Name: induction of periodontitis via a combination of ligature and lipopolysaccharide injection in a rat model
Uploaded: 2023-02-17T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model at JoVE.com

تم دعم هذا العمل من قبل Fundació Universitat-Empresa de les Illes Balears (دعوة إثبات المفهوم 2020) ، من قبل معهد الصحة كارلوس الثالث ، وزارة الاقتصاد والمنافسة ، بتمويل مشترك من الصندوق الاجتماعي الأوروبي ESF وصندوق التنمية الإقليمية الأوروبي ERDF (عقد مع M.M.B; FI18/00104) ومن قبل المديرية العامة للتحقيقات، وكونسيلريا دي للتحقيقات، وحاكم باليار (عقد مع M.M.F.C; FPI/040/2020). يشكر المؤلفون الدكتورة آنا توماس وماريا تورتوسا على مساعدتهما في الجراحة التجريبية ومنصة IdISBa. أخيرا ، شكرا لكلية طب الأسنان ADEMA للوصول إلى الماسح الضوئي CBCT.

ملاحظة: تمت الموافقة على البروتوكول التجريبي للدراسة من قبل اللجنة الأخلاقية للتجارب على الحيوانات التابعة لمعهد البحوث الصحية لجزر البليار (CEEA-UIB ؛ الرقم المرجعي 163/03/21).
1. تخدير الحيوان وإعداد الإجراءات
<ol><li>تعقيم جميع الأدوات الجراحية (كمامات الفم المصنوعة من ا?...

<ol>
	<li>Carvalho, J. D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+citrus+flavonoid+supplementation+on+inflammation+in+lipopolysaccharide-induced+periodontal+disease+in+mice.">Impact of citrus flavonoid supplementation on inflammation in lipopolysaccharide-induced periodontal disease in mice.</a> Food and Function. 12 (11), 5007-5017 (2021).</li><li>Nazir, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+periodontal+disease,+its+association+with+systemic+diseases+and+prevention.">Prevalence of periodontal disease, its association with systemic diseases and prevention.</a> International Journal of Health Sciences. 1 (2), 72-80 (2017).</li><li>Dumitrescu, A. L., El-Aleem, S. A., Morales-Aza, B., Donaldson, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+periodontitis+in+the+rat:+Effect+of+lipopolysaccharide+on+bone+resorption,+osteoclast+activity,+and+local+peptidergic+innervation.">A model of periodontitis in the rat: Effect of lipopolysaccharide on bone resorption, osteoclast activity, and local peptidergic innervation.</a> Journal of Clinical Periodontology. 31 (8), 596-603 (2004).</li><li>Wang, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventive+effects+of+the+novel+antimicrobial+peptide+Nal-P-113+in+a+rat+Periodontitis+model+by+limiting+the+growth+of+Porphyromonas+gingivalis+and+modulating+IL-1&#946;+and+TNF-&#945;+production.">Preventive effects of the novel antimicrobial peptide Nal-P-113 in a rat Periodontitis model by limiting the growth of Porphyromonas gingivalis and modulating IL-1&#946; and TNF-&#945; production.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 17 (1), 1-10 (2017).</li><li>Guan, J., Zhang, D., Wang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+periodontitis+risk+factors+through+a+retrospective+analysis+of+80+cases.">Identifying periodontitis risk factors through a retrospective analysis of 80 cases.</a> Pakistan Journal of Medical Sciences. 38 (1), 293-296 (2021).</li><li>Khajuria, D. K., Patil, O. N., Karasik, D., Razdan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+evaluation+of+novel+biodegradable+chitosan+based+metformin+intrapocket+dental+film+for+the+management+of+periodontitis+and+alveolar+bone+loss+in+a+rat+model.">Development and evaluation of novel biodegradable chitosan based metformin intrapocket dental film for the management of periodontitis and alveolar bone loss in a rat model.</a> Archives of Oral Biology. 85, 120-129 (2018).</li><li>Nishida, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+resorption+and+local+interleukin-1alpha+and+interleukin-1beta+synthesis+induced+by+Actinobacillus+actinomycetemcomitans+and+Porphyromonas+gingivalis+lipopolysaccharide.">Bone resorption and local interleukin-1alpha and interleukin-1beta synthesis induced by Actinobacillus actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide.</a> Journal of Periodontal Research. 36 (1), 1-8 (2001).</li><li>Graves, D. T., Kang, J., Andriankaja, O., Wada, K., Rossa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+to+study+host-bacteria+interactions+involved+in+periodontitis.">Animal models to study host-bacteria interactions involved in periodontitis.</a> Bone. 23 (1), 1-7 (2008).</li><li>Struillou, X., Boutigny, H., Soueidan, A., Layrolle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+in+periodontology:+a+review.">Experimental animal models in periodontology: a review.</a> The Open Dentistry Journal. 4 (1), 37-47 (2010).</li><li>Mustafa, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+periodontal+disease+via+retentive+ligature,+lipopolysaccharide+injection,+and+their+combination+in+a+rat+model.">Induction of periodontal disease via retentive ligature, lipopolysaccharide injection, and their combination in a rat model.</a> Polish Journal of Veterinary Sciences. 24 (3), 365-373 (2021).</li><li>Chadwick, J. W., Glogauer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Robust+ligature-induced+model+of+murine+periodontitis+for+the+evaluation+of+oral+neutrophils.">Robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils.</a> Journal of Visualized Experiments. 2020 (155), 6-13 (2019).</li><li>Cheng, R., Wu, Z., Li, M., Shao, M., Hu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1&#946;+is+a+potential+therapeutic+target+for+periodontitis:+a+narrative+review.">Interleukin-1&#946; is a potential therapeutic target for periodontitis: a narrative review.</a> International Journal of Oral Science. 12 (1), 1-9 (2020).</li><li>Abe, T., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+ligature-induced+periodontitis+model+in+mice.">Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice.</a> Journal of Immunological Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).</li><li>Jeong-Hyon, K., Bon-Hyuk, G., Sang-Soo, N., Yeon-Cheol, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+rat+models+of+periodontitis+treated+with+natural+extracts.">A review of rat models of periodontitis treated with natural extracts.</a> Journal of Traditional Chinese Medical Sciences. 7 (2), 95-103 (2020).</li><li>Marchesan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+murine+model+to+study+periodontitis.">An experimental murine model to study periodontitis.</a> Nature Protocols. 13 (10), 2247-2267 (2018).</li><li>Lin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+ligature-induced+periodontitis+in+mice+to+explore+the+molecular+mechanism+of+periodontal+disease.">Application of ligature-induced periodontitis in mice to explore the molecular mechanism of periodontal disease.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (16), 8900 (2021).</li><li>Irie, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+micro-computed+tomography+for+bone+evaluation+in+dentistry.">Use of micro-computed tomography for bone evaluation in dentistry.</a> Brazilian Dental Journal. 29 (3), 227-238 (2018).</li><li>Haas, L. F., Zimmermann, G. S., De Luca Canto, G., Flores-Mir, C., Corr&#234;a, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision+of+cone+beam+CT+to+assess+periodontal+bone+defects:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Precision of cone beam CT to assess periodontal bone defects: a systematic review and meta-analysis.</a> Dentomaxillofacial Radiology. 47 (2), 20170084 (2018).</li><li>Kamburo&#287;lu, K., Ere&#351;, G., Akg&#252;n, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Qualitative+and+quantitative+assessment+of+alveolar+bone+destruction+in+adult+rats+using+CBCT.">Qualitative and quantitative assessment of alveolar bone destruction in adult rats using CBCT.</a> Journal of Veterinary Dentistry. 36 (4), 245-250 (2019).</li><li>Sousa Melo, S. L., Rovaris, K., Javaheri, A. M., de Rezen de Barbosa, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cone-beam+computed+tomography+(CBCT)+imaging+for+the+assessment+of+periodontal+disease.">Cone-beam computed tomography (CBCT) imaging for the assessment of periodontal disease.</a> Current Oral Health Reports. 7 (4), 376-380 (2020).</li></ol>

تصف هذه الطريقة تحريض PD في الفئران بعد تقنية مشتركة لحقن Pg-LPS ووضع الرباط حول M1 ، مما يكشف أنه يمكن إحداث تغييرات كبيرة في أنسجة اللثة والعظام السنخية في غضون 14 يوما بعد هذه الطريقة.
خلال هذا الإجراء ، يجب توفير الاهتمام بالخطوات الحاسمة المختلفة. أثناء تخدير الحيوانات و...

التهاب دواعم السن (PD) هو سادس أكثر حالات الصحة العامة انتشارا في جميع أنحاء العالم ، حيث يؤثر على حوالي 11٪ من إجمالي السكان ، كونه شكلا متقدما لا رجعة فيه ومدمرا لأمراض اللثة 1,2. PD هي عملية التهابية تؤثر على أنسجة اللثة واللثة ، مما يؤدي إلى تراجع اللثة ، والهجرة القمية للظهارة الموصلية مع نمو الجيب ، وفقدان العظم السنخي3. علاوة على ذلك ، يرتبط مرض باركنسون بالعديد من الأمراض الجهازية ، بما في ذلك أمراض القلب والأوعية الدموية والسمنة والسكري والتهاب المفاصل الروماتويدي ، والتي تلعب العوامل البيئية والعوامل الخاصة بالمضيف دورا مهمافي 4,5.
ومن ثم ، فإن مرض باركنسون هو مرض متعدد العوامل يبدأ في المقام الأول من خلال تراكم البلاك الميكروبي - الناتج عن dysbiosis للمجتمعات الميكروبية - والاستجابة المناعية للمضيف المبالغ فيها لمسببات الأمراض اللثوية ، مما يؤدي إلى انهيار أنسجة اللثة 4,6. من بين العديد من بكتيريا اللثة ، تعد البكتيريا اللاهوائية سالبة الجرام Porphyromonas gingivalis واحدة من مسببات الأمراض الرئيسية في PD4. يحتوي P. gingivalis على عديد السكاريد الدهني المعقد (LPS) في جدرانه ، وهو جزيء معروف بتحفيز تسلل كريات الدم البيضاء متعددة الأشكال النووية وتوسع الأوعية الدموية في أنسجة اللثة الملتهبة7. ينتج عن هذا إنتاج وسطاء التهابيين ، مثل إنترلوكين 1 (IL-1) و IL-6 و IL-8 ، عامل نخر الورم (TNF) ، أو البروستاجلاندين ، مع تنشيط ناقضة العظم اللاحقة وارتشاف العظام ، مما يؤدي إلى تدمير الأنسجة وفقدان الأسنان في نهاية المطاف3.
من بين المزايا المختلفة للنماذج الحيوانية القدرة على تقليد التعقيدات الخلوية كما هو الحال في البشر ، أو أن تكون أكثر دقة من الدراسات المختبرية ، والتي تتم على الأسطح البلاستيكية ذات أنواع الخلايا المحدودة8. لنمذجة PD تجريبيا في الجسم الحي ، تم استخدام أنواع حيوانية مختلفة ، مثل الرئيسيات غير البشرية والكلاب والخنازير والقوارض والأرانب والفئران والجرذان9. ومع ذلك ، فإن الفئران هي النموذج الحيواني الأكثر دراسة على نطاق واسع للتسبب في مرض باركنسون لأنها غير مكلفة ويسهل التعامل معها10. تتميز أنسجة اللثة السنية بسمات هيكلية مماثلة لأنسجة اللثة البشرية ، مع تلم اللثة الضحل وظهارة الموصل متصلة بسطح السن. علاوة على ذلك ، كما هو الحال في البشر ، تسهل الظهارة الموصلية مرور المواد البكتيرية والغريبة والإفرازات من الخلايا الالتهابية 9.
أحد أكثر النماذج التجريبية التي تم الإبلاغ عنها لتحريض PD في الفئران هو وضع الأربطة حول الأسنان ، وهو أمر صعب تقنيا ولكنه موثوقبه 10. يسهل وضع الرباط لوحة الأسنان وتراكم البكتيريا ، مما يؤدي إلى حدوث dysbiosis في التلم اللثوي ، والذي يسبب التهاب أنسجة اللثة وتدميرها11. يمكن أن يحدث فقدان ارتباط اللثة وارتشاف العظم السنخي في 7 أيام في نموذج الفئران8.
نموذج حيواني آخر لمرض باركنسون يتكون من حقن LPS في أنسجة اللثة. نتيجة لذلك ، يتم تحفيز تكوين العظم وفقدان العظام. تتشابه السمات النسيجية المرضية لهذا النموذج مع مرض باركنسون الذي أنشأه الإنسان ، والذي يتميز بمستويات أعلى من السيتوكينات المسببة للالتهابات ، وتدهور الكولاجين ، وارتشاف العظام السنخية 6,8.
وبالتالي ، كان الهدف من هذه الدراسة هو وصف نموذج فئران بسيط لمرض باركنسون التجريبي بناء على تقنيات حقن P. gingivalis-LPS (Pg-LPS) ، جنبا إلى جنب مع وضع الرباط حول أضراس الفك العلوي الأولى (M1). هذا نموذج له خصائص مماثلة لتلك التي لوحظت في مرض باركنسون البشري ، والذي يمكن استخدامه في دراسة آليات تطور المرض والعلاجات المستقبلية الممكنة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adsorbent paper point n&#186;30&#160;</td>
			<td>Proclinc</td>
			<td>8187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aprotinin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A1153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezole</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>573751.5</td>
			<td>Revanzol 5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braided silk ligature (5/0)&#160;</td>
			<td>Laboratorio Arago Sl</td>
			<td>613112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine&#160;</td>
			<td>Richter pharma</td>
			<td>578816.6</td>
			<td>Bupaq 0.3 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cone-beam computed tomography (CBCT) Scanner&#160;</td>
			<td>MyRay</td>
			<td>hyperion X9</td>
			<td>Model Hyperion X9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTAn software</td>
			<td>SkyScan</td>
			<td></td>
			<td>Version 1.13.4.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental explorer&#160;</td>
			<td>Proclinc</td>
			<td>99743</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond lance-shaped bur&#160;</td>
			<td>Dentaltix</td>
			<td>IT21517</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Food maintenance diet</td>
			<td>Sodispain research</td>
			<td>ROD14&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated surgical platform</td>
			<td>PetSavers</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hollenback carver</td>
			<td>Hu-FRIEDY&#160;</td>
			<td>HF45234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic needle&#160;&#160;</td>
			<td>BD&#160;</td>
			<td>300600</td>
			<td>25G X 5/8&#8221; - 0,5 X 16 MM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Karizoo</td>
			<td></td>
			<td>Isoflutek 1000mg/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;&#160;</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>581140.6</td>
			<td>Anesketin 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide&#160; derived from P.Gingivalis&#160;</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>TLRL-PGLPS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M/4000/PB08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holter</td>
			<td>Fehling Surgical Instruments</td>
			<td>KOT-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical pliers</td>
			<td>KLS Martin</td>
			<td>12-384-06-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical scissors&#160;</td>
			<td>S&#38;T microsurgical instruments</td>
			<td>SDC-15 RV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monitor iMEC 8 Vet</td>
			<td>Mindray&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiplex bead immunoassay</td>
			<td>Procartaplex, Thermo fisher Scientific</td>
			<td>PPX-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA)&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>8187151000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periosteal microsurgical elevator&#160;</td>
			<td>Dentaltix</td>
			<td>CU19112468</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF)&#160;</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10837091001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Solution (PBS)</td>
			<td>Capricorn Scientific</td>
			<td>PBS-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PhosSTOP&#160;</td>
			<td>Roche</td>
			<td>4906845001</td>
			<td>Commercial phosphatase inhibitor tablet&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic vial</td>
			<td>SPL Lifesciencies</td>
			<td>60015</td>
			<td>1.5mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Cinfa</td>
			<td>204024.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Microscope&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Model SteREO Discovery.V12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical loupes led light</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors&#160;</td>
			<td>Zepf Surgical</td>
			<td>08-1701-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe&#160;</td>
			<td>BD plastipak</td>
			<td>303172</td>
			<td>1mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary dental micromotor</td>
			<td>Eickemeyer</td>
			<td>174028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Calier</td>
			<td>20102-003</td>
			<td>Xilagesic 20 mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of periodontitis via a combination of ligature and lipopolysaccharide injection in a rat model

التهاب دواعم السن (PD) هو مرض التهابي مناعي مزمن منتشر للغاية يصيب اللثة ، مما يؤدي إلى فقدان الأنسجة الرخوة اللثوية والأربطة اللثوية والملاط والعظام السنخية. في هذه الدراسة ، تم وصف طريقة بسيطة لتحريض PD في الفئران. نحن نقدم تعليمات مفصلة لوضع نموذج الرباط حول الأضراس الفكية الأولى (M1) ومجموعة من حقن عديد السكاريد الشحمي (LPS) ، المشتقة من Porphyromonas gingivalis في الجانب المتوسط الحنكي من M1. تم الحفاظ على تحريض التهاب اللثة لمدة 14 يوما ، مما يعزز تراكم البكتيريا الحيوية والالتهابات. للتحقق من صحة النموذج الحيواني ، تم تحديد IL-1β ، وهو وسيط التهابي رئيسي ، بواسطة مقايسة مناعية في السائل اللثوي (GCF) ، وتم حساب فقدان العظام السنخية باستخدام التصوير المقطعي المحوسب بالشعاع المخروطي (CBCT). كانت هذه التقنية فعالة في تعزيز تراجع اللثة ، وفقدان العظام السنخية ، وزيادة مستويات IL-1β في الصندوق الأخضر للمناخ في نهاية الإجراء التجريبي بعد 14 يوما. كانت هذه الطريقة فعالة في تحفيز مرض باركنسون ، وبالتالي يمكن استخدامها في الدراسات حول آليات تطور المرض والعلاجات المستقبلية الممكنة.

يتم عرض جدول زمني للخطوات التجريبية في الشكل 1. يوضح الشكل 2 أ صورة للفك السفلي بعد التدخل الجراحي ، مع وضع الرباط حول تلم M1 في الوقت 0 من التجربة. يوضح الشكل 2B كيف ، بعد 14 يوما من الإجراء ، يدخل الرباط حول M1 إلى التلم اللثوي ، مما يسبب التهاب الل...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model at JoVE.com

Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model

في هذه الدراسة ، تم تقديم نموذج الفئران لتحريض التهاب اللثة عن طريق مزيج من الرباط المحتجز والحقن المتكرر من عديد السكاريد الدهني المشتق من Porphyromonas gingivalis ، على مدار 14 يوما حول الأضراس الفكية الأولى. كانت تقنيات الربط وحقن LPS فعالة في إحداث التهاب القلفة ، مما أدى إلى فقدان العظم السنخي والالتهاب.

تحريض التهاب دواعم السن عن طريق مزيج من حقن الرباط وعديد السكاريد الشحمي في نموذج الفئران

Periodontitis (PD) is a highly prevalent, chronic immune-inflammatory disease of the periodontium, that results in a loss of gingival soft tissue, ...

هذا نموذج فئران لالتهاب دواعم السن التجريبي ، يعتمد على تقنيات حقن عديد السكاريد الدهني جنبا إلى جنب مع وضع الرباط ، مما يوفر طريقة فعالة لدراسة تطور المرض وتقييم علاجات التهاب دواعم السن. إن الجمع بين كلتا التقنيتين والطرق الفردية يتوج بتحريض سريع للمرض ، مما يؤدي إلى تضخيم الاستجابة الالتهابية المدمرة وزيادة فقدان النسيج الضام وارتشاف العظام السنخية. توفر هذه الطريقة فرصة ثمينة لتقييم تأثير علاجات التهاب اللثة.سيكون الدكتور أوسكار فيلا ، دكتوراه. ابدأ بتعقيم جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة. تحضير مزيج من الكيتامين والزيلازين عن طريق خلط 1.6 ملليلتر من الكيتامين مع ملليلتر واحد من الزيلازين ، مخفف في برنامج تلفزيوني أو محلول ملحي ، وتخزين المرق عند أربع درجات مئوية.تمييع أتيباميزول إلى تركيز نهائي قدره 0.25 ملليغرام لكل ملليلتر والبوبرينورفين إلى تركيز نهائي قدره 0.03 ملليغرام لكل ملليلتر في برنامج تلفزيوني أو محلول ملحي ، وتخزين الأسهم في أربع درجات مئوية. تحضير ملليلتر واحد من PG-LPS في محلول ملحي معقم وتخزين المخزون في درجة حرارة 20 درجة مئوية تحت الصفر. استخدم إناث وذكور فئران Wistar للتجربة.احتفظ بالحيوانات في مجموعات في ظل البيئة المناسبة ، مع تقديم الطعام والمياه القياسية حسب الطلب. بعد تخدير الفئران ، ضع الحيوان على ظهره على منصة جراحية ساخنة. تغطية جسم الحيوان أثناء العملية لمنع فقدان الحرارة.إدارة الأكسجين بنسبة 100٪ باستخدام مخروط أنف صغير ، ومراقبة معدل النبض وتشبع الأكسجين عن طريق قياس التأكسج النبضي. الآن ، افتح فم الفئران باستخدام هفوة فم من الألومنيوم حول القواطع. اسحب اللسان به وقم بتثبيت الفك العلوي والفك السفلي في وضع عمل مفتوح ومريح ، مما يتيح الوصول إلى أضراس الفك السفلي.اجمع العامل المشترك الأكبر باستخدام ما مجموعه أربع نقاط ورقية ماصة رقم 30 ، عن طريق إدخالها في شق اللثة حول الوسط الحنكي ل M1 حتى مقاومة طفيفة. احتفظ بنقطة الورق في نفس الموضع لمدة 30 ثانية قبل الإزالة الفورية. بعد التجميع ، انقل نقطة الورق على الفور إلى قنينة بلاستيكية واحفظها في درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر حتى أداء الفحص.ضع الذيل البعيد للخياطة على الجانب الحنكي من الأسنان وأدخل الجزء القريب بين ملامسة M1 وأضراس الفك العلوي الثاني. استخدم المصعد المجهري السمحاق لإدخال الخيط داخل التلم. لف الرباط حول سطح الشدق من M1 بعناية فائقة ، حيث أن الأنسجة في هذا المستوى تمثل منطقة ضيقة من اللثة المرفقة.تأكد من شد الخيط على كلا الطرفين ليتم دفعه إلى التلم اللثوي. بعد ذلك ، اربط نهايات الخيط بعقدة الجراح وقم بقص ذيول أقصر ما يمكن. أدخل العقدة في التلم.بعد وضع الرباط ، قم بحقن 40 ميكرولتر من PG-LPS في محلول ملحي معقم في الأنسجة تحت اللثة في الجانب المتوسط الحنكي من M1 ثنائيا. لفحص الرباط وضبطه ، ضع الحيوان المخدر على ظهره واستخدم مخروط أنف صغير أثناء العملية مع 1٪ إيزوفلوران و 100٪ أكسجين للحفاظ على تخدير الحيوان. افتح فم الالتفاف باستخدام كمامة الفم المصنوعة من الألومنيوم حول القواطع ، واسحب اللسان بها وثبت الفك العلوي والفك السفلي في وضع عمل مفتوح ومريح ، مما يتيح الوصول إلى الأحرف المركبة.شد الأربطة ضد اللثة بمساعدة مصعد جراحي مجهري السمحاق وتأكد من إدخال خياطة الأربطة ، مما يخلق التهابا حول اللثة. بعد ضبط الرباط ، قم بحقن 40 ميكرولترا من PG-LPS بشكل ثنائي في الأنسجة تحت اللثة في الجانب المتوسط الحنكي من M1 ، كما هو موضح سابقا. بعد التضحية بالحيوان في اليوم 14 ، اجمع العامل المشترك الأكبر كما هو موضح سابقا.انقل نقطة الورق على الفور إلى قنينة بلاستيكية واحفظها في درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر حتى أداء الفحص. تظهر الصور ثنائية الأبعاد للعظم السنخي لأضراس الفك العلوي حجما أكبر للعظام في التحكم القاعدي وفقدان أعلى للعظام السنخية بعد إنشاء التهاب دواعم السن. يسلط تحليل الصور السهمية الضوء على فقدان العظام السنخية بشكل أكبر في منطقة العظم بين الجذور في M1 و M2 بعد إنشاء التهاب اللثة ، مقارنة بمجموعة التحكم القاعدية.بعد التضحية ، قدم الحنك اختلافات في ركود اللثة في M1 بين المجموعات المختلفة. تظهر مجموعة التهاب دواعم السن هجرة اللثة القمية بشكل ملحوظ والتهاب اللثة حول الأضراس الفكية مقارنة بمجموعة التحكم القاعدية. أيضا ، أظهرت مجموعة التهاب اللثة إطلاق أعلى بكثير من السيتوكين المؤيد للالتهابات 1L-1 بيتا من GCF من المجموعة الضابطة.الخطوات الحاسمة في الإجراء هي الموضع الصحيح للخياطة والعقدة في التلم ، والتعديل المناسب للرباط ، وحقن عديد السكاريد الدهني الدقيق خلال بروتوكول 14 يوما.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model

Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis

إعداد مستمنع ماوس النخامية للتحريض التهاب النخامية الذاتية التجريبي

Autoimmune hypophysitis is a chronic inflammation of the pituitary gland caused or accompanied by autoimmunity1.  It has traditionally been considered a ...

Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis in SJL Mice

تحريض التهاب النخامية الذاتية التجريبية في الفئران SJL

Autoimmune hypophysitis can be reproduced experimentally by the injection of pituitary proteins mixed with an adjuvant into susceptible mice1. Mouse ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Chemoselective Modification of Viral Surfaces via Bioorthogonal Click Chemistry

Chemoselective تعديل السطوح الفيروسية عن طريق الكيمياء نقرة Bioorthogonal

The modification of virus particles has received a significant amount of attention for its tremendous potential for impacting gene therapy, oncolytic ...

A Method for Generating Pulmonary Neutrophilia Using Aerosolized Lipopolysaccharide

وهناك طريقة لتوليد الرئوي العدلات عن طريق رذاذ lipopolysaccharide في

Acute lung injury (ALI) is a severe disease characterized by alveolar neutrophilia, with limited treatment options and high mortality. Experimental models ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

نموذج غير الغازية من ممرض للأعصاب<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; العدوى في الأطفال حديثي الولادة الجرذ

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

التعريفي للشلل وإصابة النظام المرئي في الفئران التي تي الخلايا المحددة للبصري المياليني أقوابورين أوتوانتيجين-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

Two-photon Intravital Imaging of Leukocytes During the Immune Response in Lipopolysaccharide-treated Mouse Liver

اثنين-فوتون تصوير إينترافيتال من الكريات البيضاء خلال الاستجابة المناعية في الكبد تعامل Lipopolysaccharide الماوس

Sepsis is a type of severe infection that can cause organ failure and tissue damage. Although the mortality and morbidity rates associated with sepsis are ...

Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin

تحريض إصابة الرئة الماوس عن طريق حقن الرغامى من بليموسين

Pulmonary fibrosis is a hallmark of several human lung diseases with a different etiology. Since current therapies are rather limited, mouse models ...

Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

الحث والتهديف من مرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف في نموذج المورين Xenogeneic والقياس الكمي للخلايا تي البشرية في أنسجة الماوس باستخدام PCR الرقمية

Acute graft-versus-host disease (GVHD) is a significant limitation for patients receiving hematopoietic stem cell transplant as therapy for hematological ...