Name: real-time detection of reactive oxygen species production in immune response in rice with a chemiluminescence assay
Uploaded: 2022-11-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay at JoVE.com

تم دعم هذا العمل بمنح من مؤسسة شنغهاي للعلوم الطبيعية (رقم المنحة: 21ZR1429300 / BS1500016) ، جامعة شنغهاي جياو تونغ (برنامج Agri-X ، رقم المنحة: AF1500088/002) ، مركز شنغهاي للابتكار التعاوني للبذور الزراعية (رقم المنحة: ZXWH2150201/001) إلى Jiangbo Fan ، ومن خلال مشروع التعاون الطبي الهندسي لجامعة شنغهاي جياو تونغ (رقم المنحة: 21X010301734) إلى Can Li.

ملاحظة: ينطبق البروتوكول على الأنسجة النباتية المختلفة. تم استخدام غمد الأرز وأقراص الأوراق في هذا البروتوكول للكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية عند استنباط PAMP. نظرا لأن الاختلافات تنشأ بشكل أساسي بسبب طريقة أخذ العينات ، يتم وصف الإجراءات الشائعة فقط أدناه ، مع ذكر خطوات محددة عند الضرور...

<ol>
	<li>Gechev, T. S., Van Breusegem, F., Stone, J. M., Denev, I., Laloi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+as+signals+that+modulate+plant+stress+responses+and+programmed+cell+death.">Reactive oxygen species as signals that modulate plant stress responses and programmed cell death.</a> Bioessays. 28 (11), 1091-1101 (2006).</li><li>Mittler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS+are+good.">ROS are good.</a> Trends in Plant Science. 22 (1), 11-19 (2017).</li><li>Gilroy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS,+calcium,+and+electric+signals:+key+mediators+of+rapid+systemic+signaling+in+plants.">ROS, calcium, and electric signals: key mediators of rapid systemic signaling in plants.</a> Plant Physiology. 171 (3), 1606-1615 (2016).</li><li>Mittler, R., Vanderauwera, S., Gollery, M., Van Breusegem, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+gene+network+of+plants.">Reactive oxygen gene network of plants.</a> Trends in Plant Science. 9 (10), 490-498 (2004).</li><li>Marino, D., Dunand, C., Puppo, A., Pauly, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+burst+of+plant+NADPH+oxidases.">A burst of plant NADPH oxidases.</a> Trends in Plant Science. 17 (1), 9-15 (2012).</li><li>Mittler, R., Zandalinas, S. I., Fichman, Y., Van Breusegem, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+signalling+in+plant+stress+responses.">Reactive oxygen species signalling in plant stress responses.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 23 (10), 663-679 (2022).</li><li>Suzuki, N., Koussevitzky, S., Mittler, R., Miller, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS+and+redox+signalling+in+the+response+of+plants+to+abiotic+stress.">ROS and redox signalling in the response of plants to abiotic stress.</a> Plant, Cell &amp; Environment. 35 (2), 259-270 (2012).</li><li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+burst+oxidases:+the+engines+of+ROS+signaling.">Respiratory burst oxidases: the engines of ROS signaling.</a> Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 691-699 (2011).</li><li>Kadota, Y., Shirasu, K., Zipfel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+the+NADPH+oxidase+RBOHD+during+plant+immunity.">Regulation of the NADPH oxidase RBOHD during plant immunity.</a> Plant and Cell Physiology. 56 (8), 1472-1480 (2015).</li><li>Segonzac, C., Zipfel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+plant+pattern-recognition+receptors+by+bacteria.">Activation of plant pattern-recognition receptors by bacteria.</a> Current Opinion in Microbiology. 14 (1), 54-61 (2011).</li><li>Roda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+chemical+luminescence-based+biosensors:+A+critical+review.">Progress in chemical luminescence-based biosensors: A critical review.</a> Biosensors and Bioelectronics. 76, 164-179 (2016).</li><li>Hong, D., Joung, H. -. A., Lee, D. Y., Kim, S., Kim, M. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attomolar+detection+of+cytokines+using+a+chemiluminescence+immunoassay+based+on+an+antibody-arrayed+CMOS+image+sensor.">Attomolar detection of cytokines using a chemiluminescence immunoassay based on an antibody-arrayed CMOS image sensor.</a> Sensors and Actuators B: Chemical. 221, 1248-1255 (2015).</li><li>Nishinaka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.+new+sensitive+chemiluminescence+probe,+L-012,+for+measuring+the+production+of+superoxide+anion+by+cells.">et al. new sensitive chemiluminescence probe, L-012, for measuring the production of superoxide anion by cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 193 (2), 554-559 (1993).</li><li>Grundy, J., Stoker, C., Carre, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+regulation+of+abiotic+stress+tolerance+in+plants.">Circadian regulation of abiotic stress tolerance in plants.</a> Frontiers in Plant Science. 6, 648 (2015).</li></ol>

كان الغرض من هذه الدراسة هو إنشاء طريقة عالية الكفاءة لتحديد إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية المبكر استجابة ل PAMP في أنسجة الأرز. توفر هذه الطريقة إجراء موحدا لتحديد أنواع الأكسجين التفاعلية في الوقت الفعلي الناتجة عن أنسجة الأرز المعالجة. هذه الطريقة بسيطة في التشغيل ، منخفضة التكلفة ، وا...

تتكون أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) من سلسلة من مشتقات الأكسجين النشطة كيميائيا ، بما في ذلك جذور أنيون الأكسيد الفائق (O2-) ومشتقاته ، وجذور الهيدروكسيل (OH-) ، وبيروكسيد الهيدروجين ، ومنتجات تفاعلات الأكسجين المفردة أو تفاعلات تقليل الأكسدة ، والتي يتم إنتاجها باستمرار في البلاستيدات والبلاستيدات الخضراء ، والميتوكوندريا ، والبيروكسيسومات ، وغيرها من المواقع تحت الخلوية1 . تلعب أنواع الأكسجين التفاعلية أدوارا مهمة في العديد من العمليات البيولوجية وهي ضرورية لجميع النباتات2،3،4. يختلف الطيف الواسع لوظائف ROS من تنظيم النمو والتنمية إلى إدراك الضغوط اللاأحيائيةوالحيوية 5،6،7،8.
في الجهاز المناعي للنبات ، تدرك المستقبلات الموضعية لغشاء بلازما الخلية النباتية - ما يسمى مستقبلات التعرف على الأنماط (PRRs) - الأنماط الجزيئية المرتبطة بمسببات الأمراض الكيميائية المشتقة من مسببات الأمراض (PAMPs). يؤدي هذا التعرف إلى سلسلة من الاستجابات المناعية السريعة ، بما في ذلك تدفق الكالسيوم ، وانفجار ROS ، وشلال MAPK. وبالتالي ، فإن هذه الطبقة من المناعة تسمى المناعة التي يسببها PAMP (PTI). انفجار ROS هو استجابة PTI المميزة ، والتي يتم تطبيق تحديدها على نطاق واسع على الدراسات المتعلقة ب PTI 9,10. يعزى إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية الناجم عن PAMPs إلى أوكسيديز NADPH المقيم في غشاء البلازما ، أو بروتينات عائلة متجانسة أوكسيديز الانفجار التنفسي (RBOH) ، والتي تنقل الإلكترونات من NADPH الخلوي أو NADH إلى الأكسجين خارج الخلية لإنتاج أكسيد فائق (O 2-) يتم تحويله تلقائيا إلى بيروكسيد الهيدروجين (H 2 O 2) بواسطةديسموتاز فائقالأكسيد 8 . انفجار ROS الناجم عن PAMP سريع جدا ، ويظهر بعد دقائق قليلة فقط من علاج PAMP ويبلغ ذروته في ~ 10-12 دقيقة. تتكون الغالبية العظمى من جزيئات أنواع الأكسجين التفاعلية من بيروكسيد الهيدروجين (H 2 O2) ، والذي يمكن اكتشافه بسهولة وثبات باستخدام مقايسة التلألؤ الكيميائي.
في التلألؤ الكيميائي ، يتفاعل كاشف التلألؤ الكيميائي مع الأكسجين النشط ، تحت تأثير عامل حفاز ، لإنتاج وسيطة الحالة المثارة. بعد ذلك، تعود الإلكترونات الموجودة في الناتج إلى الحالة الأرضية من خلال الانتقال غير الإشعاعي، وتنبعث منها فوتونات. تشمل كواشف التلألؤ الكيميائي الشائعة اللومينول و L-012 ، مع سيطرة اللومينول على التطبيق11،12،13. ومع ذلك ، يختار المزيد من الباحثين L-012 للكشف عن إنتاج ROS ، نظرا لأن L-012 يتمتع بكفاءة انبعاث ضوء أعلى بكثير في ظل ظروف الأس الهيدروجيني المحايدة أو شبه المحايدة مقارنة باللومينول.
تصف هذه الورقة طريقة التلألؤ الكيميائي المحسنة ، استنادا إلى L-012 ، للكشف في الوقت الفعلي عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية بعد استنباط PAMPs في أقراص أوراق أنسجة الأرز (Oryza sativa) والغمد. الطريقة المقدمة هنا بسيطة ومستقرة وموحدة ، وقابلة للتكيف بدرجة كبيرة لتلبية الاحتياجات التجريبية المختلفة. البيانات التي تم الحصول عليها بهذه الطريقة قابلة للتكرار بشكل كبير في ظل ظروف خاضعة لرقابة صارمة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plate</td>
			<td>WHB</td>
			<td>WHB-96-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Innochem</td>
			<td>A43543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>flg22</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>p20973</td>
			<td>PAMP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gen5</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-012</td>
			<td>FUJIFILM</td>
			<td>120-04891</td>
			<td>8-amino-5-chloro-7-phenyl-2,3-dihydropyrido [3,4-d] pyridazine-1,4-dione, CAS #:143556-24-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td>Synergy 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS Medium</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>M8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCLO</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>S101636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase from horseradish (HRP)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phytagel</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sampler</td>
			<td>Miltex&#160;</td>
			<td>15110-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A502792</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A610195</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time detection of reactive oxygen species production in immune response in rice with a chemiluminescence assay

تلعب أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) أدوارا حيوية في مجموعة متنوعة من العمليات البيولوجية ، بما في ذلك استشعار الضغوط اللاأحيائية والحيوية. عند الإصابة بمسببات الأمراض أو التحدي مع المواد الكيميائية المرتبطة بمسببات الأمراض (الأنماط الجزيئية المرتبطة بمسببات الأمراض [PAMPs]) ، يتم تحفيز مجموعة من الاستجابات المناعية ، بما في ذلك انفجار أنواع الأكسجين التفاعلية ، بسرعة في النباتات ، والتي تسمى المناعة التي يسببها PAMP (PTI). انفجار ROS هو استجابة PTI المميزة ، والتي يتم تحفيزها بواسطة مجموعة من أوكسيديز NADPH المترجمة بغشاء البلازما - بروتينات عائلة RBOH. تتكون الغالبية العظمى من أنواع الأكسجين التفاعلية من بيروكسيد الهيدروجين (H2 O2) ، والذي يمكن اكتشافه بسهولة وثبات بواسطة طريقة التلألؤ الكيميائي القائمة على اللومينول. التلألؤ الكيميائي هو تفاعل منتج للفوتون يخضع فيه اللومينول ، أو مشتقه (مثل L-012) ، لتفاعل الأكسدة والاختزال مع أنواع الأكسجين التفاعلية تحت تأثير محفز. تصف هذه الورقة طريقة التلألؤ الكيميائي المحسنة القائمة على L-012 للكشف عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية apoplast في الوقت الفعلي عند استنباط PAMP في أنسجة الأرز. الطريقة سهلة وثابتة وموحدة وقابلة للتكرار بدرجة كبيرة في ظل ظروف خاضعة لرقابة صارمة.

هنا ، نأخذ مادة الأرز كمثال لتحديد أنواع الأكسجين التفاعلية المنتجة بمعالجة flg22. توليد ROS بعد الاستنباط عابر. في الأرز ، تم اكتشاف الزيادة في إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية لأول مرة في 1-2 دقيقة ، وبلغت ذروتها في 10-12 دقيقة ، وعادت إلى خط الأساس في ~ 30-35 دقيقة (الشكل 3). مقارنة باخ...

Watch this Scientific Journal Video about Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay at JoVE.com

Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay

هنا ، نصف طريقة للكشف في الوقت الحقيقي عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية المرتدة (ROS) في أنسجة الأرز في الاستجابة المناعية المرتبطة بالنمط الجزيئي المرتبط بمسببات الأمراض. هذه الطريقة بسيطة وموحدة وتولد نتائج قابلة للتكرار بدرجة كبيرة في ظل ظروف خاضعة للرقابة.

الكشف في الوقت الحقيقي عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية في الاستجابة المناعية في الأرز باستخدام مقايسة التلألؤ الكيميائي

Reactive oxygen species (ROS) play vital roles in a variety of biological processes, including the sensing of abiotic and biotic stresses. Upon pathogen ...

يصف هذا البروتوكول طريقة تلألؤ كيميائي محسنة قائمة على L-012 للكشف عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية في الوقت الفعلي عند استنباط PAMP في أنسجة الأرز. هذه الطريقة سهلة وموحدة وقابلة للتكرار بدرجة كبيرة في ظل ظروف خاضعة لرقابة صارمة. سيكون إظهار هذا الإجراء على يينغ ، طالب دكتوراه من مختبري.للبدء ، قم بتعقيم بذور الأرز المقشرة بنسبة 70٪ إيثانول لمدة دقيقة واحدة ، ثم باستخدام 40٪ هيبوكلوريت الصوديوم لمدة ساعة واحدة. شطف البذور خمس مرات بالماء المعقم لإزالة الكلور المتبقي. في طريقة غمد الأرز ، قم بطلاء البذور مباشرة في وعاء زجاجي معقم باستخدام وسط Murashige و Skoog أو MS.للوحة البذور في طريقة قرص الأوراق ، قم بوضعها على ألواح MS لمدة خمسة إلى سبعة أيام ثم زرعها في مصفوفة النمو أو التربة. تنمو الشتلات في غرفة النمو مع ضوء 12 ساعة ، 12 ساعة فترة الصورة المظلمة. قطع غمد من شتلات الأرز 10 أيام إلى ثلاثة أجزاء ملليمتر مع شفرة حلاقة حادة أو شفرة جراحية للمعالجة المسبقة قبل يوم واحد من فحص ROS.ضع خمسة أجزاء غمد في بئر فردي من صفيحة عيار 96 بئرا تحتوي على 100 ميكرولتر من الماء المقطر المزدوج لمدة 10 إلى 12 ساعة. قطع أقراص الأوراق من نباتات الأرز التي يبلغ عمرها أربعة إلى ستة أسابيع باستخدام لكمة خزعة مع المكبس. قم دائما بقص أقراص الأوراق من الثلث الأوسط من الورقة الثانية من الحارث الرئيسي لتقليل تباين البيانات.بعد ذلك ، ضع قرص ورقة واحدة في بئر فردي من صفيحة عيار 96 بئرا تحتوي على 100 ميكرولتر من الماء المقطر المزدوج لمدة 10 إلى 12 ساعة للمعالجة المسبقة. احتفظ بجميع أقراص الأوراق عائمة ومتجهة لأعلى في آبار صفيحة العيار الدقيق للمعالجة المسبقة للمياه لتجنب الاختلاف المرتبط بجانب الورقة. تحضير محلول الاستنباط من خلال الجمع بين 9.4 ملليلتر من 50 ميكرومولار Tris HCL ، و 400 ميكرولتر من محلول L012 ، و 100 ميكرولتر من بيروكسيديز فجل الحصان ، و 100 ميكرولتر من Flg22.أضف 200 ميكرولتر من محلول الاستنباط إلى الآبار. ابدأ تشغيل البرنامج وانقر على زر التجارب لإنشاء بروتوكول جديد أو استخدام بروتوكول موجود. انقر فوق الإجراء في النافذة المنبثقة لإعداد اللوحة وحدد الآبار من اللوحة المراد مراقبتها.انقر فوق بدء الحركة واضبط وقت التشغيل على 30 دقيقة أو أكثر ، حسب المتطلبات التجريبية. حدد الحد الأدنى للفاصل الزمني للحصول على القراءات بشكل متكرر قدر الإمكان. ولوقت التكامل ، اختر ثانية واحدة أو أكثر حسب شدة الإشارة.انقر فوق التحقق من الصحة ، متبوعا ب حسنا لتأكيد الإعدادات ، ثم انقر فوق اكتشاف اللوحة الجديدة في النافذة المنبثقة وانتظر حتى يطالب البرنامج بمربع حوار لوحة التحميل. قم بإزالة الماء المقطر المزدوج بعناية من الآبار التي تحتوي على الأنسجة المعالجة مسبقا ، وتجنب أي تلف أو جفاف للأنسجة. استخدم ماصة متعددة القنوات لإضافة 200 ميكرولتر من محلول الاستنباط إلى الآبار التي تحتوي على الأنسجة.ضع اللوحة المراد اختبارها على الناقل وابدأ الكشف. للحث على ROS بواسطة Flg22 ، تم استخدام أقراص الأوراق وأغماد بطول ثلاثة ملليمترات. تتم مراقبة توليد ROS لمدة 35 دقيقة.تشير الأشرطة إلى وسائل الانحرافات المعيارية المحسوبة من خمسة تكرارات فنية. في الأرز ، تم اكتشاف الزيادة في إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية لأول مرة في دقيقة إلى دقيقتين ، وبلغت ذروتها في 10 إلى 12 دقيقة وعادت إلى خط الأساس في حوالي 30 إلى 35 دقيقة. تم حساب المبلغ الإجمالي ل ROS من المنحنى.للحصول على المبلغ الإجمالي لقيم ROS ، قم بتطبيق الصيغة على مجموعات البيانات المقابلة لحساب ROS الذي تم إنشاؤه في كل فترة زمنية ، والتي يمكن دمجها عن طريق تطبيق مجموع الصيغة لحساب المبلغ الإجمالي الذي تم إنشاؤه. تم وضع ثقب واحد أو نصفين من قرص الأوراق في آبار صفيحة عيار 96 بئر معالجة مسبقا ب 100 ميكرولتر من الماء المقطر المزدوج لمدة 10 إلى 12 ساعة ثم معالجتها باستخدام Flg22 لتحريض ROS. قيم القراءة من عينتي نصف القرص أعلى بكثير من تلك الموجودة في قرص الورقة بالكامل.في المتوسط ، تبلغ القيم الإجمالية من عينتي نصف القرص ما يقرب من 1.6 ضعف تلك الموجودة في قرص الورقة بالكامل ، وهو ما يتناسب مع طول الحافة ، وليس مع مساحة العينات. تدعم هذه النتيجة أن أنواع الأكسجين التفاعلية تتولد بشكل أساسي في الخلايا في موقع الجرح. عند محاولة هذا الإجراء ، اعمل مع الأنسجة برفق ولا تقم بإجراء تخفيضات إضافية قد تكون مصدرا لاختلاف البيانات.يمكن تطبيق هذه الطريقة على أي عمليات فسيولوجية أخرى منتجة لأنواع الأكسجين التفاعلية في الأنسجة النباتية.

Research

JoVE Journal

Biology

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis Extension Response PER Assay in Drosophila

خرطوم ملحق مواجهتها (PER) الفحص في ذبابة الفاكهة

Proboscis extension response (PER) is a taste behavior assay that has been used in flies as well as in honeybees.
On the surface of the fly's mouth ...

Detecting, Visualizing and Quantitating the Generation of Reactive Oxygen Species in an Amoeba Model System

كشف، تصور وQuantitating الجيل من أنواع الاكسجين التفاعلية في النظام النموذجي الاميبا

Reactive oxygen species (ROS) comprise a range of reactive and short-lived, oxygen-containing molecules, which are dynamically interconverted or ...

Real-time Imaging of Single Engineered RNA Transcripts in Living Cells Using Ratiometric Bimolecular Beacons

التصوير في الوقت الحقيقي من واحدة المهندسة رنا النصوص في الخلايا الحية عن طريق Ratiometric ثنائي الجزيء منارات

The growing realization that both the temporal and spatial regulation of gene expression can have important consequences on cell function has led to the ...

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

تعزيز الشمالية كشف طخة الأنواع RNA الصغيرة في<em&gt; الدروسوفيلاميلانوجاستر</em

The last decades have witnessed the explosion of scientific interest around gene expression control mechanisms at the RNA level. This branch of molecular ...

Measuring Glutathione-induced Feeding Response in Hydra

قياس الاستجابة التغذية الناجم عن الجلوتاثيون في حيدرة

Hydra is among the most primitive organisms possessing a nervous system and chemosensation for detecting reduced glutathione (GSH) for capturing the prey. ...

Development of a Quantitative Recombinase Polymerase Amplification Assay with an Internal Positive Control

تطوير الكمية Recombinase البلمرة التضخيم الفحص مع الرقابة الداخلية إيجابي

It was recently demonstrated that recombinase polymerase amplification (RPA), an isothermal amplification platform for pathogen detection, may be used to ...

qPCRTag Analysis - A High Throughput, Real Time PCR Assay for Sc2.0 Genotyping

تحليل qPCRTag - إنتاجية عالية، في الوقت الحقيقي PCR الفحص لSc2.0 التنميط الجيني

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic ...

Stimulation of Stem Cell Niches and Tissue Regeneration in Mouse Skin by Switchable Protoporphyrin IX-Dependent Photogeneration of Reactive Oxygen Species In Situ

تحفيز منافذ الخلايا الجذعية وتجديد الأنسجة في جلد الفأر عن طريق التوليد الضوئي المعتمد على البروتوبورفيرين التاسع لأنواع الأكسجين التفاعلية في الموقع

Here, we describe a protocol to induce switchable in vivo photogeneration of endogenous reactive oxygen species (ROS) in mouse skin. This transient ...

Real-Time Monitoring of Aurora kinase A Activation using Conformational FRET Biosensors in Live Cells

المراقبة في الوقت الحقيقي لتنشيط Aurora kinase A باستخدام أجهزة الاستشعار الحيوية FRET التوافقية في الخلايا الحية

Epithelial cancers are often hallmarked by the overexpression of the Ser/Thr kinase Aurora A/AURKA. AURKA is a multifunctional protein that activates upon ...