Name: real-time detection of reactive oxygen species production in immune response in rice with a chemiluminescence assay
Uploaded: 2022-11-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door subsidies van Shanghai Natural Science Foundation (Grant Number: 21ZR1429300/BS1500016), Shanghai Jiao Tong University (Agri-X program, Grant Number:AF1500088/002), Shanghai Collaborative Innovation Center of Agri-Seeds (Grant Number: ZXWH2150201/001) aan Jiangbo Fan, en door het Medical-Engineering Collaboration Project van Shanghai Jiao Tong Univesity (subsidienummer: 21X010301734) aan Can Li.

OPMERKING: Het protocol is van toepassing op verschillende plantenweefsels. Rijstschede en bladschijven werden in dit protocol gebruikt voor ROS-detectie bij PAMP-elicitatie. Aangezien verschillen voornamelijk ontstaan als gevolg van de bemonsteringsmethode, worden hieronder alleen de gemeenschappelijke procedures beschreven, waarbij waar nodig specifieke stappen worden vermeld.
1. Plantencultuur
<ol><li>Steriliseer de ontpelde rijstzaden met 70% ethanol gedurende 1 minuut, ...

<ol>
	<li>Gechev, T. S., Van Breusegem, F., Stone, J. M., Denev, I., Laloi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+as+signals+that+modulate+plant+stress+responses+and+programmed+cell+death.">Reactive oxygen species as signals that modulate plant stress responses and programmed cell death.</a> Bioessays. 28 (11), 1091-1101 (2006).</li><li>Mittler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS+are+good.">ROS are good.</a> Trends in Plant Science. 22 (1), 11-19 (2017).</li><li>Gilroy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS,+calcium,+and+electric+signals:+key+mediators+of+rapid+systemic+signaling+in+plants.">ROS, calcium, and electric signals: key mediators of rapid systemic signaling in plants.</a> Plant Physiology. 171 (3), 1606-1615 (2016).</li><li>Mittler, R., Vanderauwera, S., Gollery, M., Van Breusegem, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+gene+network+of+plants.">Reactive oxygen gene network of plants.</a> Trends in Plant Science. 9 (10), 490-498 (2004).</li><li>Marino, D., Dunand, C., Puppo, A., Pauly, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+burst+of+plant+NADPH+oxidases.">A burst of plant NADPH oxidases.</a> Trends in Plant Science. 17 (1), 9-15 (2012).</li><li>Mittler, R., Zandalinas, S. I., Fichman, Y., Van Breusegem, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+signalling+in+plant+stress+responses.">Reactive oxygen species signalling in plant stress responses.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 23 (10), 663-679 (2022).</li><li>Suzuki, N., Koussevitzky, S., Mittler, R., Miller, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROS+and+redox+signalling+in+the+response+of+plants+to+abiotic+stress.">ROS and redox signalling in the response of plants to abiotic stress.</a> Plant, Cell &amp; Environment. 35 (2), 259-270 (2012).</li><li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+burst+oxidases:+the+engines+of+ROS+signaling.">Respiratory burst oxidases: the engines of ROS signaling.</a> Current Opinion in Plant Biology. 14 (6), 691-699 (2011).</li><li>Kadota, Y., Shirasu, K., Zipfel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+the+NADPH+oxidase+RBOHD+during+plant+immunity.">Regulation of the NADPH oxidase RBOHD during plant immunity.</a> Plant and Cell Physiology. 56 (8), 1472-1480 (2015).</li><li>Segonzac, C., Zipfel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+plant+pattern-recognition+receptors+by+bacteria.">Activation of plant pattern-recognition receptors by bacteria.</a> Current Opinion in Microbiology. 14 (1), 54-61 (2011).</li><li>Roda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+chemical+luminescence-based+biosensors:+A+critical+review.">Progress in chemical luminescence-based biosensors: A critical review.</a> Biosensors and Bioelectronics. 76, 164-179 (2016).</li><li>Hong, D., Joung, H. -. A., Lee, D. Y., Kim, S., Kim, M. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attomolar+detection+of+cytokines+using+a+chemiluminescence+immunoassay+based+on+an+antibody-arrayed+CMOS+image+sensor.">Attomolar detection of cytokines using a chemiluminescence immunoassay based on an antibody-arrayed CMOS image sensor.</a> Sensors and Actuators B: Chemical. 221, 1248-1255 (2015).</li><li>Nishinaka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.+new+sensitive+chemiluminescence+probe,+L-012,+for+measuring+the+production+of+superoxide+anion+by+cells.">et al. new sensitive chemiluminescence probe, L-012, for measuring the production of superoxide anion by cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 193 (2), 554-559 (1993).</li><li>Grundy, J., Stoker, C., Carre, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+regulation+of+abiotic+stress+tolerance+in+plants.">Circadian regulation of abiotic stress tolerance in plants.</a> Frontiers in Plant Science. 6, 648 (2015).</li></ol>

Het doel van deze studie was om een zeer efficiënte methode vast te stellen om de vroege ROS-productie te kwantificeren als reactie op PAMP in rijstweefsels. Deze methode biedt een gestandaardiseerde procedure voor de real-time bepaling van apoplast ROS geproduceerd uit behandelde rijstweefsels. Deze methode is eenvoudig in gebruik, laag in kosten, duidelijk van samenstelling en onafhankelijk van commerciële kits. Met behulp van deze methode kunnen onderzoekers de real-time productie van apoplast ROS bestuderen wanneer...

Reactieve zuurstofsoorten (ROS) omvatten een reeks chemisch actieve zuurstofderivaten, waaronder superoxide-anionradicalen (O2-) en zijn derivaten, hydroxylradicalen (OH-), waterstofperoxide en producten van singletzuurstof of oxidatie-reductiereacties, die voortdurend worden geproduceerd in plastiden en chloroplasten, mitochondriën, peroxisomen en andere subcellulaire locaties1 . ROS spelen een belangrijke rol in veel biologische processen en zijn essentieel voor alle planten 2,3,4. Het brede spectrum van ROS-functies varieert van de regulatie van groei en ontwikkeling tot de perceptie van abiotische en biotische spanningen 5,6,7,8.
In het immuunsysteem van de plant nemen plantencelplasmamembraan-gelokaliseerde receptoren - zogenaamde patroonherkenningsreceptoren (PRR's) - pathogeen-afgeleide chemicaliën-pathogeen-geassocieerde moleculaire patronen (PAMP's) waar. Deze herkenning veroorzaakt een reeks snelle immuunresponsen, waaronder calciuminstroom, ROS-burst en MAPK-cascade; daarom wordt deze laag van immuniteit PAMP-getriggerde immuniteit (PTI) genoemd. ROS-burst is een kenmerkende PTI-respons, waarvan de bepaling op grote schaal wordt toegepast op PTI-gerelateerde studies 9,10. ROS-productie veroorzaakt door PAMP's wordt toegeschreven aan plasmamembraan-residente NADPH-oxidase, of respiratoire burst-oxidasehomologe (RBOH) familie-eiwitten, die elektronen overbrengen van cytosolische NADPH of NADH naar extracellulaire zuurstof om superoxide (O 2-) te produceren dat spontaan wordt omgezet in waterstofperoxide (H 2 O 2) door superoxidedismutase 8 . PAMP-getriggerde ROS-burst is vrij snel, verschijnt slechts een paar minuten na PAMP-behandeling en piekt op ~ 10-12 min. De overgrote meerderheid van de ROS-moleculen bestaat uit waterstofperoxide (H 2 O2), dat gemakkelijk en gestaag kan worden gedetecteerd met een chemiluminescentietest.
Bij chemiluminescentie reageert het chemiluminescentiereagens met actieve zuurstof, onder invloed van een katalysator, om de aangeslagen toestandstussenproducten te produceren. Vervolgens keren de elektronen in het product terug naar de grondtoestand door niet-stralingsovergang en zenden fotonen uit. Veel voorkomende chemiluminescentiereagentia zijn luminol en L-012, waarbij luminol de toepassing domineert11,12,13. Meer onderzoekers kiezen echter voor L-012 om ros-productie te detecteren, omdat L-012 een veel hogere lichtemissie-efficiëntie heeft onder neutrale of bijna neutrale pH-omstandigheden in vergelijking met luminol.
Dit artikel beschrijft een geoptimaliseerde chemiluminescentiemethode, gebaseerd op L-012, voor de real-time detectie van ROS-productie na de elicitatie van PAMPs in rijst (Oryza sativa) weefselbladschijven en schede. De hier aangeboden methode is eenvoudig, stabiel en gestandaardiseerd en is zeer aanpasbaar om aan verschillende experimentele behoeften te voldoen. De gegevens die met deze methode worden verkregen, zijn in hoge mate reproduceerbaar onder stevig gecontroleerde omstandigheden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-well microtiter plate</td>
			<td>WHB</td>
			<td>WHB-96-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Innochem</td>
			<td>A43543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>flg22</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>p20973</td>
			<td>PAMP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gen5</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-012</td>
			<td>FUJIFILM</td>
			<td>120-04891</td>
			<td>8-amino-5-chloro-7-phenyl-2,3-dihydropyrido [3,4-d] pyridazine-1,4-dione, CAS #:143556-24-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td>Synergy 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS Medium</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>M8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCLO</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>S101636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase from horseradish (HRP)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phytagel</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sampler</td>
			<td>Miltex&#160;</td>
			<td>15110-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A502792</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A610195</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time detection of reactive oxygen species production in immune response in rice with a chemiluminescence assay

Reactieve zuurstofsoorten (ROS) spelen een vitale rol in een verscheidenheid aan biologische processen, waaronder het detecteren van abiotische en biotische spanningen. Bij pathogene infectie of uitdaging met pathogeen-geassocieerde chemicaliën (pathogeen-geassocieerde moleculaire patronen [PAMPs]), wordt een reeks immuunresponsen, waaronder een ROS-burst, snel geïnduceerd in planten, die PAMP-getriggerde immuniteit (PTI) wordt genoemd. Een ROS-burst is een kenmerkende PTI-respons, die wordt gekatalyseerd door een groep plasmamembraan-gelokaliseerde NADPH-oxidasen - de RBOH-familie-eiwitten. De overgrote meerderheid van ROS bestaat uit waterstofperoxide (H 2 O2), dat gemakkelijk en gestaag kan worden gedetecteerd met een op luminol gebaseerde chemiluminescentiemethode. Chemiluminescentie is een fotonenproducerende reactie waarbij luminol, of zijn derivaat (zoals L-012), een redoxreactie met ROS ondergaat onder invloed van een katalysator. Dit artikel beschrijft een geoptimaliseerde op L-012 gebaseerde chemiluminescentiemethode om apoplast ROS-productie in realtime te detecteren bij PAMP-elicitatie in rijstweefsels. De methode is eenvoudig, stabiel, gestandaardiseerd en zeer reproduceerbaar onder stevig gecontroleerde omstandigheden.

Hier nemen we rijstmateriaal als voorbeeld om de ROS te bepalen die wordt geproduceerd met flg22-behandeling. De generatie van ROS na elicitatie is van voorbijgaande aard. In rijst werd de toename van de ROS-productie voor het eerst gedetecteerd in 1-2 minuten, piekte op 10-12 min en keerde terug naar de basislijn in ~ 30-35 min (figuur 3). In vergelijking met de controletest, waarbij PAMP afwezig was in de elicitatieoplossing die resulteerde in geen duidelijke ROS-inductie, werd een specifi...

Watch this Scientific Journal Video about Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay at JoVE.com

Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay

Hier beschrijven we een methode voor de real-time detectie van apoplastische reactieve zuurstofsoorten (ROS) productie in rijstweefsels in pathogeen-geassocieerde moleculaire patroon-getriggerde immuunrespons. Deze methode is eenvoudig, gestandaardiseerd en genereert zeer reproduceerbare resultaten onder gecontroleerde omstandigheden.

Real-time detectie van reactieve zuurstofsoortenproductie in immuunrespons in rijst met een chemiluminescentietest

Reactive oxygen species (ROS) play vital roles in a variety of biological processes, including the sensing of abiotic and biotic stresses. Upon pathogen ...

Dit protocol beschrijft een geoptimaliseerde op L-012 gebaseerde chemiluminescentiemethode om ros-productie in realtime te detecteren bij PAMP-elicitatie in rijstweefsels. Deze methode is eenvoudig, gestandaardiseerd en zeer reproduceerbaar onder stevig gecontroleerde omstandigheden. Deze procedure wordt gedemonstreerd door On Ying, een promovendus uit mijn lab.Om te beginnen, steriliseer de ontdopte rijstzaden met 70% ethanol gedurende één minuut en vervolgens met 40% natriumhypochloriet gedurende een uur. Spoel de zaden vijf keer af met steriel water om achtergebleven chloor te verwijderen. Bij de rijstmantelmethode kunt u de zaden direct in het steriele glazen vat met Murashige en Skoog of MS-medium plaatsen.Om de zaden in de bladschijfmethode te plaatsen, Plaats ze vijf tot zeven dagen op MS-platen en transplanteer ze vervolgens naar de groeimatrix of grond. Laat de zaailingen groeien in een groeiruimte met een 12 uur lichte, 12 uur donkere fotoperiode. Snijd de schede van 10 dagen oude rijstzaailingen in drie millimetersegmenten met een scherp scheermesje of chirurgisch mesje voor voorbehandeling een dag voor de ROS-test.Plaats vijf mantelsegmenten in een individuele put van een 96-put microtiterplaat met 100 microliter dubbel gedestilleerd water gedurende 10 tot 12 uur. Snijd de bladschijven van vier tot zes weken oude rijstplanten met behulp van een biopsiepons met een zuiger. Knip altijd de bladschijven van het middelste derde deel van het tweede blad van de hoofdhelmstok om de gegevensvariatie te verminderen.Plaats vervolgens een bladschijf in een individuele put van een 96-put microtiterplaat met 100 microliter dubbel gedestilleerd water gedurende 10 tot 12 uur voor voorbehandeling. Houd alle bladschijven drijvend en naar boven gericht in de putjes van een microtiterplaat voor watervoorbehandeling om bladzijde geassocieerde variatie te voorkomen. Bereid elicitatie-oplossing door 9,4 milliliter 50 micromolaire Tris Hcl, 400 microliter L012-oplossing, 100 microliter paardenradijsperoxidase en 100 microliter Flg22 te combineren.Voeg 200 microliter elicitatie-oplossing toe aan de putten. Start de software en klik op de knop experimenten om een nieuw protocol te maken of een bestaand protocol te gebruiken. Klik op de procedure in de pop-up om de plaat in te stellen en selecteer de putten van de plaat die u wilt controleren.Klik op start kinetic en stel de runtime in op 30 minuten of langer, afhankelijk van de experimentele vereisten. Selecteer het minimale interval om de metingen zo vaak mogelijk te verkrijgen. En kies voor integratietijd een seconde of langer, afhankelijk van de signaalintensiteit.Klik op valideren, gevolgd door OK om de instellingen te bevestigen, klik vervolgens op de nieuwe plaat detecteren in de pop-up en wacht tot de software het dialoogvenster van de laadplaat vraagt. Verwijder voorzichtig het dubbel gedestilleerde water uit de putten met de voorbehandelde weefsels en vermijd weefselbeschadiging of uitdroging. Gebruik een meerkanaalspipet om 200 microliter van de elicitatieoplossing toe te voegen aan de putjes die de weefsels bevatten.Plaats de te testen plaat op de drager en begin met de detectie. Om ROS door Flg22 te induceren, werden bladschijven en drie millimeter lange mantels gebruikt. De ROS-generatie wordt gedurende 35 minuten gemonitord.De staven geven de gemiddelde standaardafwijkingen aan, berekend op basis van vijf technische herhalingen. In rijst werd de toename van de ROS-productie voor het eerst gedetecteerd in één tot twee minuten, piekte op 10 tot 12 minuten en keerde terug naar de basislijn in ongeveer 30 tot 35 minuten. Het totale bedrag aan ROS werd berekend op basis van de curve.Als u het totale aantal ROS-waarden wilt verkrijgen, past u de formule toe op de overeenkomstige gegevenssets om de ROS te berekenen die op elk tijdsinterval wordt gegenereerd, die kan worden gecombineerd door de formulesom toe te passen om het totale gegenereerde bedrag te berekenen. Een enkel gat of twee helften van een bladschijf werden in de putten van een 96-putmicrotiterplaat geplaatst, voorbehandeld met 100 microliter dubbel gedestilleerd water gedurende 10 tot 12 uur en vervolgens behandeld met Flg22 voor ROS-inductie. De afleeswaarden van de twee halve schijfmonsters zijn veel hoger dan die van de hele bladschijf.Gemiddeld zijn de totale waarden van de twee halve schijfmonsters bijna 1,6 keer die van de hele bladschijf, wat evenredig is met de randlengte, niet met de oppervlakte van de monsters. Dit resultaat ondersteunt dat ROS voornamelijk worden gegenereerd in cellen op de wondplaats. Wanneer u deze procedure probeert, moet u voorzichtig met weefsels werken en geen extra uitsneden maken die een bron van gegevensvariatie kunnen zijn.Deze methode kan worden toegepast op alle andere ROS-producerende fysiologische processen in plantenweefsels.

Research

JoVE Journal

Biology

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis Extension Response PER Assay in Drosophila

Snuit Extension Response (PER) assay in Drosophila

Proboscis extension response (PER) is a taste behavior assay that has been used in flies as well as in honeybees.
On the surface of the fly's mouth ...

Detecting, Visualizing and Quantitating the Generation of Reactive Oxygen Species in an Amoeba Model System

Opsporen, visualiseren en kwantificeren van de Generatie van reactive oxygen species in een Amoeba Model Systeem

Reactive oxygen species (ROS) comprise a range of reactive and short-lived, oxygen-containing molecules, which are dynamically interconverted or ...

Real-time Imaging of Single Engineered RNA Transcripts in Living Cells Using Ratiometric Bimolecular Beacons

Real-time beeldvorming van Single Engineered RNA-transcripten in levende cellen door gebruik Ratiometrische Bimoleculaire Beacons

The growing realization that both the temporal and spatial regulation of gene expression can have important consequences on cell function has led to the ...

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

Enhanced Northern Blot Detection of Small RNA Species in Drosophila Melanogaster

Verbeterde Northern Blot detectie van kleine RNA Species in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

The last decades have witnessed the explosion of scientific interest around gene expression control mechanisms at the RNA level. This branch of molecular ...

Measuring Glutathione-induced Feeding Response in Hydra

Meten-Glutathion geïnduceerde Feeding Response in Hydra

Hydra is among the most primitive organisms possessing a nervous system and chemosensation for detecting reduced glutathione (GSH) for capturing the prey. ...

Development of a Quantitative Recombinase Polymerase Amplification Assay with an Internal Positive Control

Ontwikkeling van een kwantitatieve Recombinase Polymerase Amplificatie test met een interne positieve controle

It was recently demonstrated that recombinase polymerase amplification (RPA), an isothermal amplification platform for pathogen detection, may be used to ...

qPCRTag Analysis - A High Throughput, Real Time PCR Assay for Sc2.0 Genotyping

qPCRTag Analyse - Een High Throughput, Real Time PCR test voor Sc2.0 genotypering

The Synthetic Yeast Genome Project (Sc2.0) aims to build 16 designer yeast chromosomes and combine them into a single yeast cell. To date one synthetic ...

Stimulation of Stem Cell Niches and Tissue Regeneration in Mouse Skin by Switchable Protoporphyrin IX-Dependent Photogeneration of Reactive Oxygen Species In Situ

Stimulatie van stamcelniches en weefselregeneratie in muizenhuid door schakelbare protoporfyrine IX-afhankelijke fotogeneratie van reactieve zuurstofsoorten in situ

Here, we describe a protocol to induce switchable in vivo photogeneration of endogenous reactive oxygen species (ROS) in mouse skin. This transient ...

Real-Time Monitoring of Aurora kinase A Activation using Conformational FRET Biosensors in Live Cells

Real-Time Monitoring van Aurora kinase A Activatie met behulp van Conformational FRET Biosensors in Live Cells

Epithelial cancers are often hallmarked by the overexpression of the Ser/Thr kinase Aurora A/AURKA. AURKA is a multifunctional protein that activates upon ...