Name: a piglet perinatal asphyxia model to study cardiac injury and hemodynamics after cardiac arrest, resuscitation, and the return of spontaneous circulation
Uploaded: 2023-01-13T13:20:00
Duration: 10 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation at J

نود أن نشكر جميع الزملاء الباحثين والباحثين الذين ساعدوا في إنشاء وتطوير وصقل نموذج الخنزير الصغير هذا للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة والسكتة القلبية في منشآتنا. نود أن نشكر الموظفين في مرافق البحوث الحيوانية في معهد البحوث الجراحية ومعهد الطب المقارن ، جامعة أوسلو ، النرويج ، وفنيي الأبحاث في جامعة ألبرتا ، إدمونتون ، كندا ، على تعاونهم خلال السنوات. نشكر برنامج أبحاث طلاب الطب في جامعة أوسلو ، ومجلس البحوث في النرويج ، و SIDS النرويجية وجمعية الإملاص على الدعم الاقتصادي لهذا المنشور.

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح ذات صلة بهذه المقالة للكشف عنها.

نموذج الخنزير الصغير هذا يستغرق وقتا طويلا ويمثل تحديا تقنيا ، مع العديد من الخطوات الحاسمة. مطلوب توازن دقيق في الأدوية والتدخلات الجراحية وطريقة إحداث السكتة القلبية لضمان معدل معقول للبقاء على قيد الحياة. نظرا لأن البروتوكول طويل المدة نسبيا ويتضمن العديد من الخطوات الحاسمة ، فإن إجراء التجارب يتطلب إعدادا شاملا وفريقا متخصصا يعمل بشكل جيد ، ويجب إجراء التجارب في مرافق لديها خبرة في الأبحاث الحيوانية الكبيرة. أجرت فرق البحث لدينا تجارب على واحد إلى ثلاثة خنازير صغيرة بالتوازي. من المستحسن أن يكون هناك شخصان على الأقل حاضران في جميع الأوقات أثناء التجارب وثلاثة أشخاص على الأقل إذا كانت التجارب ستجرى مع ثلاثة خنازير صغيرة في نفس الوقت.
تشمل الأجزاء المهمة والصعبة تقنيا بشكل خاص من التجارب ما يلي: 1) التأكد من أن جميع المعدات تعمل وأن جميع أدوات أخذ عينات البيانات متوفرة وتعمل ومعايرة. 2) تهوية ميكانيكية جيدة ومرضية ، خاصة قبل الاختناق وأثناء الإنعاش القلبي الرئوي ؛ 3) التدخل الجراحي. 4) تحريض الاختناق. 5) التأكد من السكتة القلبية. 6) الإنعاش القلبي الرئوي. و 7) أخذ عينات من العينات ، خاصة في النقاط الحرجة مثل السكتة القلبية و ROSC. أهم الخطوات في البروتوكول هي تحريض الاختناق والتأكد من السكتة القلبية. في التجارب الأولى ، تمت إضافة CO2 إلى غاز الاختناق لتقليد الحماض التنفسي والأيضي المختلط عن كثب للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة 10،11،13،14،15،16،20. ومع ذلك ، في التجارب اللاحقة7،21،22 حيث لميكن غاز CO 2 متاحا ، لوحظ أيضا انخفاض معدل التهوية الميكانيكية متبوعا بتركيب ETT بعد 20-30 دقيقة ليؤدي إلى الحماض التنفسي والأيضي المختلط. مستويات CO2 العالية في السكتة القلبية ليست مهمة فقط لمحاكاة الحالة السريرية ولكنها قد تؤثر أيضا على ROSC. قد يكون السبب في ذلك هو أن السكتة القلبية يبدو أنها تحدث عند درجة حموضة معينة ، ويعتمد الرقم الهيدروجيني على كل من اللاكتات وثاني أكسيد الكربون2. نظرا لأن فرط ثنائي أكسيد الكربون ينعكس بسهولة أكبر من الحماض اللبني ، فإن الحماض التنفسي في الغالب مقابل الحماض الأيضي قد يحدد مدى سرعة تعافي الخنازير من الاختناق. غالبا ما تبدأ نماذج الخنازير الأخرى للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة أو HIE في إعادة الأكسجة / الإنعاش قبل السكتة القلبية ، عادة وفقا لقيم MAP أو مدة الاختناق (على سبيل المثال ، 45 دقيقة من الاختناق 29 ، 2 ساعة من الاختناق 30 ، MAP من 20 مم زئبق 31 ، خريطة 30-35 مم زئبق 30 ، MAP70٪ تحت خط الأساس29،32). ميزة هذا النموذج هي أنه من خلال إحداث السكتة القلبية ، من الممكن دراسة الإنعاش القلبي الرئوي لحديثي الولادة وبيانات العينة قبل السكتة القلبية وأثناءها وبعدها مباشرة. والجدير بالذكر أن النتيجة العرضية التي تفيد بأن جزءا كبيرا من الخنازير لديها PEA 7,33 أثناء السكتة القلبية قد تزيد من قابلية تطبيق النموذج خارج مجال الفترة المحيطة بالولادة 34.
على مر السنين ، تم تحسين النموذج لتقليل تعرض الخنازير للمهدئات والتدخل الجراحي وتحسين أخذ عينات البيانات والتسجيلات. تضمنت البروتوكولات السابقة 10،11،13،14،15،16،20 تحريض التخدير باستخدام سيفوفلوران. تم التخلي عن هذا الآن ، حيث يتضمن البروتوكول الحالي إنشاء وصول وريدي مباشرة من خلال وريد الأذن والأدوية الوريدية. هذا ممكن حيث يتم تجنب ضائقة الخنزير الصغير ببساطة عن طريق تقميط الخنزير الصغير في منشفة قبل إدخال القسطرة الوريدية الطرفية بواسطة مزود مدرب. كما استخدم الميدازولام في البروتوكولات التجريبية الأولى. ومع ذلك ، فإن التقييم الشخصي للباحث (R.S.) الذي أجرى الغالبية العظمى من عمليات التشريح كان أن الدماغ كان في حالة أسوأ أثناء تشريح الجثة إذا تم استخدام الميدازولام كتسريب مستمر. لذلك ، نستخدم الآن الفنتانيل الوريدي فقط للحفاظ على التخدير. يمكن استخدام الميدازولام في جرعات البلعة إذا أظهر الخنزير الصغير علامات الضيق ولم يظهر الفنتانيل و / أو البنتوباربيتال أي تأثير. ومع ذلك ، لم نضطر أبدا إلى إدارتها.
من حيث التحسينات الأخرى ، في التجارب السابقة ، تم استئصال القصبة الهوائية مع أنبوب القصبة الهوائية مؤمن بإحكام وضعت من خلال شق تحت المزمار. يوفر هذا الإجراء مجرى هواء خال من التسرب ولكنه يسبب إجهادا جراحيا للخنزير الصغير. من ناحية أخرى ، نظرا لأكبر الشعب الهوائية العلوية للخنزير الصغير ، يرتبط التنبيب الرغامي بتسرب كبير عند استخدام ETTs غير المقيدة. لذلك ، بدأنا في استخدام ETTs المقيدة ، مما أدى إلى عدم وجود تسرب ومعدلات ROSC أعلى بشكل ملحوظ ، مقارنة بالتجارب مع الخنازير القصبة الهوائية. وعلاوة على ذلك، أدخلت بعض التعديلات فيما يتعلق بأخذ عينات البيانات. تضمنت بعض التجارب السابقة7،19،22،33،35،36 استخدام مسبار تدفق موضوع حول الشريان السباتي المشترك الأيسر. لم يكن مسبار التدفق هذا متاحا بسهولة في معهدنا في أوسلو في السنوات الأخيرة. لا يزال مختبرنا في إدمونتون يستخدم مسبار التدفق السباتي ، وقد يوفر استخدامه بيانات ديناميكية دموية إضافية قيمة للنموذج. تضمنت بعض التجارب السابقة أيضا استخدام قسطرة حجم الضغط الموضوعة في البطين الأيسر عن طريق دفعها عبر أحد السباتيين. أدى إعطاء ضغطات الصدر إلى إرباك تسجيلات قسطرة حجم الضغط ، وفي بعض الحالات ، تسبب في فشل القسطرة وكسرها. وبالتالي ، تم التخلي عن استخدامه في نموذج الاعتقال. في الآونة الأخيرة ، تمت إضافة أجهزة مراقبة أول أكسيد الكربون غير الغازية إلى البروتوكول ، ونحن نركز على تحسين إشارات تخطيط القلب أثناء السكتة القلبية والإنعاش القلبي الرئوي ، لأنها قد تقدم معلومات قيمة عن مورفولوجيا تخطيط القلب و PEA. أخيرا ، تم تمديد وقت المراقبة بعد ROSC من 4 ساعات إلى 9.5 ساعة ، لأن 4 ساعات قصيرة جدا بحيث لا تكون قادرة على اكتشاف التغيرات النسيجية المرضية وموت الخلايا والتغيرات في بعض المؤشرات الحيوية.
أحد أهم قيود هذا النموذج ، واستخدام الخنازير بشكل عام كنموذج متعدي ، هو أنه على عكس الإنعاش القلبي الرئوي لغرفة الولادة ، فإن الانتقال القلبي الرئوي بعد الولادة قد حدث بالفعل في الخنازير. من غير المحتمل أن يكون للخنازير تحويلات قلبية وعائية جنينية مفتوحة وضغوط رئوية عالية ، كما هو الحال في حديثي الولادة المختنقين. على الرغم من أن دراسة أجراها Fugelseth et al.37 ، والتي استخدمت نسخة سابقة من نموذج اختناق الخنازير (وليس السكتة القلبية) ، أظهرت أنه من المحتمل إعادة فتح تحويلات الأوعية الدموية في الخنازير أثناء الاختناق ، إلا أن استجاباتها للتهوية ودعم الدورة الدموية قد تختلف. لذلك ، قد لا تكون القياسات الفسيولوجية دائما ممثلة لحديث الولادة البشري المتغير. توجد أيضا بعض الاختلافات التشريحية بين الخنازير وحديثي الولادة ، مثل الممرات الهوائية العلوية الأكبر في الخنازير ، والتي تسبب تسرب ETT (مما يعني أنه من المهم استخدام ETTs المقيدة) وارتفاع درجة الحرارة القاعدية.
على الرغم من هذه القيود ، هناك تقليد طويل في مجتمع البحث العالمي لاستخدام الخنازير كنموذج متعدي للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة. يشبه الخنزير البشر من حيث التشريح وعلم وظائف الأعضاء والأنسجة والكيمياء الحيوية والالتهاب38 ، وبصرف النظر عن انخفاض أوزان الولادة عند المدى (1.5-2.5 كجم) ، فإن الخنزير الصغير حديث الولادة له حجم مشابه تماما لحديثي الولادة البشريين. يتيح الحجم والتشريح الأجهزة والمراقبة والتصوير وجمع العينات البيولوجية المماثلة لحديثي الولادة البشريين. يسمح هذا النموذج أيضا بإجراء دراسات الإنعاش حيث يسهل نسبيا إجراء ضغطات الصدر بنفس الطريقة كما هو الحال في الأطفال حديثي الولادة ، والخنازير لديها تشريح القلب وعلم وظائف الأعضاء يشبه البشر39 ، بما في ذلك توزيع الدم التاجي ، وإمدادات الدم إلى نظام التوصيل ، والمظهر النسيجي لعضلة القلب ، والاستجابات البيوكيميائية والأيضية لإصابة نقص تروية40. عامل مهم آخر هو أن الخنزير الصغير حديث الولادة لديه نمو دماغي مماثل في الفترة المحيطة بالولادة لحديث الولادةالبشري 41 ، ويؤدي الاختناق إلى استجابة كيميائية حيوية مع فرط ثنائي أكسيد الكربون والحماض التنفسي والأيضي المختلط ، والذي يشبه موت حديثي الولادة المختنق.
في الختام ، هذا النموذج من الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة يمثل تحديا تقنيا ويستغرق وقتا طويلا. ومع ذلك ، فإنه يوفر معلومات قيمة حول التغيرات الفسيولوجية وديناميكية الدم أثناء الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة ، ويسمح بدراسات إنعاش حديثي الولادة ، ويوفر معلومات قيمة عن التغيرات الفسيولوجية قبل وأثناء وبعد السكتة القلبية ، والتي قد تكون أيضا ذات أهمية لمجالات البحث الأخرى في الطب بصرف النظر عن الفترة المحيطة بالولادة.

يحدث الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة بسبب تبادل الغازات للخطر (نقص الأكسجة وفرط ثنائي أكسيد الكربون) قبل الولادة وأثناءها و / أو بعدها. يؤدي إلى انخفاض تدفق الدم (نقص التروية) إلى الأعضاء الحيوية وما يتبعه من الحماض التنفسي والتمثيل الغذائي المختلط. الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة هو أحد المضاعفات الشائعة للولادة التي تسبب سنويا 580000 حالة وفاة للرضع في جميع أنحاء العالم1. يعد خفض هذا العدد أمرا ضروريا للحد من الوفيات بين الأطفال حديثي الولادة والأطفال دون سن 5 سنوات ، كما هو مذكور في هدف الأمم المتحدة للتنمية المستدامة رقم 3.2 (أي وفيات الأطفال حديثي الولادة <12 لكل 1000 مولود حي ووفيات الأطفال دون سن الخامسة <25 لكل 1000 مولود حي)2.
سريريا ، يظهر الاختناق على شكل اعتلال دماغي نقص تروية نقص الأكسجين (HIE) ، واكتئاب الجهاز التنفسي ، وفشل الدورة الدموية عند الرضيع حديث الولادة3 (أي أعراض وعلامات نقص تروية الأعضاء الحيوية)4. وبالتالي ، قد يحتاج الرضيع المختنق إلى علاج للاعتلال الدماغي ، بما في ذلك النوبات ، ودعم الجهاز التنفسي والدورة الدموية المتقدمة. على الصعيد العالمي، كل عام، يحتاج ما يصل إلى 10 ملايين رضيع إلى شكل من أشكال التدخل، مثل التحفيز عن طريق اللمس، ويحتاج 6-7 ملايين رضيع إلى مساعدة على التنفس الصناعي عند الولادة5. وهكذا، فإن الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة يضع ضغطا كبيرا على نظام الرعاية الصحية، مع ما يرتبط به من آثار اجتماعية واقتصادية. وللحد من عبء المرض العالمي المنسوب إلى الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة، تعتقد مجموعاتنا البحثية أنه ينبغي دراسة مجالات التركيز التالية في الدراسات العلمية: الوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما في ذلك تحسين الرعاية والمتابعة قبل الولادة والتوليد؛ والوقاية، بما المؤشرات الحيوية النذير وتحسين إنعاش غرفة الولادة وتحقيق الاستقرار6.
الخنازير حديثي الولادة والرضع الرضع في الحمل على المدى القريب لديهم نفس التشريح والفيزيولوجيا المرضية7. على الرغم من أنه لا يوجد نموذج حيواني للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة والسكتة القلبية يمكن أن يخلق الجانب الكامل للانتقال الفاشل في الفترة المحيطة بالولادة مما يؤدي إلى الاختناق والسكتة القلبية ، إلا أن الخنازير هي نماذج متعدية جيدة.
في وقت مبكر من سبعينيات القرن العشرين ، قمنا بتطوير نموذج نقص الأكسجة في الخنازير البالغة8. تم تنقيحه بنجاح من قبل مجموعات البحث9 ، وبالتالي توفير نموذج خنزير صغير للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة 10،11،12،13،14،15،16،17،18. في عام 2007 ، تم إجراء التجارب الأولى مع السكتة القلبية في الخنازير في معهد البحوث الجراحية في مستشفى جامعة أوسلو11،13،15،16. قدم نموذج الاعتقال أدلة لتطوير المبادئ التوجيهية 10،13،15،16،19،20 ، بالإضافة إلى فرص واسعة للدراسات الفسيولوجية واختبار المعدات / أدوات التشخيص 14،21 ، بروتوكولات الإنعاش (الدراسات المعشاة ذات الشواهد)13،15،16 ،22 ، والمؤشرات الحيوية للدم والأنسجة 10،12،20. وهكذا ، أثبت النموذج أنه متعدد الاستخدامات ، وقد تم استخدام سلسلة تجريبية واحدة تقليديا للإجابة على العديد من الأسئلة البحثية. هذا مهم ويتفق مع ثلاثة روبية (التخفيض والاستبدال والصقل) لأبحاث التجارب23 (أي مبدأ تقليل عدد الحيوانات التي يتم التضحية بها للأغراض العلمية).
في البروتوكول التالي ، يتم وصف نموذج الخنزير الصغير للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة بالتفصيل ، بما في ذلك كيفية تحفيز السكتة القلبية وتعريفها والتأكد منها. تم تحسين النموذج لتقليل التعرض للمهدئات والتدخلات الجراحية ويشمل التهوية الميكانيكية والاختناق والإنعاش ومراقبة ما بعد الإنعاش وجمع عينات من الدم والبول والسائل النخاعي. تقوم مجموعاتنا أيضا بجمع الأنسجة من الأعضاء الحيوية بعد الوفاة ، ولكن لم يتم وصف إجراء جمع الأنسجة بالتفصيل في هذا البروتوكول. يحاكي النموذج إهانة نقص الأكسجين مع الحماض التنفسي والأيضي المختلط ، والذي يعكس الكيمياء الحيوية لحديثي الولادة المختنقين. من خلال المراقبة الدقيقة للخنازير مع ضغط الدم الغازي (BP) ومعدل ضربات القلب (HR) ، وقياس التأكسج النبضي (PO) ، ومخطط كهربية القلب (ECG) ، وتخطيط القلب المعاوقة (ICG) ، وتقييمات التحليل الطيفي للأشعة تحت الحمراء القريبة (NIRS) ، يمكن دراسة فسيولوجيا الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة ، مع التركيز بشكل خاص على القلب ، بالتفصيل.
النموذج صعب تقنيا ، حيث أن التوازن الدقيق للغاية في الأدوية والتدخلات الجراحية وطريقة إحداث السكتة القلبية مطلوب لضمان معدل معقول للبقاء على قيد الحياة. يتطلب إجراء التجارب إعدادا شاملا وفريقا متخصصا يعمل بشكل جيد. يبدو أن اختيار التجارب يلعب أيضا دورا مهما في ضمان نجاح التجارب. في هذه الورقة ، نصف البروتوكول بالتفصيل وتجاربنا معه.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acid-base machine (ABL 800 Flex)</td>
			<td>Radiometer Medical ApS, Br&#248;nsh&#248;j, Denmark</td>
			<td>989-963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AcqKnowledge 4.0 software for PC</td>
			<td>Biopac Systems Inc., Goleta, CA, USA</td>
			<td>ACK100W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive aperture drape</td>
			<td>OneMed Group Oy, Helsinki, Finland</td>
			<td>1505-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adrenaline (1 mg/mL)</td>
			<td>Takeda AS, Asker, Norway</td>
			<td>Vnr 00 58 50</td>
			<td>Dilute 1:10 in normal saline to 0.1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial cannula 20 G 1,10 mm x 45 mm</td>
			<td>Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden</td>
			<td>682245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial forceps</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Asphyxia gas, 8% oxygen in nitrogen</td>
			<td>Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway</td>
			<td>110093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benelyte, 500 mL</td>
			<td>Fresenius Kabi, Norge AS, Halden, Norway</td>
			<td>79011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopac ECG and invasive blood pressure modules, Model MP 150</td>
			<td>Biopac Systems Inc., Goleta, CA 93117, USA</td>
			<td>ECG100C, MP150WSW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box of cardboard for sample storage</td>
			<td>Syhehuspartner HF, Oslo, Norway</td>
			<td>2000076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula , 23G x 1 1/4&#34;- Nr.14</td>
			<td>Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain</td>
			<td>300700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula, 18G x 2&#34;</td>
			<td>Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain</td>
			<td>301900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula, 21G x 1 1/2&#34;- Nr.2</td>
			<td>Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain</td>
			<td>304432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge (Megafuge 1.0R)&#160;</td>
			<td>Heraeus instruments, Kendro Laboratory Products GmbH, Hanau, Germany</td>
			<td>75003060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidin colored 5 mg/mL</td>
			<td>Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway</td>
			<td>00 73 24</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combi-Stopper</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4495101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CRF form</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Desmarres eyelid retractor 13 cm x 18 mm</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Thermometer ama-digit ad 15 th</td>
			<td>Amarell, Kreuzwertheim, Germany</td>
			<td>9243101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECG electrodes, Skintact</td>
			<td>Leonhard Lang, Innsbruck, Austria</td>
			<td>FS-TC1 /10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating mattress</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extension set</td>
			<td>Codan Medizinische Ger&#228;te GmbH &#38; Co KG, Lensahn, Germany</td>
			<td>71.4021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl (50 &#181;g/mL)</td>
			<td>Hameln, Saksa, Germany</td>
			<td>00 70 16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine wood chips</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Finnpipette F1, 100-1000 &#181;L</td>
			<td>VWR, PA, USA</td>
			<td>613-5550</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fully equipped surgical room</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas hose</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs 5 cm x 5 cm</td>
			<td>Bastos Viegas,.a., Penafiel, Portugal</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin, heparinnatium 5000 IE/a.e./mL</td>
			<td>LEO Pharma AS, Ballerup, Denmark</td>
			<td>46 43 27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HighClean Nonwoven Swabs, 10 cm x 10 cm</td>
			<td>Selefa, OneMed Group Ay, Helsinki, Finland</td>
			<td>223003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICON&#160;</td>
			<td>Osypka Medical GmbH, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Portable non-invasive cardiometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICON electrodes/ECG electrodes, Ambu WhiteSensor WSP25</td>
			<td>Ambu A/S, Ballerup, Denmark</td>
			<td>WsP25-00-S/50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusomat Space medical pump</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>8713050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invasive blood pressure monitoring system</td>
			<td>Codan pvb Critical Care GmbH, Forstinning, Germany</td>
			<td>74.6604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope SunMed Greenlinen blade No 2&#160;</td>
			<td>KaWe Medical, Asperg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leoni plus mechanical ventilator&#160;</td>
			<td>L&#246;wenstein Medical SE &#38; Co. KG, Bad Ems, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid nitrogen 230 L</td>
			<td>Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway</td>
			<td>102730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tubes, 1.5 ml</td>
			<td>Forsyningssenteret, Trondheim, Norway</td>
			<td>72.690.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcuff endotracheal tube, size 3.5</td>
			<td>Avanos, GA, USA</td>
			<td>35162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neoflon, peripheral venous catheter, 24 G 0.7 mm x 19 mm</td>
			<td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB, Helsingborg, Sweden</td>
			<td>391350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neonatal piglets 12-36 h of age</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>As young as possible</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIRS electrodes,&#160;FORE-SIGHT Single Non-Adhesive Sensor Kit Small</td>
			<td>Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA</td>
			<td>01-07-2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIRS machine, FORE-SIGHT Universal, Cerebral Oximeter MC-202, Benchtop regional oximeter&#160;FORE-SIGHT</td>
			<td>Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA</td>
			<td>01-06-2020</td>
			<td>May also use INVOS, Covidien</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL.</td>
			<td>Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway</td>
			<td>Vare nr. 141387</td>
			<td>Unmixed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL.</td>
			<td>Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway</td>
			<td>141388</td>
			<td>For IV blood pressure monitoring, add heparin (0.2 ml heparin 5000 IE/a.e./mL in 500 mL of 0.9% NaCl)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc Cryogenic Tubes 1.8 mL</td>
			<td>VWR, PA, USA</td>
			<td>479-6847</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Original Perfusor Line, I Standard PE</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>8723060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen saturation monitor, MasimoSET, Rad 5</td>
			<td>Masimo, Neuch&#226;tel, Switzerland</td>
			<td>9196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen saturation monitor, OxiMax N-65</td>
			<td>Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA</td>
			<td>N65-PDN1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital (100 mg/mL)</td>
			<td>Norges Apotekerforening, Oslo, Norway</td>
			<td>Pnr 811602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips</td>
			<td>VWR, PA, USA</td>
			<td>732-2383</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic container with holes</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td>Has to allow for circulation of air</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Printer labels B-492, hvit, 25 mm x 9 mm, 3000 labels</td>
			<td>VWR, PA, USA</td>
			<td>BRDY805911</td>
			<td>For nunc tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor, single use disposable</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber gloves</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber hot water bottles</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Self-inflating silicone pediatric bag 500 ml</td>
			<td>Laerdal Medical, Stavanger, Norway</td>
			<td>86005000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smallbore T-Port Extension Set</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>471954</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical gloves latex, Sempermed supreme</td>
			<td>Semperit Technische Produkte Ges.m.b.H., Vienna, Austria</td>
			<td>size 7: 822751701</td>
			<td>Different sizes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stethoscope&#160;</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcocks, 3-way, Discofix</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>16494C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stylet size 3.5&#160;</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SunMed Greenlinen laryngoscope blade No 2&#160;</td>
			<td>KaWe Medical, Asperg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blade, size 15</td>
			<td>Swann Morton LTD, Sheffield England</td>
			<td>205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical forceps</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical sponges, sterile</td>
			<td>M&#246;lnlycke Health Care, G&#246;teborg, Sweden</td>
			<td>C0130-3025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical swabs</td>
			<td>M&#246;lnlycke Health Care, G&#246;teborg, Sweden</td>
			<td>159860-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tape Micropore 2.5 cm x 9.1 m&#160;</td>
			<td>3M Norge AS, Lillestr&#248;m, Norway</td>
			<td>153.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, Monsoft Monofilament Nylon 3-0</td>
			<td>Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA</td>
			<td>SN653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, Polysorb Braided Absorbable</td>
			<td>Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA</td>
			<td>GL884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 0.01-1 mL Omnifix F Luer Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>9161406V</td>
			<td>Used for acid base blood sampling. Flush with heparin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 10 mL Omnifix Luer Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4616103V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 2.5 mL BD Plastipak</td>
			<td>Beckton Dickinson S.A., Madrid, Spain</td>
			<td>300185</td>
			<td>Used for blood sampling. Flush with heparinized NaCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 20 mL Omnifix Luer Loc Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4617207V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 20 mL Omnifix Luer Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4616200V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 5 mL Omnifix Luer Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4616057V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 50 mL Omnifix Luer Lock Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4617509F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 50 mL Omnifix Luer Solo</td>
			<td>B. Braun Melsungen AG,&#160; Melsungen, Germany</td>
			<td>4616502F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table drape sheet, asap drytop</td>
			<td>Asap Norway AS, Skien, Norway</td>
			<td>83010705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape Tensoplast 2.5 cm x 4.5 m&#160;</td>
			<td>BSN Medical, Essity Medical Solutions, Charlotte, NC, USA</td>
			<td>66005305, 72067-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Towels</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transparent IV-fixation</td>
			<td>Mediplast AB, Malm&#246;, Sweden</td>
			<td>60902106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>Optimu Medical Solutions Ltd. Leeds, UK</td>
			<td>1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound machine, LOGIQ e</td>
			<td>GE Healthcare, GE Medical Systems, WI, USA</td>
			<td>5417728-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Utility drape, sterile</td>
			<td>OneMed Group Oy, Helsinki, Finland</td>
			<td>1415-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuette K3E K3EEDTA 2mL</td>
			<td>Greiner Bio-One GmbH, Kremsm&#252;nster, Austria</td>
			<td>454222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Venflon Pro Safety 22 G 0.9 mm x 25 mm</td>
			<td>Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden</td>
			<td>393222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilation mask made to fit tightly around a piglet snout</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td>Typically cone shaped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weight</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a piglet perinatal asphyxia model to study cardiac injury and hemodynamics after cardiac arrest, resuscitation, and the return of spontaneous circulation

تم استخدام الخنازير الوليدية على نطاق واسع كنماذج متعدية للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة. في عام 2007 ، قمنا بتكييف نموذج الاختناق الصغير الراسخ من خلال إدخال السكتة القلبية. وقد مكننا ذلك من دراسة تأثير الاختناق الشديد على النتائج الرئيسية ، بما في ذلك الوقت المستغرق لاستعادة الدورة الدموية التلقائية (ROSC) ، وكذلك تأثير ضغطات الصدر وفقا لبروتوكولات بديلة للإنعاش القلبي الرئوي. بسبب أوجه التشابه التشريحية والفسيولوجية بين الخنازير وحديثي الولادة من البشر ، تعمل الخنازير كنماذج جيدة في دراسات الإنعاش القلبي الرئوي ومراقبة الدورة الدموية. في الواقع ، قدم نموذج السكتة القلبية هذا دليلا على تطوير المبادئ التوجيهية من خلال البحث في بروتوكولات الإنعاش ، والفيزيولوجيا المرضية ، والمؤشرات الحيوية ، والطرق الجديدة لمراقبة الدورة الدموية. والجدير بالذكر أن النتيجة العرضية التي تفيد بأن جزءا كبيرا من الخنازير لها نشاط كهربائي بلا نبض (PEA) أثناء السكتة القلبية قد يزيد من قابلية تطبيق النموذج (أي أنه يمكن استخدامه لدراسة الفيزيولوجيا المرضية الممتدة إلى ما بعد فترة ما حول الولادة). ومع ذلك ، فإن جيل النموذج يمثل تحديا تقنيا ويتطلب مجموعات مهارات مختلفة ، وموظفين متفانين ، وتوازنا دقيقا بين التدابير ، بما في ذلك البروتوكولات الجراحية واستخدام المهدئات / المسكنات ، لضمان معدل معقول للبقاء على قيد الحياة. في هذه الورقة ، يتم وصف البروتوكول بالتفصيل ، بالإضافة إلى تجارب التكيف مع البروتوكول على مر السنين.

بعد أن يتم تجهيز الخنازير وتثبيتها ، يتم جمع قياسات ECG و BP باستمرار باستخدام برنامج الحصول على البيانات وتحليلها. يمكن بسهولة رؤية التغيرات الديناميكية الدموية أثناء الاختناق في البرنامج (الشكل 5). ينخفض ضغط الدم تدريجيا أثناء الاختناق حتى السكتة القلبية عندما يكون ضغط الدم = 0. بعد تحقيق ROSC ، يزداد ضغط الدم ، ثم بعد مرور بعض الوقت ، يصبح طبيعيا مرة أخرى. يمكن استخدام بيانات BP و ECG لأنواع مختلفة من التحليلات ، على سبيل المثال ، حساب ضغط التروية التاجية أثناء الإنعاش القلبي الرئوي والتغيرات في إيقاع BP و ECG والتشكل قبل وأثناء و / أو بعد الاختناق.
تتم مراقبة حجم السكتة الدماغية القلبية ومؤشر القلب باستمرار من خلال تخطيط القلب المعاوقة (قياس النتاج القلبي غير الجراحي)21. لدراسة إصابة القلب ، يتم قياس علامات عضلة القلب للإجهاد التأكسدي والتمثيل الغذائي اللاهوائي19. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن قياس إنزيمات القلب بما في ذلك تروبونين القلب T في البلازما (النتائج لم تنشر بعد).
الاختناق يغير فسيولوجيا الخنزير الصغير. يوضح الشكل 6 مثالا على كيفية تغير HR (الشكل 6A) و MAP (الشكل 6B) والرقم الهيدروجيني (الشكل 6C) و pCO2 (الشكل 6D) والفائض الأساسي (الشكل 6E) واللاكتات (الشكل 6F) خلال التجربة. كما هو متوقع ، ينخفض MAP و pH و Base الزائد أثناء الاختناق ، بينما يزداد pCO2 واللاكتات (الحماض التنفسي والأيضي المختلط). قرب نهاية التجربة ، يتم تطبيع القيم.
تاريخيا ، تم إجراء التجارب على الخنازير القصبة الهوائية11،13،15،16،19 (أي مع مجرى هوائي خال من التسرب). للحد من الإجهاد الجراحي ، تم تنبيب الخنازير داخل القصبة الهوائية باستخدام ETTs غير المقيدة في تجارب من عام 2019. في تلك التجارب21 ، لوحظ انخفاض ملحوظ في معدلات ROSC. وهكذا ، في التجارب الأخيرة ، قارنا معدلات ROSC باستخدام ETTs غير المقيدة مقابل ETTs المقيدة. عند استخدام ETTs غير المقيدة ، حققت 7/19 خنزير صغير ROSC ، وعند استخدام ETTs مكبلة ، حققت 5/5 خنزير صغير ROSC (p = 0.012) (نتائج غير منشورة). تدعم هذه النتيجة أهمية مجرى الهواء الخالي من التسرب في هذا النموذج.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64788/64788fig05.jpg"> الشكل 5: أخذ عينات البيانات المستمر باستخدام برنامج الحصول على البيانات وتحليلها. مثال على كيفية ظهور أخذ عينات البيانات المستمرة في برنامج الحصول على البيانات وتحليلها. أ: ضغط الدم للتجربة بأكملها. (ب) معقدات الضرب للضرب من BP و ECG. تم تمييز أجزاء مختلفة من التجربة في اللوحة (أ): 1) بداية الاختناق ، 2) السكتة القلبية والإنعاش القلبي الرئوي ، 3) ROSC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64788/64788fig05large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64788/64788fig06.jpg"> الشكل 6: التغيرات في المتغيرات القلبية الوعائية والأيضية خلال التجربة. عرض توضيحي لكيفية تغير المتغيرات المختلفة خلال التجربة. النقاط الزمنية الست الموضحة هي كما يلي: قبل بدء نقص الأكسجة مباشرة (خط الأساس) ، 10 دقائق من نقص الأكسجة ، السكتة القلبية ، ROSC ، 120 دقيقة بعد ROSC ، ونهاية الدراسة (570 دقيقة بعد ROSC). (أ) معدل ضربات القلب (HR) ، (ب) متوسط الضغط الشرياني (MAP) ، (ج) الرقم الهيدروجيني ، (د) الضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون2 (pCO2) ، (ه) فائض القاعدة ، و (F) اللاكتات. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64788/64788fig06large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation at J

A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation

يتضمن نموذج الخنزير الصغير هذا الأدوات الجراحية والاختناق حتى السكتة القلبية والإنعاش ومراقبة ما بعد الإنعاش. يسمح النموذج بأخذ عينات متعددة لكل ، وباستخدام ضغط الدم الشرياني الغازي المستمر ، وتخطيط القلب ، ومراقبة النتاج القلبي غير الغازية ، فإنه يوفر المعرفة حول ديناميكا الدم والفيزيولوجيا المرضية القلبية في الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة والإنعاش القلبي الرئوي لحديثي الولادة.

نموذج خنزير صغير للاختناق في الفترة المحيطة بالولادة لدراسة إصابة القلب وديناميكا الدم بعد السكتة القلبية والإنعاش وعودة الدورة الدموية التلقائية

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model ...

هذا البروتوكول مهم لأنه يتيح دراسة التغيرات الديناميكية الدموية والفسيولوجية قبل وأثناء وبعد الاختناق في الفترة المحيطة بالولادة والسكتة القلبية. نظرا لأن هذا النموذج يتضمن السكتة القلبية ، فإنه يسمح لنا بدراسة العوامل المتعلقة بالإنعاش القلبي الرئوي لحديثي الولادة وكيفية تأثيرها على علم وظائف الأعضاء وديناميكا الدم. يوفر هذا النموذج معلومات قيمة عن حديثي الولادة المختنقين.تسلط الملاحظات الضوء على الفيزيولوجيا المرضية للسكتة القلبية بما في ذلك النشاط الكهربائي غير النبضي. هذا يوسع قابليته للتطبيق على مجموعات المرضى الأخرى. هذا النموذج يمثل تحديا تقنيا ويجب إجراء التجارب في المرافق ذات الخبرة في الأبحاث الكبيرة والطويلة, ويفضل أن تكون كريات فرعية كبيرة.يجب دراسة البروتوكول بالتفصيل. سينضم إلي في إظهار هذا الإجراء رونوغ سولبرغ ، وآن لي سوليفاج ، وسيرا سيباستيان ، ممرضة غرفة العمليات ، من منشآتنا البحثية في جامعة أوسلو. قبل البدء في التدخل الجراحي ، قم بإعداد جميع المعدات اللازمة وملء جميع القسطرة بمحلول ملحي طبيعي.لاحظ الوقت الذي تبدأ فيه الجراحة في نموذج تسجيل الحالة أو CRF. تعقيم جلد الخنزير الصغير المخدر بخمسة ملليغرام لكل ملليلتر من الكلورهيكسيدين الملون باستخدام ثلاثة إلى خمسة إسفنجات جراحية وتغطيتها بستارة فتحة لاصقة. قم بعمل شق جلدي بطول 2.5 سم على الجانب الأيمن من رقبة الخنزير الصغير ، واسحب الجلد على جانبي الشق باستخدام مبعدات الجفن.بعد ذلك ، بمساعدة ملقط الشريان ، قم بتشريح وفضح الوريد الوداجي الداخلي ووضع خيطين من النايلون ثلاثة صفر تحت الوريد الوداجي للحفاظ على ثباته. أمسك أحد الغرز بيد ، والقسطرة الوريدية المركزية في اليد الأخرى ، أدخل القسطرة واسحب الإبرة. اغسل ملليلتر واحد من المحلول الملحي العادي لتأكيد الموضع الصحيح للقسطرة.الآن اربط أحد خيوط الخياطة التي تم استخدامها لتثبيت الوريد حول الوريد والقسطرة في المنطقة التي توجد بها القسطرة داخل الوريد. أغلق الجلد بخيوط قابلة للامتصاص بأربعة صفر وقم بتوصيل الفنتانيل الوريدي ومحلول إلكتروليت متوازن من الكربوهيدرات بالقسطرة الوريدية المركزية. باستخدام مشرط ، قم بعمل شق جلدي بطول 2.5 سم على الجانب الأيسر من رقبة الخنزير الصغير ، وهو أكثر بقليل من الشق السابق على الجانب الأيمن.ثم اسحب الجلد على جانبي الشق باستخدام مبعدات الجفن. بمساعدة ملقط الشريان ، قم بتشريح وفضح الشريان السباتي المشترك الإنسي للعضلة القصية الترقوية الخشاء. تثبيت الشريان السباتي المشترك عن طريق وضع زوج من خيوط خياطة النايلون ثلاثة صفر تحته.أمسك إحدى الغرز بيد واحدة والقسطرة الشريانية المركزية في اليد الأخرى ، أدخل القسطرة الشريانية المركزية واسحب الإبرة. ثم اربط أحد خيوط الخياطة التي تمسك الشريان حول الشريان والقسطرة في المنطقة التي توجد بها القسطرة داخل الشريان. بعد التأكد من الموضع الصحيح للقسطرة عن طريق شطفها بمليلتر واحد من المحلول الملحي العادي ، قم بتثبيت أجنحة القسطرة على الجلد بخيوط قابلة للامتصاص بأربعة صفر وأغلق الجلد.بعد ذلك ، قم بتوصيل الخنزير الصغير بنظام مراقبة ضغط الدم الشرياني الغازي. قم بتغطية القسطرة بضمادة شفافة وابدأ في الحصول على البيانات. بمجرد وضع القسطرة الشريانية المركزية في مكانها ، لاحظ وقت انتهاء الجراحة على CRF.لاحظ وقت بدء الاختناق على CRF جنبا إلى جنب مع القياسات الفسيولوجية للخنزير الصغير. مباشرة قبل بدء الاختناق ، اجمع عينات الدم من الخنزير الصغير وأوقف إعطاء الفنتانيل الرابع. لبدء الاختناق ، أدر قرص الأكسجين على جهاز التنفس الصناعي إلى 100٪ وقلل معدل التنفس الصناعي بمقدار 10 نفخات في الدقيقة.أثناء تبديل خرطوم الأكسجين الموجود على جهاز التنفس الصناعي إلى غاز الاختناق ، تأكد من تقليل تشبع الأكسجين في الخنزير الصغير للتأكد من الحث الناجح للاختناق. بعد الاستمرار في الاختناق لمدة 10 دقائق ، قلل من معدل التنفس الصناعي بمقدار 10 تضخم آخر في الدقيقة. من هذه النقطة فصاعدا ، بعد 10 دقائق وبعد ذلك كل خمس دقائق حتى السكتة القلبية.تتبع الحالة القائمة على الحمض ولاحظ القياسات الفسيولوجية للخنزير الصغير أسفل CRF. استمر في الاختناق حتى السكتة القلبية. قلل معدل التنفس الصناعي بمقدار 10 تضخمات في الدقيقة كل 10 دقائق ، وقم بتثبيت الأنبوب الرغامي أو ETT بالملقط الشرياني بعد 30 دقيقة من الاختناق.عندما ينخفض متوسط الضغط الشرياني إلى أقل من 20 ملم من الزئبق ، ابدأ التسمع المستمر للقلب. تسمع القلب وأبلغ الفريق عندما تصبح نبضات القلب غير مسموعة. ثم قم بإزالة مشبك ETT إن أمكن واضبط الجزء المناسب من الأكسجين المستوحى وإعدادات جهاز التنفس الصناعي وفقا للبروتوكول.في الوقت نفسه ، قم بإعادة خرطوم غاز الاختناق الموجود على جهاز التنفس الصناعي إلى مخرج الأكسجين. أخيرا ، اسحب عينات الدم المقابلة للنقطة الزمنية للسكتة القلبية أثناء التحضير للإنعاش القلبي الرئوي. إذا اتبعت لجنة الاتصال الدولية بشأن الإنعاش الموصى بها ثلاثة إلى واحد CPR ، فقم بتهوية الخنزير الصغير ميكانيكيا لمدة 30 ثانية بعد السكتة القلبية.ثم ابدأ ضغطات الصدر واستهدف نسبة ضغط الصدر إلى التهوية من ثلاثة إلى واحد. استخدم تقنية الإبهام واليدين الدائريتين لضغط الصدر إلى عمق ثلث القطر الصدري والخلفي والسماح بالارتداد الكامل للصدر. تهدف إلى توليد ضغط شرياني انقباضي أكبر من 20 ملم من الزئبق.بعد 30 ثانية من الضغط على الصدر تطبيق الأدرينالين الوريدي وتكراره بعد كل ثلاث دقائق من الإنعاش القلبي الرئوي لمدة أقصاها أربع جرعات. اغسل القسطرة بمليلتر واحد من المحلول الملحي العادي بعد كل تناول للأدرينالين. تحديد عودة الدورة الدموية التلقائية أو ROSC من خلال مراقبة تتبع ضغط الدم الشرياني وتخطيط القلب وتأكيد ذلك عن طريق التسمع القلبي.استمر في جهود الإنعاش حتى ROSC أو لمدة أقصاها 15 دقيقة. إذا كان الإنعاش ناجحا ، لاحظ وقت ROSC ، ومدة الإنعاش القلبي الرئوي بالثواني ، وعدد جرعات الأدرينالين التي يتم إعطاؤها في نموذج الإبلاغ الموحد. إذا لم ينجح الإنعاش القلبي الرئوي في غضون 15 دقيقة ، فقم بإيقاف جهود الإنعاش وتسجيل وقت الوفاة.أخيرا ، بعد ROSC ، خذ عينات الدم وتسجيلات CRF في أقرب وقت ممكن واستمر في التسجيلات كما هو موضح في المخطوطة لمدة 9.5 ساعات أخرى. انخفض ضغط دم الخنزير تدريجيا منذ بداية الاختناق وأصبح صفرا عند حدوث السكتة القلبية. ارتفع BP بمجرد تحقيق ROSC قبل أن يستغرق بعض الوقت للتطبيع مرة أخرى.تمت الإشارة بوضوح إلى التغيرات في فسيولوجيا الخنزير الصغير أثناء الاختناق من خلال التغيرات في معدل ضربات القلب ، ومتوسط الضغط الشرياني ، ودرجة الحموضة ، والضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون ، والفائض الأساسي ، واللاكتات. كما هو متوقع ، انخفض متوسط الضغط الشرياني ودرجة الحموضة وفائض القاعدة أثناء الاختناق بينما زاد الضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون واللاكتات مما يدل على الحماض التنفسي والأيضي المختلط. ومع ذلك ، تم تسوية القيم في نهاية التجربة.يعد الحفاظ على تهوية جيدة أثناء الإنعاش القلبي الرئوي وأخذ عينات البيانات الصحيحة في جميع أنحاء أجزاء مهمة بشكل خاص من هذا البروتوكول. قدم نموذج حديثي الولادة هذا دليلا على تطوير المبادئ التوجيهية من خلال البحث حول استخدام الأكسجين التكميلي وبروتوكولات الإنعاش. بالإضافة إلى ذلك ، تم التحقيق في الفيزيولوجيا المرضية والمؤشرات الحيوية والطرق الجديدة لمراقبة الدورة الدموية.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

A الخنزير الصغير نموذج من الأطفال حديثي الولادة نقص الأوكسجين، اعتلال الدماغ الإقفاري

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

The Perinatal Asphyxiated Lamb Model: A Model for Newborn Resuscitation

الفترة المحيطة بالولادة خنق نموذج خروف: نموذج لإنعاش حديثي الولادة

Birth asphyxia accounts for nearly one million deaths worldwide each year, and is one of the primary causes of early neonatal morbidity and mortality. ...

Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model

غرس المستمدة من هيبسك بقع عضلة القلب بعد "إصابة احتشاء عضلة القلب" في "نموذج خنزير غينيا"

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss ...

Pre-clinical Model of Cardiac Donation after Circulatory Death

نموذج ما قبل السريرية للتبرع القلبي بعد الوفاة الدورة الدموية

Cardiac transplantation demand is on the rise; nevertheless, organ availability is limited due to a paucity of suitable donors. Organ donation after ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

نموذج زرع رئة الفئران لإصابة نقص التروية / التروية الدافئة: تحسينات لتحسين النتائج

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

Transthoracic Echocardiography to Assess Post-Resuscitation Left Ventricular Dysfunction After Acute Myocardial Infarction and Cardiac Arrest in Pigs

تخطيط صدى القلب عبر الصدر لتقييم ضعف البطين الأيسر بعد الإنعاش بعد احتشاء عضلة القلب الحاد والسكتة القلبية في الخنازير

One of the main causes of out-of-hospital cardiac arrest is acute myocardial infarction (AMI). After successful resuscitation from cardiac arrest, ...

Large-Animal Model of Donation after Circulatory Death and Normothermic Regional Perfusion for Cardiac Assessment

The increase in demand for cardiac transplantation throughout the years has fueled interest in donation after circulatory death (DCD) to expand the organ ...

Extracorporeal Cardiopulmonary Resuscitation in Animal Model After Cardiac Arrest

Pediatric Animal Model of Extracorporeal Cardiopulmonary Resuscitation After Prolonged Circulatory Arrest

Author Spotlight: Simulating Pediatric Cardiac Surgery Using a Neonatal Piglet Model

Congenital heart disease (CHD) is the most prevalent congenital malformation, with about one million births impacted worldwide per year. Comprehensive ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

زراعة قلب البطن غير المتجانسة المعدلة ونموذج قلس الأبهر الجديد في الفئران

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...