Name: investigating the protective effects of platycodin d on non-alcoholic fatty liver disease in a palmitic acid-induced in vitro model
Uploaded: 2022-12-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model at JoVE.com

Dit werk wordt ondersteund door subsidies van de Chongqing Science and Technology Commission (cstc2020jxjl-jbky10002, jbky20200026, cstc2021jscx-dxwtBX0013 en jbky20210029) en de China Postdoctoral Science Foundation (nr. 2021MD703919).

AML-12-cellen (een normale hepatocytencellijn van muizen) worden gebruikt voor de celgebaseerde studies. De cellen worden verkregen uit een commerciële bron (zie tabel met materialen).
1. Voorbehandeling van de AML-12-cellen om NAFLD in vitro te modelleren
<ol><li>Houd de cellen in normale celkweekmedia (DMEM plus Ham's F12 [1:1] met 0,005 mg/ml insuline, 5 ng/ml selenium, 0,005 mg/ml transferrine, 40 ng/ml dexamethason en 10% foetaal runderserum ...

Studies hebben het feit benadrukt dat NAFLD een clinicopathologisch syndroom is, variërend van leververvetting tot NASH, dat zich kan ontwikkelen tot cirrose en leverkanker51. Een vetrijk dieet en een inactieve levensstijl zijn typische risicofactoren voor NAFLD. Zowel niet-medicamenteuze therapieën als medicamenteuze therapieën voor NAFLD-behandeling zijn onderzocht51,52,53. De pathogenese van NAFLD i...

Platycodon grandiflorus (PG), de gedroogde wortel van Platycodon grandiflorus (Jacq.) A.DC., wordt gebruikt in de traditionele Chinese geneeskunde (TCM). Het wordt voornamelijk geproduceerd in de noordoostelijke, noordelijke, oostelijke, centrale en zuidwestelijke regio's van China1. De PG-componenten omvatten triterpenoïde saponinen, polysacchariden, flavonoïden, polyfenolen, polyethyleenglycolen, vluchtige oliën en mineralen2. PG heeft een lange geschiedenis van gebruik als voedsel en kruidengeneesmiddel in Azië. Traditioneel werd dit kruid gebruikt om medicijnen tegen longziekten te maken. Moderne farmacologie levert ook bewijs van de werkzaamheid van PG voor de behandeling van andere ziekten. Studies hebben aangetoond dat PG een therapeutisch effect heeft op een verscheidenheid aan door geneesmiddelen geïnduceerde leverbeschadigingsmodellen. De voedingssuppletie van PG- of platycodinextracten kan vetrijke door voeding veroorzaakte obesitas en de bijbehorende metabole ziekten verbeteren 3,4,5. Polysacchariden van PG kunnen worden gebruikt voor de behandeling van acute leverbeschadiging veroorzaakt door LPS / D-GalN bij muizen6. Bovendien verbeteren saponinen uit de wortels van PG vetrijke dieet-geïnduceerde niet-alcoholische steatohepatitis (NASH)7. Bovendien kan platycodine D (PD), een van de belangrijkste therapeutische componenten van PG, de expressie van lipoproteïnereceptoren met lage dichtheid en de opname van lipoproteïne met lage dichtheid in cellen van menselijk hepatocellulair carcinoom (HepG2) verbeteren8. Bovendien kan PD ook apoptose induceren en adhesie, migratie en invasie in HepG2-cellen remmen 9,10. In deze studie worden muis hepatoom AML-12-cellen dus gebruikt voor in vitro modelconstructie en om de farmacologische effecten en onderliggende mechanismen van PD in dit model verder te bestuderen.
De term niet-alcoholische leververvetting (NAFLD) verwijst naar een groep leverziekten die eenvoudige steatose, NASH, cirrose en hepatocellulair carcinoomomvat 11. Hoewel de pathogenese van NAFLD onvolledig wordt begrepen, van de klassieke "two-hit" theorie tot de huidige "multiple-hit" theorie, wordt insulineresistentie beschouwd als centraal in de pathogenese van NAFLD12,13,14. Studies hebben aangetoond dat insulineresistentie in hepatocyten kan leiden tot verhoogde vrije vetzuren, die triglyceriden vormen die in de lever worden afgezet en ervoor zorgen dat de lever vet wordt15,16. De ophoping van vet kan leiden tot lipotoxiciteit, oxidatieve stress-geïnduceerde mitochondriale disfunctie, endoplasmatische reticulumstress en inflammatoire cytokine-afgifte, resulterend in de pathogenese en progressie van NAFLD17,18. Bovendien speelt autofagie ook een rol bij de pathogenese van NAFLD, omdat het betrokken is bij het reguleren van cellulaire insulinegevoeligheid, cellulair lipidenmetabolisme, hepatocytenbeschadiging en aangeboren immuniteit 19,20,21.
Een verscheidenheid aan diermodellen en cellulaire modellen zijn vastgesteld om een basis te bieden voor het verkennen van de pathogenese en potentiële therapeutische doelen van NAFLD22,23. Afzonderlijke diermodellen kunnen echter niet alle pathologische processen van NAFLD24 volledig nabootsen. Individuele verschillen tussen dieren leiden tot verschillende pathologische kenmerken. Het gebruik van levercellijnen of primaire hepatocyten in in vitro studies van NAFLD zorgt voor maximale consistentie in de experimentele omstandigheden. Ontregeling van het lipidenmetabolisme in de lever kan leiden tot hogere niveaus van accumulatie van hepatocytenlipidedruppels in NAFLD25. Vrije vetzuren zoals oliezuur en palmolie zijn gebruikt in het in vitro model om NAFLD na te bootsen veroorzaakt door een vetrijk dieet26,27. De menselijke hepatoblastoomcellijn HepG2 wordt vaak gebruikt bij de constructie van NAFLD-modellen in vitro, maar als tumorcellijn verschilt het metabolisme van HepG2-cellen aanzienlijk van dat van levercellen onder normale fysiologische omstandigheden28. Daarom is het gebruik van primaire hepatocyten of primaire hepatocyten van muizen om het in vitro NAFLD-model voor geneesmiddelenscreening te construeren voordeliger dan het gebruik van tumorcellijnen. Bij vergelijking van het synergetisch onderzoek van geneesmiddeleffecten en therapeutische doelen in zowel diermodellen als in vitro hepatocytenmodellen, lijkt het erop dat het gebruik van muishepatocyten om het in vitro NAFLD-model te construeren een beter toepassingspotentieel heeft.
Vrije vetzuren die de lever binnenkomen, worden geoxideerd om energie te produceren of opgeslagen als triglyceriden. Significant is dat vrije vetzuren een bepaalde lipotoxiciteit hebben en cellulaire disfunctie en apoptose kunnen veroorzaken12. Palmitinezuur (PA) is het meest voorkomende verzadigde vetzuur in menselijk plasma29. Wanneer cellen in niet-vetweefsel lange tijd worden blootgesteld aan hoge concentraties PA, stimuleert dit de productie van reactieve zuurstofsoorten (ROS) en veroorzaakt oxidatieve stress, lipideaccumulatie en zelfs apoptose30. Daarom gebruiken veel onderzoekers PA als een inductor om levercellen te stimuleren om ROS te produceren en zo het in vitro leververvettingsmodel te construeren en de beschermende effecten van bepaalde werkzame stoffen op cellen te evalueren31,32,33,34. Deze studie introduceert een protocol voor het onderzoeken van de beschermende effecten van PD op een celmodel van NAFLD geïnduceerd door PA.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5% BSA Blocking Buffer</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>SW3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AML12 (alpha mouse liver 12) cell line</td>
			<td>Procell Life Science&#38;Technology Co., Ltd, China</td>
			<td>AML12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beyo ECL&#160;Plus</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0018S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-safety cabinet</td>
			<td>Esco Micro Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>AC2-5S1 A2&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cellSens</td>
			<td>Olympus, Tokyo, Japan</td>
			<td>1.8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture CO2 Incubator</td>
			<td>Esco Micro Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>CCL-170B-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>ST125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>D8371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>SH30023.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone, Tauranga, New Zealand</td>
			<td>SH30406.05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphpad software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA</td>
			<td>8.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP Goat Anti-Mouse IgG (H+L)</td>
			<td>ABclonal, Wuhan, China</td>
			<td>AS003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic PVDF Transfer Membrane</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>IPFL00010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin, Transferrin, Selenium Solution, 100&#215;</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>C0341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MAP LC3&#946; Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>SC-376404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC-1</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>M8650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Inverted Microscope IX53</td>
			<td>Olympus, Tokyo, Japan</td>
			<td>IX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palmitic Acid</td>
			<td>Sigma, Germany</td>
			<td>P0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin Solution (100x)</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylmethanesulfonyl&#160;fluoride</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>ST506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Solution</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platycodin D</td>
			<td>Chengdu Must Bio-Technology Co., Ltd, China</td>
			<td>CSA: 58479-68-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail for general use, 100x</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Marker</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>PR1910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reactive Oxygen Species Assay Kit</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>CA1410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA&#160;Lysis&#160;Buffer</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0013E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0012AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE Sample Loading Buffer, 5x</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sigma Centrifuge</td>
			<td>Sigma, Germany</td>
			<td>3K15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SQSTM1/p62 Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>SC-28359</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan Infinite 200 PRO&#160;&#160;</td>
			<td>Tecan Austria GmbH, Austria</td>
			<td>1510002987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WB Transfer Buffer,10x</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>D1060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Actin Mouse mAb</td>
			<td>ABclonal, Wuhan, China</td>
			<td>AC004</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigating the protective effects of platycodin d on non-alcoholic fatty liver disease in a palmitic acid-induced in vitro model

Het voorkomen van niet-alcoholische leververvetting (NAFLD) is wereldwijd in een alarmerend tempo toegenomen. Platycodon grandiflorum wordt veel gebruikt als een traditionele etnogeneeskunde voor de behandeling van verschillende ziekten en is een typisch functioneel voedsel dat kan worden opgenomen in het dagelijkse dieet. Studies hebben gesuggereerd dat platycodine D (PD), een van de belangrijkste actieve ingrediënten in Platycodon grandiflorum, een hoge biologische beschikbaarheid heeft en de voortgang van NAFLD aanzienlijk vermindert, maar het onderliggende mechanisme hiervan is nog steeds onduidelijk. Deze studie heeft tot doel het therapeutisch effect van PD tegen NAFLD in vitro te onderzoeken. AML-12-cellen werden gedurende 24 uur voorbehandeld met 300 μM palmitinezuur (PA) om NAFLD in vitro te modelleren. Vervolgens werden de cellen behandeld met PD of kregen ze gedurende 24 uur geen PD-behandeling. De niveaus van reactieve zuurstofsoorten (ROS) werden geanalyseerd met behulp van 2′,7′-dichloor-dihydro-fluoresceïnediacetaat (DCFH-DA) kleuring en de mitochondriale membraanpotentiaal werd bepaald door de JC-1-kleuringsmethode. Bovendien werden de eiwitexpressieniveaus van LC3-II/LC3-I en p62/SQSTM1 in de cellysaten geanalyseerd door western blotting. PD bleek de ROS- en mitochondriale membraanpotentiaalniveaus in de met PA behandelde groep significant te verlagen in vergelijking met de controlegroep. Ondertussen verhoogde PD de LC3-II/LC3-I-niveaus en verlaagde de p62/SQSTM1-niveaus in de met PA behandelde groep in vergelijking met de controlegroep. De resultaten gaven aan dat PD NAFLD in vitro verbeterde door oxidatieve stress te verminderen en autofagie te stimuleren. Dit in vitro model is een nuttig hulpmiddel voor het bestuderen van de rol van PD in NAFLD.

Intracellulaire ROS in de cellen AML-12-cellen werden geïnduceerd met 300 μM PA gedurende 24 uur en er werd een NAFLD-celmodel vastgesteld. Vervolgens werden de cellen gedurende 24 uur behandeld met PD. De cellen werden gelabeld met een DCFH-DA fluorescerende sonde en de ROS-productie werd waargenomen onder een fluorescentiemicroscoop. De resultaten van de DCFH-DA-kleuring van intracellulaire ROS in de cellen zijn weergegeven in figuur 1. De resultaten toonden aan dat P...

Watch this Scientific Journal Video about Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model at JoVE.com

Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model

Dit protocol onderzoekt de beschermende effecten van platycodine D op niet-alcoholische leververvetting in een palmitinezuur-geïnduceerd in vitro model.

Onderzoek naar de beschermende effecten van Platycodin D op niet-alcoholische leververvetting in een palmitinezuur-geïnduceerd in vitro model

The occurrence of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) has been increasing at an alarming rate worldwide. Platycodon grandiflorum is widely used as a ...

Deze methode demonstreert het gebruik van AML-12-cellen die modelconstructie mogelijk maken en de beschermende effecten van platycodine D op NAFLD onderzoeken. Te veel vertrouwen op het gebruik van diermodellen verhoogt de last van de ontwikkeling van therapeutische geneesmiddelen. Het gebruik van celmodellen in het vroege stadium van de ontwikkeling van NAFLD-geneesmiddelen is praktischer en kosteneffectiever.Dit TCM-model kan helpen het begrip van de biologische functie van platycodine D te verbeteren en het gebruik van andere TCM voor de behandeling van NAFLD te bestuderen. Begin met het zaaien van één milliliter AML-12-cellen per put in 12-putplaten. Verdeel vervolgens de 12-well plaat in vier verschillende behandelingsgroepen en label ze als controle, PD behandeld, PA behandeld en PA plus PD behandelde groep.Voeg één milliliter van de normale celkweekmedia per put toe aan de controle- en de met PD behandelde groep. Voeg een milliliter van de normale celkweekmedia aangevuld met 300 micromolair palmitinezuur toe aan de met PA behandelde en PA plus PD behandelde groep. Verwijder na 24 uur incubatie het kweekmedium van de cellen en was de cellen vervolgens twee keer met één milliliter serumvrije media.Voeg vervolgens één milliliter normale celkweekmedia aangevuld met een vehikel toe aan de controlegroep en één milliliter normale celkweekmedia aangevuld met één micromolair platycodine D aan de met PD behandelde groep. Voeg één milliliter normale celkweekmedia aangevuld met 300 micromolair palmitinezuur toe aan de met PA behandelde groep en één milliliter normale celkweekmedia aangevuld met 300 micromolair palmitinezuur en één micromolair platycodine D aan de met PA plus PD behandelde groep. Na het behandelen van de cellen gedurende 24 uur, was de cellen met een milliliter 1X PBS per put drie keer.Bevlek vervolgens de cellen met 100 microliter 10 micromolaire DCFH-DA per put. Incubeer de cellen in het donker gedurende 30 minuten. Was na incubatie de cellen drie keer met 1X PBS en voeg een milliliter 1X PBS toe aan elke put.Plaats de 12-well plaat op het microscoopstadium en gebruik een 20X-objectief om de morfologie van de cellen bij 200X vergroting te observeren. Om het mitochondriale membraanpotentiaal te meten, wast u de behandelde cellen die eerder zijn bereid drie keer met één milliliter 1X PBS per put. Bevlek vervolgens de cellen met 100 microliter van vijf microgram per milliliter JC-1 werkoplossing en incuber de cellen gedurende 30 minuten bij 37 graden Celsius in het donker.Was vervolgens de cellen drie keer met 1X PBS en voeg een milliliter 1X PBS toe aan elke put. Plaats de 12-well plaat op het microscoopstadium en gebruik een 20X-objectief om de morfologie van de cellen bij 200X vergroting te observeren. Lyseer de behandelde cellen en verzamel het cellysaat in microcentrifugebuizen van 1,5 milliliter.Centrifugeer de buizen op 12.000 G gedurende 20 minuten bij vier graden Celsius. Voeg vervolgens 5x SDS-pagina-monsterlaadbuffer toe aan het cellysaatsupernatant met een volumeverhouding van één tot vier. Plaats vervolgens de voorbereide 12% SDS-PAGE-gel met 12 putjes in de elektroforesetank en voeg 1X SDS-upmonsterbuffer verdund met ultrapuur water toe tot de aanbevolen hoogtelimiet.Voer na SDS-PAGE-elektroforese de elektrooverdracht van de eiwitten uit naar een PVDF-membraan van 0,45 micron. Incubeer het membraan in vijf milliliter van de primaire antilichamen verdund in blokkerende buffer. Gebruik antilichamen die specifiek zijn voor LC-III, p62 en bèta-actine.Incubeer 's nachts bij vier graden Celsius. Incubeer vervolgens het PVDF-membraan met konijn anti-muis LGG HRP secundair antilichaam verdund één tot 10.000 in blokkerende buffer. Incubeer het membraan bij kamertemperatuur beschermd tegen licht gedurende twee uur.Plaats na incubatie het PVDF-membraan op een plasticfolie. Voeg een geschikte hoeveelheid ECL-werkoplossing toe en incubeer gedurende twee minuten. Verwijder vervolgens de ECL-werkoplossing en stel het PVDF-membraan in het beeldvormingssysteem bloot voor beeldontwikkeling.DCFH-DA-kleuring toonde aan dat platycodine D het niveau van intracellulaire ROS in de ALM-12-cellen aanzienlijk kon verminderen, wat aangeeft dat deze behandeling cellulaire oxidatieve stress kan verminderen. Bovendien was de groene fluorescentie die JC-1-monomeren of gedepolariseerde mitochondriën vertegenwoordigde hoger in de met palmitinezuur behandelde cellen dan in de onbehandelde cellen, terwijl de rode fluorescentie die de JC-1-dimeren of gepolariseerde mitochondriën vertegenwoordigde, lager was in de met palmitinezuur behandelde cellen dan de onbehandelde cellen, wat wijst op palmitinezuur-geïnduceerde MMP-depolarisatie. Bovendien nam in vergelijking met de modelgroep de verhouding tussen JC-1-monomeren en dimeren af in de platycodine D-behandelingsgroep, wat aangeeft dat het de door palmitinezuur geïnduceerde MMP kon verbeteren.Eiwitexpressieniveaus van autofagie-gerelateerde eiwitten LC-III en p62 werden onderzocht door western blotting. De verhouding van LC-32 tot LC-31 nam aanzienlijk af en het eiwitexpressieniveau van p62 nam toe na behandeling met palmitinezuur. Aan de andere kant verlaagde platycodine D het eiwitexpressieniveau van p62 aanzienlijk en verhoogde het de verhouding van LC-32 tot LC-31, wat wijst op herstel van de autofagische flux geïnduceerd door palmitinezuur.Als de fluorescentiewaarde van de cellen in de negatieve controlegroep relatief hoog is, kunnen de werkconcentraties van de fluorescerende sondes indien nodig worden aangepast.

Research

JoVE Journal

Medicine

Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxische Stimulatie van Hersenen Microslices als<em&gt; In vitro</em&gt; Model van een beroerte

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Halsslagader Infusions voor farmacokinetische en farmacodynamische analyse van Taxanen in Muizen

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Quick Phenotypic Neurological Scoring System for Evaluating Disease Progression in the SOD1-G93A Mouse Model of ALS

Een Quick Fenotypische Neurologische Scoring System voor het evalueren van ziekteprogressie bij de SOD1-G93A muismodel van ALS

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

De dimethylnitrosamine geïnduceerde leverfibrose Model in het Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro en In Vivo opsporing van Mitophagy in menselijke cellen, C. Elegansen muizen

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Beoordeling van Plasma coagulatie op leverweefsel in een grote diermodel In Vivo

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrische Contractility meting van de muis mesenterische slagader met behulp van draad Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis (NASH) Resolution

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis NASH Resolution

Opneming van een Survivable lever biopsie Procedure bij muizen te beoordelen van de resolutie van de niet-alkoholische Steatohepatitis (NASH)

Clinical trials assessing therapies for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) involve a baseline and end of study liver biopsy, and ...

In Vitro Model of Coronary Angiogenesis

Here, we describe an in vitro culture assay to study coronary angiogenesis. Coronary vessels feed the heart muscle and are of clinical importance. Defects ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Murine Precision-Cut Lever Plakjes als een Ex Vivo Model van leverbiologie

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...