Name: surgical approach, challenges, and resolutions for uterus transplantation in rats
Uploaded: 2023-04-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Approach, Challenges, and Resolutions for Uterus Transplantation in Rats at JoVE.com

Deze studie werd ondersteund door de Swiss National Science Foundation (projectsubsidie nr. 310030_192736). We willen dr. Frauke Seehusen van het Instituut voor Veterinaire Pathologie van de Universiteit van Zürich bedanken voor haar histopathologische ondersteuning.

Alle dierproeven werden uitgevoerd volgens de Zwitserse federale diervoorschriften en goedgekeurd door het Veterinair Bureau van Zürich (nr. 225/2019), waardoor de menselijke zorg werd gewaarborgd. Vrouwelijke maagdelijke Lewis-ratten (lichaamsgewicht van 170-200 g) en vrouwelijke maagdelijke Brown Norway-ratten (170-200 g) werden gebruikt als baarmoederdonoren / ontvangers, terwijl mannelijke Lewis-ratten (300-320 g) werden gebruikt voor de paring. De ratten waren 12-15 maanden oud. De dieren werden verkregen uit comme...

<ol>
	<li>Richards, E. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterus+transplantation:+state+of+the+art+in+2021.">Uterus transplantation: state of the art in 2021.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).</li><li>Jones, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Options+for+acquiring+motherhood+in+absolute+uterine+factor+infertility;+adoption,+surrogacy+and+uterine+transplantation.">Options for acquiring motherhood in absolute uterine factor infertility; adoption, surrogacy and uterine transplantation.</a> The Obstetrician &amp; Gynaecologist. 23 (2), 138-147 (2021).</li><li>Brannstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+first+clinical+trial+of+uterus+transplantation:+surgical+technique+and+outcome.">The first clinical trial of uterus transplantation: surgical technique and outcome.</a> American Journal of Transplantation. 14, 44 (2014).</li><li>Ejzenberg, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+uterus+transplantation+from+a+deceased+donor+in+a+recipient+with+uterine+infertility.">Livebirth after uterus transplantation from a deceased donor in a recipient with uterine infertility.</a> Lancet. 392 (10165), 2697-2704 (2018).</li><li>Lavoue, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+donor+for+uterus+transplants:+brain-dead+donor+or+living+donor?+A+systematic+review.">Which donor for uterus transplants: brain-dead donor or living donor? A systematic review.</a> Transplantation. 101 (2), 267-273 (2017).</li><li>O'Donovan, L., Williams, N. J., Wilkinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+and+policy+issues+raised+by+uterus+transplants.">Ethical and policy issues raised by uterus transplants.</a> British Medical Bulletin. 131 (1), 19-28 (2019).</li><li>Kisu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+outcome+and+rejection+after+allogeneic+uterus+transplantation+in+cynomolgus+macaques.">Long-term outcome and rejection after allogeneic uterus transplantation in cynomolgus macaques.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (10), 1572 (2019).</li><li>Ozkan, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterus+transplantation:+From+animal+models+through+the+first+heart+beating+pregnancy+to+the+first+human+live+birth.">Uterus transplantation: From animal models through the first heart beating pregnancy to the first human live birth.</a> Womens Health. 12 (4), 442-449 (2016).</li><li>Favre-Inhofer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involving+animal+models+in+uterine+transplantation.">Involving animal models in uterine transplantation.</a> Frontiers in Surgery. 9, 830826 (2022).</li><li>El-Akouri, R. R., Wranning, C. A., Molne, J., Kurlberg, G., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+in+transplanted+mouse+uterus+after+long-term+cold+ischaemic+preservation.">Pregnancy in transplanted mouse uterus after long-term cold ischaemic preservation.</a> Human Reproduction. 18 (10), 2024-2030 (2003).</li><li>Sahin, S., Selcuk, S., Eroglu, M., Karateke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterus+transplantation:+Experimental+animal+models+and+recent+experience+in+humans.">Uterus transplantation: Experimental animal models and recent experience in humans.</a> Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 12 (1), 38-42 (2015).</li><li>Wranning, C. A., Akhi, S. N., Diaz-Garcia, C., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+after+syngeneic+uterus+transplantation+and+spontaneous+mating+in+the+rat.">Pregnancy after syngeneic uterus transplantation and spontaneous mating in the rat.</a> Human Reproduction. 26 (3), 553-558 (2011).</li><li>Wranning, C. A., Akhi, S. N., Kurlberg, G., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterus+transplantation+in+the+rat:+Model+development,+surgical+learning+and+morphological+evaluation+of+healing.">Uterus transplantation in the rat: Model development, surgical learning and morphological evaluation of healing.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 87 (11), 1239-1247 (2008).</li><li>Brannstrom, M., Wranning, C. A., Altchek, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+uterus+transplantation.">Experimental uterus transplantation.</a> Human Reproduction Update. 16 (3), 329-345 (2010).</li><li>Diaz-Garcia, C., Akhi, S. N., Wallin, A., Pellicer, A., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+report+on+fertility+after+allogeneic+uterus+transplantation.">First report on fertility after allogeneic uterus transplantation.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 89 (11), 1491-1494 (2010).</li><li>R, E., Brown, M. J., Karas, A. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. 2nd edn. , (2008).</li><li>Donovan, J., Brown, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Euthanasia.">Euthanasia.</a> Current Protocols. , 8 (2006).</li><li>Rutledge, C., Raper, D. M. S., Abla, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+I+do+it:+superficial+temporal+artery-middle+cerebral+artery+bypass+for+flow+augmentation+and+replacement.">How I do it: superficial temporal artery-middle cerebral artery bypass for flow augmentation and replacement.</a> Acta Neurochirurgica. 162 (8), 1847-1851 (2020).</li><li>Kuo, S. C. -. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+multiple-U+technique:+a+novel+microvascular+anastomosis+technique+that+guarantees+everted+anastomosis+sites+with+solid+intima-to-intima+contact.">The multiple-U technique: a novel microvascular anastomosis technique that guarantees everted anastomosis sites with solid intima-to-intima contact.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 149 (5), 981 (2022).</li><li>Magee, D. J., Manske, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathology and Intervention in Musculoskeletal Rehabilitation. 2nd edn. , 25-62 (2016).</li><li>Diaz-Garcia, C., Johannesson, L., Shao, R. J., Bilig, H., Brannstrom, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+after+allogeneic+uterus+transplantation+in+the+rat:+perinatal+outcome+and+growth+trajectory.">Pregnancy after allogeneic uterus transplantation in the rat: perinatal outcome and growth trajectory.</a> Fertility and Sterility. 102 (6), 1545-1552 (2014).</li><li>Canovai, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IGL-1+as+a+preservation+solution+in+intestinal+transplantation:+a+multicenter+experience.">IGL-1 as a preservation solution in intestinal transplantation: a multicenter experience.</a> Transplant International. 33 (8), 963-965 (2020).</li><li>Habran, M., De Beule, J., Jochmans, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IGL-1+preservation+solution+in+kidney+and+pancreas+transplantation:+A+systematic+review.">IGL-1 preservation solution in kidney and pancreas transplantation: A systematic review.</a> PLoS One. 15 (4), 0231019 (2020).</li><li>Mosbah, I. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IGL-1+solution+reduces+endoplasmic+reticulum+stress+and+apoptosis+in+rat+liver+transplantation.">IGL-1 solution reduces endoplasmic reticulum stress and apoptosis in rat liver transplantation.</a> Cell Death &amp; Disease. 3 (3), 279 (2012).</li><li>Wiederkehr, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+IGL-1+preservation+solution+in+liver+transplantation.">Use of IGL-1 preservation solution in liver transplantation.</a> Transplantation Proceedings. 46 (6), 1809-1811 (2014).</li><li>Tilney, N. L., Guttmann, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+initial+ischemia/reperfusion+injury+on+the+transplanted+kidney.">Effects of initial ischemia/reperfusion injury on the transplanted kidney.</a> Transplantation. 64 (7), 945-947 (1997).</li><li>de Rougemont, O., Dutkowski, P., Clavien, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+modulation+of+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Biological modulation of liver ischemia-reperfusion injury.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 15 (2), 183-189 (2010).</li><li>Jakubauskiene, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relaxin+and+erythropoietin+significantly+reduce+uterine+tissue+damage+during+experimental+ischemia-reperfusion+injury.">Relaxin and erythropoietin significantly reduce uterine tissue damage during experimental ischemia-reperfusion injury.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (13), 7120 (2022).</li><li>Wang, Y., Wu, Y., Peng, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resveratrol+inhibits+the+inflammatory+response+and+oxidative+stress+induced+by+uterine+ischemia+reperfusion+injury+by+activating+PI3K-AKT+pathway.">Resveratrol inhibits the inflammatory response and oxidative stress induced by uterine ischemia reperfusion injury by activating PI3K-AKT pathway.</a> PLoS One. 17 (6), 0266961 (2022).</li><li>Kisu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+for+donors+in+uterus+transplantation.">Risks for donors in uterus transplantation.</a> Reproductive Sciences. 20 (12), 1406-1415 (2013).</li><li>Jones, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterine+transplantation+in+transgender+women.">Uterine transplantation in transgender women.</a> BJOG: an International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 126 (2), 152-156 (2019).</li></ol>

Het hier gepresenteerde protocol biedt gedetailleerde instructies voor de chirurgische aanpak achter baarmoedertransplantatie bij ratten. Het protocol is geoptimaliseerd om de kans op levendgeborenen na UTx en daaropvolgende paring te vergroten. Het oorspronkelijke protocol is overgenomen van de Brännström-groep 12,13, geïnspireerd op het muizenwerk van Akouri et al.10, en aangepast op basis van de ervaringen van de auteurs in de afgelopen jaren.<sup class="xr...

Baarmoedertransplantatie (UTx) is een nieuwe behandeling voor absolute baarmoederfactor onvruchtbaarheid (AUFI). AUFI is het gevolg van een afwezigheid (aangeboren of verworven) of misvorming van de baarmoeder en treft 3% -5% van de vrouwen wereldwijd1. Ethische, juridische of religieuze redenen sluiten adoptie of draagmoederschap uit voor veel vrouwen die een verlangen naar moederschap hebben, maar lijden aan AUFI2. Voor deze vrouwen blijft UTx de enige optie om een eigen gezin te stichten. UTx is in de kliniek toegepast, zij het met wisselend succes; De procedure is technisch uitdagend en vereist een gestage verbetering voor de klinische vestiging.
In 2014 werd de eerste transplantatie van een baarmoeder van een levende donor (LD) - resulterend in een succesvolle zwangerschap - uitgevoerd door de baanbrekende Zweedse groep van Brännström3. De eerste geboorte na UTx van een overleden donor (DD) werd gemeld in 2016 in Brazilië4. In 2021 zijn er wereldwijd meer dan 80 UTx's uitgevoerd, echter met een slagingspercentage van ongeveer 50% en met grafts afkomstig van LD voor de meerderheid1.
Hoewel niet levensreddend, is UTx een steeds populairdere procedure om de verlangens naar eigen nageslacht te vervullen. Als zodanig neemt de vraag naar grafts toe, waardoor DD-donatie in een toekomstige focus komt te liggen. DD-donatie is echter gecompliceerd vanwege aanzienlijk langere koude (en in het geval van hartdood, ook warme) ischemische blootstellingen, waardoor de risico's op transplantaatdisfunctie en afstoting toenemen 5,6. Chirurgische techniek, veeleisende compatibiliteitsmatching en bijbehorende immunosuppressie blijven kritieke kwesties met betrekking tot UTx-uitkomsten7.
Om de bovenstaande risico's in de kliniek te beheersen, zijn geschikte diermodellen voor de verkenning van ischemie en immunosuppressie nodig. Het meest klinisch relevante eindpunt voor diermodellen blijft een succesvolle geboorte; tot op heden zijn zwangerschappen na experimentele UTx bereikt bij muizen, ratten, schapen, konijnen en cynomolgusapen8. Terwijl grotere dieren voorbestemd zijn voor het verwerven en optimaliseren van chirurgische technieken, hebben knaagdieren het duidelijke voordeel van korte draagtijd. Daarom zijn knaagdiermodellen superieur met betrekking tot praktische, financiële en ethische overwegingen9. De grootste uitdaging van UTx bij muizen is echter de kleine anatomie, waarbij de zeer veeleisende operatie verband houdt met de lage reproduceerbaarheid van murine UTx10. Ratten daarentegen zijn chirurgisch toegankelijker en behouden de voordelen van korte draagtijd. Als zodanig is de rat het voorkeursmodel geworden voor UTx9. Wranning et al. introduceerden het rattenmodel van orthotopische UTx in 2008, en met behulp van dit model is de eerste levende geboorte na UTx en natuurlijke paring gemeld11,12,13. Latere studies hebben een cruciale bijdrage geleverd aan de implementatie van UTx bij mensen9.
Niettemin blijft UTx een uitdaging bij ratten en slechts enkele groepen hebben deze chirurgische techniek tot nu toe onder de knie. Een relevant obstakel voor de verspreiding van UTx bij ratten onder onderzoekers is het ontbreken van een nauwkeurige beschrijving van de individuele microchirurgische stappen, de valkuilen en de bijbehorende maatregelen voor het oplossen van problemen14. Dit protocol is bedoeld om een gedetailleerde gids te bieden voor deze zeer complexe microchirurgische procedure om de implementatie van dit diermodel in toekomstig onderzoek te vergemakkelijken.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angled to Side Scissor 5 mm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15008-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big Paper Clip</td>
			<td>No specific</td>
			<td></td>
			<td>Used as retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Bend Needle G30</td>
			<td>Unimed S.A.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacain 0.5%</td>
			<td>Sintetica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine 0.3 mg/mL</td>
			<td>Temgesic</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dosiernadel G25</td>
			<td>H.SIGRIST&#38; PARTNER AG</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5SF Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 10/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2810G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 6/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>667H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 7/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7446H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon 8/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2808G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Femal Brown Norway Rats (150-170 g)</td>
			<td>Janvier</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Femal Lewis Rats (150-170 g)</td>
			<td>Charles River Deutschland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors - Sharp</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>14060-09</td>
			<td>Any other small scissor works too</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Micro Needle Holder</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12500-12</td>
			<td>Any other small needholder works too</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Natrium 25000 I.E./ 5 mL</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Institute Georges Lopez Perfusion Solution (IGL)</td>
			<td>Institute Georges Lopez</td>
			<td></td>
			<td>Organ preservation solution&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Male Lewis Rats (300-320 g)</td>
			<td>Charles River Deutschland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines 13 mm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>18055-04&#160;&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines 16 mm gebogen</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>18055-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applicator with Lock&#160;&#160;</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>18056-14&#160;&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M&#246;lnlyncke Op Towel</td>
			<td>M&#246;lnlyncke</td>
			<td>800300</td>
			<td>Sterile drape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octenisept</td>
			<td>Sch&#252;lke</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper Tape</td>
			<td>Tesa</td>
			<td></td>
			<td>For fixing the animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Philips Avent Schneller Flaschenw&#228;rmer SCF358/02</td>
			<td>Philips</td>
			<td>12824216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringerfundin</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rompun 2%</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td>Xylazine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Handled Needle Holders</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12075-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Handled Needle Holders</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12075-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 45&#176;</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>00276-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sacryl Naht</td>
			<td>KRUUSE</td>
			<td>152575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scapel No 10</td>
			<td>Swann Morton</td>
			<td>201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Histo-Container</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any small histo-container works fine-for coldstorage of the graft</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Plastik Bags</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any transparant plastic bags are fine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steril Cotton swab</td>
			<td>Lohmann-Rauscher</td>
			<td></td>
			<td>Any steril cotton swab is fine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Lohmann-Rauscher</td>
			<td></td>
			<td>Any steril gauze is fine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Scissor 8mm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15024-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope &#8211; SZX9</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>OLY-SZX9-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutter Non Stick GLISS 0.4 mm</td>
			<td>Sutter</td>
			<td>78 01 69 SLS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Tying Forceps&#160;</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>00272-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ThermoLux warming mat</td>
			<td>ThermoLux</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps for Skin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any tissue forceps are fine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vesseldilatator Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl&#160; plus 4/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>VCP292H</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical approach, challenges, and resolutions for uterus transplantation in rats

Baarmoedertransplantatie (UTx) is een nieuwe benadering voor de behandeling van vrouwen met absolute baarmoederfactor onvruchtbaarheid (AUFI). Naar schatting 3%-5% van de vrouwen lijdt aan AUFI. Deze vrouwen werden beroofd van de mogelijkheid om kinderen te krijgen tot de komst van UTx. De klinische toepassing van UTx werd gedreven door experimentele studies bij dieren en de eerste succesvolle UTx werd bereikt bij ratten. Gezien hun fysiologische, immunologische, genetische en reproductieve kenmerken zijn ratten een geschikt modelsysteem voor dergelijke transplantaties. In het bijzonder is hun korte draagtijd een duidelijk voordeel, omdat het gebruikelijke eindpunt van experimentele UTx een succesvolle zwangerschap met levende geboorte is. De grootste uitdaging voor rattenmodellen blijft de kleine anatomie, die geavanceerde microchirurgische vaardigheden en ervaring vereist. Hoewel UTx heeft geleid tot zwangerschap in de kliniek, is de procedure niet vastgesteld en vereist voortdurende experimentele optimalisatie. Hier wordt een gedetailleerd protocol gepresenteerd, inclusief essentiële probleemoplossing voor rat UTx, waarvan wordt verwacht dat het de hele procedure gemakkelijker te begrijpen zal maken voor mensen zonder ervaring met dit type microchirurgie.

Resultaten van twee groepen ratten worden gepresenteerd. UTx werd uitgevoerd voor (groep 1, n = 8) en na (groep 2, n = 8) protocolaanpassing (tabel 1) om de effecten van onze wijzigingen aan te tonen (zie de discussie voor een uitleg van onze wijzigingen)12,15,21.
De uitkomst van rat UTx is geassocieerd met drie belangrijke fasen. De eerste fase is succesvol herstel v...

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Approach, Challenges, and Resolutions for Uterus Transplantation in Rats at JoVE.com

Surgical Approach, Challenges, and Resolutions for Uterus Transplantation in Rats

Het huidige protocol beschrijft alle essentiële stappen voor succesvolle baarmoedertransplantatie (UTx) bij ratten. Het rattenmodel is geschikt gebleken om de klinische implementatie van UTx te bevorderen; rat UTx is echter een zeer complexe procedure die zorgvuldige instructies vereist.

Chirurgische aanpak, uitdagingen en resoluties voor baarmoedertransplantatie bij ratten

Uterine transplantation (UTx) is a new approach for treating women with absolute uterine factor infertility (AUFI). An estimated 3%-5% of women suffer ...

Rechter baarmoedertransplantatie behoort tot een van de meest complexe microchirurgische procedures die slechts door weinigen wordt beheerst. Ons protocol verschuift de transplantatie van de rechter baarmoeder van een experimenteel stadium naar een toepasbare methodiek. Ons protocol leidt tot een hoog aantal levendgeborenen na baarmoedertransplantatie.Het zal binnenkort de toepassing van rechter baarmoedertransplantatie voor daadwerkelijk onderzoek bevorderen. Geduld en uithoudingsvermogen zijn belangrijke eigenschappen tijdens de hele procedure. Na het uitvoeren van een mediane laparotomie, op een verdoofde rat, oogst de rechter baarmoederhoorn met de gemeenschappelijke baarmoederholte en baarmoederhals samen met vasculaire pedikels.Schroei de wond dicht en ligate de linker baarmoederhoorn met een 4-0 polygalactine hechting. Breek nu de linker baarmoederhoorn naast de vertakking van de gemeenschappelijke baarmoederholte. Scheid het cervicale en vaginale deel van het toekomstige transplantaat van de rectale aanhechting.Scheid het toekomstige transplantaat van de paravaginale en paracervicale ligamenten. Ontleed met behulp van diathermie de vagina ongeveer twee tot drie millimeter caudaal van de baarmoederhals. Lokaliseer de baarmoederslagader en aderen bij hun oorsprong.Ligate alle vaten caudaal van de baarmoedervaten met 8-0 polyamide plaats. Plaats 8-0 polyamideligaturen direct rond de rechter gemeenschappelijke iliacale slagader en ader proximaal aan de aorta- en cavalbifurcaties. Maak een 0,5 tot één millimeter lange incisie in de rechter gemeenschappelijke iliacale slagader direct grenzend aan de bifurcatie.Steek een stompe rechte naald van 25 gauge in het lumen om het eruit te spoelen. Zet de naald vast met een 6-0 polyamide ligatuur. Om uitstroom tijdens het spoelen mogelijk te maken, ontleedt u de gemeenschappelijke iliacale ader caudaal naar de ligatuur aan de rechter gemeenschappelijke iliacale ader.Gebruik een spuit van drie milliliter en spoel de baarmoeder met koude Ringer-oplossing, gevolgd door een oplossing voor orgaanbehoud, beide aangevuld met heparine en xylazine. Snijd de gemeenschappelijke iliacale slagader caudaal van de ligatuur bij de abdominale aorta-bifurcatie. Snijd vervolgens met behulp van stompe dissectie de gemeenschappelijke iliacale vaten van de aorta vena cava-bifurcatie bij de verdeling van de baarmoedervaten.En verwijder de transplantatie wanneer het baarmoederweefsel bleek wordt. Plaats de transplantatie in de koude orgaanconserveringsoplossing om de voorbereiding en opslag van de achterste tafel vóór de transplantatie te vergemakkelijken. Na het plaatsen van het transplantaat in de buikholte en het positioneren van de transplantaatader, plaatst u een 10-0 polyamide-hechting in de schedelhoek en een losse hechting in de caudale hoek van de spleet op de rechter gemeenschappelijke iliacale ader.Anastomose één kant van de transplantaatader in de ader van de ontvanger met behulp van zes tot acht lussen van een continue hechting. Op dezelfde manier anastomose de andere kant van het vat vanaf de buitenkant. Bind vervolgens met behulp van 10-0 polyamide een knoop bij de schedelverblijfhechting en een andere knoop bij de caudale verblijfhechting.Voer arteriële anastomose uit met behulp van 10-0 polyamide onderbroken hechtingen aan de rechter gemeenschappelijke iliacale arteria met acht tot 10 lussen. Om te beginnen met transplantaatperfusie, wanneer de sites patent lijken, laat u de vasculaire klemmen op de transplantaatvaten los en controleert u het transplantaat op tekenen van reperfusie. Verbind de vaginale manchet van de transplantatie met het vaginale gewelf met behulp van zes tot zeven 6-0 polygalactine onderbroken hechtingen.Met behulp van vijf tot zeven polyamide 7-0 onderbroken hechtingen, anastomose de grafiek baarmoederhoorn end tot eind naar het resterende ontvanger craniale baarmoedersegment. Controleer de werking van de rattenpost. Na de baarmoedertransplantatie vertoonden twee groep 1-ratten tekenen van zwangerschap.Onderzoek onthulde echter een verwijde baarmoeder, wat suggereert dat de pups zich normaal ontwikkelden, maar de ratten slaagden er niet in om de pups af te leveren. Histologisch onderzoek bij de foetussen toonde aan dat de pups zich ontwikkelden tot aan de bevalling. Vijf groep 2 ratten vertoonden zwangerschap met drie die pups baarden.Het Lewis-vrouwtje beviel twee keer. Alle pups in het eerste nest overleefden, terwijl slechts twee van de drie pups uit het tweede nest overleefden. Het bruine Noorse vrouwtje beviel ook twee keer en alle overlevende pups vertoonden een normale ontwikkeling.De aanpassing van het protocol verbeterde zowel de directe chirurgische uitkomsten als het aantal levendgeborenen na baarmoedertransplantatie. Het verhoogde de overleving van twee weken graft van 50% in groep 1 tot 75% in groep 2. Het is belangrijk om de hechtknoop in de caudale hoek los te houden voor een betere afstelling en om snaareffecten te voorkomen.Transplantatie van de rechter baarmoeder is met name geschikt om pre-transplantatiebenaderingen te beoordelen die de resultaten van baarmoedertransplantatie kunnen verbeteren, zoals ex vivo hypodermische orgaanperfusie of andere technieken voor de beperking van orgaanletsel. Over het algemeen was en is baarmoedertransplantatie bij dieren een must om te introduceren om baarmoedertransplantatie in de kliniek tot stand te brengen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Orthotope dunne darm bij ratten

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

A Novel chirurgische benadering voor intratracheale toediening van bioactieve stoffen in een Foetale Muis Model

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantatie van Pulmonary Valve een muis model van Heterotope Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

The Mouse Round-window Approach for Ototoxic Agent Delivery: A Rapid and Reliable Technique for Inducing Cochlear Cell Degeneration

De muis Round-window aanpak voor Ototoxische Agent Levering: een snelle en betrouwbare techniek voor het induceren van Cochlear celdegeneratie

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Chirurgische Aanpak voor midden cerebrale slagader occlusie en reperfusie Induced Stroke in Muizen

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Designing CAD/CAM Surgical Guides for Maxillary Reconstruction Using an In-house Approach

Ontwerpen van CAD/CAM chirurgische gidsen voor maxillaire wederopbouw met behulp van een In-house aanpak

Computer-aided design/computer-assisted manufacturing (CAD/CAM) is now being evaluated as a preparative technique for maxillofacial surgery. Because this ...