Name: cell culture techniques and practices to avoid contamination by fungi and bacteria in the research cell culture laboratory
Uploaded: 2023-07-07T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cell Culture Techniques and Practices to Avoid Contamination by Fungi and Bacteria in the Research Cell Culture Laboratory at JoVE.com

Эта работа стала возможной благодаря финансированию Медицинского института Говарда Хьюза (HHMI). Мы хотели бы поблагодарить нашего руководителя лаборатории Цзюэ Чен за прочтение рукописи и за ее постоянную поддержку, Донну Таллент за ее полезные правки и комментарии, а также Джеффа Хеннефельда из отдела информационных технологий Рокфеллеровского университета за его помощь с видеокомпонентом этой рукописи.

1. Подготовка 
<ol><li>Общее<ol><li>Носите чистый лабораторный халат, предназначенный для ношения только в комнате клеточных культур и ни в каких других частях лаборатории. ПРИМЕЧАНИЕ: Лабораторный халат не обязательно должен быть стерильным.</li>
		<li>Наденьте новые перчатки, которы?...

<ol>
	<li>Johnson, Z. L., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+basis+of+substrate+recognition+by+the+multidrug+resistance+protein+MRP1.">Structural basis of substrate recognition by the multidrug resistance protein MRP1.</a> Cell. 168 (6), 1075-1085 (2017).</li><li>Capes-Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+lines+as+biological+models:+practical+steps+for+more+reliable+research.">Cell lines as biological models: practical steps for more reliable research.</a> Chemical Research in Toxicology. 32 (9), 1733-1736 (2019).</li><li>Segeritz, C. P., Vallier, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture:+growing+cells+as+model+systems+in+vitro.">Cell culture: growing cells as model systems in vitro.</a> Basic Science Methods for Clinical Researchers. , 151-172 (2017).</li><li>Drexler, H. G., Uphoff, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycoplasma+contamination+of+cell+cultures:+Incidence,+sources,+effects,+detection,+elimination,+prevention.">Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.</a> Cytotechnology. 39 (2), 75-90 (2002).</li><li>Lincoln, C. K., Gabridge, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination:+sources,+consequences,+prevention,+and+elimination.">Cell culture contamination: sources, consequences, prevention, and elimination.</a> Methods in Cell Biology. 57, 49-65 (1998).</li><li>Nikfarjam, L., Farzaneh, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+detection+of+mycoplasma+contamination+in+cell+culture.">Prevention and detection of mycoplasma contamination in cell culture.</a> Cell Journal. 13 (4), 203-212 (2012).</li><li>Stacey, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination.">Cell culture contamination.</a> Methods in Molecular Biology. 731, 79-91 (2011).</li><li>Young, L., Sung, J., Stacey, G., Masters, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Mycoplasma+in+cell+cultures.">Detection of Mycoplasma in cell cultures.</a> Nature Protocols. 5 (5), 929-934 (2010).</li><li>Barth, O. M., Majerowicz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+by+transmission+electron+microscopy+of+mycoplasma+contamination+in+sera+and+cell+cultures.">Rapid detection by transmission electron microscopy of mycoplasma contamination in sera and cell cultures.</a> Memorias do Instituto Oswaldo Cruz. 83 (1), 63-66 (1988).</li><li>Mirabelli, P., Coppola, L., Salvatore, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+cell+lines+are+useful+model+systems+for+medical+research.">Cancer cell lines are useful model systems for medical research.</a> Cancers. 11 (8), 1098 (2019).</li><li>A cell culture master class: What your cells wish they could tell you. Science Available from: <a target="_blank" href="https://www.science.org/content/webinar/cell-culture-master-class-your-cells-wish-they-could-tell-you">https://www.science.org/content/webinar/cell-culture-master-class-your-cells-wish-they-could-tell-you</a> (2020)</li><li>Langdon, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+contamination:+an+overview.">Cell culture contamination: an overview.</a> Methods in Molecular Medicine. 88, 309-317 (2004).</li><li>Babic, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-research:+Incidences+of+problematic+cell+lines+are+lower+in+papers+that+use+RRIDs+to+identify+cell+lines.">Meta-research: Incidences of problematic cell lines are lower in papers that use RRIDs to identify cell lines.</a> eLife. 8, e41676 (2019).</li><li>Visconti, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+tandem+repeat+profiling+for+the+authentication+of+cancer+stem-like+cells.">Short tandem repeat profiling for the authentication of cancer stem-like cells.</a> International Journal of Cancer. 148 (6), 1489-1498 (2021).</li><li>Horbach, S. P. J. M., Halffman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ghosts+of+HeLa:+How+cell+line+misidentification+contaminates+the+scientific+literature.">The ghosts of HeLa: How cell line misidentification contaminates the scientific literature.</a> PLoS One. 12 (10), 0186281 (2017).</li><li>Why 70% isopropyl alcohol is a better disinfectant than 99% isopropyl alcohol when it comes to Covid-19. MunGlobal Available from: <a target="_blank" href="https://munglobal.com.au/resources/knowledge-base/pathogens/why-70-isopropyl-alcohol-is-a-better-disinfectant-than-99-isopropyl-alcohol/#:~:text=Due%20to%20the%20concentration%20difference">https://munglobal.com.au/resources/knowledge-base/pathogens/why-70-isopropyl-alcohol-is-a-better-disinfectant-than-99-isopropyl-alcohol/#:~:text=Due%20to%20the%20concentration%20difference</a> (2023)</li><li>United States Department of Agriculture. Processing and Safety. Food Safety Publications Available from: <a target="_blank" href="https://www.ars.usda.gov/ARSUserFiles/60701000/FoodSafetyPublications/p328.pdf">https://www.ars.usda.gov/ARSUserFiles/60701000/FoodSafetyPublications/p328.pdf</a> (2004)</li><li>Sterilizing Practices. Centers for Disease Control and Prevention Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/infectioncontrol/guidelines/disinfection/sterilization/sterilizing-practices.html">https://www.cdc.gov/infectioncontrol/guidelines/disinfection/sterilization/sterilizing-practices.html</a> (2023)</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+technique+for+cell+culture.">Aseptic technique for cell culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. , (2001).</li><li>Uphoff, C. C., Drexler, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eradication+of+Mycoplasma+contamination+from+cell+cultures.">Eradication of Mycoplasma contamination from cell cultures.</a> Current Protocols in Molecular Biology. 106, 1-12 (2014).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+technique.">Aseptic technique.</a> Current Protocols in Microbiology. 56 (1), e98 (2020).</li><li>How a Class II, Type A2 Biosafety Cabinet Works. Nuaire Available from: <a target="_blank" href="https://www.nuaire.com/resources/class-ii-type-a2-biosafety-cabinet-how-it-works-article">https://www.nuaire.com/resources/class-ii-type-a2-biosafety-cabinet-how-it-works-article</a> (2020)</li><li>Phelan, K., May, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+cell+tissue+culture+techniques.">Mammalian cell tissue culture techniques.</a> Current Protocols in Pharmacology. 73, 1-23 (2016).</li></ol>

В то время как загрязнение является одной из основных проблем при выполнении работы с клеточными культурами, методы и методы, изложенные в этой рукописи, помогут снизить риски. Критические шаги включают в себя ношение чистого лабораторного халата, который используется только в комнате...

Клеточная культура имеет множество применений в исследовательской лаборатории. С момента возникновения клеточных культур в начале 20-го века клеточные линии помогли продвинуть науку. Клеточные линии имеют ряд преимуществ; Различные клеточные линии могут помочь исследователям изучать клеточную биологию, производить бакуловирус для дальнейших исследований или производить большое количество белка, представляющего интерес, и это лишь некоторые изних. Некоторые дополнительные виды использования включают изучение роста тканей, помощь в разработке вакцин, токсикологические исследования, изучение роли генов в здоровых организмах и больных моделях, а также производство гибридных клеточных линий 2,3. Клеточные линии также могут обеспечивать производство лекарств3. При работе с клеточными линиями необходимы правильные асептические методики; Методы и методы, изложенные в этой рукописи, применимы к исследовательским лабораториям, где проводятся работы с клеточными культурами. Другие лабораторные условия не обсуждаются.
Загрязнение часто является основной проблемой при выполнении работы с клеточными культурами. В контексте этой статьи под загрязнением обычно понимаются грибки и бактерии. Общая цель метода, изложенного в этой статье, состоит в том, чтобы подробно описать лучшие практики предотвращения загрязнения. Все члены лаборатории должны придерживаться этих правил при работе в комнате клеточных культур исследовательской лаборатории. Лаборатории должны обеспечить, чтобы все работники были активными участниками использования этих передовых методов для предотвращения загрязнения. Знание правильных практик и методов поможет гарантировать, что клеточные культуры останутся жизнеспособными, здоровыми и свободными от загрязнения. Разработка этого метода основана на изучении литературы, семилетнем опыте работы с клеточными культурами и необходимости метода, к которому могут обращаться как новички, так и опытные работники клеточных культур на ежегодной основе.
Существует потребность в четкой, стандартизированной методике, которой должны следовать все исследовательские лаборатории клеточных культур. Большая часть литературы по загрязнению клеточных культур обсуждает обнаружение микоплазмы, асептические методы, источники загрязнения, устранение загрязняющих веществ и профилактику с помощью антибиотиков и регулярного тестирования 4,5,6,7,8. Хотя эта информация полезна, в литературе нет видеороликов, демонстрирующих правильные методы культивирования клеток, которым следует следовать. Преимущество представленных методов перед альтернативными методами заключается в том, что основное внимание уделяется предотвращению загрязнения до того, как оно произойдет, а не обнаружению и исправлению ошибок позже. Кроме того, тщательная демонстрация асептических методов, обсуждение предотвращения роста грибков и бактерий, а также информация о воздушном потоке шкафа биобезопасности ценны как для начинающих, так и для опытных работников клеточных культур.
Бактерии и грибки являются двумя наиболее распространенными типами загрязняющих веществ. В категории бактерий микоплазма является серьезной проблемой из-за ее небольшого размера и способности размножаться, оставаясь незамеченной. Это самовоспроизводящиеся организмы без жесткой клеточной стенки, рост которых зависит от эукариотических клеток. Они имеют сниженные метаболические возможности и могут сильно размножаться, оставаясь нераспознанными при обычном визуальном осмотре клеточных культур и регулярном микроскопическом анализе, хотя просвечивающая электронная микроскопия может обнаружить микоплазму 9,10. Более того, они могут проходить через микробиологические фильтры10. Питательная среда для клеточных культур обеспечивает микоплазму питательными веществами, хотя, к сожалению, добавление антибиотиков не влияет на микоплазму10. Следует отметить, что, как правило, нет необходимости дополнять среды антибиотиками; Надлежащих методов должно быть достаточно для предотвращения загрязнения. Заражение микоплазмой не приводит к немедленной гибели клеток, но это беспокоит исследователей, поскольку влияет на воспроизводимость и качество данных.
Весь персонал лаборатории должен строго придерживаться надлежащей практики культивирования клеток. Культуры следует проверять на микоплазму после того, как они были недавно приобретены, пока они в настоящее время выращиваются, перед криоконсервацией и при размораживании от жидкого азота 2,10. На рынке доступны различные тесты, использующие полимеразную цепную реакцию (ПЦР), иммуноферментный анализ (ИФА) или иммуноокрашивание. 3 В литературе указывается, что «человеческие изоляты представляют собой большой процент загрязнителей микоплазмы, обнаруженных в культуре клеток»5. Хотя было описано более 200 видов микоплазмы, около шести из них являются причиной большинства инфекций. Этими шестью видами являются M. arginini, M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale и Acholeplasma laidlawii10. Как и в случае с другими типами загрязнения, воздух и аэрозоли переносят их в клеточные культуры5. Это повторяется в других работах, поскольку «человек-оператор потенциально представляет наибольшую опасность в лаборатории»7. Хотя это делается из-за человеческой ошибки, риск можно устранить, если следовать стандартной процедуре. Выделение от персонала не ограничивается только заражением микоплазмой; Клеточные культуры в одной лаборатории обычно инфицированы одними и теми же видами микоплазмы, что указывает на то, что загрязнение распространяется от одной колбы к другой из-за неправильных методов культивирования клеток10.
Предотвращение перекрестного загрязнения также является еще одной причиной, по которой следует следовать правильным методам культивирования клеток. Отмечается, что, по крайней мере, 15–18% клеточных линий во всем мире могут быть перекрестно загрязнены или неправильно идентифицированы11,12. В дополнение к тестированию клеточных линий на микоплазменное загрязнение, они также должны быть проверены на перекрестную контаминацию10. Для клеточных линий человека аутентификация клеточных линий с помощью недорогого метода на основе ДНК, называемого профилированием короткого тандемного повтора (STR), является текущим международным эталонным стандартом, поскольку это простой способ подтвердить идентичность клеточной линии 2,10,13,14. STR может идентифицировать неправильно маркированные или перекрестно загрязненные клеточные линии, но он не может обнаружить неправильное происхождение ткани10,13,14. Достоверность данных исследований может быть поставлена под угрозу, если клеточные линии неправильно маркированы, неправильно идентифицированы или загрязнены13. Подобно другим типам загрязнения, перекрестное загрязнение может происходить из-за плохой техники, вызывающей распространение аэрозолей, ошибочного контакта, приводящего к попаданию неправильного типа клеток в колбу, или использования одной и той же бутылки с носителем и реагентов с разными клеточными линиями10. Совместное использование бутылок с носителями не должно происходить; Совместное использование одной бутылки среды между двумя разными клеточными линиями может позволить этим клеточным популяциям смешиваться, что приводит к тому, что более быстрорастущий тип клеток полностью захватывает колбу. Эта замена не заметна и приводит к неправильной маркировке и неправильной идентификации2. Клеточная линия также может быть ошибочно принята за другую, если культуры перепутаны во время обработки или маркировки10. Особое внимание следует уделять хранению реагентов, сред и колб отдельно друг от друга. У каждого члена лаборатории должны быть свои собственные бутылки-носители; Между членами лаборатории не должно происходить совместное использование. Сами клеточные линии должны быть приобретены у квалифицированного банка клеток и поставщика. Лаборатории не должны делиться клетками. Исследования показывают, что, хотя тесты STR и микоплазмы используются регулярно, во многих исследовательских работах в литературе уже использовались неправильно идентифицированные или загрязненные клеточные линии15. Просеивание исследований, чтобы найти эти проблемные статьи и задним числом проинформировать читателей об этом вопросе, является громоздким. Профилактика - лучший способ гарантировать, что эта проблема не возникнет в первую очередь.
Простое действие распыления предметов с 70% EtOH может убить организмы; 70% EtOH работает путем денатурации белков и растворения липидов в наиболее часто загрязняющих организмах, включая бактерии и грибы16. Исследования показали, что 70% является наиболее эффективной концентрацией; поверхностные белки не коагулируют быстро с 70% EtOH, поэтому они могут проникнуть в клетку, в то время как содержащаяся в них вода необходима для процесса денатурации белков. Из-за разницы в концентрациях воды и спирта по обе стороны клеточной стенки 70% EtOH поступает в клетку для денатурации как ферментативных, так и структурных белков. Если в колбах наблюдается рост плесени, весь инкубатор необходимо обеззаразить, сначала опрыскав его 70% EtOH и вытерев насухо, а затем 16-часовую ночную инкубацию при 60 ° C17. Это убивает большую часть плесени и любых бактерий.
Основное преимущество профилактических практик по сравнению с альтернативными методами устранения загрязнения после его возникновения заключается в том, что, предотвращая загрязнение на ранней стадии, лабораторные работники могут быть уверены, что их клеточные культуры здоровы и не будет высоких затрат, связанных с обеззараживанием инкубаторов или выбрасыванием клеточных культур. Удаление микоплазменных загрязнителей, например, после, не является эффективным7. Если вы потратите время на то, чтобы убедиться, что лабораторный персонал должным образом обучен, комната для культивирования клеток автономна, а стандартная процедура используется, это сэкономит время и деньги.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14-190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F-12 Media</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>30-2006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Baffled Flask</td>
			<td>Pyrex&#160;</td>
			<td>09-552-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pipettes</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>13-678-6B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Aid</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>13-681-15A&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipette</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-200-573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-202-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25-300-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>*Items may vary because this video is about general cell culture techniques</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cell culture techniques and practices to avoid contamination by fungi and bacteria in the research cell culture laboratory

Клеточная культура — это тонкий навык, необходимый для выращивания клеток человека, животных и насекомых или других тканей в контролируемой среде. Цель протокола состоит в том, чтобы подчеркнуть правильные методы, используемые в исследовательской лаборатории для предотвращения загрязнения грибками и бактериями. Особое внимание уделяется предотвращению заражения микоплазмой, что является серьезной проблемой в помещении для культивирования клеток из-за его небольшого размера и устойчивости к большинству антибиотиков, используемых для культивирования клеток. Эти же методы обеспечивают непрерывный рост и поддерживают здоровые клетки. Как для новых, так и для опытных пользователей клеточных культур важно последовательно придерживаться этих передовых методов, чтобы снизить риск заражения. Раз в год лаборатории должны проводить обзор передового опыта в области клеточных культур и при необходимости проводить обсуждение или дополнительное обучение. Заблаговременное принятие мер по предотвращению загрязнения в первую очередь сэкономит время и деньги по сравнению с очисткой после загрязнения. Универсальные передовые методы поддерживают здоровье клеточных культур, тем самым уменьшая необходимость постоянного размораживания новых клеток, покупки дорогостоящих сред для клеточных культур и сокращения количества обеззараживания инкубаторов и времени простоя.

Если не следовать надлежащим методам и практикам культивирования клеток, изложенным в этой статье, в исследовательской лаборатории клеточных культур может произойти заражение грибами и бактериями. На рисунке 2 показаны колбы, содержащие загрязнение как в суспензии, та...

Watch this Scientific Journal Video about Cell Culture Techniques and Practices to Avoid Contamination by Fungi and Bacteria in the Research Cell Culture Laboratory at JoVE.com

Cell Culture Techniques and Practices to Avoid Contamination by Fungi and Bacteria in the Research Cell Culture Laboratory

В этом протоколе представлены основные методы и методы культивирования клеток, которые будут использоваться в исследовательской лаборатории клеточных культур, чтобы избежать заражения грибками и бактериями. В категории бактерий особый акцент будет сделан на предотвращении заражения микоплазмами.

Методы и методы культивирования клеток для предотвращения загрязнения грибами и бактериями в исследовательской лаборатории клеточных культур

Cell culture is a delicate skill necessary for growing human, animal, and insect cells, or other tissues, in a controlled environment. The goal of the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Human ES cells: Starting Culture from Frozen Cells

ЭС клетки человека: начиная культуры из замороженных клеток

Here we demonstrate how our lab begins a HuES human embryonic stem cell line culture from a frozen stock.  First, a one to two day old ten cm plate of  ...

Title Cell Encapsulation by Droplets

Название сотовый Инкапсуляция воздушно-капельным путем

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

Первичные культуры и плазмиды электропорации мышей органа Корти.

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Determining Cell Number During Cell Culture using the Scepter Cell Counter

Определение сотовый номер при использовании культуры клеток Счетчик скипетр сотовый

Counting cells is often a necessary but tedious step for in vitro cell culture. Consistent cell concentrations ensure experimental reproducibility and ...

Induction and Testing of Hypoxia in Cell Culture

Индукция и тестирование Гипоксия в культуре клеток

Hypoxia is defined as the reduction or lack of oxygen in organs, tissues, or cells.  This decrease of oxygen tension can be due to a reduced supply in ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Выделение и культура Индивидуальные мышечных волокон и их сателлитные клетки от взрослых скелетных мышц

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

The Slice Culture Method for Following Development of Tooth Germs In Explant Culture

Кусочек Культура Метод После Развитие Зуб микробов в эксплантата культуры

Explant culture allows manipulation of developing organs at specific time points&#160;and is therefore an important method for the developmental ...

Isolation, Culture, and Transplantation of Muscle Satellite Cells

Изоляция, культура, и трансплантация мышечных сателлитных клеток

Muscle satellite cells are a stem cell population required for postnatal skeletal muscle development and regeneration, accounting for 2-5% of sublaminal ...

Detection of RNA-binding Proteins by In Vitro RNA Pull-down in Adipocyte Culture

Detection of RNA-binding Proteins by In Vitro RNA Pull-down in Adipocyte Culture

Обнаружение РНК-связывающих белков<em&gt; In Vitro</em&gt; РНК спускающее в адипоцитов культуры

RNA-binding proteins (RBPs) are emerging as a regulatory layer in the development and function of adipose. RBPs play a key role in the gene expression ...