Name: investigating the protective effects of platycodin d on non-alcoholic fatty liver disease in a palmitic acid-induced in vitro model
Uploaded: 2022-12-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model at JoVE.com

Эта работа поддерживается грантами Комиссии по науке и технологиям Чунцина (cstc2020jxjl-jbky10002, jbky20200026, cstc2021jscx-dxwtBX0013 и jbky20210029) и Китайского фонда постдокторантуры (No 2021MD703919).

Клетки AML-12 (нормальная клеточная линия гепатоцитов мыши) используются для клеточных исследований. Ячейки получены из коммерческого источника (см. Таблицу материалов).
1. Предварительная обработка клеток AML-12 для моделирования НАЖБП in vitro
<ol><li>Подд?...

Исследования подчеркнули тот факт, что НАЖБП является клинико-патологическим синдромом, варьирующимся от жировой дистрофии печени до НАСГ, который может прогрессировать до цирроза и рака печени51. Диета с высоким содержанием жиров и малоподвижный образ жизни являются тип?...

Platycodon grandiflorus (PG), который является высушенным корнем Platycodon grandiflorus (Jacq.) A.DC., используется в традиционной китайской медицине (ТКМ). Он в основном производится в северо-восточных, северных, восточных, центральных и юго-западных регионах Китая1. Компоненты PG включают тритерпеноидные сапонины, полисахариды, флавоноиды, полифенолы, полиэтиленгликоли, летучие масла и минералы2. PG имеет долгую историю использования в качестве пищи и растительного лекарственного средства в Азии. Традиционно эта трава использовалась для изготовления лекарств от болезней легких. Современная фармакология также предоставляет доказательства эффективности ПГ для лечения других заболеваний. Исследования показали, что ПГ оказывает терапевтическое действие на различные модели лекарственно-индуцированного повреждения печени. Пищевые добавки PG или экстрактов платикодина могут улучшить ожирение, вызванное диетой с высоким содержанием жиров, и связанные с ним метаболические заболевания 3,4,5. Полисахариды из PG можно использовать для лечения острого повреждения печени, вызванного LPS / D-GalN у мышей6. Кроме того, сапонины из корней PG улучшают вызванный диетой неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)7. Кроме того, платикодин D (PD), один из наиболее важных терапевтических компонентов PG, может усиливать экспрессию рецепторов липопротеинов низкой плотности и поглощение липопротеинов низкой плотности в клетках гепатоцеллюлярной карциномы человека (HepG2)8. Кроме того, БП может также индуцировать апоптоз и ингибировать адгезию, миграцию и инвазию в клетках HepG2 9,10. Таким образом, в данном исследовании клетки AML-12 гепатомы мыши используются для построения модели in vitro и для дальнейшего изучения фармакологических эффектов и основных механизмов БП в этой модели.
Термин неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) относится к группе заболеваний печени, которая включает простой стеатоз, НАСГ, цирроз и гепатоцеллюлярную карциному11. Хотя патогенез НАЖБП до конца не изучен, от классической теории «двух ударов» до современной теории «множественного удара» резистентность к инсулину считается центральной в патогенезе НАЖБП12,13,14. Исследования показали, что резистентность к инсулину в гепатоцитах может привести к увеличению количества свободных жирных кислот, которые образуют триглицериды, которые откладываются в печени и заставляют печень становиться жирной15,16. Накопление жира может привести к липотоксичности, митохондриальной дисфункции, вызванной окислительным стрессом, стрессу эндоплазматического ретикулума и высвобождению воспалительных цитокинов, что приводит к патогенезу и прогрессированию НАЖБП17,18. Кроме того, аутофагия также играет роль в патогенезе НАЖБП, поскольку она участвует в регуляции клеточной чувствительности к инсулину, клеточном липидном обмене, повреждении гепатоцитов и врожденном иммунитете 19,20,21.
Было создано множество животных моделей и клеточных моделей, чтобы обеспечить основу для изучения патогенеза и потенциальных терапевтических мишеней НАЖБП22,23. Однако модели на отдельных животных не могут полностью имитировать все патологические процессы НАЖБП24. Индивидуальные различия между животными приводят к разным патологическим особенностям. Использование клеточных линий печени или первичных гепатоцитов в исследованиях НАЖБП in vitro обеспечивает максимальную согласованность в экспериментальных условиях. Нарушение регуляции липидного обмена в печени может привести к более высоким уровням накопления липидных капель гепатоцитов в НАЖБП25. Свободные жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и пальмовое масло, использовались в модели in vitro для имитации НАЖБП, вызванной диетой с высоким содержанием жиров26,27. Клеточная линия гепатобластомы человека HepG2 часто используется при построении моделей НАЖБП in vitro, но, как линия опухолевых клеток, метаболизм клеток HepG2 значительно отличается от метаболизма клеток печени в нормальных физиологических условиях28. Таким образом, использование первичных гепатоцитов или первичных гепатоцитов мыши для построения модели НАЖБП in vitro для скрининга лекарств является более выгодным, чем использование линий опухолевых клеток. Сравнивая синергетическое исследование эффектов лекарств и терапевтических мишеней как на животных моделях, так и на моделях гепатоцитов in vitro, представляется, что использование гепатоцитов мыши для построения модели НАЖБП in vitro имеет лучший потенциал применения.
Свободные жирные кислоты, поступающие в печень, окисляются для производства энергии или хранятся в виде триглицеридов. Важно отметить, что свободные жирные кислоты обладают определенной липотоксичностью и могут вызывать клеточную дисфункцию и апоптоз12. Пальмитиновая кислота (ПА) является наиболее распространенной насыщенной жирной кислотой в плазме кровичеловека 29. Когда клетки в нежировой ткани подвергаются воздействию высоких концентраций ПА в течение длительного времени, это стимулирует выработку активных форм кислорода (АФК) и вызывает окислительный стресс, накопление липидов и даже апоптоз30. Поэтому многие исследователи используют ПА в качестве индуктора для стимуляции клеток печени к выработке АФК и, таким образом, строят модель жировой болезни печени in vitro и оценивают защитные эффекты определенных активных веществ на клетки31,32,33,34. В этом исследовании представлен протокол для изучения защитных эффектов БП на клеточной модели НАЖБП, индуцированной ПА.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5% BSA Blocking Buffer</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>SW3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AML12 (alpha mouse liver 12) cell line</td>
			<td>Procell Life Science&#38;Technology Co., Ltd, China</td>
			<td>AML12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beyo ECL&#160;Plus</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0018S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-safety cabinet</td>
			<td>Esco Micro Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>AC2-5S1 A2&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cellSens</td>
			<td>Olympus, Tokyo, Japan</td>
			<td>1.8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture CO2 Incubator</td>
			<td>Esco Micro Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>CCL-170B-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>ST125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>D8371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>SH30023.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone, Tauranga, New Zealand</td>
			<td>SH30406.05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphpad software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA</td>
			<td>8.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP Goat Anti-Mouse IgG (H+L)</td>
			<td>ABclonal, Wuhan, China</td>
			<td>AS003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic PVDF Transfer Membrane</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>IPFL00010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin, Transferrin, Selenium Solution, 100&#215;</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>C0341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MAP LC3&#946; Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>SC-376404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC-1</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>M8650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Inverted Microscope IX53</td>
			<td>Olympus, Tokyo, Japan</td>
			<td>IX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palmitic Acid</td>
			<td>Sigma, Germany</td>
			<td>P0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin Solution (100x)</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylmethanesulfonyl&#160;fluoride</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>ST506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Solution</td>
			<td>Hyclone,&#160;Logan,&#160;UT,&#160;USA</td>
			<td>BL302A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platycodin D</td>
			<td>Chengdu Must Bio-Technology Co., Ltd, China</td>
			<td>CSA: 58479-68-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail for general use, 100x</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Marker</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>PR1910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reactive Oxygen Species Assay Kit</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>CA1410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA&#160;Lysis&#160;Buffer</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0013E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0012AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS-PAGE Sample Loading Buffer, 5x</td>
			<td>Beyotime, Shanghai, China</td>
			<td>P0015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sigma Centrifuge</td>
			<td>Sigma, Germany</td>
			<td>3K15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SQSTM1/p62 Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd</td>
			<td>SC-28359</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan Infinite 200 PRO&#160;&#160;</td>
			<td>Tecan Austria GmbH, Austria</td>
			<td>1510002987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WB Transfer Buffer,10x</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>D1060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Actin Mouse mAb</td>
			<td>ABclonal, Wuhan, China</td>
			<td>AC004</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigating the protective effects of platycodin d on non-alcoholic fatty liver disease in a palmitic acid-induced in vitro model

Заболеваемость неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП) растет с угрожающей скоростью во всем мире. Platycodon grandiflorum широко используется в качестве традиционной этномедицины для лечения различных заболеваний и является типичной функциональной пищей, которая может быть включена в повседневный рацион. Исследования показали, что платикодин D (PD), один из основных активных ингредиентов Platycodon grandiflorum, обладает высокой биодоступностью и значительно смягчает прогрессирование НАЖБП, но основной механизм этого до сих пор неясен. Это исследование направлено на изучение терапевтического эффекта БП против НАЖБП in vitro. Клетки AML-12 предварительно обрабатывали 300 мкМ пальмитиновой кислотой (ПА) в течение 24 ч для моделирования НАЖБП in vitro. Затем клетки либо обрабатывали БП, либо не получали лечения БП в течение 24 часов. Уровни активных форм кислорода (АФК) анализировали с помощью окрашивания 2',7'-дихлордигидро-флуоресцеинового диацетата (DCFH-DA), а мембранный потенциал митохондрий определяли методом окрашивания JC-1. Кроме того, уровни экспрессии белков LC3-II/LC3-I и p62/SQSTM1 в лизатах клеток анализировали методом вестерн-блоттинга. Было обнаружено, что БП значительно снижает уровни АФК и митохондриального мембранного потенциала в группе, получавшей ПА, по сравнению с контрольной группой. Между тем, БП повышала уровни LC3-II/LC3-I и снижала уровни p62/SQSTM1 в группе, получавшей PA, по сравнению с контрольной группой. Результаты показали, что БП улучшает НАЖБП in vitro , уменьшая окислительный стресс и стимулируя аутофагию. Эта модель in vitro является полезным инструментом для изучения роли БП в НАЖБП.

Внутриклеточные АФК в клетках Клетки ОМЛ-12 индуцировали 300 мкМ ПА в течение 24 ч, и была создана модель клеток НАЖБП. В последующем клетки обрабатывали БП в течение 24 ч. Клетки были помечены флуоресцентным зондом DCFH-DA, а образование АФК наблюдалось под флуоресцентным микроскопо...

Watch this Scientific Journal Video about Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model at JoVE.com

Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model

В этом протоколе исследуются защитные эффекты платикодина D на неалкогольную жировую болезнь печени в модели, индуцированной пальмитиновой кислотой in vitro .

Исследование защитных эффектов платикодина D на неалкогольную жировую болезнь печени в модели, индуцированной пальмитиновой кислотой in vitro

The occurrence of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) has been increasing at an alarming rate worldwide. Platycodon grandiflorum is widely used as a ...

Этот метод демонстрирует использование клеток AML-12, которые позволят построить модель и исследовать защитные эффекты платикодина D на НАЖБП. Чрезмерная зависимость от использования животных моделей увеличивает бремя разработки терапевтических лекарств. Использование клеточных моделей на ранней стадии разработки лекарств от НАЖБП является более практичным и экономически эффективным.Эта модель ТКМ может помочь улучшить понимание биологической функции платикодина D и помочь изучить использование других ТКМ для лечения НАЖБП. Начните с посева одного миллилитра клеток AML-12 в лунку в 12-луночные планшеты. Затем разделите 12-луночную пластину на четыре разные группы лечения и обозначьте их как контрольную, обработанную БП, обработанную ПА и группу ПА плюс БП.Добавьте один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток на лунку в контрольную группу и группу с БП. Добавьте один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток с добавлением 300 микромолярной пальмитиновой кислоты в группу, обработанную ПА, и ПА плюс БП. После 24 часов инкубации удалите питательную среду из клеток, а затем промойте клетки одним миллилитром среды, не содержащей сыворотки, два раза.Затем добавьте один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток, дополненной носителем, в контрольную группу и один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток, дополненную одним микромолярным платикодином D, в группу обработанной БП. Добавьте один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток, дополненной 300 микромолярной пальмитиновой кислотой, в группу, обработанную ПА, и один миллилитр нормальной среды для культивирования клеток, дополненную 300 микромолярной пальмитиновой кислотой и одним микромолярным платикодином D, в группу, обработанную ПА плюс БП. После обработки клеток в течение 24 часов промойте клетки одним миллилитром 1X PBS на лунку три раза.Затем окрашивают клетки 100 микролитрами 10 микромолярных DCFH-DA на лунку. Инкубируйте клетки в темноте в течение 30 минут. После инкубации промойте ячейки 1X PBS три раза и добавьте по одному миллилитру 1X PBS в каждую лунку.Поместите 12-луночную пластину на столик микроскопа и используйте 20-кратный объектив для наблюдения за морфологией клеток при 200-кратном увеличении. Чтобы измерить потенциал митохондриальной мембраны, промойте обработанные клетки, подготовленные ранее, одним миллилитром 1X PBS на лунку три раза. Затем окрашивают клетки рабочим раствором JC-1 объемом 100 микролитров по пять микрограммов на миллилитр и инкубируют клетки в течение 30 минут при температуре 37 градусов Цельсия в темноте.Затем промойте ячейки 1X PBS три раза и добавьте по одному миллилитру 1X PBS в каждую лунку. Поместите 12-луночную пластину на столик микроскопа и используйте 20-кратный объектив для наблюдения за морфологией клеток при 200-кратном увеличении. Лизируйте обработанные клетки и соберите клеточный лизат в микроцентрифужные пробирки объемом 1,5 миллилитра.Центрифугируйте пробирки при 12 000 G в течение 20 минут при четырех градусах Цельсия. Затем добавьте 5X SDS-PAGE буфер загрузки образца в надосадочную жидкость клеточного лизата с соотношением объема один к четырем. Затем поместите подготовленный 12%-ный гель SDS-PAGE с 12 лунками в резервуар для электрофореза и добавьте 1X буфер для образцов SDS, разбавленный сверхчистой водой, до рекомендуемого предела высоты.После электрофореза SDS-PAGE проводят электроперенос белков на 0,45-микронную мембрану PVDF. Инкубируют мембрану в пяти миллилитрах первичных антител, разведенных в блокирующем буфере. Используйте антитела, специфичные для LC-III, p62 и бета-актина.Инкубировать в течение ночи при четырех градусах Цельсия. Затем инкубируйте мембрану PVDF с вторичным антителом кролика против мыши LGG HRP, разбавленным от одного до 10 000 в блокирующем буфере. Инкубируют мембрану при комнатной температуре в защищенном от света месте в течение двух часов.После инкубации поместите мембрану PVDF на пищевую пленку. Добавьте необходимое количество рабочего раствора ECL и выдерживайте в течение двух минут. Затем удалите рабочий раствор ECL и обнажьте мембрану PVDF в системе визуализации для проявления изображения.Окрашивание DCFH-DA показало, что платикодин D может значительно снизить уровень внутриклеточных АФК в клетках ALM-12, что указывает на то, что эта обработка может снизить клеточный окислительный стресс. Кроме того, зеленая флуоресценция, представляющая мономеры JC-1 или деполяризованные митохондрии, была выше в клетках, обработанных пальмитиновой кислотой, чем в необработанных клетках, тогда как красная флуоресценция, представляющая димеры JC-1 или поляризованные митохондрии, была ниже в клетках, обработанных пальмитиновой кислотой, чем в необработанных клетках, что указывает на деполяризацию MMP, индуцированную пальмитиновой кислотой. Кроме того, по сравнению с модельной группой, отношение мономеров JC-1 к димерам снизилось в группе лечения платикодином D, что указывает на то, что он может улучшить ММР, индуцированный пальмитиновой кислотой.Уровни экспрессии белков LC-III и p62, связанных с аутофагией, исследовали методом вестерн-блоттинга. Соотношение LC-32 и LC-31 значительно снижалось, а уровень экспрессии белка p62 увеличивался после лечения пальмитиновой кислотой. С другой стороны, платикодин D значительно снижал уровень экспрессии белка р62 и увеличивал отношение LC-32 к LC-31, что указывает на восстановление аутофагического потока, индуцированного пальмитиновой кислотой.Если значение флуоресценции клеток в отрицательной контрольной группе относительно высокое, рабочие концентрации флуоресцентных зондов могут быть скорректированы по мере необходимости.

Research

JoVE Journal

Medicine

Investigating the Protective Effects of Platycodin D on Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in a Palmitic Acid-Induced In Vitro Model

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Экзайтотоксическим Стимуляция мозга Microslices как<em&gt; В пробирке</em&gt; Модель инсульта

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Сонной артерии Настои для Фармакокинетические и фармакодинамические анализ Таксаны в мышах

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Quick Phenotypic Neurological Scoring System for Evaluating Disease Progression in the SOD1-G93A Mouse Model of ALS

Быстрый Фенотипическая Неврологические система подсчета очков для оценки прогрессирования заболевания в SOD1-G93A мышиной модели СЛА

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Диметилнитрозамин Индуцированные печени Фиброз Модель в Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro и In Vivo обнаружения Mitophagy в клетки человека и C. Elegans, мышей

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Оценка плазменной коагуляции на ткани печени в большой модели на животных в естественных условиях

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Изометрические сократимости измерение верхней брыжеечной артерии мыши, с помощью проволоки миография

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis (NASH) Resolution

Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis NASH Resolution

Включения процедуры живуч биопсии печени в мышах оценить резолюции неалкогольный стеатогепатит (НАСГ)

Clinical trials assessing therapies for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis (NASH) involve a baseline and end of study liver biopsy, and ...

In Vitro Model of Coronary Angiogenesis

В vitro Модель коронарного ангиогенеза

Here, we describe an in vitro culture assay to study coronary angiogenesis. Coronary vessels feed the heart muscle and are of clinical importance. Defects ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Murine Точность Cut печени фрагменты, как Ex Vivo Модель печени биологии

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...