Name: open-source real-time closed-loop electrical threshold tracking for translational pain research
Uploaded: 2023-04-21T14:30:00
Duration: 10 min 28 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Open-Source Real-Time Closed-Loop Electrical Threshold Tracking for Translational Pain Research at JoVE.com

Vorremmo ringraziare i nostri finanziatori per il loro sostegno: Academy of Medical Sciences (J.P.D., A.E.P.), Versus Arthritis (J.P.D., A.E.P.), Jean Golding Institute Seedcorn Grant (J.P.D., A.E.P., G.W., A.C.S., M.M.P.) e Biotechnology and Biological Sciences Research Council partnership partnership doctorship con Eli Lilly (G.W.T.N.). Vorremmo estendere i nostri ringraziamenti a tutti coloro che hanno contribuito allo sviluppo di APTrack. Vorremmo anche ringraziare i nostri volontari che hanno partecipato agli esperimenti di microneurografia e i nostri collaboratori di coinvolgimento e coinvolgimento dei pazienti e del pubblico per il loro inestimabile contributo.

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G.W.T.N. è una borsa di dottorato BBSRC Collaborative Training Partnership con l'Università di Bristol e Eli Lilly and Company (BB / T508342 / 1). A.P.N. è attualmente un dipendente di Eli Lilly and Company e può possedere azioni di questa società.

APTrack è un plugin software da utilizzare con la piattaforma Open Ephys. Abbiamo scelto questa piattaforma in quanto è open-source, flessibile ed economica da implementare. Escludendo il costo dello stimolatore a corrente costante, tutte le attrezzature necessarie per iniziare a utilizzare il plugin potrebbero essere acquistate per circa $ 5.000 USD al momento della scrittura. Speriamo che ciò consentirà ai ricercatori di implementare APTrack nei loro studi di elettrofisiologia dei nervi periferici più facilmente. Inoltre, i ricercatori possono modificare liberamente il software per soddisfare le loro esigenze sperimentali. È importante sottolineare che questo strumento ha permesso il tracciamento della soglia elettrica di singoli nocicettori in fibra C, per la prima volta, negli esseri umani.
Maggiore è il rapporto segnale-rumore, meglio gli algoritmi possono identificare i potenziali d'azione. Il rapporto segnale-rumore durante la microneurografia era sufficiente nella maggior parte delle nostre registrazioni, ma gli utenti devono essere attenti al rischio di degradazione del segnale nel tempo. Ciò è particolarmente importante per protocolli sperimentali più lunghi, perché se l'ampiezza del potenziale d'azione tracciato scende al di sotto della soglia di rilevamento, l'ampiezza della stimolazione verrà aumentata erroneamente; Questo può essere mitigato dagli sperimentatori che monitorano il plugin e quindi regolano le impostazioni, se necessario. Il rapporto segnale/rumore è migliorato con il filtraggio passa banda, ma i transienti più grandi possono ancora essere identificati erroneamente come potenziali d'azione se dovessero arrivare durante la finestra temporale della casella di ricerca. Il rischio di identificare erroneamente il rumore transitorio come potenziale d'azione può essere ridotto restringendo la finestra temporale durante la quale il plugin cerca i potenziali d'azione e ottimizzando le impostazioni di soglia. Tuttavia, ci sono ancora situazioni che si possono incontrare che impediscono le prestazioni del plugin. L'attività spontanea può causare difficoltà se i potenziali d'azione di ampiezza maggiore rientrano nella finestra della casella di ricerca dell'algoritmo, poiché verranno erroneamente identificati come potenziali d'azione target. Inoltre, l'attività spontanea nel neurone di interesse può significare che la stimolazione elettrica cade durante il suo periodo refrattario, causando l'incapacità di generare un potenziale d'azione. Le difficoltà nell'uso del software possono anche sorgere quando i neuroni afferenti primari mostrano flip-flop, per cui vengono stimolati rami terminali alternativi di un singolo neurone, facendo così sì che il potenziale d'azione evocato abbia due (o più) latenze basali che si escludono a vicenda20. Durante le registrazioni da neuroni che mostrano flip-flop con alti rapporti segnale-rumore, abbiamo eseguito con successo il tracciamento della latenza e della soglia elettrica aumentando la larghezza della casella di ricerca per incapsulare tutte le potenziali velocità di conduzione esibite dal neurone. Tuttavia, la soglia elettrica può variare a seconda del ramo terminale del neurone che viene eccitato, il che è probabilmente in parte dovuto alle differenze nella distanza dal sito della stimolazione elettrica ai terminali nocicettori alternativi. È possibile un ulteriore lavoro sul processo di identificazione del potenziale d'azione per includere, ad esempio, la corrispondenza dei modelli e potrebbe essere integrato in questo software. I plugin GUI per il band-stop o la filtrazione adattiva del rumore potrebbero anche essere utilizzati a monte di APTrack nella catena del segnale se dovessero essere sviluppati.
Consideriamo la soglia elettrica determinata come la corrente richiesta per suscitare un potenziale d'azione il 50% del tempo, su un numero definito dall'utente di stimoli elettrici, tipicamente 2-10. La morfologia della stimolazione elettrica è di 0,5 ms e impulsi positivi a onda quadra. Questo non è lo stesso che determinare la reobase, una misura comunemente usata di eccitabilità neuronale. Il plugin potrebbe essere adattato per determinare la reobase. Tuttavia, abbiamo perseguito una misura più semplice, poiché i cambiamenti dinamici nell'eccitabilità, come quelli ipotizzati durante il riscaldamento, sarebbero stati più difficili da quantificare con i cambiamenti della reobase rispetto alla nostra stima della soglia elettrica.
Questo software può essere utilizzato in esperimenti sia umani che di roditori. Ciò è reso possibile dal supporto flessibile per i sistemi di stimolazione elettrica. Il software funzionerà con qualsiasi stimolatore che accetta una tensione di comando analogica o può essere interfacciato manualmente con un motore passo-passo. Per la microneurografia, lo abbiamo usato con uno stimolatore a corrente costante marcato CE che è stato progettato per l'uso nella ricerca umana e aveva la sua stimolazione controllata da un quadrante. Gli stimolatori che accettano comandi di tensione analogici possono essere rumorosi in quanto non scollegano il circuito tra gli stimoli, il che significa che qualsiasi ronzio o rumore a 50/60 Hz sull'ingresso analogico verrà trasmesso alla registrazione. Uno stimolatore che richiede un segnale di trigger TLL aggiuntivo per collegare il circuito, consentendo di generare uno stimolo a una corrente analoga all'ingresso di tensione analogico, è ideale per l'uso con il plugin. Ciò impedisce che il rumore venga trasmesso alla registrazione tra gli stimoli.
Il software utilizza un semplice metodo up-down per stimare la soglia elettrica. Questo è stato usato nei test di psicofisica per molti decenni25. In linea con il metodo up-down, l'algoritmo di tracciamento della soglia elettrica per modulare l'ampiezza della stimolazione considera solo l'ampiezza e la risposta della stimolazione precedente quando si calcola l'ampiezza della stimolazione successiva. Ciò significa che l'ampiezza della stimolazione oscillerà attorno alla vera soglia elettrica, producendo così una velocità di accensione del 50%, supponendo che la soglia sia stabile. La dimensione minima di un incremento o decremento è 0,01 V; ciò equivale a 0,01 mA supponendo che lo stimolatore abbia un rapporto ingresso-uscita di 1 V:1 mA e una risoluzione sufficiente per ottenere cambiamenti di passo così piccoli. Il plugin aggiornerà la stima in tempo reale della soglia elettrica del potenziale d'azione target ogni volta che raggiunge una velocità di attivazione del 50% su un numero definito dall'utente di stimoli precedenti (2-10). Post hoc, raccomandiamo di utilizzare una media mobile dell'ampiezza della stimolazione negli ultimi 2-10 stimoli per stimare la soglia elettrica, e va notato che questa stima sarà accurata solo quando la velocità di accensione è relativamente stabile al 50%. Sia nelle stime live che post hoc della soglia elettrica, c'è un equilibrio tra risoluzione, affidabilità e tempo da considerare. L'utilizzo di piccoli passi di incremento e decremento aumenterà l'accuratezza della stima della soglia elettrica, ma aumenterà il tempo necessario per trovare la nuova soglia elettrica inizialmente e dopo la perturbazione. Il calcolo della soglia elettrica su un numero maggiore di stimoli precedenti fornirà una migliore affidabilità ma aumenterà il tempo necessario per raggiungere una stima accurata.
APTrack è stato progettato per l'uso nelle registrazioni dei nervi periferici, in particolare per tracciare le soglie elettriche delle fibre C durante perturbazioni sperimentali e patologiche in periodi in cui la latenza potenziale d'azione può variare a seconda dell'attività neuronale sottostante. Questo metodo consentirà l'esame non solo dell'eccitabilità assonale, ma anche dei potenziali generatori di nocicettori in volontari e pazienti sani. Prevediamo che altri campi dell'elettrofisiologia possano adottare e adattare questo strumento per l'uso in qualsiasi esperimento che richieda il monitoraggio della soglia elettrica di un'attività bloccata dallo stimolo. Ad esempio, questo potrebbe essere facilmente adattato per la stimolazione optogenetica con impulsi luminosi guidati da APTrack. Il plugin è open-source e disponibile per i ricercatori sotto licenza GPLv3. È costruito sulla piattaforma Open Ephys, che è un sistema di acquisizione dati adattabile, a basso costo e open source. Il plugin fornisce hook aggiuntivi per i plugin a valle per estrarre le informazioni sul potenziale d'azione e fornire interfacce utente aggiuntive o paradigmi adattivi. Il plugin fornisce una semplice interfaccia utente per la visualizzazione e il monitoraggio della latenza dei potenziali d'azione in tempo reale. Può anche riprodurre i dati precedenti e visualizzarli utilizzando il grafico raster temporale. Inoltre, può anche eseguire il monitoraggio della latenza durante la riproduzione di dati precedenti. Mentre ci sono altri pacchetti software disponibili per il monitoraggio della latenza in tempo reale, non sono open-source e non possono eseguire il tracciamento della soglia elettrica26,27. APTrack ha un vantaggio rispetto ai metodi tradizionali di identificazione dei potenziali d'azione a latenza costante dalle tracce di tensione in quanto utilizza un grafico raster temporale per la visualizzazione dei dati. Inoltre, le nostre esperienze di utilizzo in esperimenti con bassi rapporti segnale-rumore hanno indicato che il metodo di visualizzazione del grafico raster temporale consente l'identificazione di potenziali d'azione a latenza costante che altrimenti sarebbero stati persi.
Il monitoraggio della soglia del nervo intero è un metodo ampiamente utilizzato per valutare l'eccitabilità assonale13. Il tracciamento della soglia elettrica del singolo neurone nelle fibre C dei roditori è stato utilizzato in precedenza per quantificare l'eccitabilità dei nocicettori14 e la sua utilità nell'uomo è riconosciuta10,11; Tuttavia, fino ad ora, questo non era possibile. Forniamo un nuovo strumento open source per misurare direttamente l'eccitabilità dei singoli nocicettori negli studi elettrofisiologici sui roditori e sui nervi periferici umani. APTrack consente per la prima volta il monitoraggio in tempo reale, open-source, della soglia elettrica dei potenziali d'azione dei singoli neuroni negli esseri umani. Prevediamo che faciliterà gli studi traslazionali dei nocicettori tra roditori e umani.

I nocicettori sono neuroni afferenti primari nel sistema nervoso periferico che vengono attivati da eventi apertamente o potenzialmente dannosi per i tessuti e svolgono un ruolo protettivo critico nel dolore acuto1. Registrazioni elettrofisiologiche da nocicettori in fibra C e Aδ in modelli animali, volontari umani sani e pazienti hanno rivelato sensibilizzazione e attività spontanea anormale in una vasta gamma di condizioni di dolore 2,3,4,5,6,7. Comprendere i meccanismi che sono alla base di questi cambiamenti nell'eccitabilità dei nocicettori nei pazienti potrebbe consentire interventi terapeutici mirati8. Tuttavia, ci sono pochi strumenti per valutare direttamente l'eccitabilità dei nocicettori, in particolare nei pazienti9, ma il potenziale per l'utilità di tali strumenti è ben riconosciuto10,11.
Il monitoraggio della soglia elettrica del nervo intero può essere utilizzato per esaminare l'eccitabilità assonale negli esseri umani12. Tuttavia, poiché i neuroni periferici di grandi dimensioni e mielinizzati contribuiscono in modo sproporzionato all'ampiezza del potenziale d'azione del composto sensoriale, il monitoraggio della soglia elettrica dell'intero nervo non consente la valutazione della funzione delle fibre C11,13. Infatti, in uno studio precedente, il monitoraggio della soglia elettrica del nervo intero nelle coorti di dolore neuropatico cronico con neuropatia diabetica e polineuropatia indotta da chemioterapia non ha mostrato differenze nell'eccitabilità assonale11.
In uno studio precedente, il tracciamento della soglia elettrica a livello di singolo neurone è stato utilizzato per esaminare l'eccitabilità dei nocicettori delle fibre C durante le registrazioni delle fibre prese in giro in una preparazione di nervo cutaneo di ratto ex vivo 14. Gli autori hanno dimostrato che una maggiore concentrazione di potassio, condizioni acide e bradichinina hanno aumentato l'eccitabilità dei nocicettori delle fibre C, come riflesso da una soglia elettrica ridotta per la generazione del potenziale d'azione. Inoltre, il riscaldamento del campo ricettivo dei nocicettori sensibili al calore ha ridotto la loro soglia elettrica, mentre i nocicettori insensibili al calore hanno mostrato un aumento della loro soglia elettrica14. Ciò fornisce un'importante prova che il tracciamento della soglia elettrica a singolo neurone è possibile e può essere utile, ma attualmente non ci sono soluzioni software e / o hardware disponibili per consentire tali indagini, in particolare per gli studi sull'uomo.
Nell'uomo, la microneurografia è l'unico metodo disponibile per valutare direttamente le proprietà elettrofisiologiche delle fibre C15. Questo approccio è stato utilizzato per dimostrare la disfunzione dei nocicettori in pazienti con dolore cronico 2,3,4,5,6,7. La microneurografia può rilevare potenziali d'azione di un singolo neurone; tuttavia, a causa dei bassi rapporti segnale-rumore, i ricercatori utilizzano la tecnica di marcatura per caratterizzare l'attività delle fibre C16. Nella tecnica di marcatura, la stimolazione elettrica soprasoglia viene applicata ai campi ricettivi della fibra C nella pelle. Questa stimolazione elettrica genera un potenziale d'azione che si verifica a una latenza costante, determinata dalla velocità di conduzione della fibra C. Le fibre C mostrano un rallentamento dipendente dall'attività, per cui la loro velocità di conduzione si riduce e, quindi, la loro latenza di conduzione aumenta durante i periodi di scarica potenziale d'azione17. In condizioni basali, le fibre C normalmente non generano potenziali d'azione in assenza di stimoli nocivi e, pertanto, la loro latenza di conduzione in risposta alla stimolazione elettrica a bassa frequenza è costante. Gli stimoli meccanici, termici o farmacologici, che evocano l'accensione, inducono un rallentamento dipendente dall'attività, che aumenta la latenza dei potenziali d'azione evocati dalla concomitante stimolazione elettrica a bassa frequenza. Ciò consente l'identificazione oggettiva delle risposte agli stimoli non elettrici applicati nel contesto di un basso rapporto segnale-rumore. Pertanto, il rallentamento dipendente dall'attività può essere utilizzato per caratterizzare funzionalmente le fibre C16. In effetti, diverse classi funzionali di fibre C mostrano modelli distintivi di rallentamento dipendente dall'attività nei paradigmi di stimolazione elettrica che comportano la variazione della frequenza di stimolazione18,19. Questa variabilità nella latenza dei potenziali d'azione delle fibre C rappresenta una sfida per gli algoritmi progettati per monitorarli.
L'attività continua in un nocicettore porta ad una maggiore variabilità nella sua latenza durante la stimolazione elettrica a bassa frequenza, e questo è di nuovo dovuto al rallentamento dipendente dall'attività. Questa maggiore variabilità, o jitter, è una misura proxy quantificabile dell'eccitabilità2. Ulteriori cause di variabilità nella latenza del potenziale d'azione includono il flip-flop, in cui vengono stimolati rami terminali alternativi di un singolo neurone, che fa sì che il potenziale d'azione evocato abbia due (o più) latenze basali che si escludono a vicenda20. Infine, i cambiamenti nella temperatura dei rami terminali di un neurone periferico causano anche cambiamenti di latenza del potenziale d'azione in modo termodinamico, con il riscaldamento che aumenta la velocità di conduzione e il raffreddamento rallenta la velocità di conduzione19. Pertanto, qualsiasi software che cerchi di eseguire il tracciamento della soglia elettrica a circuito chiuso delle fibre C nocicettive deve consentire cambiamenti nella latenza nei potenziali d'azione evocati elettricamente.
Per raggiungere il nostro obiettivo di tracciamento della soglia elettrica cross-specie dei nocicettori in fibra C, abbiamo sviluppato APTrack, un plug-in software open source per la piattaforma Open Ephys21, per consentire il monitoraggio della soglia elettrica in tempo reale, a circuito chiuso, e il monitoraggio della latenza. Forniamo dati proof-of-concept che dimostrano che è possibile il tracciamento della soglia elettrica dei nocicettori in fibra C durante la microneurografia umana. Inoltre, dimostriamo che questo strumento può essere utilizzato nell'elettrofisiologia delle fibre stuzzicate ex vivo dei roditori, consentendo così studi traslazionali tra esseri umani e roditori. Qui, descriveremo in dettaglio come i ricercatori possono implementare e utilizzare questo strumento per aiutare il loro studio della funzione e dell'eccitabilità dei nocicettori.

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			<td>12V DC Power Supply&#160;</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>To power uStepper S-lite. Required for dial-controlled stimulators.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>36 Pin Electrode Adapter Board</td>
			<td>Intan Technology</td>
			<td>C3410</td>
			<td>APTrack Dependency. For connecting electrode input to headstage. $255 USD as of March 2021.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APTrack Plugin</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>https://github.com/Microneurography/APTrack</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar Ag/AgCl Recording Electrode</td>
			<td>Custom</td>
			<td>NA</td>
			<td>Recording electrode for the skin-nerve preparation. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar Concentric Stimulating Electrode</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SNE-100</td>
			<td>For electrical stimulation in the mouse skin-nerve preparation. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar Transcutaneous Stimulating Electrode</td>
			<td>Custom</td>
			<td>NA</td>
			<td>For transcutaneous electrical stimulation while searching for single-neuron action potentials during microneurography.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNC T Splitter (1+)</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. Any standard BNC T splitter.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNC to BNC cables (3+)</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. Any standard BNC cables.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C6H11NaO7</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S2054</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C5670</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digitimer DS4 Constant Current Stimulator</td>
			<td>Digitimer</td>
			<td>DS4</td>
			<td>Constant current stiulator for animal research. &#163;1,695 GBP as of September 2022.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digitimer DS7 Constant Current Stimulator</td>
			<td>Digitimer</td>
			<td>DS7A</td>
			<td>Constant current stiulator for human research. &#163;3,400 GBP as of September 2022.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroaccupuncture Classic Plus Stimulating Electrodes</td>
			<td>Harmony Medical</td>
			<td>NA</td>
			<td>For fixed position intradermal electrical stimulation of the dorsal aspect of the foot during human microneurography.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>G/0450/60</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HDMI Cable</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. Any standard passive HMDI cable. To connect OE I/O Board to OE Acquisition Board.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>P9541</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>213115000</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil</td>
			<td>Merck</td>
			<td>330779</td>
			<td>Electrical insulation for nerve recordings in th skin-nerve preparation. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S9888</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S6014</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S0751</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open Ephys Acquisition Board</td>
			<td>Open Ephys</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. Includes USB cable to connect to computer and mains socket power supply. &#8364;2,955 EUR as of September 2022.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open Ephys Graphical User Interface</td>
			<td>Open Ephys</td>
			<td>NA</td>
			<td>https://github.com/open-ephys/plugin-GUI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open Ephys I/O Board</td>
			<td>Open Ephys</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. For ADC voltage inputs via BNC cables. &#8364;12.5 EUR without connectors, &#8364;85 EUR with connectors as of September 2022.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PulsePal V2</td>
			<td>Sanworks</td>
			<td>1102</td>
			<td>APTrack Dependency. Open-source DAC and train generator. $725 USD pre-assembled as of September 2022. Approx. $275 USD for self-assembly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RHD 6ft SPI Cable</td>
			<td>Intan Technology</td>
			<td>C3206</td>
			<td>APTrack Dependency. For connecting headstage to OE Acquisition Board. $295 USD as of March 2021</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RHD2216 16ch Bipolar Headstage</td>
			<td>Intan Technology</td>
			<td>C3313</td>
			<td>APTrack Dependency. For data acquisition and digitization. $725 USD as of March 2021. Or equivalent RHD2000 series headstage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S/8560/60</td>
			<td>Skin-nerve preparation synthetic interstitial fluid constituent. Or equivalent.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TCS-II Thermal Stimulator</td>
			<td>QST.Lab</td>
			<td>NA</td>
			<td>For thermal stimualtion of nociceptor receptive fields during human microneurography.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten Microelectrode Pair (Active + Reference)</td>
			<td>FHC</td>
			<td>30085</td>
			<td>For microneurography recordings. 35mm.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound Scanner iQ+&#160;</td>
			<td>Butterfly Network</td>
			<td>NA</td>
			<td>For ultrasound-guided electrode insertion during microneurography.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB 3.0 5kV RMS Isolation</td>
			<td>Inota Technology</td>
			<td>7055-D</td>
			<td>For isolating human microneuroography participant from computer. &#8364;459 EUR as of September 2022.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB-A to micro USB-B cable (2)</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>APTrack Dependency. To connect computer to PulsePal and to uStepper S-lite if using stepper-stimulator interfacing.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>uStepper S-lite + NEMA17 motor</td>
			<td>uStepper</td>
			<td>NA</td>
			<td>To interface with stimulators via a control dial. &#8364;50 EUR as of September 2022.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Von Frey Filaments</td>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>37450-275</td>
			<td>For mechanical stimulation of receptive fields during sensory phenotyping of nociceptors.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

open-source real-time closed-loop electrical threshold tracking for translational pain research

I nocicettori sono una classe di neuroni afferenti primari che segnalano stimoli nocivi potenzialmente dannosi. Un aumento dell'eccitabilità dei nocicettori si verifica in condizioni di dolore acuto e cronico. Ciò produce un'attività in corso anomala o soglie di attivazione ridotte a stimoli nocivi. Identificare la causa di questa maggiore eccitabilità è necessario per lo sviluppo e la convalida di trattamenti basati sul meccanismo. Il tracciamento della soglia elettrica a singolo neurone può quantificare l'eccitabilità dei nocicettori. Pertanto, abbiamo sviluppato un'applicazione per consentire tali misurazioni e dimostrarne l'uso negli esseri umani e nei roditori. APTrack fornisce la visualizzazione dei dati in tempo reale e l'identificazione del potenziale d'azione utilizzando un grafico raster temporale. Gli algoritmi rilevano i potenziali d'azione superando la soglia e monitorano la loro latenza dopo la stimolazione elettrica. Il plugin modula quindi l'ampiezza della stimolazione elettrica utilizzando un metodo up-down per stimare la soglia elettrica dei nocicettori. Il software è stato costruito sul sistema Open Ephys (V0.54) e codificato in C ++ utilizzando il framework JUCE. Funziona su sistemi operativi Windows, Linux e Mac. Il codice open source è disponibile (<a data-saferedirecturl="https://www.google.com/url?q=https://github.com/Microneurography/APTrack&source=gmail&ust=1680789829274000&usg=AOvVaw0nMk9J_EI2jUn8SlmC5JJm" href="https://github.com/Microneurography/APTrack" target="_blank">https://github.com/ Microneurografia/APTrack</a>). Le registrazioni elettrofisiologiche sono state prese da nocicettori sia in una preparazione di pelle di topo utilizzando il metodo della fibra stuzzicata nel nervo safeno sia in volontari umani sani utilizzando la microneurografia nel nervo peroneo superficiale. I nocicettori sono stati classificati in base alla loro risposta agli stimoli termici e meccanici, nonché monitorando il rallentamento dipendente dall'attività della velocità di conduzione. Il software ha facilitato l'esperimento semplificando l'identificazione del potenziale d'azione attraverso il grafico raster temporale. Dimostriamo il monitoraggio della soglia elettrica a circuito chiuso in tempo reale dei potenziali d'azione dei singoli neuroni durante la microneurografia umana in vivo, per la prima volta, e durante le registrazioni elettrofisiologiche ex vivo del topo di fibre C e Aδ. Stabiliamo la prova di principio dimostrando che la soglia elettrica di un nocicettore umano in fibra C sensibile al calore viene ridotta riscaldando il campo ricettivo. Questo plugin consente il tracciamento della soglia elettrica dei potenziali d'azione dei singoli neuroni e consente la quantificazione dei cambiamenti nell'eccitabilità dei nocicettori.

Un esempio rappresentativo del software che lavora per controllare un esperimento è mostrato nella Figura 7. Regola iterativamente l'ampiezza della stimolazione utilizzando un metodo up-down per trovare efficacemente la soglia elettrica dei singoli nocicettori. Per la prima volta, dimostriamo la fattibilità del monitoraggio della soglia elettrica a singolo neurone in tempo reale negli esseri umani durante la microneurografia (Figura 7A). Inoltre, mostriamo il tracciamento della soglia elettrica in una fibra Aδ del topo (Figura 7B). L'identificazione dei potenziali d'azione mediante attraversamento della soglia, come qui utilizzata, è sufficiente per tracciare le soglie elettriche nel tempo. Consigliamo agli utenti di adottare misure per ridurre al minimo il rumore elettrico durante le registrazioni, ad esempio utilizzando una gabbia di Faraday e filtri passa-banda per migliorare il rapporto segnale-rumore.
Per dimostrare che il tracciamento della soglia elettrica può essere utilizzato come misura dei cambiamenti nell'eccitabilità dei nocicettori negli esseri umani, è stato eseguito il monitoraggio della soglia elettrica durante un paradigma di riscaldamento a gradini (Figura 8). L'aumento della temperatura dei terminali nocicettori ha diminuito la corrente di stimolazione elettrica richiesta per suscitare un potenziale d'azione, riflettendo un aumento dell'eccitabilità dei nocicettori (Figura 8C). Ciò è stato probabilmente causato dalla generazione di potenziali recettoriali da parte dei canali ionici sensibili al calore espressi nel nocicettore14 della fibra C. Al massimo livello di temperatura, 44 °C, sono stati suscitati potenziali d'azione evocati termicamente (Figura 8A, numero di stimolo 86-96). Ciò provoca un aumento della soglia elettrica in quanto il nocicettore può essere in uno stato refrattario dopo una scarica ad alta frequenza. Come previsto, la latenza del potenziale d'azione tracciato è diminuita all'aumentare della temperatura. Si pensa che ciò si verifichi a causa di un effetto termodinamico sul macchinario di conduzione, che aumenta la velocità di conduzione della fibra C. Questa fibra C può anche esibire flip-flop (Figura 8B, numero di stimolo 47-54), che può comportare un aumento errato della seguente stimolazione elettrica in ampiezza se il potenziale d'azione non rientra nella finestra di ricerca dell'algoritmo.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig01.jpg"> Figura 1: Uno schema della configurazione dell'apparecchiatura e dei collegamenti dei cavi necessari per il tracciamento della soglia elettrica dei nocicettori con APTrack nei roditori e nell'uomo. Nota i due diversi metodi di controllo dell'ampiezza della stimolazione: un motore passo-passo per stimolatori regolati manualmente nella nostra configurazione umana e un PulsePal per stimolatori controllati dalla tensione di ingresso nella nostra configurazione di roditori. (1) Un PC (Windows, Mac o Linux) che esegue il plugin per la piattaforma Open Ephys. (2) Un motore passo-passo che aziona la manopola di ampiezza di stimolazione sul DS7. (3) Uno stimolatore a corrente costante approvato per l'uso nell'uomo; qui abbiamo usato una DS7. (4) Un optoisolatore USB 3.0, che isola il partecipante umano dal PC (opzionale, richiesto solo per la ricerca umana). (5) Un generatore di impulsi PulsePal V2, che genera timestamp TTL (canale di uscita 2) e passi di tensione corrispondenti all'ampiezza di stimolazione richiesta (canale di uscita 1). (6) uno stimolatore a corrente costante per l'uso negli animali; qui, abbiamo usato una DS4. (7) Un alimentatore CC per il sistema (alimentatore CC di rete utilizzato per la configurazione del roditore e alimentatore CC della batteria utilizzato per la configurazione umana). (8) Un comitato di acquisizione. (9) Una scheda I/O per collegare i cavi coassiali BNC che trasportano i segnali da registrare, come le uscite della termocoppia e i marcatori TTL. (10) La preparazione pelle-nervo del topo sottoposta a registrazioni elettrofisiologiche dei nocicettori. (11) Un partecipante umano sottoposto a registrazione microneurografica da fibre C nel nervo peroneo superficiale. (12) Un headstage Intan RHD2216 per l'acquisizione e la digitalizzazione delle registrazioni. (13) Una scheda adattatore per elettrodi Intan, a cui sono collegati gli elettrodi di registrazione e che consente di trasmettere il segnale all'headstage RHD2216. (14) Un sistema di stimolazione termica in grado di emettere la temperatura tramite una connessione coassiale BNC. (15) Un pulsante/pedale alimentato a batteria da 3,3 V utilizzato per contrassegnare gli eventi di stimolazione meccanica e le applicazioni farmacologiche. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig01large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig02.jpg"> Figura 2: Catena di segnali del modello. La freccia rossa punta al pulsante per abilitare l'ingresso ADC dalla scheda I/O. La freccia gialla indica il menu a discesa per selezionare il formato di file Open Ephys. La freccia verde indica i pulsanti Riproduci e Registra. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig02large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig03.jpg"> Figura 3: Interfaccia utente grafica. La GUI è composta da quattro componenti principali. (1) Pannello Grafico raster temporale (verde) per la visualizzazione dei dati e le impostazioni associate al controllo del grafico. Una risposta di latenza costante che mostra un rallentamento graduale dipendente dall'attività è indicata dalla freccia verde. (2) Pannello di controllo della stimolazione (giallo) per impostare i parametri di ampiezza della stimolazione e caricare gli script del paradigma di stimolazione. (3) Tabella di tracciamento multi-unità (blu) per aggiungere i potenziali d'azione per il tracciamento e l'attivazione della latenza e del tracciamento della soglia elettrica. (4) Menu Opzioni per selezionare gli stili di colore e il canale di input per i trigger dati e TTL. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig03large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig04.jpg"> Figura 4: Facilitazione dell'identificazione di potenziali d'azione a latenza costante attraverso la visualizzazione dei dati in tempo reale su un grafico raster temporale utilizzando APTrack. Questo è un esempio di elevato rapporto segnale-rumore. I dati presentati nel grafico raster temporale provengono da una registrazione umana in fibra C dal nervo peroneo superficiale durante la microneurografia. Voltage Trace è il plugin LFP Viewer simile all'oscilloscopio all'interno di Open Ephys. L'interfaccia utente APTrack è l'interfaccia utente grafica del plugin. Il potenziale d'azione tracciato è indicato da frecce verdi e il cursore circolare sul bordo del grafico raster temporale serve per controllare la posizione della casella di ricerca in cui gli algoritmi cercheranno gli eventi di attraversamento della soglia. L'artefatto di stimolazione elettrica è contrassegnato in blu sulla traccia di tensione. L'ampiezza di stimolazione del comando di tensione analogico è indicata in rosso; Si noti che questo potrebbe non essere lo stesso dell'ampiezza della corrente di stimolazione a seconda del fattore di scala impostato sullo stimolatore. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig04large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig05.jpg"> Figura 5: Rappresentazione grafica dell'algoritmo di tracciamento della latenza. In termini semplici, se un potenziale d'azione viene rilevato dal passaggio di soglia, la casella di ricerca regolerà la sua posizione per centrarsi al momento della tensione di picco. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig05large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig06.jpg"> Figura 6: Rappresentazione grafica dell'algoritmo di tracciamento della soglia elettrica. In termini semplici, se un potenziale d'azione viene rilevato dal superamento della soglia, l'ampiezza della stimolazione sarà diminuita del tasso di decremento. Se non viene rilevato alcun potenziale d'azione, l'ampiezza della stimolazione verrà aumentata della velocità di incremento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig06large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig07.jpg"> Figura 7: Tracciamento automatico della soglia elettrica dei potenziali d'azione di un singolo neurone a una frequenza di stimolazione di 0,25 Hz . (A) Tracce sequenziali di una fibra C umana del nervo peroneo superficiale durante un esperimento di microneurografia. (B) Tracce sequenziali di una fibra Aδ di topo del nervo safeno durante la preparazione del nervo cutaneo hanno preso in giro l'elettrofisiologia delle fibre. Le tracce sono state colorate di rosso quando è stato identificato un potenziale d'azione, con conseguente diminuzione dell'ampiezza dello stimolo. L'algoritmo software trova efficacemente l'ampiezza dello stimolo richiesta per una probabilità del 50% di sparare. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig07large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64898/64898fig08.jpg"> Figura 8: Tracciamento della soglia elettrica ad una frequenza di stimolazione di 0,25 Hz durante la stimolazione termica di un nocicettore umano in fibra C. L'asse y codifica il numero di stimolazione dall'inizio del paradigma. (A) Traccia di tensione per 4.000 ms dopo stimolazione elettrica, con eventi di superamento della soglia contrassegnati in rosso. (B) Traccia di tensione da A ingrandita attorno al potenziale d'azione tracciato. Le tracce sono state colorate di rosso quando è stato rilevato il potenziale d'azione tracciato. La linea blu verticale è la latenza di base dell'unità tracciata. (C) Corrente di stimolazione comandata da APTrack. La linea blu verticale è la soglia elettrica di base. (D) Temperatura della sonda termostimolante TCS-II campo ricettivo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64898/64898fig08large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Composto</td>
			<td>Concentrazione</td>
		</tr><tr><td>NaCl</td>
			<td>107,8 mM</td>
		</tr><tr><td>NaHCO3</td>
			<td>26,2 mM</td>
		</tr><tr><td>Kcl</td>
			<td>3,5 mM</td>
		</tr><tr><td>NaH2PO4</td>
			<td>1,67 mM</td>
		</tr><tr><td>CaCl2</td>
			<td>1,53 mM</td>
		</tr><tr><td>MgSO4</td>
			<td>0,69 mM</td>
		</tr><tr><td>Gluconato di sodio</td>
			<td>9,64 mM</td>
		</tr><tr><td>Saccarosio</td>
			<td>7,6 mM</td>
		</tr><tr><td>Glucosio</td>
			<td>5,55 mM</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 1: Contenuto del liquido interstiziale sintetico per la preparazione del nervo cutaneo del topo23.

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Open-Source Real-Time Closed-Loop Electrical Threshold Tracking for Translational Pain Research

APTrack è un plugin software sviluppato per la piattaforma Open Ephys che consente la visualizzazione dei dati in tempo reale e il monitoraggio della soglia elettrica a circuito chiuso dei potenziali d'azione neuronali. Abbiamo usato con successo questo in microneurografia per nocicettori umani in fibra C e nocicettori in fibra C e fibra Aδ di topo.

Monitoraggio della soglia elettrica a circuito chiuso in tempo reale open source per la ricerca traslazionale del dolore

Nociceptors are a class of primary afferent neurons that signal potentially harmful noxious stimuli. An increase in nociceptor excitability occurs in ...

Questo strumento può essere utilizzato per studiare diversi meccanismi di sensibilizzazione dei nocicettori, ed è questa sensibilizzazione che può guidare alcune forme di dolore cronico. Il monitoraggio automatico delle soglie elettriche fornisce una misura affidabile, online e in tempo reale dell'eccitabilità dei nocicettori. In quanto tale, questa misura fornisce un importante ponte traslazionale, consentendo di effettuare misurazioni sia nell'uomo che negli animali.Allo stesso modo, consentendo di valutare patologia e trattamenti efficaci. In futuro, AP Track potrebbe essere utilizzato nei pazienti con dolore cronico per confermare se un agente terapeutico sta normalizzando l'eccitabilità dei loro nocicettori sensibilizzati. Ciò rappresenterebbe un biomarcatore cruciale di efficacia.Prevediamo che il nostro toolkit open source, AP Track, sarà utile agli elettrofisiologi che studiano stimoli del ciclo temporale di diversa grandezza. Ad esempio, pensiamo anche che sarà utile per studiare l'optogenetica. Gestire un esperimento e un software contemporaneamente è impegnativo all'inizio, quindi consiglio agli utenti di caricare i dati preregistrati in AP Track per familiarizzare con il loro utilizzo prima di tentare un esperimento.Abbiamo fornito dati demo. Per iniziare, collegare la scheda di acquisizione al computer utilizzando il cavo fornito dal produttore e accenderla. Quindi, collegare la scheda IO all'importazione analogica sulla scheda di acquisizione e collegare un headstage di registrazione Intan RHD alla scheda di acquisizione utilizzando un cavo di interfaccia periferica seriale.Quindi, collega il Pulse Pal al computer. Dividere il segnale del canale di uscita Pulse Pal utilizzando uno splitter BNC T, quindi collegarlo all'ingresso dello stimolatore a corrente costante e alla scheda IO, in modo che il comando di tensione analogico possa essere registrato. Collegare il canale di uscita Pulse Pal due alla scheda IO per registrare i marcatori di evento TTL di stimolazione.Per il montaggio con uno stimolatore a corrente costante controllato da quadrante, accendere uno stimolatore a corrente costante e collegare la scheda di controllo del motore passo-passo al motore passo-passo utilizzando il cavo e il supporto magnetico forniti dal produttore. Collegare direttamente la scheda di controllo al computer utilizzando qualsiasi cavo standard da USB-A a USB micro B. Collegare la scheda di controllo e il motore passo-passo a una staffa di montaggio personalizzata e impostare la manopola di ampiezza di stimolazione sullo stimolatore a corrente costante su zero milliampere.Quindi, collegare un adattatore barilotto personalizzato al cilindro del motore passo-passo. Collegare il motore passo-passo e l'apparecchio di montaggio personalizzato alla ghiera di ampiezza di stimolazione sullo stimolatore a corrente costante utilizzando l'adattatore del cilindro e accenderlo. Aprire la GUI AP Track e stabilire una registrazione elettrofisiologica stabile dei nervi periferici.Identificare il campo ricettivo sulla pelle e posizionare l'elettrodo stimolante lì. Nel menu Opzioni, selezionare Trigger Channel (Trigger Channel) e scegliere il canale ADC contenente il marcatore TTL di stimolazione elettrica dal canale di uscita Pulse Pal due. Quindi, selezionare il canale dati e scegliere il canale contenente i dati elettrofisiologici.Fare clic su Connetti per collegare AP Track all'apparato Pulse Pal e al motore passo-passo. Questo potrebbe richiedere un momento. Una volta collegata, la scheda di controllo del motore passo-passo si imposterà in posizione zero.Nel pannello di controllo della stimolazione, definire le ampiezze di stimolazione minima e massima iniziali utilizzando il cursore. Assicurarsi che la stimolazione corrente sia impostata sopra lo zero, in modo che vengano generati i marcatori TTL. Fare clic su F per caricare un file contenente le istruzioni di stimolazione, quindi fare clic sulla freccia destra per iniziare il paradigma di stimolazione caricato.Il grafico raster temporale inizierà ad aggiornarsi con la risposta alla stimolazione elettrica, con ogni nuova risposta di stimolazione visualizzata come una nuova colonna sulla destra. Per rilevare correttamente i potenziali d'azione del singolo neurone, passare al pannello del grafico raster temporale e regolare i valori di soglia dell'immagine bassa, di rilevamento e alta. Con l'impostazione di adeguate soglie di immagine, gli eventi di attraversamento della soglia rilevati dagli algoritmi saranno codificati in verde.Sistematicamente, spostare l'elettrodo stimolante intorno all'area della pelle innervata dal nervo. Monitorare il grafico raster temporale per tre eventi di attraversamento della soglia che appaiono di fila alla stessa latenza mentre l'elettrodo si trova nella stessa posizione di stimolazione. Ciò indica l'identificazione di un potenziale d'azione dei neuroni periferici a latenza costante.Dopo aver identificato il potenziale d'azione del singolo neurone sul grafico raster temporale, spostare il cursore lineare grigio sul lato destro del grafico per regolare la posizione della casella di ricerca. Quindi, regola la casella di ricerca con il cursore rotante su una larghezza appropriata. Ridurre la larghezza della casella di ricerca.Per iniziare a monitorare il potenziale di azione mirato, fai clic sul segno più sotto la tabella di tracciamento multi-unità. Una nuova riga verrà aggiunta alla tabella contenente i dettagli del potenziale d'azione target, inclusa la posizione della latenza, la percentuale di attivazione da due a 10 stimoli e l'ampiezza di picco rilevata. L'algoritmo di tracciamento della latenza verrà eseguito automaticamente su di esso ad ogni successiva stimolazione elettrica.Seleziona la casella del picco di traccia nella tabella per spostare la casella di ricerca nella posizione appropriata per quel particolare potenziale d'azione. Calcola la velocità di conduzione del neurone periferico dividendo la distanza tra i siti di stimolazione e registrazione per la latenza visualizzata nella tabella. Per eseguire il tracciamento della soglia elettrica, regolare i tassi di incremento e decremento nel pannello di controllo della stimolazione alla velocità desiderata.Mantieni uguali questi valori. Assicurarsi che la frequenza di stimolazione sia impostata su una frequenza appropriata, in genere da 0,25 a 0,5 Hertz. Regolare manualmente l'ampiezza della stimolazione approssimativamente alla soglia elettrica del neurone.Quindi, seleziona la casella della soglia di traccia nella tabella di tracciamento multi-unità, che avvierà l'algoritmo di tracciamento della soglia elettrica. Nella tabella di tracciamento multi-unità, monitorare la velocità di sparo. Una velocità di sparo del 50% indica che la soglia elettrica approssimativa è stata determinata e il valore di soglia verrà aggiornato.Infine, applicare una manipolazione sperimentale al campo ricettivo e continuare a tracciare la soglia elettrica. Questo quantificherà i cambiamenti nell'eccitabilità dei neuroni periferici. Le tracce sequenziali di una fibra C umana del nervo perenne superficiale durante un esperimento di micro neurografia e le tracce sequenziali di una fibra A-delta di topo del nervo safeno durante la preparazione della pelle-nervo sono mostrate in questa figura.Le tracce sono state colorate di rosso quando è stato identificato un potenziale d'azione, con conseguente diminuzione dell'ampiezza dello stimolo. L'algoritmo software trova efficacemente l'ampiezza dello stimolo richiesta per una probabilità del 50% di sparare. Il tracciamento della soglia elettrica a una frequenza di stimolazione di 0,25 Hertz durante la stimolazione termica di un nocicettore di fibra C umana è presentato in questa figura.L'asse y codifica il numero di stimolazione dall'inizio del paradigma. Le tracce di tensione per 4.000 millisecondi dopo la stimolazione elettrica con gli eventi di attraversamento della soglia sono contrassegnate in rosso. La traccia di tensione ingrandita attorno al potenziale d'azione tracciato è mostrata qui.La linea blu verticale è la latenza di base dell'unità tracciata. La corrente di stimolazione comandata da AP Track è mostrata in questa figura. La linea blu verticale è la soglia elettrica di base.Qui viene presentata la temperatura della sonda termostimolante TCS-II del campo ricettivo. Poiché il campo ricettivo di questa fibra C sensibile al calore viene riscaldato dallo stimolatore termico, la soglia elettrica diminuisce. La scelta dei valori appropriati per la larghezza della casella di ricerca e la soglia di rilevamento è importante, in quanto migliorano significativamente le prestazioni di AP Track riducendo l'impatto del rumore elettrico.Quantificare l'impatto degli agenti terapeutici sull'ipereccitabilità nei nocicettori può aiutarci a comprendere meglio i meccanismi alla base del dolore cronico. Speriamo che altri ricercatori utilizzino questo strumento disponibile gratuitamente per comprendere meglio la biologia nocicettiva e i cambiamenti che si sono verificati durante la sensibilizzazione dei nocicettori.

Research

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Neuroscience

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