Name: standardization of transfer across labs between flow cytometers for detection of lymphocytes in japanese encephalitis vaccinated children
Uploaded: 2023-02-10T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children at JoVE.com

RW, Pekin Doğa Bilimleri Vakfı, Çin (No. 7222059), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82002130), XZ, Tıp Bilimleri için CAMS İnovasyon Fonu (No. 2019-I2M-5-026) tarafından desteklenmiştir.

Çalışma, Başkent Tıp Üniversitesi Pekin Çocuk Hastanesi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (Onay Numarası: 2020-k-85). Bu çalışmada sadece klinik testlerden sonra kalıntı örnekler kullanıldığı için insan deneklerin bilgilendirilmiş onamından feragat edilmiştir. Bu çalışmada iki laboratuvar yer almaktadır. Transfer laboratuvarı , standartlaştırılmış yöntemin bir akış sitometresi kullanılarak geliştirildiği yerdir. Bu laboratuvardaki sitometre bundan böyle <stro...

<ol>
	<li>Cabanski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+method+transfer:+Recommendations+for+best+practice.">Flow cytometric method transfer: Recommendations for best practice.</a> Cytometry Part B. Clinical Cytometry. 100 (1), 52-62 (2021).</li><li>Le Lann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+procedure+for+flow+cytometry+data+harmonization+in+prospective+multicenter+studies.">Standardization procedure for flow cytometry data harmonization in prospective multicenter studies.</a> Scientific Reports. 10 (1), 11567 (2020).</li><li>Linskens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+standardization+of+flow+cytometry+diagnostic+screening+of+primary+immunodeficiency+by+software-based+automated+gating.">Improved standardization of flow cytometry diagnostic screening of primary immunodeficiency by software-based automated gating.</a> Frontiers in Immunology. 11, 584646 (2020).</li><li>Glier, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+8-color+flow+cytometry+across+different+flow+cytometer+instruments:+A+feasibility+study+in+clinical+laboratories+in+Switzerland.">Standardization of 8-color flow cytometry across different flow cytometer instruments: A feasibility study in clinical laboratories in Switzerland.</a> Journal of Immunological Methods. 475, 112348 (2019).</li><li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidemiology+and+disease+burden+of+children+hospitalized+for+viral+infections+within+the+family+Flaviviridae+in+China:+A+national+cross-sectional+study.">The epidemiology and disease burden of children hospitalized for viral infections within the family Flaviviridae in China: A national cross-sectional study.</a> PLOS Neglected Tropical Diseases. 16 (7), e0010562 (2022).</li><li>Ding, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+peripheral+blood+lymphocyte+subsets+of+healthy+children+in+China.">Reference values for peripheral blood lymphocyte subsets of healthy children in China.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 142 (3), 970-973 (2018).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+polyfunctional+T+cells+in+children+vaccinated+with+Japanese+encephalitis+vaccine+via+the+flow+cytometry+technique.">Detection of polyfunctional T cells in children vaccinated with Japanese encephalitis vaccine via the flow cytometry technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (187), e64671 (2022).</li><li>Yu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4(+)+CD25+(+)+CD127+(low/-)+T+cells:+a+more+specific+Treg+population+in+human+peripheral+blood.">CD4(+) CD25 (+) CD127 (low/-) T cells: a more specific Treg population in human peripheral blood.</a> Inflammation. 35 (6), 1773-1180 (2012).</li><li>Kalina, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+flow+cytometry+through+standardization:+opportunities+and+challenges.">Reproducibility of flow cytometry through standardization: opportunities and challenges.</a> Cytometry Part A. 97 (2), 137-147 (2020).</li><li>Sommer, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+highly+sophisticated+flow+cytometry+assays+in+multicenter+clinical+studies:+considerations+and+guidance.">Implementation of highly sophisticated flow cytometry assays in multicenter clinical studies: considerations and guidance.</a> Bioanalysis. 7 (10), 1299-1311 (2015).</li><li>Glier, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comments+on+EuroFlow+standard+operating+procedures+for+instrument+setup+and+compensation+for+BD+FACS+Canto+II,+Navios+and+BD+FACS+Lyric+instruments.">Comments on EuroFlow standard operating procedures for instrument setup and compensation for BD FACS Canto II, Navios and BD FACS Lyric instruments.</a> Journal of Immunological Methods. 475, 112680 (2019).</li></ol>

Periferik kan lenfosit alt gruplarının immünofenotiplenmesi, çocuklarda aşılama sonrası hücre aracılı adaptif bağışıklıktaki değişikliklerin anlaşılmasına yardımcı olabilir. Klinik uygulamalarda, numunelerin zamanında tespit edilememesi veya bir akış sitometresinin değiştirilmesi gibi beklenmeyen durumlar ortaya çıkar; bu nedenle, farklı laboratuvarlardaki akış sitometreleri arasında transferleri kolaylaştıran hızlı standartlaştırılmış yöntemlere ihtiyaç...

Akış sitometrisinin standardizasyonu, farklı laboratuvarlar ve çalışma merkezleri arasında farklı sitometrelerden elde edilen sonuçların karşılaştırılabilirliği için yararlıdır ve iş verimliliğini artırmak için sonuçların karşılıklı olarak tanınmasına elverişlidir. Giderek artan sayıda senaryo standardizasyon gerektirmektedir. İlaç geliştirme sürecinde, akış sitometrisi standardizasyonu önemlidir, çünkü geliştirilmiş ve doğrulanmış bir tahlil, klinik öncesi analizden klinik analize kadar tüm ilaç geliştirme sürecini destekleyecektir. Akış sitometrik yöntemleri sıklıkla ilaç endüstrisi ile işbirliği yapan laboratuvarlar arasında aktarılır1. Ayrıca, çok merkezli klinik çalışmalardan karşılaştırılabilir veriler elde etmek esastır. Örneğin, çok merkezli akış sitometrisi2'den karşılaştırılabilir veriler elde etmek için Sistemik Otoimmün Hastalıklar Çok Merkezli Klinik Araştırma Projesi'nde bir standardizasyon iş akışı geliştirilmiştir.
Akım sitometri yöntemlerinin standardizasyonu zordur. Laboratuvarlarda yaşanan zorluklar, standartlaştırılmış malzemelerin eksikliğine, yazılım uyumluluğu sorunlarına, cihaz kurulumundaki tutarsızlıklara ve farklı akış sitometreleri arasında farklı konfigürasyonların kullanılmasına ve merkezler arasındaki farklı geçiş stratejilerine bağlanmaktadır 3,4. Bu nedenle, laboratuvarlar arasında bir boşluk analizi yapmak önemlidir. Numune erişimi, kalite sistemleri, personel nitelikleri ve cihaz konfigürasyonu, gereksinimlerin karşılandığından emin olmak için gözden geçirilmelidir.
Şu anda, Japon ensefaliti (JE) aşısı ile aşılanan çocuklar, JE5 insidansında önemli ölçüde azalmaya sahiptir. Periferik kan immün hücrelerinin izlenmesi, aşılama sonrası hücre aracılı adaptif bağışıklıktaki değişiklikleri ve periferik kan lenfosit alt kümelerindeki değişiklikler ile aşılamanın etkileri arasındaki korelasyonu anlamaya yardımcı olabilir. Tam kan örneklerinin sınırlı stabilitesi nedeniyle, aşı etkinliğinin değerlendirilmesi genellikle birden fazla merkezde yapılmaktadır. Bu analiz için naif CD8+ veya CD4+ T hücrelerini CD27+ CD45RA+, merkezi bellek T hücrelerini (T CM) CD27+ CD45RA-, efektör bellek T hücrelerini (TEM) CD27- CD45RA-, terminal olarak farklılaşmış efektör bellek T hücrelerini (T EMRA) CD27- CD45RA+ olarak tanımladık. CD19+ B hücreleri, CD27'yi IgD 6,7'ye karşı eksprese eden popülasyonlara ayrılabilir, naif B hücreleri CD27n bellek B hücrelerini (mBC'ler) eksprese eder, IgD6'nın ekspresyonuna dayanarak tanımlanabilir ve düzenleyici T hücreleri (Tregs) CD4 + CD25 + + CD127düşük 8 olarak tanımlanabilir. Birden fazla merkezde deneysel sonuçların tutarlılığını ve karşılaştırılabilirliğini sağlamak için standartlaştırılmış bir akış sitometrisi deneyi oluşturmak için, Je aşılı çocukların tam kanındaki lenfositlerin tespiti için protokollerin farklı akış sitometreleri arasında transferini kolaylaştırmak için hızlı ve uygulanabilir bir standardizasyon yöntemi oluşturulmuştur. Altı sağlıklı çocuk (2 yaşında) Başkent Tıp Üniversitesi Pekin Çocuk Hastanesi'nden işe alındı. 6 aydan daha kısa bir süre önce canlı zayıflatılmış bir JE SA14-14-2 aşısı ile bir prime ve boost aşılaması aldıktan sonra, gönüllülerden periferik kan örnekleri toplandı. Çok merkezli değerlendirmeler için yararlı olan standartlaştırılmış prosedürleri takip eden farklı araçlardan son derece karşılaştırılabilir veriler elde edilmiştir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD CompBeads Anti-Mouse Ig, &#954;/Negative Control Compensation Particles Set</td>
			<td>BD</td>
			<td>552843</td>
			<td>compensation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSCanto</td>
			<td>BD</td>
			<td>FACSCanto</td>
			<td>flow Cytometry A in the transferring lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSDiva CS&#38;T Research Beads</td>
			<td>BD</td>
			<td>655051</td>
			<td>define flow cytometer baseline and track cytometer performance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon BV421 Mouse Anti-Human CD127</td>
			<td>BD</td>
			<td>562436</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon BV605 Mouse Anti-Human CD27</td>
			<td>BD</td>
			<td>562656</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Horizon V500 Mouse Anti-Human CD45</td>
			<td>BD</td>
			<td>560777</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSRFortessa</td>
			<td>BD</td>
			<td>LSRFortessa</td>
			<td>flow Cytometry B in the test method lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD OptiBuild BB700 Mouse Anti-Human CD19</td>
			<td>BD</td>
			<td>745907</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD OptiBuild R718 Mouse Anti-Human CD8</td>
			<td>BD</td>
			<td>751953</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen APC Mouse Anti-Human CD45RA</td>
			<td>BD</td>
			<td>550855</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen APC-H7 Mouse Anti-Human CD3</td>
			<td>BD</td>
			<td>560176</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen FITC Mouse Anti-Human CD4</td>
			<td>BD</td>
			<td>566320</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen PE Mouse Anti-Human CD25</td>
			<td>BD</td>
			<td>555432</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Pharmingen PE-Cy7 Mouse Anti-Human IgD</td>
			<td>BD</td>
			<td>561314</td>
			<td>Fluorescent antibody&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Staining Buffer Plus</td>
			<td>BD</td>
			<td>566385</td>
			<td>Staining Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810</td>
			<td>Cell centrifugation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tube</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>BD-35209715</td>
			<td>15 mL centrifuge tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CS&#38;T IVD Beads</td>
			<td>BD</td>
			<td>662414</td>
			<td>standard beads to setup cytometer settings in different flow cytometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysing Solution 10x Concentrate</td>
			<td>BD</td>
			<td>349202</td>
			<td>lysing red blood cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-023</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round-bottom test tube</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>352235</td>
			<td>5 mL test tube</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

standardization of transfer across labs between flow cytometers for detection of lymphocytes in japanese encephalitis vaccinated children

Giderek artan sayıda laboratuvarın, özellikle birden fazla merkezde gerçekleştirilen araştırma projeleri için çoklu akış sitometrelerinden veri toplaması gerekmektedir. Farklı laboratuvarlarda iki akış sitometresi kullanmanın zorlukları, standartlaştırılmış malzemelerin eksikliğini, yazılım uyumluluk sorunlarını, cihaz kurulumundaki tutarsızlıkları ve farklı akış sitometreleri için farklı konfigürasyonların kullanılmasını içerir. Birden fazla merkezde deneysel sonuçların tutarlılığını ve karşılaştırılabilirliğini sağlamak için standartlaştırılmış bir akış sitometrisi deneyi oluşturmak için, parametreleri farklı akış sitometreleri arasında aktarmak için hızlı ve uygulanabilir bir standardizasyon yöntemi oluşturulmuştur. 
Bu çalışmada geliştirilen yöntemler, Japon ensefaliti (JE) aşılı çocuklarda lenfositlerin tespiti için farklı laboratuvarlardaki iki akış sitometresi arasında deneysel ortamların ve analiz şablonlarının aktarılmasına olanak sağlamıştır. Sitometre ayarlarını oluşturmak için floresan standart boncuklar kullanılarak iki sitometre arasında tutarlı bir floresan yoğunluğu elde edildi. Farklı cihaz tiplerine sahip iki laboratuvarda karşılaştırılabilir sonuçlar elde edilmiştir. Bu yöntemi kullanarak, Je aşılı çocukların bağışıklık fonksiyonlarını farklı laboratuvarlarda farklı aletlerle değerlendirmek için analizleri standartlaştırabilir, birden fazla merkezdeki akış sitometreleri arasındaki veri ve sonuç farklılıklarını azaltabilir ve laboratuvar sonuçlarının karşılıklı akreditasyonu için uygulanabilir bir yaklaşım sağlayabiliriz. Akış sitometresi deneylerinin standardizasyon yöntemi, araştırma projelerinin birden fazla merkezde etkili bir şekilde gerçekleştirilmesini sağlayacaktır.

Şekil 1'de, CST parlak boncukları için hedef değer şablonunun genel bir çalışma sayfası gösterilmektedir. Bir FSC/SSC grafiği kullanılarak, CST parlak boncuklarını seçmek için bir çokgen kapısı çizilir. CST parlak boncuklar için 10 floresan kanalının histogram grafikleri elde edildi: FITC, PE, BB700, PE-Cy7, APC, R718, APC-H7, BV421, V500 ve BV605. Her parametre için hedef değer, Tablo 2'deki histogram kapıları içindeki medyan gösterilerek görü...

Watch this Scientific Journal Video about Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children at JoVE.com

Standardization of Transfer across Labs between Flow Cytometers for Detection of Lymphocytes in Japanese Encephalitis Vaccinated Children

Bu çalışmada, Japon ensefalit aşılı çocuklarda lenfositlerin tespiti için iki laboratuvarda iki akış sitometresi arasında deneysel ortamların ve analiz şablonlarının transferini kolaylaştırmak için bir yöntem geliştirilmiştir. Akış sitometresi deneyleri için standardizasyon yöntemi, araştırma projelerinin birden fazla merkezde etkili bir şekilde yürütülmesini sağlayacaktır.

Japon Ensefaliti Aşılı Çocuklarda Lenfositlerin Tespiti için Akış Sitometreleri Arasında Laboratuvarlar Arasında Transferin Standardizasyonu

An increasing number of laboratories need to collect data from multiple flow cytometers, especially for research projects performed across multiple ...

Akış sitometresinin standardizasyon yöntemi, laboratuvar sonuçlarının karşılıklı akreditasyonu için uygulanabilir bir yaklaşım sağlar ve sonuçların birden fazla merkezdeki araştırma projeleriyle tutarlılığını sağlar. Zaman tüketimini en aza indirgeme yönteminin yürütülmesi kolaydır, otomatikleştirmek için donatılmıştır, şablonu analiz eder ve veri analizi gereksinimini önemli ölçüde azaltabilir. Sitometre A yazılımında, aktarma laboratuvarından, sitometre düğmesine tıklayarak ve görünüm yapılandırmalarını seçerek yeni bir yapılandırma oluşturmaya başlayın.Konfigürasyon listesinde temel konfigürasyonlar klasörüne sağ tıklayın, yeni klasörü seçin ve yeniden adlandırın. Ardından, temel yapılandırmayı sağ tıklatıp kopyalayarak yeni bir yapılandırma oluşturun. Yeni klasörü sağ tıklayın ve yeni yapılandırmayı yeniden adlandırmadan önce temel yapılandırmayı yapıştırın, Standartlaştırılmış yöntem aktarımı"Parametreler listesinden FETC gibi parametre adını uygun dedektör 530/30'a sürükleyin, ayrıca yeni yapılandırmaya ek parametreleri düzenleyin.Aktarımı yapan laboratuvarda denemeyi standartlaştırmak için, bu sitometre A kurulumunu kullanarak bir performans kontrolü çalıştırın ve Sitometre A'nın iyi performans gösterdiğini doğrulamak için boncukları izleyin. Yazılım tarayıcı penceresinde sitometre A ayarlarına sağ tıklayın ve uygulama ayarlarını seçerek bir çalışma sayfası oluşturun. Ardından, ileri saçılma alanının veya FSC'nin ve yan saçılma alanının veya SSC'nin ve tüm floresan parametrelerinin fotoğraf çarpan tüpünü veya PMT voltajlarını ayarlamak için lekesiz bir örnek kullanın.Deneme sitometresi ayarlarına sağ tıklayıp uygulama ayarlarını seçerek uygulama ayarlarını kaydedin. Ücret kontrollerini otomatik olarak eklemek için, telafi denetimleri oluştur'u seçmeden önce deneme düğmesine tıklayın ve ücret ayarları menüsünü seçin. Tüm kompanzasyon kontrol boncukları için verileri kaydedin.İşiniz bittiğinde, denemeye tıklayın ve kompanzasyon kurulumunu seçin, tek hücreli lekeli kontroller için verileri kaydetmeden önce telafiyi otomatik olarak hesaplayın. R7-18'in telafi değerini %15 APC'ye değiştirmek için CD45 RAA APC'yi, APC H7'nin telafi değerini %14 BB700'e değiştirmek için CD19 BB700'ü ve APC H7'nin ücret değerini %60 R7-18'e değiştirmek için CD8 R7-18'i kullanın. CST boncukları için verileri kaydettikten sonra, CST parlak boncukları için hedef değer şablonunun genel bir çalışma sayfasını oluşturun, bir kez bittiğinde, örnekleri akış sitometre dizisinde çalıştırın ve 25.000 lenfosit toplayın.Örnekler için analiz şablonunun genel bir çalışma sayfasını oluşturun ve deneysel şablonu sitometre A.CD-ROM'u kullanarak deneysel şablonu dışa aktarın. Deneysel şablonu test laboratuvarındaki sitometre B'ye aktarmak için, sitometre B'nin iyi performans gösterdiğini doğrulamak için CST boncuklarını kullanarak bir performans kontrolü yapın. Deneysel şablonu sitometre A'dan içe aktarın ve şablonu kullanarak B sitometresi için bir deney oluşturun.Aynı sayıda CST boncuğu kullanılarak, her floresan kanalı için floresan parametre voltajları önceki MFI cihazıyla eşleşecek şekilde ayarlanır. Gerekirse, lekesiz numuneyi kullanarak FSC voltajını ayarlayın. Deneysel sitometre ayarlarına sağ tıklayın ve uygulama ayarlarını kaydetmek için uygulama ayarlarını seçin.Ardından, CD45 RA APC kullanarak R7-18 telafi değerini %15 APC olarak değiştirin. APC H7'nin telafi değerini %24 BB700 olarak değiştirmek için CD19 BB700 kullanın. APC H7'nin telafi değerini %60 R7-18 olarak değiştirmek için CD8 R7-18'i kullanın.Telafi değeri modifikasyonundan sonra, örnekleri B akış sitometresinde çalıştırın ve 25.000 lenfosit toplayın. Sitometre kurulumu ve takibi için hedef değer şablonunun genel bir çalışma sayfasında veya CST parlak boncuklarda, 10 floresan kanalının histogram grafikleri elde edildi, histogram kapıları içinde medyan gösterilerek her parametre için hedef değer görüntülendi. cihaz standardizasyonundan sonra A ve B sitometresi kullanılarak elde edilen numunenin nokta grafikleri, otomatik bir analiz şablonu kullanarak farklı cihazlar arasındaki verilerin tutarlılığını göstermiştir.Altı numuneden elde edilen sonuçlar iki farklı cihaz modelinde karşılaştırıldığında anlamlı bir fark gözlenmedi. Standartlaştırılmış yöntem kullanılarak farklı aletlerden elde edilen 15 lenfoid alt setin sonuçları oldukça karşılaştırılabilir veriler elde etmiştir. Aynı konfigürasyon adı, şablonun oluşturulması ve güvenlik boncuklarının ekoteknoloji değerlerinin farklı enstrümanlarda yapılması bu protokoldeki kritik adımlardır.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Yapışkan bant tabanlı Örnekleme ve Floresans kombinasyonu In situ</emHızlı Algılama> Hibridizasyon Salmonella Taze üretin

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

Kilitli Nükleik Asit Sitometrisi-floresan Yerinde Hibridizasyon (LNA akış FISH): Bakteriyel Küçük RNA Algılama Yöntemi

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Toplam Protein Ekstraksiyon ve 2-D Jel Elektroforez Yöntemleri<em&gt; Burkholderia</em&gt; Türler

The investigation of  the intracellular protein levels of bacterial species is of importance to  understanding the pathogenic mechanisms of diseases ...

Detection of Fluorescent Nanoparticle Interactions with Primary Immune Cell Subpopulations by Flow Cytometry

Sitometrisi ile Primer İmmün hücre alt Floresan Nanoparçacık Etkileşimleri Algılama

Engineered nanoparticles are endowed with very promising properties for therapeutic and diagnostic purposes. This work describes a fast and reliable ...

Static Adhesion Assay for the Study of Integrin Activation in T Lymphocytes

T Lenfositlerindeki Integrin Aktivasyonunun Çalışması için statik Adezyon Deneyi

T lymphocyte adhesion is required for multiple T cell functions, including migration to sites of inflammation and formation of immunological synapses with ...

A Simple and Rapid Protocol to Non-enzymatically Dissociate Fresh Human Tissues for the Analysis of Infiltrating Lymphocytes

İnfiltratif Lenfositlerinin Analiz Olmayan enzimatik ayırmak Taze İnsan Dokusuna Basit ve Hızlı Protokolü

The ability of malignant cells to evade the immune system, characterized by tumor escape from both innate and adaptive immune responses, is now accepted ...

Isolation and Flow Cytometric Characterization of Murine Small Intestinal Lymphocytes

Fare Küçük Bağırsak Lenfositler izolasyonu ve Akım Sitometrisi Karakterizasyonu

The intestines &#8212; which contain the largest number of immune cells of any organ in the body &#8212; are constantly exposed to foreign antigens, both ...

Visualizing the Effects of Sputum on Biofilm Development Using a Chambered Coverglass Model

Bir odacıklı coverglass Modeli Kullanılarak Biyofilm Kalkınma Sputum Etkilerinin görselleştirme

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the ...

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

Salmonella spp. testi ile taranması için yüksek üretilen iş platformu /Shigella spp.

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...