोशिकाएं हैं जो कंकाल के विकास और वयस्क हड्डी रीमॉडेलिंग में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती हैं। कई हड्डी विकार ओसी के बढ़ते भेदभाव और सक्रियण के कारण होते हैं, इसलिए इस पैथोबायोलॉजी का निषेध एक महत्वपूर्ण चिकित्सीय सिद्धांत है। दो प्रमुख कारक माइलॉयड अग्रदूतों से ओसी के भेदभाव को चलाते हैं: मैक्रोफेज कॉलोनी-उत्तेजक कारक (एम-सीएसएफ) और परमाणु कारक कप्पा-बी लिगैंड (रैंकएल) के रिसेप्टर एक्टिवेटर। मानव परिसंचारी सीडी 14 + मोनोसाइट्स को लंबे समय से इन विट्रो में ओसी में अंतर करने के लिए जाना जाता है। हालांकि, एक्सपोजर समय और रैंकएल की एकाग्रता भेदभाव दक्षता को प्रभावित करती है। दरअसल, विट्रो में मानव ओसी की पीढ़ी के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन किया गया है, लेकिन वे अक्सर एक खराब और लंबी भेदभाव प्रक्रिया में परिणाम देते हैं। इसमें, समय पर तरीके से कार्यात्मक रूप से सक्रिय परिपक्व मानव ओसी उत्पन्न करने के लिए एक मजबूत और मानकीकृत प्रोटोकॉल प्रदान किया जाता है। सीडी 14+ मोनोसाइट्स मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (पीबीएमसी) से समृद्ध होते हैं और रैंक को विनियमित करने के लिए एम-सीएसएफ के साथ प्राइम किए जाते हैं। रैंकएल के बाद के संपर्क में आने से खुराक और समय-निर्भर तरीके से ओसी उत्पन्न होते हैं। ओसीएस की पहचान टार्टरेट एसिड-प्रतिरोधी फॉस्फेट (टीआरएपी) और प्रकाश माइक्रोस्कोपी विश्लेषण के साथ धुंधला करके की जाती है। कार्यात्मक रूप से सक्रिय ओसी की पहचान करने के लिए नाभिक और एफ-एक्टिन के इम्यूनोफ्लोरेसेंस धुंधला होने का उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, OSCAR + CD14− परिपक्व OCs को फ्लो साइटोमेट्री सेल सॉर्टिंग के माध्यम से और अधिक समृद्ध किया जाता है, और OC कार्यक्षमता खनिज (या डेंटिन / हड्डी) पुनर्जीवन परख और एक्टिन रिंग गठन द्वारा निर्धारित की जाती है। अंत में, एक ज्ञात ओसी अवरोधक, रोटेनोन, परिपक्व ओसी पर उपयोग किया जाता है, यह दर्शाता है कि एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट (एटीपी) उत्पादन एक्टिन रिंग अखंडता और ओसी फ़ंक्शन के लिए आवश्यक है। अंत में, इस काम में उच्च संख्या में ओसी को अलग करने के लिए एक मजबूत परख स्थापित की गई है, जो एक्टिन रिंग स्टेनिंग और एटीपी परख के साथ संयोजन में ओसी फ़ंक्शन का मूल्यांकन करने और नए चिकित्सीय यौगिकों की जांच करने के लिए एक उपयोगी इन विट्रो मॉडल प्रदान करता है जो भेदभाव प्रक्रिया को संशोधित कर सकते हैं।

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Differentiation of Functional Osteoclasts from Human Peripheral Blood CD14+ Monocytes

ओस्टियोक्लास्ट शरीर में प्रमुख हड्डी-पुनर्जीवित कोशिकाएं हैं। यह प्रोटोकॉल मानव परिधीय रक्त मोनोसाइट्स से ओस्टियोक्लास्ट के इन विट्रो भेदभाव के लिए एक विश्वसनीय विधि का वर्णन करता है। इस विधि का उपयोग होमोस्टेसिस और रोगों में ओस्टियोक्लास्ट जीव विज्ञान को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में किया जा सकता है।

मानव परिधीय रक्त सीडी 14 + मोनोसाइट्स से कार्यात्मक ओस्टियोक्लास्ट का भेदभाव

Osteoclasts (OCs) are bone-resorbing cells that play a pivotal role in skeletal development and adult bone remodeling. Several bone disorders are caused ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Differentiation of Functional Osteoclasts from Human Peripheral Blood CD14+ Monocytes

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विस्तार, शोधन, और मानव परिधीय रक्त एन.के. कोशिकाओं के कार्यात्मक मूल्यांकन

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

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Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

मानव परिधीय रक्त का विस्तार γδ टी Zoledronate का उपयोग कक्ष

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

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Monocytes और लघु मानव रक्त के नमूने से वृक्ष के समान कोशिकाओं में वंश - विशिष्ट टोल की तरह रिसेप्टर की मध्यस्थता संकेतन का मात्रात्मक इमेजिंग

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Human immunodeficiency virus (HIV) remains a major health concern despite the introduction of combined antiretroviral therapy (cART) in the mid-1990s. ...