Name: cell culture techniques and practices to avoid contamination by fungi and bacteria in the research cell culture laboratory
Uploaded: 2023-07-07T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cell Culture Techniques and Practices to Avoid Contamination by Fungi and Bacteria in the Research Cell Culture Laboratory at JoVE.com

यह काम हावर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट (एचएचएमआई) से फंडिंग की बदौलत संभव हो पाया है। हम पांडुलिपि को पढ़ने और उनके निरंतर समर्थन के लिए प्रयोगशाला के प्रमुख, जू चेन को धन्यवाद देना चाहते हैं, डोना टालेंट को उनके सहायक संपादन और टिप्पणियों के लिए, और रॉकफेलर विश्वविद्यालय में सूचना प्रौद्योगिकी विभाग से जेफ हेनेफेल्ड को इस पांडुलिपि के वीडियो घटक के साथ उनकी मदद के लिए।

1. तैयारी 
<ol><li>सामान्य<ol><li>केवल सेल कल्चर रूम में पहनने के लिए नामित एक साफ लैब कोट पहनें और प्रयोगशाला के अन्य हिस्सों में नहीं। नोट: लैब कोट को बाँझ होने की आवश्यकता नहीं है।</li>
		<li>नए दस्ताने पहनें ?...

<ol>
	<li>Johnson, Z. L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+basis+of+substrate+recognition+by+the+multidrug+resistance+protein+MRP1.">Structural basis of substrate recognition by the multidrug resistance protein MRP1.</a> Cell. 168 (6), 1075-1085 (2017).</li><li>Capes-Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+lines+as+biological+models:+practical+steps+for+more+reliable+research.">Cell lines as biological models: practical steps for more reliable research.</a> Chemical Research in Toxicology. 32 (9), 1733-1736 (2019).</li><li>Segeritz, C. P., Vallier, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture:+growing+cells+as+model+systems+in+vitro.">Cell culture: growing cells as model systems in vitro.</a> Basic Science Methods for Clinical Researchers. , 151-172 (2017).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Lincoln, C. K., Gabridge, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination:+sources,+consequences,+prevention,+and+elimination.">Cell culture contamination: sources, consequences, prevention, and elimination.</a> Methods in Cell Biology. 57, 49-65 (1998).</li><li>Nikfarjam, L., Farzaneh, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+detection+of+mycoplasma+contamination+in+cell+culture.">Prevention and detection of mycoplasma contamination in cell culture.</a> Cell Journal. 13 (4), 203-212 (2012).</li><li>Stacey, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination.">Cell culture contamination.</a> Methods in Molecular Biology. 731, 79-91 (2011).</li><li>Young, L., Sung, J., Stacey, G., Masters, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Mycoplasma+in+cell+cultures.">Detection of Mycoplasma in cell cultures.</a> Nature Protocols. 5 (5), 929-934 (2010).</li><li>Barth, O. M., Majerowicz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+by+transmission+electron+microscopy+of+mycoplasma+contamination+in+sera+and+cell+cultures.">Rapid detection by transmission electron microscopy of mycoplasma contamination in sera and cell cultures.</a> Memorias do Instituto Oswaldo Cruz. 83 (1), 63-66 (1988).</li><li>Mirabelli, P., Coppola, L., Salvatore, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+cell+lines+are+useful+model+systems+for+medical+research.">Cancer cell lines are useful model systems for medical research.</a> Cancers. 11 (8), 1098 (2019).</li><li>A cell culture master class: What your cells wish they could tell you. Science Available from: <a target="_blank" href="https://www.science.org/content/webinar/cell-culture-master-class-your-cells-wish-they-could-tell-you">https://www.science.org/content/webinar/cell-culture-master-class-your-cells-wish-they-could-tell-you</a> (2020)</li><li>Langdon, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination:+an+overview.">Cell culture contamination: an overview.</a> Methods in Molecular Medicine. 88, 309-317 (2004).</li><li>Babic, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-research:+Incidences+of+problematic+cell+lines+are+lower+in+papers+that+use+RRIDs+to+identify+cell+lines.">Meta-research: Incidences of problematic cell lines are lower in papers that use RRIDs to identify cell lines.</a> eLife. 8, e41676 (2019).</li><li>Visconti, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+tandem+repeat+profiling+for+the+authentication+of+cancer+stem-like+cells.">Short tandem repeat profiling for the authentication of cancer stem-like cells.</a> International Journal of Cancer. 148 (6), 1489-1498 (2021).</li><li>Horbach, S. P. J. M., Halffman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ghosts+of+HeLa:+How+cell+line+misidentification+contaminates+the+scientific+literature.">The ghosts of HeLa: How cell line misidentification contaminates the scientific literature.</a> PLoS One. 12 (10), 0186281 (2017).</li><li>Why 70% isopropyl alcohol is a better disinfectant than 99% isopropyl alcohol when it comes to Covid-19. MunGlobal Available from: <a target="_blank" href="https://munglobal.com.au/resources/knowledge-base/pathogens/why-70-isopropyl-alcohol-is-a-better-disinfectant-than-99-isopropyl-alcohol/#:~:text=Due%20to%20the%20concentration%20difference">https://munglobal.com.au/resources/knowledge-base/pathogens/why-70-isopropyl-alcohol-is-a-better-disinfectant-than-99-isopropyl-alcohol/#:~:text=Due%20to%20the%20concentration%20difference</a> (2023)</li><li>United States Department of Agriculture. Processing and Safety. Food Safety Publications Available from: <a target="_blank" href="https://www.ars.usda.gov/ARSUserFiles/60701000/FoodSafetyPublications/p328.pdf">https://www.ars.usda.gov/ARSUserFiles/60701000/FoodSafetyPublications/p328.pdf</a> (2004)</li><li>Sterilizing Practices. Centers for Disease Control and Prevention Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/infectioncontrol/guidelines/disinfection/sterilization/sterilizing-practices.html">https://www.cdc.gov/infectioncontrol/guidelines/disinfection/sterilization/sterilizing-practices.html</a> (2023)</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+technique+for+cell+culture.">Aseptic technique for cell culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. , (2001).</li><li>Uphoff, C. C., Drexler, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eradication+of+Mycoplasma+contamination+from+cell+cultures.">Eradication of Mycoplasma contamination from cell cultures.</a> Current Protocols in Molecular Biology. 106, 1-12 (2014).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+technique.">Aseptic technique.</a> Current Protocols in Microbiology. 56 (1), e98 (2020).</li><li>How a Class II, Type A2 Biosafety Cabinet Works. Nuaire Available from: <a target="_blank" href="https://www.nuaire.com/resources/class-ii-type-a2-biosafety-cabinet-how-it-works-article">https://www.nuaire.com/resources/class-ii-type-a2-biosafety-cabinet-how-it-works-article</a> (2020)</li><li>Phelan, K., May, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+cell+tissue+culture+techniques.">Mammalian cell tissue culture techniques.</a> Current Protocols in Pharmacology. 73, 1-23 (2016).</li></ol>

जबकि सेल कल्चर कार्य करते समय संदूषण प्राथमिक चिंताओं में से एक है, इस पांडुलिपि में उल्लिखित प्रथाओं और तकनीकों से जोखिमों को कम करने में मदद मिलेगी। महत्वपूर्ण चरणों में एक साफ लैब कोट पहनना शामिल ह?...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14-190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F-12 Media</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>30-2006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Baffled Flask</td>
			<td>Pyrex&#160;</td>
			<td>09-552-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pipettes</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>13-678-6B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Aid</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>13-681-15A&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipette</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-200-573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-202-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25-300-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>*Items may vary because this video is about general cell culture techniques</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cell culture techniques and practices to avoid contamination by fungi and bacteria in the research cell culture laboratory

सेल कल्चर एक नियंत्रित वातावरण में मानव, पशु और कीट कोशिकाओं, या अन्य ऊतकों को बढ़ाने के लिए आवश्यक एक नाजुक कौशल है। प्रोटोकॉल का लक्ष्य कवक और बैक्टीरिया से संदूषण को रोकने के लिए एक शोध प्रयोगशाला में उपयोग की जाने वाली सही तकनीकों पर जोर देना है। माइकोप्लाज्मा संदूषण से बचने पर विशेष जोर दिया जाता है, जो सेल कल्चर रूम में एक बड़ी चिंता का विषय है क्योंकि इसके छोटे आकार और सेल कल्चर के लिए उपयोग किए जाने वाले अधिकांश एंटीबायोटिक दवाओं के प्रतिरोध के कारण। ये समान तकनीकें निरंतर विकास सुनिश्चित करती हैं और स्वस्थ कोशिकाओं को बनाए रखती हैं। नए और अनुभवी सेल संस्कृति उपयोगकर्ताओं के लिए समान रूप से, संदूषण के जोखिम को कम करने के लिए इन सर्वोत्तम प्रथाओं का लगातार पालन करना महत्वपूर्ण है। वर्ष में एक बार, प्रयोगशालाओं को सेल संस्कृति सर्वोत्तम प्रथाओं की समीक्षा करनी चाहिए और यदि आवश्यक हो तो चर्चा या अतिरिक्त प्रशिक्षण के साथ अनुवर्ती कार्रवाई करनी चाहिए। पहले स्थान पर संदूषण को रोकने के लिए प्रारंभिक कार्रवाई करने से समय और धन की बचत होगी, संदूषण होने के बाद सफाई की तुलना में। सार्वभौमिक सर्वोत्तम प्रथाएं सेल संस्कृतियों को स्वस्थ रखती हैं, जिससे लगातार नई कोशिकाओं को पिघलाने, महंगे सेल कल्चर मीडिया खरीदने और इनक्यूबेटर परिशोधन और डाउनटाइम की मात्रा को कम करने की आवश्यकता कम हो जाती है।

यदि इस पेपर में उल्लिखित उचित सेल कल्चर तकनीकों और प्रथाओं का पालन नहीं किया जाता है, तो अनुसंधान सेल कल्चर प्रयोगशाला में कवक और बैक्टीरिया द्वारा संदूषण हो सकता है। चित्र 2 निलंबन और अनुया...

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Cell Culture Techniques and Practices to Avoid Contamination by Fungi and Bacteria in the Research Cell Culture Laboratory

यह प्रोटोकॉल कवक और बैक्टीरिया द्वारा संदूषण से बचने के लिए अनुसंधान सेल संस्कृति प्रयोगशाला में उपयोग की जाने वाली आवश्यक सेल कल्चर तकनीकों और प्रथाओं को प्रस्तुत करता है। बैक्टीरिया की श्रेणी के भीतर, माइकोप्लाज्मा संदूषण को रोकने पर विशेष जोर दिया जाएगा।

अनुसंधान सेल कल्चर प्रयोगशाला में कवक और बैक्टीरिया द्वारा संदूषण से बचने के लिए सेल कल्चर तकनीक और प्रथाएं

Cell culture is a delicate skill necessary for growing human, animal, and insect cells, or other tissues, in a controlled environment. The goal of the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Human ES cells: Starting Culture from Frozen Cells

जमे हुए कक्ष से शुरू संस्कृति: मानव ES कोशिकाओं

Here we demonstrate how our lab begins a HuES human embryonic stem cell line culture from a frozen stock.  First, a one to two day old ten cm plate of  ...

Title Cell Encapsulation by Droplets

शीर्षक बूंदों द्वारा सेल इनकैप्सुलेशन

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

प्राथमिक संस्कृति और Corti के murine अंग के प्लाज्मिड electroporation.

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Determining Cell Number During Cell Culture using the Scepter Cell Counter

सेल संस्कृति के दौरान सेल नंबर निर्धारण राजाधिकार सेल काउंटर का उपयोग

Counting cells is often a necessary but tedious step for in vitro cell culture. Consistent cell concentrations ensure experimental reproducibility and ...

Induction and Testing of Hypoxia in Cell Culture

प्रेरण और सेल संस्कृति में Hypoxia का परीक्षण

Hypoxia is defined as the reduction or lack of oxygen in organs, tissues, or cells.  This decrease of oxygen tension can be due to a reduced supply in ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

अलगाव और व्यक्तिगत और वयस्क कंकाल की मांसपेशी से myofibers अपने उपग्रह कोशिकाओं की संस्कृति

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

The Slice Culture Method for Following Development of Tooth Germs In Explant Culture

Explant संस्कृति में दांत कीटाणुओं के विकास के बाद के लिए टुकड़ा संस्कृति विधि

Explant culture allows manipulation of developing organs at specific time points&#160;and is therefore an important method for the developmental ...

Isolation, Culture, and Transplantation of Muscle Satellite Cells

स्नायु उपग्रह कोशिकाओं के अलगाव, संस्कृति, और ट्रांसप्लांटेशन

Muscle satellite cells are a stem cell population required for postnatal skeletal muscle development and regeneration, accounting for 2-5% of sublaminal ...

Detection of RNA-binding Proteins by In Vitro RNA Pull-down in Adipocyte Culture

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द्वारा शाही सेना बाध्यकारी प्रोटीन का पता लगाने<em&gt; इन विट्रो</emवसाकोशिका संस्कृति में&gt; आरएनए पुल से नीचे

RNA-binding proteins (RBPs) are emerging as a regulatory layer in the development and function of adipose. RBPs play a key role in the gene expression ...