Name: synthesis of decellularized cartilage extracellular matrix hydrogels
Uploaded: 2023-07-21T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Decellularized Cartilage Extracellular Matrix Hydrogels at JoVE.com

Bu çalışma, Zhejiang Eyaleti Tıp ve Sağlık Teknolojisi Planı (2019KY050), Zhejiang Eyaleti Geleneksel Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Planı (2019ZA026), Zhejiang Eyaletindeki Temel Araştırma ve Geliştirme Planı (Hibe No.2020C03043), Zhejiang Eyaleti Geleneksel Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Planı (2021ZQ021) ve Çin Zhejiang Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (LQ22H060007).

Bu çalışma, Zhejiang Eyaleti Tongde Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. DC-ECM hidrojelin hazırlanması
NOT: Bu çalışmada kıkırdak, 12 aylık Bama minyatür domuzların diz eklemlerinden, kemik dokusu toplanmasından kaçınılarak elde edilmiştir.
<ol><li>Toplanan kıkırdağı alın ve bir neşter ile 1-2 mm3 parçaya bölün ve kesin.</li>
	<li>20 g kıyılmış kıkırdağı 50 mL'lik bir santrifüj t?...

<ol>
	<li>Vega, S. L., Kwon, M. Y., Burdick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+hydrogels+for+cartilage+tissue+engineering.">Recent advances in hydrogels for cartilage tissue engineering.</a> European Cells &amp; Materials. 33, 59-75 (2017).</li><li>Yang, J., Zhang, Y. S., Yue, K., Khademhosseini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-laden+hydrogels+for+osteochondral+and+cartilage+tissue+engineering.">Cell-laden hydrogels for osteochondral and cartilage tissue engineering.</a> Acta Biomaterialia. 57, 1-25 (2017).</li><li>Bejleri, D., Davis, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+extracellular+matrix+materials+for+cardiac+repair+and+regeneration.">Decellularized extracellular matrix materials for cardiac repair and regeneration.</a> Advanced Healthcare Materials. 8 (5), e1801217 (2019).</li><li>Brown, M., Li, J., Moraes, C., Tabrizian, M., Li-Jessen, N. Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+extracellular+matrix:+New+promising+and+challenging+biomaterials+for+regenerative+medicine.">Decellularized extracellular matrix: New promising and challenging biomaterials for regenerative medicine.</a> Biomaterials. 289, 121786 (2022).</li><li>Barbulescu, G. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+extracellular+matrix+scaffolds+for+cardiovascular+tissue+engineering:+Current+techniques+and+challenges.">Decellularized extracellular matrix scaffolds for cardiovascular tissue engineering: Current techniques and challenges.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (21), 13040 (2022).</li><li>Zhang, W., Du, A., Liu, S., Lv, M., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+in+decellularized+extracellular+matrix-derived+hydrogels.">Research progress in decellularized extracellular matrix-derived hydrogels.</a> Regenerative Therapy. 18, 88-96 (2021).</li><li>Zhu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-derived+decellularized+extracellular+matrix+scaffolds+for+articular+cartilage+repair.">Cell-derived decellularized extracellular matrix scaffolds for articular cartilage repair.</a> International Journal of Artificial Organs. 44 (4), 269-281 (2021).</li><li>Li, T., Javed, R., Ao, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenogeneic+decellularized+extracellular+matrix-based+biomaterials+for+peripheral+nerve+repair+and+regeneration.">Xenogeneic decellularized extracellular matrix-based biomaterials for peripheral nerve repair and regeneration.</a> Current Neuropharmacology. 19 (12), 2152-2163 (2021).</li><li>Xia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+cartilage+as+a+prospective+scaffold+for+cartilage+repair.">Decellularized cartilage as a prospective scaffold for cartilage repair.</a> Materials Science &amp; Engineering C-Materials for Biological Applications. 101, 588-595 (2019).</li><li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desktop-stereolithography+3D+printing+of+a+radially+oriented+extracellular+matrix/mesenchymal+stem+cell+exosome+bioink+for+osteochondral+defect+regeneration.">Desktop-stereolithography 3D printing of a radially oriented extracellular matrix/mesenchymal stem cell exosome bioink for osteochondral defect regeneration.</a> Theranostics. 9 (9), 2439-2459 (2019).</li><li>Saldin, L. T., Cramer, M. C., Velankar, S. S., White, L. J., Badylak, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+hydrogels+from+decellularized+tissues:+Structure+and+function.">Extracellular matrix hydrogels from decellularized tissues: Structure and function.</a> Acta Biomaterialia. 49, 1-15 (2017).</li><li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+delivery+in+tissue-specific+hydrogel+enabled+meniscal+repair+in+an+orthotopic+rat+model.">Stem cell delivery in tissue-specific hydrogel enabled meniscal repair in an orthotopic rat model.</a> Biomaterials. 132, 59-71 (2017).</li><li>Zheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensified+stiffness+and+photodynamic+provocation+in+a+collagen-based+composite+hydrogel+drive+chondrogenesis.">Intensified stiffness and photodynamic provocation in a collagen-based composite hydrogel drive chondrogenesis.</a> Advanced Science. 6 (16), 1900099 (2019).</li><li>Young, J. L., Holle, A. W., Spatz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P.Nanoscale+and+mechanical+properties+of+the+physiological+cell-ECM+microenvironment.">P.Nanoscale and mechanical properties of the physiological cell-ECM microenvironment.</a> Experimental Cell Research. 343 (1), 3-6 (2016).</li><li>Abdolghafoorian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+heart+valve+decellularization+on+xenograft+rejection.">Effect of heart valve decellularization on xenograft rejection.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 15 (3), 329-336 (2017).</li></ol>

Bu protokol, kıkırdak dokusunun doğal ECM'sini yakından taklit eden hücreden arındırılmış kıkırdak hücre dışı matriks hidrojellerinin hazırlanması için sistematik bir yaklaşım sağlar. Protokol, ECM'nin yapısını ve bileşimini korurken hücresel materyali uzaklaştırmak için fiziksel, kimyasal ve enzimatik bozulmanın bir kombinasyonunu içerir. Protokolün kritik adımları, hücreden arındırma süresinin ve yöntemlerinin ayarlanmasını ve tam hücreden arındırmanın sağlanmasını içer...

Kıkırdak doku mühendisliği, hasarlı veya hastalıklı kıkırdak dokusunu yeniden oluşturmayı amaçlayan hızla gelişen bir alandır1. Bu alandaki en önemli zorluklardan biri, kıkırdak2 üretmekten sorumlu hücreler olan kondrositlerin büyümesini ve farklılaşmasını destekleyebilecek biyomimetik iskelelerin geliştirilmesidir. Kıkırdak dokusunun ECM'si, kondrositlerin davranışını düzenlemede kritik bir rol oynar. DC-ECM, doku mühendisliği uygulamaları için etkili bir iskeledir3.
Kıkırdak dokusundan DC-ECM üretmek için kimyasal, enzimatik ve fiziksel yöntemler dahil olmak üzere bir dizi teknik geliştirilmiştir. Bununla birlikte, bu yöntemler genellikle yeterince biyomimetik olmayan ECM hidrojellerinin üretilmesine neden olur ve bu da doku mühendisliği uygulamalarında kullanım potansiyellerini sınırlar 4,5. Bu nedenle, DC-ECM hidrojelleri üretmek için daha etkili bir yönteme ihtiyaç vardır.
Bu tekniğin geliştirilmesi önemlidir, çünkü doku yenilenmesini ve onarımını destekleyebilecek biyomimetik iskeleler oluşturmak için yeni bir yaklaşım sağlayarak doku mühendisliği alanını ilerletebilir. Ayrıca, bu teknik, diğer dokulardan ECM hidrojelleri üretmek için kolayca uyarlanabilir ve böylece potansiyel uygulamalarını genişletebilir.
Daha geniş literatürde, DC-ECM'nin doku mühendisliği uygulamaları için bir iskele olarak kullanılmasına artan bir ilgi vardır6. Çok sayıda çalışma, DC-ECM hidrojellerinin kıkırdak 7,8 dahil olmak üzere çeşitli dokularda hücre büyümesini ve farklılaşmasını teşvik etmedeki etkinliğini göstermiştir. Bu nedenle, kıkırdak dokusunun doğal ECM'sini yakından taklit eden DC-ECM hidrojellerinin üretilmesi için bir protokolün geliştirilmesi, alana önemli bir katkıdır.
Bu yazıda sunulan protokol, kıkırdak dokusunun doğal ECM'sini yakından taklit eden DC-ECM hidrojellerinin üretilmesi için yeni bir yöntem sağlayarak bu ihtiyacı karşılamaktadır. Protokol, kıkırdak dokusunun hücrelerden arındırılmasını, elde edilen ECM'nin izole edilmesini ve ECM'nin biyouyumlu bir polimerle çapraz bağlanmasıyla bir hidrojel oluşturulmasını içerir. Elde edilen hidrojel, kondrositlerin büyümesini ve farklılaşmasını desteklemede umut verici sonuçlar göstermiştir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 M Tris-HCl, pH7.6</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>ST776-100 mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 M Tris-HCl, pH8.0</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>ST780-500 mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-80 &#176;C Freezer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>F440340034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deoxyribonuclease</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>D128600-80KU</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNEasy Blood &#38;Tissue Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>No. 69506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAG colorimetric quantitative detection kit</td>
			<td>Shanghai Haling</td>
			<td>HL19236.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCP-2 dryer&#160;</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop8000</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Spectrophotometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (10x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ribonuclease</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>R341325-100 mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sigma500</td>
			<td>ZIESS</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Scanning electron microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectra S</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Transmission electron microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel sieve</td>
			<td>SHXB-Z-1</td>
			<td>Shanghai Xinbu</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>P0096-500 mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15050065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet lamp</td>
			<td>Omnicure 2000</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin B2</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>R4500-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer</td>
			<td>Shanghai Qiasen</td>
			<td>78HW-1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of decellularized cartilage extracellular matrix hydrogels

Hücresellikten arındırılmış kıkırdak hücre dışı matriks (DC-ECM) hidrojelleri, biyouyumlulukları ve doğal doku özelliklerini taklit etme yetenekleri nedeniyle doku mühendisliği ve rejeneratif tıp için umut verici biyomalzemelerdir. Bu protokol, kıkırdak dokusunun doğal ECM'sini yakından taklit eden DC-ECM hidrojelleri üretmeyi amaçlamaktadır. Protokol, ECM'nin yapısını ve bileşimini korurken hücresel materyali uzaklaştırmak için fiziksel ve kimyasal bozulma ve enzimatik sindirimin bir kombinasyonunu içerir. DC-ECM, stabil ve biyolojik olarak aktif bir hidrojel oluşturmak için kimyasal bir ajan kullanılarak çapraz bağlanır. DC-ECM hidrojel, mükemmel biyolojik aktiviteye, uzamsal yapıya ve biyolojik indüksiyon işlevine ve ayrıca düşük immünojenisiteye sahiptir. Bu özellikler, hücre yapışmasını, çoğalmasını, farklılaşmasını ve göçünü teşvik etmede ve hücre büyümesi için üstün bir mikro ortam oluşturmada faydalıdır. Bu protokol, doku mühendisliği alanındaki araştırmacılar ve klinisyenler için değerli bir kaynak sağlar. Biyomimetik hidrojeller, kıkırdak onarımı ve rejenerasyonu için etkili doku mühendisliği stratejilerinin geliştirilmesini potansiyel olarak artırabilir.

Daha iyi bir DC-ECM kıkırdak hidrojeli hazırlamak için önceki literatürü inceledik ve gözden geçirdik ve çeşitli hücreden arındırma protokollerini hücreden arındırma oranı, immünojenisite ve mekanik işlevsellik açısından karşılaştırdık9.
Bu temelde, DC-ECM kıkırdak hidrojelini hazırladık ve radyal yönelimli ekstraktif matriks/mezenkimal kök hücre eksozom biyo-mürekkebinin osteokondral defektlerin tedavisinde etkisini araştırdık. So...

Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Decellularized Cartilage Extracellular Matrix Hydrogels at JoVE.com

Synthesis of Decellularized Cartilage Extracellular Matrix Hydrogels

Bu makale, hücresellikten arındırılmış kıkırdak hücre dışı matriks (DC-ECM) hidrojellerinin sentezi için yeni bir yöntem sunmaktadır. DC-ECM hidrojelleri mükemmel biyouyumluluğa sahiptir ve hücre büyümesi için üstün bir mikro ortam sağlar. Bu nedenle, ideal hücre iskeleleri ve biyolojik dağıtım sistemleri olabilirler.

Decellularize Kıkırdak Hücre Dışı Matriks Hidrojellerinin Sentezi

Decellularized cartilage extracellular matrix (DC-ECM) hydrogels are promising biomaterials for tissue engineering and regenerative medicine due to their ...

Protokolümüz, kıkırdak dokusunun doğasına çok benzeyen hidrojellerde hastalık oluşturulmasını sağladığı için önemlidir. Bu tekniğin ana avantajı, mekansal yapıda belirgin biyolojik aktiviteye, düşük immünojenisiteye ve biyolojik endüstriyel fonksiyona sahip hidrojellerde hastalık üretme yeteneğidir. Başlamak için, toplanan kıkırdağı bir neşter kullanarak bir ila iki milimetre küp büyüklüğünde parçalar halinde doğrayın.50 milimetrelik bir santrifüj tüpünde, 20 mililitre hipotonik Tris-hidroklorür tamponuna 20 gram kıyılmış kıkırdak daldırın. Tüpü üç saat boyunca 80 santigrat derecede ve ardından üç saat boyunca 37 santigrat derecede fırına koyun. Santrifüj tüpünü 1000 RPM'de 30 saniye vorteksleyin.Ardından, 50 mililitrelik bir santrifüj tüpüne yerleştirilmiş plastik bir elek kullanarak hücrelerden arındırılmış kıkırdağı süzün. Kıkırdağı toplamadan önce steril PBS ile üç kez yıkayın. Toplanan kıkırdağa 10 mililitre tripsin çözeltisi ekleyin ve her dört saatte bir tripsin değiştirerek 24 saat boyunca 37 santigrat derecede bir çalkalayıcı üzerinde inkübe edin.Süspansiyonu filtreledikten sonra, tripsinizli kıkırdağı hipertonik tampon ile yıkayın. Kıkırdak korunduktan sonra, 10 mililitre nükleaz çözeltisi ekleyin ve dört saat boyunca 37 santigrat derecede bir çalkalayıcıya koyun. Steril PBS ile yıkadıktan sonra, kıkırdağa hipertonik Tris-hidroklorür çözeltisi ekleyin ve gösterildiği gibi çalkalayıcıya yerleştirin.Steril PBS ile yıkandıktan sonra, dokuyu 24 saat boyunca% 1 Triton X-100 çözeltisine batırın. Triton X-100'ü çıkardıktan sonra, hücreden arındırılmış kıkırdağı üç gün boyunca damıtılmış suyla durulayın ve suyu her 12 saatte bir değiştirin. Üç gün sonra, kıkırdağa perasetik asit çözeltisi ekleyin ve dört saat bekletin.PBS ile yıkandıktan sonra, daha önce gösterildiği gibi plastik bir elek kullanarak kıkırdağı toplayın. Sıvı nitrojen kullanarak, hücrelerden arındırılmış kıkırdak tozu hazırlayın. İki gram kıkırdak tozuna 80 mililitre 0.5 molar asetik asit ve 20 miligram pepsin ekleyin ve karışımı 37 santigrat derecede 24 saat sindirin.Sindirimden sonra, süspansiyonu 400 G'de 10 dakika santrifüjleyin ve şimdi DC-ECM çözeltisi olarak adlandırılan süpernatanı toplayın DC-ECM çözeltisini saklamak için, altı oyuklu bir plakanın her bir kuyucuğuna bir mililitre çözelti ekleyin ve bir liyofilizatöre yerleştirin. Çözelti dondurularak kurutulduktan sonra bir santrifüj tüpüne aktarın. Bir hidrojel oluşturmak için, 20 miligram dondurularak kurutulmuş DC-ECM çözeltisini bir mililitre steril damıtılmış suda çözün.Girdap haline getirildikten sonra, DC-ECM çözeltisine bir miligram B2 vitamini ekleyin. İnkübasyondan sonra, üç dakika boyunca UV ışığı ile ışınlayın. 20 miligram DC-ECM kıkırdak tozuna tampon GTL ve proteinaz K ekleyin ve vorteks salınımı kullanarak iyice karıştırın.Kıkırdağın tamamen çözünmesi için, karışımı dört saat boyunca 56 santigrat derecede inkübe edin. Girdap haline getirildikten sonra, 200 mikrolitre tampon GTL ve ardından susuz etanol ekleyin. Girdaptan sonra, numuneyi dört santigrat derecede bir dakika boyunca 6000 G'de santrifüjleyin.Daha sonra DNA'yı el yazmasında açıklandığı gibi toplayın ve ölçün. Kollajeni analiz etmek için, beş miligram DC-ECM tozunu hidroklorik asit içinde 100 santigrat derecede 20 dakika asitleştirin. Daha sonra beş mililitre altı molar sodyum hidroksit çözeltisi ile nötralize edin.Hidroksiprolin standardına karşı 570 nanometrede absorbans kullanarak nötralize edilmiş numunenin hidroksiprolin içeriğini hesaplayın. Karıştırdıktan sonra 200 miligram DC-ECM tozuna 500 mikrolitre reaktif A ekleyin. Numuneyi dört santigrat derecede 16 saat inkübe edin.Santrifüjlendikten sonra, 50 mikrolitre numune çözeltisi toplayın ve 50 mikrolitre reaktif B, ardından reaktif C ekleyin.Numuneyi 10 dakika inkübe ettikten sonra, 750 mikrolitre reaktif D ekleyin ve karanlıkta 30 dakika inkübe edin. Santrifüjlemeden sonra, pelete bir mikrolitre reaktif E ekleyin ve santrifüjlemeden önce iyice karıştırın. Ardından, GAG içeriği ölçümünden önce numuneyi ayırın.Hazırlanan DC-ECM kıkırdağında DNA içeriği önemli ölçüde ortadan kaldırıldı. Bununla birlikte, doğal kıkırdak ile karşılaştırıldığında kollajen ve GAG içeriği korunmuştur. SEM ve TEM analizleri, hazırlanan DC-ECM'nin ultra yapısını ortaya koymuştur.Ters çevrilmiş tüpte hazırlanan hidrojel dibe akmadı, böylece jelleşme gösterdi. Ayrıca, sadece DC-ECM çözeltisi ile karşılaştırıldığında, B2 vitamini ilavesi, DC-ECM hidrojel oluşumu sırasında indüklenen çapraz bağlanma nedeniyle jelleşme süresini azalttı. DC-ECM hidrojel viskozitesi, çözelti viskozitesinden daha yüksekti ve artan kesme hızları, çözelti viskozitesini azalttı.Ayrıca, DC-ECM çözeltisinin ve hidrojelin yüksek depolama modülü, her ikisinin de sıvı özelliklerden ziyade jel özelliklere sahip olduğunu gösterdi. SEM analizi, DC-ECM çözeltisinin gözenek boyutunun, çapraz bağlama ve dondurarak kurutmadan sonra hidrojel formunda önemli ölçüde azaldığını göstermiştir. Protokol, ECM'nin yapısını ve konuşmasını korurken hücresel materyali uzaklaştırmak için fiziksel ve kimyasal bozulma ve enzimatik sindirimin bir kombinasyonunu içerir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

The Synthesis of RGD-functionalized Hydrogels as a Tool for Therapeutic Applications

Tedavi Uygulamaları için bir alet olarak RGD-fonksiyonelleştirilmiş Hidrojeller Sentezi

The use of polymers as biomaterials has provided significant advantages in therapeutic applications. In particular, the possibility to modify and ...

Biyomühendislik

Preparation of Extracellular Matrix Protein Fibers for Brillouin Spectroscopy

Brillouin Spektroskopisi için Ekstraselüler Matriks Proteini Elyaf Hazırlama

Brillouin spectroscopy is an emerging technique in the biomedical field. It probes the mechanical properties of a sample through the interaction of ...

Tunable Hydrogels from Pulmonary Extracellular Matrix for 3D Cell Culture

3D Hücre Kültürü için Pulmoner Ekstrasellüler Matrix Ayarlanabilir Hidrojellerinin

Here we present a method for establishing multiple component cell culture hydrogels for in vitro lung cell culture. Beginning with healthy en bloc lung ...

Fabricating a Kidney Cortex Extracellular Matrix-Derived Hydrogel

Bir böbrek korteks ekstraselüler matrisi elde edilen hidrojel imalatı

Extracellular matrix (ECM) provides important biophysical and biochemical cues to maintain tissue homeostasis. Current synthetic hydrogels offer robust ...

Fabrication of Decellularized Cartilage-derived Matrix Scaffolds

Decellularized matris kıkırdak elde edilen iskele imalatı

Osteochondral defects lack sufficient intrinsic repair capacity to regenerate functionally sound bone and cartilage tissue. To this extent, cartilage ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Küresel hücresel matriks metalloproteinaz ve 3D Hydrogels metabolik etkinliğini ölçme

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Labeling of Extracellular Vesicles for Monitoring Migration and Uptake in Cartilage Explants

Kıkırdak Eksplantlarında Göç ve Alımı İzlemek için Hücre Dışı Veziküllerin Etiketlenmesi

Extracellular vesicles (EVs) are used in different studies to prove their potential as a cell-free treatment due to their cargo derived from their ...

Fabrication and Characterization of Layer-By-Layer Janus Base Nano-Matrix to Promote Cartilage Regeneration

Kıkırdak Rejenerasyonunu Teşvik Etmek için Katman Katman Janus Baz Nano-Matrisinin Üretimi ve Karakterizasyonu

Various biomaterial scaffolds have been developed to guide cell adhesion and proliferation in hopes to promote specific functions for in vitro and in vivo ...

Sığır Akciğeri ECM Hidrojelleri için Decellularizasyon Tekniklerinin Karşılaştırmalı Çalışması

Development and Characterization of Decellularized Lung Extracellular Matrix Hydrogels

Yazar Spotlight: Organotipik Hidrojeller için Sığır Akciğeri Decellularizasyonunu Optimize Etme

Dehücreli Akciğer Ekstraselüler Matriks Hidrojellerinin Geliştirilmesi ve Karakterizasyonu

The use of extracellular matrix (ECM)-derived hydrogels in tissue engineering has become increasingly popular, as they can mimic cells&#39; natural ...