Name: standardization of transfer across labs between flow cytometers for detection of lymphocytes in japanese encephalitis vaccinated children
Uploaded: 2023-02-10T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children at JoVE.com

RW ble støttet av Beijing Natural Science Foundation, Kina (nr. 7222059), National Natural Science Foundation of China (nr. 82002130), XZ ble støttet av CAMS Innovation Fund for Medical Sciences (nr. 2019-I2M-5-026).

Studien ble godkjent av etikkomiteen ved Beijing Children's Hospital, Capital Medical University (godkjenningsnummer: 2020-k-85). Informert samtykke fra forsøkspersoner ble frafalt da kun restprøver etter klinisk testing ble brukt i denne studien. To laboratorier er involvert i denne studien. Overføringslaboratoriet er der den standardiserte metoden ble utviklet ved hjelp av ett flowcytometer. Cytometeret i dette laboratoriet blir heretter referert til som cytometer A. Testmet...

<ol>
	<li>Cabanski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+method+transfer:+Recommendations+for+best+practice.">Flow cytometric method transfer: Recommendations for best practice.</a> Cytometry Part B. Clinical Cytometry. 100 (1), 52-62 (2021).</li><li>Le Lann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+procedure+for+flow+cytometry+data+harmonization+in+prospective+multicenter+studies.">Standardization procedure for flow cytometry data harmonization in prospective multicenter studies.</a> Scientific Reports. 10 (1), 11567 (2020).</li><li>Linskens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+standardization+of+flow+cytometry+diagnostic+screening+of+primary+immunodeficiency+by+software-based+automated+gating.">Improved standardization of flow cytometry diagnostic screening of primary immunodeficiency by software-based automated gating.</a> Frontiers in Immunology. 11, 584646 (2020).</li><li>Glier, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+8-color+flow+cytometry+across+different+flow+cytometer+instruments:+A+feasibility+study+in+clinical+laboratories+in+Switzerland.">Standardization of 8-color flow cytometry across different flow cytometer instruments: A feasibility study in clinical laboratories in Switzerland.</a> Journal of Immunological Methods. 475, 112348 (2019).</li><li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidemiology+and+disease+burden+of+children+hospitalized+for+viral+infections+within+the+family+Flaviviridae+in+China:+A+national+cross-sectional+study.">The epidemiology and disease burden of children hospitalized for viral infections within the family Flaviviridae in China: A national cross-sectional study.</a> PLOS Neglected Tropical Diseases. 16 (7), e0010562 (2022).</li><li>Ding, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+peripheral+blood+lymphocyte+subsets+of+healthy+children+in+China.">Reference values for peripheral blood lymphocyte subsets of healthy children in China.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 142 (3), 970-973 (2018).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+polyfunctional+T+cells+in+children+vaccinated+with+Japanese+encephalitis+vaccine+via+the+flow+cytometry+technique.">Detection of polyfunctional T cells in children vaccinated with Japanese encephalitis vaccine via the flow cytometry technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (187), e64671 (2022).</li><li>Yu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4(+)+CD25+(+)+CD127+(low/-)+T+cells:+a+more+specific+Treg+population+in+human+peripheral+blood.">CD4(+) CD25 (+) CD127 (low/-) T cells: a more specific Treg population in human peripheral blood.</a> Inflammation. 35 (6), 1773-1180 (2012).</li><li>Kalina, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+flow+cytometry+through+standardization:+opportunities+and+challenges.">Reproducibility of flow cytometry through standardization: opportunities and challenges.</a> Cytometry Part A. 97 (2), 137-147 (2020).</li><li>Sommer, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+highly+sophisticated+flow+cytometry+assays+in+multicenter+clinical+studies:+considerations+and+guidance.">Implementation of highly sophisticated flow cytometry assays in multicenter clinical studies: considerations and guidance.</a> Bioanalysis. 7 (10), 1299-1311 (2015).</li><li>Glier, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comments+on+EuroFlow+standard+operating+procedures+for+instrument+setup+and+compensation+for+BD+FACS+Canto+II,+Navios+and+BD+FACS+Lyric+instruments.">Comments on EuroFlow standard operating procedures for instrument setup and compensation for BD FACS Canto II, Navios and BD FACS Lyric instruments.</a> Journal of Immunological Methods. 475, 112680 (2019).</li></ol>

Immunfenotyping av undergrupper av perifere lymfocytter i blodet kan bidra til å forstå endringene i cellemediert adaptiv immunitet etter vaksinasjon hos barn. I kliniske applikasjoner oppstår uventede situasjoner, for eksempel manglende oppdagelse av prøver i tide eller erstatning av et flowcytometer; Derfor er det nødvendig med raske standardiserte metoder som letter overføringer mellom flowcytometre i forskjellige laboratorier 9,10,11.<sup cla...

Standardiseringen av flowcytometri er nyttig for sammenlignbarheten av resultater oppnådd fra forskjellige cytometre på tvers av forskjellige laboratorier og studiesentre, og bidrar til gjensidig anerkjennelse av resultater for å forbedre arbeidseffektiviteten. Stadig flere scenarier krever standardisering. Under legemiddelutviklingsprosessen er standardisering av flowcytometri viktig, da en utviklet og validert analyse vil støtte hele legemiddelutviklingsprosessen fra preklinisk til klinisk analyse. Flowcytometriske metoder overføres ofte mellom farmasøytisk industri og samarbeidende laboratorier1. Videre er det viktig å innhente sammenlignbare data fra multisentriske kliniske studier. For eksempel ble det utviklet en standardiseringsarbeidsflyt i Systemic Autoimmune Diseases Multicenter Clinical Research Project for å oppnå sammenlignbare data fra multisentrisk flowcytometri2.
Standardisering av flowcytometrimetoder er utfordrende. Utfordringene som oppleves på tvers av laboratorier tilskrives mangelen på standardiserte materialer, programvarekompatibilitetsproblemer, inkonsekvenser i instrumentoppsett og bruk av forskjellige konfigurasjoner mellom forskjellige strømningscytometre og divergerende gatingstrategier mellom sentrene 3,4. Derfor er det viktig å gjennomføre en gapanalyse mellom laboratorier. Prøvetilgang, kvalitetssystemer, personellkvalifikasjoner og instrumentkonfigurasjon må gjennomgås for å sikre at kravene oppfylles.
For tiden har barn vaksinert med den japanske encefalittvaksinen (JE) en signifikant redusert forekomst av JE5. Overvåking av perifere blodimmunceller kan bidra til å forstå endringene i cellemediert adaptiv immunitet etter vaksinasjon, og sammenhengen mellom endringene i undergrupper av perifere lymfocytter i blodet og effekten av vaksinasjon. På grunn av den begrensede stabiliteten til fullblodprøver, blir evalueringer av vaksineeffekt ofte utført i flere sentre. For denne analysen definerte vi naive CD8+- eller CD4+ T-celler som CD27+ CD45RA+, sentrale minne-T-celler (TCM) som CD27+ CD45RA-, effektorminne-T-celler (TEM) som CD27-CD45RA-, og terminalt differensierte effektorminne-T-celler (TEMRA) som CD27- CD45RA+. CD19+ B-celler kan deles inn i populasjoner som uttrykker CD27 versus IgD 6,7, naive B-celler uttrykker CD27n-minne B-celler (mBC) kan identifiseres basert på ekspresjonen av IgD6, og regulatoriske T-celler (Tregs) kan identifiseres som CD4+CD25++CD127lav 8. For å etablere et standardisert flowcytometrieksperiment for å oppnå konsistens og sammenlignbarhet av eksperimentelle resultater i flere sentre, ble det etablert en rask og gjennomførbar standardiseringsmetode for å lette overføringen av protokoller over forskjellige flowcytometre for påvisning av lymfocytter i fullblod hos JE-vaksinerte barn. Seks friske barn (2 år) ble rekruttert fra Beijing Children's Hospital, Capital Medical University. Etter å ha mottatt en prime og boost-vaksinasjon med en levende-svekket JE SA14-14-2-vaksine mindre enn 6 måneder før, ble perifere blodprøver samlet inn fra frivillige. Svært sammenlignbare data ble innhentet fra forskjellige instrumenter etter standardiserte prosedyrer, noe som er nyttig for multisentervurderinger.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD CompBeads Anti-Mouse Ig, &#954;/Negative Control Compensation Particles Set</td>
			<td>BD</td>
			<td>552843</td>
			<td>compensation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSCanto</td>
			<td>BD</td>
			<td>FACSCanto</td>
			<td>flow Cytometry A in the transferring lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSDiva CS&#38;T Research Beads</td>
			<td>BD</td>
			<td>655051</td>
			<td>define flow cytometer baseline and track cytometer performance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon BV421 Mouse Anti-Human CD127</td>
			<td>BD</td>
			<td>562436</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon BV605 Mouse Anti-Human CD27</td>
			<td>BD</td>
			<td>562656</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon V500 Mouse Anti-Human CD45</td>
			<td>BD</td>
			<td>560777</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSRFortessa</td>
			<td>BD</td>
			<td>LSRFortessa</td>
			<td>flow Cytometry B in the test method lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD OptiBuild BB700 Mouse Anti-Human CD19</td>
			<td>BD</td>
			<td>745907</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD OptiBuild R718 Mouse Anti-Human CD8</td>
			<td>BD</td>
			<td>751953</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen APC Mouse Anti-Human CD45RA</td>
			<td>BD</td>
			<td>550855</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen APC-H7 Mouse Anti-Human CD3</td>
			<td>BD</td>
			<td>560176</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen FITC Mouse Anti-Human CD4</td>
			<td>BD</td>
			<td>566320</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen PE Mouse Anti-Human CD25</td>
			<td>BD</td>
			<td>555432</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen PE-Cy7 Mouse Anti-Human IgD</td>
			<td>BD</td>
			<td>561314</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Staining Buffer Plus</td>
			<td>BD</td>
			<td>566385</td>
			<td>Staining Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810</td>
			<td>Cell centrifugation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tube</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>BD-35209715</td>
			<td>15 mL centrifuge tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CS&#38;T IVD Beads</td>
			<td>BD</td>
			<td>662414</td>
			<td>standard beads to setup cytometer settings in different flow cytometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysing Solution 10x Concentrate</td>
			<td>BD</td>
			<td>349202</td>
			<td>lysing red blood cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round-bottom test tube</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>352235</td>
			<td>5 mL test tube</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardization of transfer across labs between flow cytometers for detection of lymphocytes in japanese encephalitis vaccinated children

Et økende antall laboratorier trenger å samle inn data fra flere strømningscytometre, spesielt for forskningsprosjekter utført på tvers av flere sentre. Utfordringene ved bruk av to flowcytometre i forskjellige laboratorier inkluderer mangel på standardiserte materialer, programvarekompatibilitetsproblemer, inkonsekvenser i instrumentoppsett og bruk av forskjellige konfigurasjoner for forskjellige flowcytometre. For å etablere et standardisert flowcytometrieksperiment for å oppnå konsistens og sammenlignbarhet av eksperimentelle resultater på tvers av flere sentre, ble det etablert en rask og gjennomførbar standardiseringsmetode for å overføre parametere på tvers av forskjellige flowcytometre. 
Metodene utviklet i denne studien tillot overføring av eksperimentelle innstillinger og analysemaler mellom to flowcytometre i forskjellige laboratorier for påvisning av lymfocytter hos japanske encefalitt (JE) -vaksinerte barn. En konsistent fluorescensintensitet ble oppnådd mellom de to cytometrene ved bruk av fluorescensstandardperler for å etablere cytometerinnstillingene. Sammenlignbare resultater ble oppnådd i to laboratorier med forskjellige typer instrumenter. Ved hjelp av denne metoden kan vi standardisere analyse for evaluering av immunfunksjonen til JE-vaksinerte barn i forskjellige laboratorier med forskjellige instrumenter, redusere forskjellene i data og resultater mellom flowcytometre i flere sentre, og gi en gjennomførbar tilnærming for gjensidig akkreditering av laboratorieresultater. Standardiseringsmetoden for flowcytometereksperimenter vil sikre effektiv ytelse av forskningsprosjekter på tvers av flere sentre.

Figur 1 viser et globalt regneark for målverdimalen for CST-lyse perler. Ved hjelp av et FSC/SSC-plott tegnes en polygonport for å velge CSTs lyse perler. Histogramplott av 10 fluorescenskanaler ble oppnådd for CST-lyse perler: FITC, PE, BB700, PE-Cy7, APC, R718, APC-H7, BV421, V500 og BV605. Målverdien for hver parameter vises ved å vise medianen innenfor histogramportene i tabell 2. Skjermbilder av maler og parameterinnstillinger i programvaren til cytometer A og cyto...

Watch this Scientific Journal Video about Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children at JoVE.com

Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children

I denne studien ble det utviklet en metode for å lette overføringen av eksperimentelle innstillinger og analysemaler mellom to strømningscytometre i to laboratorier for påvisning av lymfocytter hos japanske encefalittvaksinerte barn. Standardiseringsmetoden for flowcytometereksperimenter vil tillate forskningsprosjekter å bli effektivt utført i flere sentre.

Standardisering av overføring på tvers av laboratorier mellom flowcytometre for påvisning av lymfocytter hos japanske encefalittvaksinerte barn

An increasing number of laboratories need to collect data from multiple flow cytometers, especially for research projects performed across multiple ...

Standardiseringsmetoden til flowcytometeret gir en gjennomførbar tilnærming for gjensidig akkreditering av laboratorieresultater og sikrer konsistens av resultater med forskningsprosjekter på tvers av flere sentre. Metoden minimerer tidsforbruket er enkel å utføre, er utstyrt for å automatisere, analyserer mal og kan dramatisk redusere kravet til dataanalyse. Begynn å lage en ny konfigurasjon i programvaren til cytometer A, fra overføringslaboratoriet, ved å klikke på cytometer-knappen og velge vis konfigurasjoner.Høyreklikk på basekonfigurasjonsmappen i konfigurasjonslisten, velg ny mappe og gi den nytt navn. Deretter oppretter du en ny konfigurasjon ved å høyreklikke på basiskonfigurasjonen og kopiere den. Høyreklikk på den nye mappen og lim inn basiskonfigurasjonen før du gir nytt navn til den nye konfigurasjonen, Standardisert metodeoverføring"Dra parameternavnet, for eksempel FETC fra parameterlisten, til den aktuelle detektoren 530/30, rediger også flere parametere til den nye konfigurasjonen.For å standardisere eksperimentet i overføringslaboratoriet, kjør en ytelseskontroll ved hjelp av dette cytometer A-oppsettet og spor perlene for å bekrefte at cytometer A fungerer bra. Høyreklikk cytometer A-innstillinger i programvarenettleservinduet og opprett et regneark ved å velge programinnstillingene. Bruk deretter en ufarget prøve til å justere fotomultiplikatorrøret, eller PMT-spenningene, til det fremoverspredningsområdet, eller FSC, og sidespredningsområdet, eller SSC, og alle fluorescensparametere.Lagre programinnstillingene ved å høyreklikke innstillingene for eksperimentcytometeret og velge programinnstillinger. Hvis du vil legge til kompensasjonskontroller automatisk, klikker du på eksperimentknappen og velger menyen for kompensasjonsoppsett før du velger opprett kompensasjonskontroller. Registrer data for alle kompensasjonskontrollperler.Når du er ferdig, klikker du på eksperimentet og velger kompensasjonsoppsett, beregner kompensasjonen automatisk, før du registrerer dataene for enkeltcellefargede kontroller. bruke CD45 RAA APC til å endre kompensasjonsverdien til R7-18 til 15 % APC, bruke CD19 BB700 til å endre kompensasjonsverdien til APC H7 til 14 % BB700 og bruke CD8 R7-18 til å endre kompensasjonsverdien til APC H7 til 60 % R7-18. Etter å ha registrert dataene for CST-perlene, opprett et globalt regneark av målverdimalen for CST-lyse perler, når du er ferdig, kjør prøvene på flowcytometer-matrisen og samle 25.000 lymfocytter.Opprett et globalt regneark med analysemalen for prøvene og lagre den eksperimentelle malen på cytometer A.Eksporter den eksperimentelle malen ved hjelp av CD-ROMen. For å overføre den eksperimentelle malen til cytometer B i testlaboratoriet, utfør en ytelseskontroll ved hjelp av CST-perler for å verifisere at cytometer B fungerer bra. Importer den eksperimentelle malen fra cytometer A og opprett et eksperiment for cytometer B ved hjelp av malen.Bruk samme masse CST-perler til å justere fluorescerende parameterspenninger for hver fluorescenskanal for å matche det forrige MFI-instrumentet. Hvis nødvendig, juster FSC-spenningen ved hjelp av den ufargede prøven. Høyreklikk på de eksperimentelle cytometerinnstillingene og velg applikasjonsinnstillinger for å lagre applikasjonsinnstillingene.Deretter endrer du kompensasjonsverdien fra R7-18 til 15 % APC ved hjelp av CD45 RA APC. Bruk CD19 BB700 til å endre kompensasjonsverdien for APC H7 til 24 % BB700. Og bruk CD8 R7-18 til å endre kompensasjonsverdien til APC H7 til 60 %R7-18.Etter endring av kompensasjonsverdien, kjør prøvene på strømningscytometer B og samle 25.000 lymfocytter. I et globalt regneark av målverdimalen for cytometeroppsett og sporing, eller CST lyse perler, ble histogramplottene til 10 fluorescenskanaler oppnådd, målverdien for hver parameter ble vist ved å vise medianen innenfor histogramportene. prikkplottene til prøven oppnådd ved bruk av cytometer A og B etter instrumentstandardisering, demonstrerte konsistensen av data mellom forskjellige instrumenter ved hjelp av en automatisk analysemal.Ingen signifikant forskjell ble observert når resultatene fra seks prøver ble sammenlignet på tvers av to forskjellige instrumentmodeller. Resultatene av 15 lymfoide undergrupper oppnådd fra forskjellige instrumenter ved bruk av den standardiserte metoden oppnådde svært sammenlignbare data. Det samme konfigurasjonsnavnet, oppretting av malen og å lage de økotekniske verdiene til sikkerhetsperler i forskjellige instrumenter er kritiske trinn i denne protokollen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

Stengte Nucleic Acid flowcytometrisystemer-fluorescens In situ Hybridisering (LNA flow-FISH): En metode for Bakteriell små RNA Detection

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Totalt Protein Extraction og 2-D-gel-elektroforese Metoder<em&gt; Burkholderia</em&gt; Arter

The investigation of  the intracellular protein levels of bacterial species is of importance to  understanding the pathogenic mechanisms of diseases ...

Detection of Fluorescent Nanoparticle Interactions with Primary Immune Cell Subpopulations by Flow Cytometry

Påvisning av Fluorescent Nanoparticle Interaksjoner med Primær immun celle subpopulasjoner av flowcytometri

Engineered nanoparticles are endowed with very promising properties for therapeutic and diagnostic purposes. This work describes a fast and reliable ...

A Simple and Rapid Protocol to Non-enzymatically Dissociate Fresh Human Tissues for the Analysis of Infiltrating Lymphocytes

En enkel og Rapid-protokollen til ikke-enzymatisk distansere Ferske menneskelig vev for analyse av infiltrerende Lymfocytter

The ability of malignant cells to evade the immune system, characterized by tumor escape from both innate and adaptive immune responses, is now accepted ...

Isolation and Flow Cytometric Characterization of Murine Small Intestinal Lymphocytes

Isolasjon og Flowcytometriske Karakterisering av Murine Small Intestinal Lymfocytter

The intestines &#8212; which contain the largest number of immune cells of any organ in the body &#8212; are constantly exposed to foreign antigens, both ...

Visualizing the Effects of Sputum on Biofilm Development Using a Chambered Coverglass Model

Visualisere effekten av Sputum på Biofilm Development Ved hjelp av en Chambered dekkglass Model

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the ...

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

Isolasjon og In Vitro kultur Murine og menneskelig Alveolar makrofager

Alveolar macrophages are terminally differentiated, lung-resident macrophages of prenatal origin. Alveolar macrophages are unique in their long life and ...

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

En høy gjennomstrømming plattform for Screening av Salmonella spp. /Shigella spp.

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...