Name: mechanical control of relaxation using intact cardiac trabeculae
Uploaded: 2023-02-17T13:35:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mechanical Control of Relaxation Using Intact Cardiac Trabeculae at JoVE.com

Эта работа поддерживается Национальными институтами здравоохранения (1R01HL151738) и Американской кардиологической ассоциацией (18TPA34170169).

<ol>
	<li>Iribe, G., Helmes, M., Kohl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force-length+relations+in+isolated+intact+cardiomyocytes+subjected+to+dynamic+changes+in+mechanical+load.">Force-length relations in isolated intact cardiomyocytes subjected to dynamic changes in mechanical load.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 292 (3), 1487-1497 (2007).</li><li>Dowrick, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Work-loop+contractions+reveal+that+the+afterload-dependent+time+course+of+cardiac+Ca(2+)+transients+is+modulated+by+preload.">Work-loop contractions reveal that the afterload-dependent time course of cardiac Ca(2+) transients is modulated by preload.</a> Journal of Applied Physiology. 133 (3), 663-675 (2022).</li><li>ter Keurs, H. E., Rijnsburger, W. H., van Heuningen, R., Nagelsmit, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tension+development+and+sarcomere+length+in+rat+cardiac+trabeculae.+Evidence+of+length-dependent+activation.">Tension development and sarcomere length in rat cardiac trabeculae. Evidence of length-dependent activation.</a> Circulation Research. 46 (5), 703-714 (1980).</li><li>Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force-velocity+relations+in+mammalian+heart+muscle.">Force-velocity relations in mammalian heart muscle.</a> The American Journal of Physiology. 202, 931-939 (1962).</li><li>Brutsaert, D. L., Rademakers, F. E., Sys, S. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triple+control+of+relaxation:+implications+in+cardiac+disease.">Triple control of relaxation: implications in cardiac disease.</a> Circulation. 69 (1), 190-196 (1984).</li><li>Taberner, A. J., Han, J. C., Loiselle, D. S., Nielsen, P. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+innovative+work-loop+calorimeter+for+in+vitro+measurement+of+the+mechanics+and+energetics+of+working+cardiac+trabeculae.">An innovative work-loop calorimeter for in vitro measurement of the mechanics and energetics of working cardiac trabeculae.</a> Journal of Applied Physiology. 111 (6), 1798-1803 (2011).</li><li>De Tombe, P. P., Little, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inotropic+effects+of+ejection+are+myocardial+properties.">Inotropic effects of ejection are myocardial properties.</a> Am J Physiol. 266, 1202-1213 (1994).</li><li>Chung, C. S., Hoopes, C. W., Campbell, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+relaxation+is+accelerated+by+fast+stretch,+not+reduced+afterload.">Myocardial relaxation is accelerated by fast stretch, not reduced afterload.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 103, 65-73 (2017).</li><li>Schick, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+preload+increases+Mechanical+Control+(strain-rate+dependence)+of+Relaxation+by+modifying+myosin+kinetics.">Reduced preload increases Mechanical Control (strain-rate dependence) of Relaxation by modifying myosin kinetics.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 707, 108909 (2021).</li><li>Parikh, S. S., Zou, S. Z., Tung, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contraction+and+relaxation+of+isolated+cardiac+myocytes+of+the+frog+under+varying+mechanical+loads.">Contraction and relaxation of isolated cardiac myocytes of the frog under varying mechanical loads.</a> Circulation Research. 72 (2), 297-311 (1993).</li><li>Dowrick, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+brightfield,+fluorescence,+and+optical+coherence+tomographic+imaging+of+contracting+cardiac+trabeculae+ex+vivo.">Simultaneous brightfield, fluorescence, and optical coherence tomographic imaging of contracting cardiac trabeculae ex vivo.</a> Journal of Visualized Experiments. (176), e62799 (2021).</li><li>Wiggers, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+consecutive+phases+of+the+cardiac+cycle+I.+The+duration+of+the+consecutive+phases+of+the+cardiac+cycle+and+the+criteria+for+their+precise+determination.">Studies on the consecutive phases of the cardiac cycle I. The duration of the consecutive phases of the cardiac cycle and the criteria for their precise determination.</a> American Journal of Physiology-Legacy Content. 56 (3), 415-438 (1921).</li><li>Rosen, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late+systolic+onset+of+regional+LV+relaxation+demonstrated+in+three-dimensional+space+by+MRI+tissue+tagging.">Late systolic onset of regional LV relaxation demonstrated in three-dimensional space by MRI tissue tagging.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 287 (4), 1740-1746 (2004).</li><li>Saito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differences+in+left+ventricular+torsional+behavior+between+patients+with+hypertrophic+cardiomyopathy+and+hypertensive+heart+disease.">The differences in left ventricular torsional behavior between patients with hypertrophic cardiomyopathy and hypertensive heart disease.</a> International Journal of Cardiology. 150 (3), 301-306 (2011).</li><li>Monasky, M. M., Biesiadecki, B. J., Janssen, P. M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+phosphorylation+of+tropomyosin,+troponin+I,+and+myosin+light+chain-2+after+stretch+in+rabbit+ventricular+myocardium+under+physiological+conditions.">Increased phosphorylation of tropomyosin, troponin I, and myosin light chain-2 after stretch in rabbit ventricular myocardium under physiological conditions.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 48 (5), 1023-1028 (2010).</li><li>Raff, G. L., Glantz, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volume+loading+slows+left+ventricular+isovolumic+relaxation+rate.+Evidence+of+load-dependent+relaxation+in+the+intact+dog+heart.">Volume loading slows left ventricular isovolumic relaxation rate. Evidence of load-dependent relaxation in the intact dog heart.</a> Circulation Research. 48, 813-824 (1981).</li><li>Matsubara, H., Takaki, M., Yasuhara, S., Araki, J., Suga, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Logistic+time+constant+of+isovolumic+relaxation+pressure-time+curve+in+the+canine+left+ventricle.+Better+alternative+to+exponential+time+constant.">Logistic time constant of isovolumic relaxation pressure-time curve in the canine left ventricle. Better alternative to exponential time constant.</a> Circulation. 92 (8), 2318-2326 (1995).</li><li>Chung, C. S., Kovacs, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+determinants+of+left+ventricular+isovolumic+pressure+decline:+model+prediction+with+in+vivo+validation.">Physical determinants of left ventricular isovolumic pressure decline: model prediction with in vivo validation.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 294 (4), 1589-1596 (2008).</li><li>Campbell, K. B., Kirkpatrick, R. D., Tobias, A. H., Taheri, H., Shroff, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Series+coupled+non-contractile+elements+are+functionally+unimportant+in+the+isolated+heart.">Series coupled non-contractile elements are functionally unimportant in the isolated heart.</a> Cardiovascular Research. 28 (2), 242-251 (1994).</li><li>Raman, S., Kelley, M. A., Janssen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+muscle+dimensions+on+trabecular+contractile+performance+under+physiological+conditions.">Effect of muscle dimensions on trabecular contractile performance under physiological conditions.</a> Pflugers Archiv: European Journal of Physiology. 451 (5), 625-630 (2006).</li><li>Czeiszperger, T. L., Wang, M. P., Chung, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+stabilizer+Poloxamer+188+improves+yield+of+primary+isolated+rat+cardiomyocytes+without+impairing+function.">Membrane stabilizer Poloxamer 188 improves yield of primary isolated rat cardiomyocytes without impairing function.</a> Physiol Rep. 8 (4), 14382 (2020).</li><li>Louch, W. E., Sheehan, K. A., Wolska, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+cardiomyocyte+isolation,+culture,+and+gene+transfer.">Methods in cardiomyocyte isolation, culture, and gene transfer.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 51 (3), 288-298 (2011).</li><li>Loiselle, D. S., Johnston, C. M., Han, J. C., Nielsen, P. M. F., Taberner, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+heat:+a+window+into+the+thermodynamics+of+a+molecular+machine.">Muscle heat: a window into the thermodynamics of a molecular machine.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 310 (3), 311-325 (2016).</li><li>de Tombe, P. P., ter Keurs, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force+and+velocity+of+sarcomere+shortening+in+trabeculae+from+rat+heart.+Effects+of+temperature.">Force and velocity of sarcomere shortening in trabeculae from rat heart. Effects of temperature.</a> Circulation Research. 66 (5), 1239-1254 (1990).</li><li>Palmer, B. M., Bell, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparing+excitable+cardiac+papillary+muscle+and+cardiac+slices+for+functional+analyses.">Preparing excitable cardiac papillary muscle and cardiac slices for functional analyses.</a> Frontiers in Physiology. 13, 817205 (2022).</li><li>Brunello, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+filament-based+regulation+of+the+dynamics+of+contraction+in+heart+muscle.">Myosin filament-based regulation of the dynamics of contraction in heart muscle.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 117 (14), 8177-8186 (2020).</li></ol>

Никакой.

Механический контроль релаксации (MCR) количественно определяет зависимость скорости релаксации миокарда от скорости деформации мышцы, протекающей релаксации 8,9. Скорость деформации, а не постнагрузка, необходима и достаточна для изменения скорости релаксации8. Поскольку не было доказано, что вмешательства по изменению нормы кальция существенно улучшают сердечную релаксацию, механическое вмешательство может дать новое понимание механизма и обеспечить новое лечение диастолической дисфункции.
В протоколе изменения скорости деформации миокарда, описанном здесь, используется изотонический зажимнагрузки 8,9. Сильной стороной изотонического нагрузочного зажима является количественный контроль постнагрузочного напряжения. Протоколы, подобные протоколам Виндкесселя, могут быть использованы для дальнейшего исследования изменений в постнагрузке, преднагрузке и работе сердца 2,6,7. Рампа, не контролируемая зажимом нагрузки, также может быть использована для лучшей изоляции изменения деформации от скорости деформации. Несмотря на это, сама постнагрузка, по-видимому, не является сильным модификатором скорости релаксации8.
Протокол также может быть адаптирован для приближения к более физиологическим условиям температуры и скорости стимуляции. Текущие детали протокола были использованы, чтобы показать наличие MCR. Обычно рекомендуется проводить эксперименты в физиологических условиях, в зависимости от экспериментального вопроса. Однако эксперименты, проводимые при 37 ° C или при высокой скорости стимуляции, могут быстрее вызвать истощение (повреждение) мышцы. Может потребоваться решение с улучшенной пропускной способностью кислорода. Кроме того, сбор данных должен иметь возможность выборки длины и силы достаточно быстро, чтобы устранить быстрые подергивания и обеспечить контроль обратной связи.
Текущий протокол не описывает измерение кальция или измерение и контроль длины саркомера. Измерения кальция рассматривались в других протоколах11, в то время как измерение длины саркомера может быть добавлено с помощью соответствующего оборудования. Контроль длины саркомера не используется в текущих исследованиях MCR, поскольку длина мышц является наиболее корреляционным параметром для клинического состояния19. Дальнейший контроль длины саркомера (по сравнению с контролем длины мышц) даст конкретные ответы на кинетические вопросы, но вряд ли добавит к трансляционным знаниям из-за межсаркомеровых вариаций и минимального понимания изменений длины саркомера in vivo.
Здесь выделены три экспериментальных соображения для повышения воспроизводимости данных.
Во-первых, у некоторых животных может быть трудно обнаружить отдельно стоящие сердечные трабекулы (неопубликованные результаты и сообщения). В то время как подергивание мышц можно обнаружить у большинства крыс, разумный показатель успеха для получения данных из трабекулы у крыс составляет один к трем. Успех Trabecula может быть выше у крыс Brown Norway x Lewis F1, которые также использовались исторически20 и, как сообщается, имеют больше трабекул (неопубликованные сообщения). Для мышей показатели успеха, вероятно, будут ниже, и менее одного из 10 ожидается для мышей с фоном BL / 6; однако более высокий показатель ожидается для мышей с фоном FVBN (неопубликованные сообщения и наблюдения).
Во-вторых, повреждение мышц может снизить производительность. Если развитые силы составляют менее 10 мН мм-2 при 25 ° C и частоте 0,5 Гц, исследователям может потребоваться выполнить поиск и устранение неисправностей, чтобы оценить, происходит ли непреднамеренное растяжение или контакт между металлическими щипцами и мышцей, если растворы не приготовлены должным образом, или правильно ли функционирует кардиостимулятор или экспериментальное оборудование. Другие протоколы, использующие интактную трабекулу, предлагают использовать шприцы с замком Люэра в качестве передаточных сосудов11. Хотя это возможно, особенно если пользователь контролирует очень медленную скорость потока или меньший мышечный сегмент, в текущем протоколе используется пипетка для переноса отверстия гораздо большего размера, чтобы свести к минимуму возможные повреждения. Еще один этап, на котором может произойти ишемическое повреждение, - это рассечение. Аорту следует канюлировать и промывать перфузионным раствором в течение 3 мин после первого разреза брюшной полости (крыса) или вывиха шейки матки (мышь), аналогично пределам, указанным в протоколах выделения кардиомиоцитов21,22. Это сводит к минимуму время, когда сердечная ткань не подвергается воздействию кардиоплегического перфузионного раствора. Кроме того, рассечения продолжительностью более 30 минут обычно не вызывают подергивания трабекулы. Таким образом, операторы должны практиковать быстрое, но осторожное вскрытие, чтобы свести к минимуму ущерб. Площадь поперечного сечения выше 0,2мм2 (2 x 10-7 м2) может страдать от ишемии ядра20.
В-третьих, следует учитывать способ, которым мышцы прикреплены к двигателю и преобразователю силы. Этот протокол в настоящее время фокусируется на крючках и отдельно стоящих трабекулах. Иногда быстрая скорость растяжения перед расслаблением может привести к скольжению мышцы, если она не прикреплена должным образом, поэтому текущий протокол не использует «корзины» для удержания трабекулы23,24. Альтернативные методы монтажа (клеи, зажимы и т. Д.25,26) также могут быть рассмотрены и проверены. В описанном здесь протоколе используются трабекулы, а не папиллярные мышцы. Хорды сосочковой мышцы индуцируют последовательную эластичность, которая может ингибировать изменения MCR9. Тем не менее, точное размещение прикреплений в мышце вряд ли повлияет на меры, потому что длина (и диаметр) трабекулы существенно различаются.
Ограничением прокалывания концов мышц крючками является то, что сама точка крепления также может быть повреждена. Возможный разрыв прикрепленной мышечной ткани при частых сокращениях (в зависимости от их силы) может изменить длину или эластичность ряда. Такую скорость разрыва трудно контролировать. Точно так же повреждение ткани и крючка может усугубиться во время растяжения, что также может вызвать проблемы. Визуальный осмотр и разработанные значения силы, оставшиеся >80% от уравновешенной изометрической силы, должны использоваться для оценки того, поврежден ли препарат, и должны быть исключены.
Другое ограничение или соображение влияет на то, на какие экспериментальные вопросы можно ответить с помощью метода. Например, рассмотрим использование 2,3-бутандионмоноксима (BDM) в перфузионном растворе. BDM - это фосфатаза, которая может изменять функцию мышц. Кроме того, длительный период разгрузки и отсутствие темпа означают, что состояние скрытого фосфорилирования, вероятно, изменилось. Таким образом, следует соблюдать осторожность, если вы пытаетесь напрямую оценить сократимость мышц животного (по сравнению с различиями между генотипами или методами лечения), поскольку сократительное состояние, вероятно, изменилось. Однако влияние фосфорилирования можно оценить фармакологически путем добавления агониста или антагониста пути.
Таким образом, MCR дает представление о том, как расслабление регулируется движением мышц (скоростью напряжения). MCR может помочь лучше понять диагностику и мониторинг диастолического заболевания, а также цели фармакологического вмешательства, такие как изменение кинетики миозина. В протоколе и рекомендациях, изложенных здесь, изложены знания, накопленные за несколько лет испытаний, и они должны быть применимы к другим системам и моделям сердечных заболеваний.

Сердечная релаксация нарушается почти при всех формах сердечной недостаточности (включая сердечную недостаточность со сниженной фракцией выброса) и при многих сердечно-сосудистых заболеваниях. В дополнение к многочисленным методам оценки сердечной функции в пермеабилизированных мышцах, оценка интактных сердечных мышц вызывает все больший интерес. Такие ткани оцениваются как ненагруженные (концы могут свободно сокращаться) или нагруженные (контролируемая длина или сила). Исторически сложилось так, что интактные изолированные миоциты оценивались в ненагруженном состоянии, когда тело клетки может свободно укорачиваться во время сокращения. Интактные сердечные трабекулы часто оцениваются в изометрических условиях, когда длина не может изменяться, но создается напряжение (сила на площадь поперечного сечения). Как интактные миоцитарные, так и трабекульные методы начинают сближаться с модификациями нагрузки 1,2.
Протоколы нагрузочного зажима мышцы (т.е. контроля развивающегося напряжения мышцы при заданном значении, имитирующем физиологические постнагрузки) разрабатывались в течение нескольких десятилетий 3,4,5. В интактных сердечных тканях нагрузочные зажимы позволяют исследователям более точно имитировать сердечный цикл in vivo с использованием изотонических или виндкессельских постнагрузок 6,7,8,9. Целью этого протокола является получение данных, используемых для количественной оценки MCR (т.е. зависимости скорости деформации от скорости релаксации)8,9.
В то время как протокол MCR был адаптирован из предыдущей работы, основное внимание в этом протоколе (по сравнению с аналогичными протоколами, использующими интактные сердечные ткани) уделяется биомеханическим механизмам, которые модифицируют релаксацию. Существует несколько протоколов, использующих зажим нагрузки 3,4,5,7,10, и протоколы, ориентированные на модели Виндкесселя 1,2,11, но этот протокол конкретно описывает, как растяжение перед релаксацией изменяет скорость релаксации. Мы показали, что этот контроль происходит во время протодиастолического периода8, фазы, первоначально описанной Виггерсом12. В нормальных здоровых сердцах миокард подвергается удлиняющей нагрузке во время выброса до закрытия аортального клапана (т. е. до изоволюмиальной релаксации)13. Это имитируется продлением продолжительности контроля постнагрузки до тех пор, пока мышца не начнет растягиваться. Клинические данные свидетельствуют о том, что это удлинение может быть ослаблено или утрачено при болезненных состояниях14, а последствия и механизмы изменения скорости конечной систолической деформации не были полностью выяснены. Учитывая редкие варианты лечения диастолических заболеваний и сердечной недостаточности с сохраненной фракцией выброса, мы предполагаем, что MCR может дать представление о новых механизмах, лежащих в основе нарушения релаксации.
В то время как грубое вскрытие, описанное здесь, фокусируется на грызунах, выделение трабекулы может быть выполнено из любого неповрежденного сердца и ранее использовалось с сердечной трабекулой8 человека. Аналогичным образом, сбор и анализ данных также могут быть применены к кардиомиоцитам или другим изолированным типам мышц 1,10. Обсуждение включает комментарии о возможных изменениях и адаптациях метода, а также ограничения, такие как предостережение против использования сосочковых мышц из-за механических свойств хорд9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>18 or 16 gauge blunted needle/canula</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>for cannulation of rat aorta, use 1mm of PE160 or PE205 tubing as stop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3-Butanedione Monoxime</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B0753-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 gauge blunted needle/canula</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>for cannulation of mouse aorta, use 1mm of PE50 tubing as stop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL syringe</td>
			<td>BD Luer-Lock</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>95% Oxygen/5% CO2</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>Z02OX9522000043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anethesia system</td>
			<td>EZ Systems</td>
			<td>EZ-SA800</td>
			<td>Can use any appropriate anethesia method/system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP-1600</td>
			<td>to coat tips of fine forcepts, scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride Dihydrate</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>C79-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Containers/dissection dishes</td>
			<td>FisherBrand</td>
			<td>08-732-113</td>
			<td>Weigh dishes for creating dissection plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13005-14</td>
			<td>for mouse gross dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition software</td>
			<td>SLControl</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition system</td>
			<td>MicrostarLabs</td>
			<td>DAP5216a</td>
			<td>Can use any DAQ.&#160; This is a PCI based data acqusition for use with SLControl; must have a PC with a PCI slot</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data analysis software</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td>Matlab</td>
			<td>Custom Script</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #3 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11231-30</td>
			<td>2x for cannulation of aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>2x for trabecula isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Experimental system</td>
			<td>Aurora Scientific</td>
			<td>801C</td>
			<td>Can use any appropriate experimental chamber with force and length control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors, curved</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14061-09</td>
			<td>for removal of heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gooseneck Piggyback Illuminator</td>
			<td>AmScope</td>
			<td>LED-6WA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3375-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging software</td>
			<td>IrfanView</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>15915</td>
			<td>for removal of heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>502017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride Hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2670-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14110-15</td>
			<td>for rat gross dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14116-14</td>
			<td>for mouse gross dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope connected camera</td>
			<td>Flir</td>
			<td>BFS-U3-27S5M-C</td>
			<td>Includes acquisition software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope/digital imaging system</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX-73</td>
			<td>Can use any appropriate microscope.&#160; Needed to measure muscle length, cross sectional area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Pin/Needle</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>305136</td>
			<td>For holding heart to dish.&#160; 27 G x 1-1/4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Pin/Needle</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26000-40</td>
			<td>For holding heart to dish. 0.4mm diameter insect pin (Alt to 27G needle)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen (O2)</td>
			<td>AirGas</td>
			<td>OX USP300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>Rabbit</td>
			<td>Can be any means to create flow in experimental chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH and Oxygen sensor</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>SevenGo pH and DO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>237205-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>795488-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rochester-pean Hemostat</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501708</td>
			<td>for rat gross dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Suture, Size: 4/0</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18020-40</td>
			<td>cut to ~1.5 inch pieces, soaked in water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6297-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9888-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8045-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Phosphate Dibasic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7907-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>AmScope</td>
			<td>SM-1TX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Vannas Spring Scissors&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91500-09</td>
			<td>for opening of the RV</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYLGARD 184 Silicone Elastomer Base</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>3097358-1004</td>
			<td>For creating dissection plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Holder</td>
			<td>Harbor Frieght</td>
			<td>Helping Hands 60501</td>
			<td>Can be used as alternate for ring stand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T0625-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>FisherBrand</td>
			<td>13-711-7M</td>
			<td>cut ~1&#34; from tip to widen bore</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-00</td>
			<td>for trabecula isolation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanical control of relaxation using intact cardiac trabeculae

Диастолическая дисфункция является распространенным фенотипом в проявлениях сердечно-сосудистых заболеваний. В дополнение к повышенной сердечной жесткости (повышенное конечное диастолическое давление левого желудочка), нарушение сердечной релаксации является ключевым диагностическим показателем диастолической дисфункции. В то время как релаксация требует удаления цитозольного кальция и дезактивации саркомерных тонких нитей, нацеливание на такие механизмы еще не обеспечило эффективного лечения. Было высказано предположение, что механические механизмы, такие как кровяное давление (т.е. постнагрузка), изменяют релаксацию. Недавно мы показали, что изменение скорости деформации растяжения, а не постнагрузки, было необходимым и достаточным для изменения последующей скорости релаксации ткани миокарда. Зависимость скорости деформации релаксации, называемая механическим контролем релаксации (MCR), может быть оценена с использованием интактных сердечных трабекул. Этот протокол описывает подготовку модели мелкого животного, экспериментальной системы и камеры, изоляцию сердца и последующую изоляцию трабекулы, подготовку экспериментальной камеры, а также протоколы экспериментов и анализа. Данные о удлинении напряжений в неповрежденном сердце свидетельствуют о том, что MCR может предоставить новые арены для лучшей характеристики фармакологического лечения, а также метод оценки кинетики миофиламентов в интактных мышцах. Таким образом, изучение MCR может пролить свет на путь к новым подходам и новым рубежам в лечении сердечной недостаточности.

Репрезентативный набор данных показан на рисунке 4, а дополнительные результаты можно найти в предыдущих публикациях 8,9. Вкратце, скорость деформации рассчитывается из производной деформации, непосредственно перед изометрической релаксацией. Напряжение - это длина в зависимости от времени, деленная на длину мышцы при оптимальной длине. Скорость релаксации вычисляется как 1/τ, где τ — экспоненциальная постояннаявремени 16. Множественные скорости деформации и их результирующие скорости релаксации необходимы для определения механического управления релаксацией (MCR). Эти данные нанесены на график зависимости скорости релаксации от скорости деформации. Наклон линии обеспечивает индекс MCR.
Обратите внимание, что конечные систолические и диастолические деформации вряд ли превысят 1 с-1. Следовательно, наклон должен включать только скорости деформации < 1 с-1. Скорость релаксации при низких скоростях деформации может быть искажена изменениями минимальной производной напряжения по времени (dStress/dtmin), и в этих случаях данные о растяжениях менее чем приблизительно 0,15 с-1 могут быть проигнорированы.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64879/64879fig01.jpg"> Рисунок 1: Настройка грубого рассечения и зоны канюляции сердца. Справа налево: а. Анестезиологическая индукционная камера для животного расположена рядом с зоной рассечения. b. Шноркель для дополнительного поглотителя летучих газов. c. Подушечка для рассечения, куда животное будет помещено лежа на спине, окружена (по часовой стрелке) d. носовым обтекателем, чтобы обеспечить непрерывную анестезию грызуна, e. гемостаты, f. хирургические ножницы, g. изогнутые тонкие ножницы, расположенные для легкого доступа доминирующей (режущей) рукой, h. изогнутые щипцы радужной оболочки, расположенные для легкого доступа с недоминантной рукой. Верхние конечности грызуна могут быть прикреплены к диссекционной подушечке с помощью ленты, и i. рядом следует поместить диссекционную тарелку (или маленький стакан) с перфузионным раствором для промывания сердца. j. Рядом должна быть оборудована площадка для канюляции. Шприц с соответствующей канюлей устанавливается на кольцевую подставку. k. (Вставка) Более близкое изображение канюли 16 G с прикрепленной трубкой PE205 толщиной 1 мм и неплотно завязанным узлом швом. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64879/64879fig01large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64879/64879fig02.jpg"> Рисунок 2: Экспериментальная зона и инструменты . (А) Опытный район. Экспериментальная камера и система сбора данных подготовлены на соседнем перевернутом микроскопе (слева). Изоляция и монтаж трабекулы происходит под стереоскопом (справа). (B) Наконечники двух щипцов, больших и маленьких ножниц Vannas и специального стеклянного зонда готовятся путем замачивания в 10% растворе BSA. (C) Дополнительные инструменты вскрытия. Чашка с силиконовым эластомерным покрытием позволяет монтировать сердце во время тонкого рассечения. Пипетка для переноса объемом 7 мл с отрезанным концом показана под чашкой и стеклянным зондом. Отрезанный наконечник пипетки для переноса отбрасывается, а увеличенное отверстие используется для переноса мышцы с минимальным риском растяжения или обезвоживания. D) увеличенное изображение конца стеклянной пипетки длиной приблизительно 2 мм и диаметром 0,25-0,5 мм. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64879/64879fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64879/64879fig03.jpg"> Рисунок 3: Руководство по вскрытию . (А) Грубое рассечение следует начинать с поперечного разреза (1. зеленого) через кожу в брюшную полость ниже ксифоидного отростка (нижние ребра и ксифоид обозначены тонкой серой линией). Далее следуют парасагиттальные разрезы от брюшной полости вверх по грудной клетке (2. бирюзовая и 3. синяя линии), после чего диафрагма должна быть разрезана. Затем гемостат можно использовать для зажима ксифоидного отростка и поднятия грудной стенки к голове. (B) Интактное сердце крысы, прикрепленное к кремниево-эластомерной чашке, ориентированное с видом на выходной тракт правого желудочка (RVOT), правое предсердие (RA), аорту (Ao) и левое предсердие (LA). Первый набор надрезов должен быть от RVOT до вершины вдоль перегородки (1. Желтая линия). Второй набор разрезов должен быть от RVOT вдоль основания сердца, затем через правое предсердие (2. оранжевая линия). (C) RVOT можно осторожно оттянуть от аорты, чтобы открыть сердце и закрепить его обратно. Желтые и оранжевые линии соответствуют разрезам, описанным в B. Свободно стоящие трабекулы часто встречаются у основания свободной стенки RV и вблизи перегородки, но могут возникать где угодно (красные линии указывают на общие места). (D) Увеличенный вид стеклянного зонда под трабекулой (желтая стрелка указывает на пересечение трабекулы и зонда). (E) Трабекула (красная стрелка) установлена на экспериментальной системе между датчиком силы (слева) и двигателем (в центре справа) и окружена двумя проводами для стимуляции (горизонтально над и под трабекулой). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64879/64879fig03large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64879/64879fig04.jpg"> Рисунок 4: Репрезентативные следы и результаты . (A) Одна сердечная трабекула, освещенная светодиодным светом на гусиной шее под крутым (~ 75 °) углом от оси линзы микроскопа, что усиливает контраст трабекулы. В этом примере два изображения разбиты на плитки, чтобы показать всю длину трабекулы. (B) Кривые времени напряжения (вверху) и времени деформации (внизу) для одной и той же трабекулы. Показано изометрическое подергивание, а также три подергивания с нагрузочным зажимом при увеличении скорости конечной систолической деформации. (C) Репрезентативный расчет MCR. MCR определяется как наклон линии между скоростью релаксации и скоростью деформации. Как отмечалось в обсуждении, скорости деформации могут быть ограничены для получения количественного, воспроизводимого MCR. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64879/64879fig04large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
Таблица 1: Решения. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64879/64879_Table1.xlsx" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Mechanical Control of Relaxation Using Intact Cardiac Trabeculae at JoVE.com

Mechanical Control of Relaxation Using Intact Cardiac Trabeculae

Быстрая релаксация миокарда и сердца необходима для нормальной физиологии. В настоящее время известно, что механизмы механической релаксации зависят от скорости деформации. В этом протоколе представлен обзор сбора и анализа экспериментов для дальнейшего изучения механического управления релаксацией.

Механический контроль релаксации с помощью интактных сердечных трабекул

Diastolic dysfunction is a common phenotype across cardiovascular disease presentations. In addition to elevated cardiac stiffness (elevated left ...

Этот протокол описывает метод измерения механического контроля релаксации или деформационной зависимости мышечной релаксации в сердечной трабекеле. Основное преимущество этой техники заключается в том, что она фокусируется на расслаблении сердца. Учитывая отсутствие вариантов лечения диастолических заболеваний, этот метод может быть использован для выявления новых индексов и мишеней лекарств, связанных с сердечной релаксацией.Этот способ будет показан при сердце грызуна, но его можно использовать и на любой неповрежденной мышце. Продемонстрировать эту процедуру буду я и Анита Аббо, младший научный сотрудник в моей лаборатории. Для начала извлеките сердце грубой рассеченной модели мелкого животного из канюли и поместите его в весовую чашку с силиконовым эластомерным покрытием, чтобы подготовиться к трабекулярной изоляции.Затем поместите и осветите сердце под стереомикроскопом. Найдя выходной тракт правого желудочка, прикрепите левое предсердие и верхушку желудочка к силиконовому эластомуру в чашке. С помощью длинных ножниц Vannas, разрежьте от правого желудочкового оттока до верхушки вдоль перегородки.Далее разрезают выходной тракт правого желудочка до правого предсердия возле аорты, а затем разрезают правое предсердие. С помощью щипцов осторожно оттяните правую желудочковую свободную стенку из выходного тракта, не растягивая ткани. Белые тонкие соединительнотканные нити, если они обнаружены, могут быть разрезаны, но не более крупные розовые нити ткани, так как они могут быть трабекулами.Приколите свободную стенку треугольника правого желудочка к тарелке, чтобы обнажить правый желудочек. Используя тонкую пипетку из расплавленного стекла с тупым концом, обыщите открытый эндокард на наличие отдельно стоящих трабекул, не применяя давления. Избегайте треугольных папиллярных мышц и выбирайте трабекулы с параллельными сторонами, которые часто встречаются у основания свободной стенки правого желудочка и вдоль перегородки.Рассеките трабекулу с помощью маленьких ножниц Ваннаса, оставляя кусок ткани размером в один миллиметр на каждом конце трабекулы, чтобы его можно было прикрепить. Затем отрежьте примерно два дюйма от конца семимиллилитровой пипетки для переноса, медленно втяните трабекулу в пипетку и перенесите ее в новую чашу для взвешивания, содержащую 50% перфузионного раствора и 50% модифицированного раствора Тирода. Дайте мышце уравновеситься к увеличению внеклеточного кальция в смешанном растворе в течение нескольких минут.Выключите насос, подающий суперфузию или всасывание в экспериментальную камеру. Используя пипетку для переноса большого диаметра, переместите трабекулу в экспериментальную камеру, заполненную раствором Тирода. Прикрепите один кубик ткани на конце трабекулы к крючку на преобразователе силы, затем прикрепите второй кубик к двигателю.Перезапустите суперфузию и начните расхаживать мышцы, чтобы определить пороговое напряжение. Темп на 20% выше порогового напряжения в течение примерно одного часа. В конце этого периода равновесия медленно растягивайте мышцу с помощью микрометра, подключенного к двигателю, до тех пор, пока не будет достигнута оптимальная развитая генерация напряжения путем наблюдения за развитым напряжением.Прекратите увеличивать длину мышц, когда пассивное диастолическое напряжение растет быстрее, чем пиковое напряжение, что указывает на то, что оптимальная длина пройдена. Выключите подсветку проходящего микроскопа и осветите трабекулу с помощью осветителя на гусиной шее под крутым углом. Используя предварительно откалиброванную камеру, подключенную через оптику микроскопа, запишите изображение трабекулы во время диастолы в экспериментальную папку.Усредните меры диаметра и преобразуйте диаметр и длину из пикселей в миллиметры, используя ранее полученную калибровку. Рассчитайте площадь поперечного сечения и длину мышцы в микрометрах. В программном обеспечении для сбора данных получите зажатые данные загрузки, определив посленагрузку в файле dap, и выполните итерацию значений пропорционального усиления и параметров интегрирования, сохранив файл в текстовом редакторе, затем нажмите «Запустить эксперимент»в интерфейсе.Управляйте концом зажима нагрузки, изменяя режим. Повторите захват, изменяя конец зажима нагрузки с нуля на полный, возвращаясь к начальной длине. Чтобы увеличить длину, постепенно увеличивайте порог окончания зажима нагрузки с нуля до тех пор, пока мышца почти не вернется к своей первоначальной длине.При желании измените постнагрузку и немедленно повторите захват. При желании измените преднатяг, растянув или укоротив мышцу, или обработайте мышцу, добавив соединения в раствор Tyrode, но подождите не менее 20 минут, чтобы убедиться, что медленная силовая реакция стабилизировалась и соединение полностью проникло в мышцу. После завершения сбора данных удалите трабекулу и очистите экспериментальную систему.Количественно оцените релаксацию, убедившись, что программа анализа данных анализирует зажатый удар и что программа правильно получает начало зажима нагрузки. После количественной оценки всех следов данного состояния постройте график взаимосвязи между скоростью релаксации и скоростью деформации, ограничив максимальные данные физиологической скоростью деформации менее одного в секунду. Исключите данные при низких скоростях деформации, так как фаза релаксации может не отражать экспоненциальный распад.Получите наклон линии между скоростью релаксации и скоростью деформации и запишите наклон как показатель механического управления релаксацией. Здесь показана одиночная сердечная трабекула, освещенная светодиодной лампой на гусиной шее под крутым углом 75 градусов от оси линзы микроскопа. Кривые времени напряжения и времени деформации для одной и той же трабекулы показали изометрическое подергивание и три подергивания зажима нагрузки при возрастающей и систолической скорости деформации.Скорость деформации рассчитывается из производной деформации непосредственно перед изометрической релаксацией. Данные нанесены на график зависимости скорости релаксации от скорости деформации, где наклон линии обеспечивает механический контроль релаксации, или индекс MCR. Самым сложным компонентом в этом протоколе является тщательная изоляция сердечной трабекулы.Этот протокол можно комбинировать с другими измерениями мышц, включая внутриклеточный кальций, сократительную способность и длину саркомера. Также этот метод используется для выявления молекулярных механизмов и лучшего понимания патофизиологии нарушения сердечной релаксации.

Research

JoVE Journal

Medicine

Quantitative Visualization and Detection of Skin Cancer Using Dynamic Thermal Imaging

Количественная визуализация и обнаружение рака кожи с использованием динамических Тепловизор

In 2010 approximately 68,720 melanomas will be diagnosed in the US alone, with around 8,650 resulting in death 1. To date, the only effective treatment ...

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Брыжеечной артерии Сокращение и отдых Исследования с помощью автоматизированной миография провода

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between ...

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

Прямая контроля давления в легочной точно предсказывает окклюзии вены во время Cryoballoon аблации

Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Раннее выявление лекарственно-индуцированный почечной дисфункции гемодинамических Использование Сонографические технологии в Rats

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

Визуализация<em&gt; Пневмококк</em&gt; В сердечной микроповреждениям и последующих ремоделирования сердца

During bacteremia Streptococcus pneumoniae can translocate across the vascular endothelium into the myocardium and form discrete bacteria-filled ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Хроническая сердечная ишемия модель в свиней, с помощью Ameroid удав

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Mechanical Ventilation Boot Camp Curriculum

ИВЛ Boot Camp учебная программа

Medical management of mechanically ventilated patients is challenging to novice providers. Incorrect management of this population may lead to increased ...

Noninvasive Determination of Vortex Formation Time Using Transesophageal Echocardiography During Cardiac Surgery

Неинвазивный определение Vortex время формирования с помощью Чреспищеводная эхокардиография при сердечной хирургии

Trans-mitral blood flow produces a three-dimensional rotational body of fluid, known as a vortex ring, that enhances the efficiency of left ventricular ...

Normothermic Ex Situ Heart Perfusion in Working Mode: Assessment of Cardiac Function and Metabolism

Нормотермических Ex Situ сердце перфузии в рабочем режиме: оценки функции сердца и метаболизма

The current standard method for organ preservation (cold storage, CS), exposes the heart to a period of cold ischemia that limits the safe preservation ...

In Vitro Assessment of Cardiac Function Using Skinned Cardiomyocytes

In Vitro Оценка сердечной функции с использованием кожистого кардиомиоцита

In this article, we describe the steps required to isolate a single permeabilized (&#34;skinned&#34;) cardiomyocyte and attach it to a force-measuring ...