Name: the superficial inferior epigastric artery axial flap to study ischemic preconditioning effects in a rat model
Uploaded: 2023-01-27T14:45:00
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Diese Arbeit wurde vom Massachusetts General Hospital (W.G.A.) und Shriners Children's Boston (B.U, K.U, C.L.C.) finanziert. Y.B und I.F.v.R werden von den Shriners Hospitals for Children finanziert (Vorschlags-ID: #970280 bzw. #857829).

Das Massachusetts General Hospital Institutional Animal Care and Use Committee genehmigte das Versuchsprotokoll (IACUC-Protokoll #2022N000099). Die Autoren folgten für diese Arbeit der ARRIVE-Checkliste (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). Alle Tiere wurden gemäß dem Leitfaden des National Institute of Health für die Pflege und Verwendung von Labortieren artgerecht behandelt. Für alle Experimente wurden insgesamt 12 männliche Lewis-Ratten (250-350 g, 8-10 Wochen alt) verwendet.
<p class="j...

<ol>
	<li>Copelli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+free+flap+failure+in+head+and+neck+surgery.">Management of free flap failure in head and neck surgery.</a> ACTA Otorhinolaryngologica Italica. 37 (5), 387-392 (2017).</li><li>Lese, I., Biedermann, R., Constantinescu, M., Grobbelaar, A. O., Olariu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predicting+risk+factors+that+lead+to+free+flap+failure+and+vascular+compromise:+A+single+unit+experience+with+565+free+tissue+transfers.">Predicting risk factors that lead to free flap failure and vascular compromise: A single unit experience with 565 free tissue transfers.</a> Journal of Plastic, Reconstructive &amp; Aesthetic Surgery. 74 (3), 512-522 (2021).</li><li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flap+failure+and+salvage+in+head+and+neck+reconstruction.">Flap failure and salvage in head and neck reconstruction.</a> Seminars in Plastic Surgery. 34 (4), 314-320 (2020).</li><li>Gabrysz-Forget, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+versus+pedicled+flaps+for+reconstruction+of+head+and+neck+cancer+defects:+a+systematic+review.">Free versus pedicled flaps for reconstruction of head and neck cancer defects: a systematic review.</a> Journal of Otolaryngology - Head &amp; Neck Surgery. 48 (1), 13 (2019).</li><li>Sievert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+of+pedicled+flap+reconstruction+in+the+head+and+neck+area:+A+case+report+of+a+bilateral+subclavian+artery+stenosis.">Failure of pedicled flap reconstruction in the head and neck area: A case report of a bilateral subclavian artery stenosis.</a> International Journal of Surgery Case Reports. 76, 381-385 (2020).</li><li>Vaienti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+by+congestion+of+pedicled+and+free+flaps+for+reconstruction+of+lower+limbs+after+trauma:+the+role+of+negative-pressure+wound+therapy.">Failure by congestion of pedicled and free flaps for reconstruction of lower limbs after trauma: the role of negative-pressure wound therapy.</a> Journal of Orthopaedics and Traumatology. 14 (3), 213-217 (2013).</li><li>Murry, C. 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H., Choe, S. H., Kim, W. S., Ahn, S. -. H., Cho, Y. 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N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+monitor+breathing+in+laboratory+rodents:+a+review+of+the+current+methods.">How to monitor breathing in laboratory rodents: a review of the current methods.</a> Journal of Neurophysiology. 120 (2), 624-632 (2018).</li><li>Strohl, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventilation+and+metabolism+among+rat+strains.">Ventilation and metabolism among rat strains.</a> Journal of Applied Physiology. 82 (1), 317-323 (1997).</li><li>Mucke, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomization+of+epigastric+flaps+in+rats.">Autonomization of epigastric flaps in rats.</a> Microsurgery. 31 (6), 472-478 (2011).</li><li>Hsu, C. -. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+groin+flap+model+redesigned+for+evaluating+treatment+effects+on+ischemia-reperfusion+injury.">The rat groin flap model redesigned for evaluating treatment effects on ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Surgical Research. 222, 160-166 (2018).</li><li>M&#252;cke, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+videoangiography-assisted+prediction+of+flap+necrosis+in+the+rat+epigastric+flap+using+the+flow&#174;+800+tool.">Indocyanine green videoangiography-assisted prediction of flap necrosis in the rat epigastric flap using the flow&#174; 800 tool.</a> Microsurgery. 37 (3), 235-242 (2017).</li><li>Wang, D., Chen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green+angiography+for+continuously+monitoring+blood+flow+changes+and+predicting+perfusion+of+deep+inferior+epigastric+perforator+flap+in+rats.">Indocyanine green angiography for continuously monitoring blood flow changes and predicting perfusion of deep inferior epigastric perforator flap in rats.</a> Journal of Investigative Surgery. 34 (4), 393-400 (2021).</li><li>Berkane, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+secure+pedicled+flaps+using+perioperative+indocyanine+green+angiography:+a+prospective+study+about+10+cases.">How to secure pedicled flaps using perioperative indocyanine green angiography: a prospective study about 10 cases.</a> World Journal of Surgery and Surgical Research. 4 (1), 1319 (2021).</li><li>Alstrup, T., Christensen, B. O., Damsgaard, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ICG+angiography+in+immediate+and+delayed+autologous+breast+reconstructions:+peroperative+evaluation+and+postoperative+outcomes.">ICG angiography in immediate and delayed autologous breast reconstructions: peroperative evaluation and postoperative outcomes.</a> Journal of Plastic Surgery and Hand Surgery. 52 (5), 307-311 (2018).</li><li>K&#252;ntscher, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+preconditioning+by+brief+extremity+ischemia+before+flap+ischemia+in+a+rat+model.">Ischemic preconditioning by brief extremity ischemia before flap ischemia in a rat model.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 109 (7), 2398-2404 (2002).</li><li>Liu, R. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cost+analysis+of+indocyanine+green+fluorescence+angiography+for+prevention+of+anastomotic+leakage+in+colorectal+surgery.">Cost analysis of indocyanine green fluorescence angiography for prevention of anastomotic leakage in colorectal surgery.</a> Surgical Endoscopy. 36 (12), 9281-9287 (2022).</li><li>Cheng, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Devices+for+ischemic+preconditioning+of+the+pedicled+groin+flap.">Devices for ischemic preconditioning of the pedicled groin flap.</a> The Journal of Trauma. 48 (3), 552-557 (2000).</li><li>Xiao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+innovative+and+economical+device+for+ischemic+preconditioning+of+the+forehead+flap+prior+to+pedicle+division:+a+comparative+study.">An innovative and economical device for ischemic preconditioning of the forehead flap prior to pedicle division: a comparative study.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 38 (9), 703-710 (2022).</li><li>K&#252;ntscher, M. V., Hartmann, B., Germann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remote+ischemic+preconditioning+of+flaps:+a+review.">Remote ischemic preconditioning of flaps: a review.</a> Microsurgery. 25 (4), 346-352 (2005).</li></ol>

Dieser Artikel beschreibt ein reproduzierbares fasziokutanes Lappenmodell, das bei Ratten geerntet wurde und eine I.P.-Evaluierung ermöglicht. Dieses Schritt-für-Schritt-Operationsprotokoll gibt Forschungsgruppen ein zuverlässiges Modell an die Hand, um verschiedene I.P.-Therapien zu testen. Durch die Verhinderung einer anderen Vaskularisation als des Pedikels ermöglicht dieses Modell die Untersuchung der Neovaskularisation des Lappens vom Wundbett und -rand aus. In dieser Studie wurde die Ligatur an POD5 durchgefüh...

Die plastische und rekonstruktive Chirurgie entwickelt sich ständig weiter. Die Entwicklung von Muskel-, Fasziokutan- und Perforatorlappen hat es ermöglicht, qualitativ hochwertigere Rekonstruktionen anzubieten und gleichzeitig die Morbidität zu reduzieren. Durch die Kombination dieses verbesserten anatomischen Wissens mit verbesserten technischen Fähigkeiten können rekonstruktive Chirurgen freie Lappentransfers durchführen, wenn sich die Defekte nicht in der Nähe einer lokalen Lösung befinden. Während die Perforatorlappenchirurgie derzeit die fortschrittlichste Technik in der rekonstruktiven Chirurgie ist, berichtet die Literatur von einer Misserfolgsrate von 5 % bei freien Lappentransfers 1,2,3 und bis zu 20 % bei der gestielten Lappenrekonstruktion 4,5,6. Ein teilweises bis vollständiges Versagen des Lappens tritt auf, wenn der Pedikel des Lappens beeinträchtigt ist, daher ist es wichtig, kontinuierlich nach Verbesserungen der aktuellen Techniken zu suchen. Eine der Methoden, um das Überleben des Lappens zu verbessern, besteht darin, die Neovaskularisation auf dem Wundgrund zu fördern und so die Durchblutung durch eine andere Quelle als den Pedikel zu ermöglichen. Die ischämische Präkonditionierung (I.P.) wurde erstmals in einem Herzmodell7 beschrieben, was zeigt, dass ein Organ, das einer kontrollierten Ischämie ausgesetzt ist, in höherem Maße überlebt, nachdem es seine primäre Blutversorgung durch eine Ischämie-induzierte Neovaskularisation verloren hat. Mehrere Autoren haben dieses Grundprinzip untersucht, um das Überleben von Lappen in präklinischen und klinischen Modellen zu optimieren 8,9,10.
Der Vorteil dieser Technik gegenüber anderen Methoden zur Verbesserung des Überlebens des Lappens ist ihre einfache Durchführung, die aus Clamp/Declamp-Tests der Blutquelle besteht. Im Rattenmodell verwendeten frühere Autoren den Lappen der oberflächlichen unteren epigastrischen Arteria (SIEA), um den I.P. zu untersuchen, indem sie den Hauptstiel11,12,13 einklemmten. Nichtsdestotrotz können bei diesem Modell mehrere technische Probleme auftreten, und in der Literatur fehlen gut beschriebene Protokolle.
Daher zielt diese Arbeit darauf ab, den Forschern eine detaillierte Beschreibung einer Ratten-SIEA-Lappenbeschaffungstechnik mit einer erweiterten Dissektion der Femurgefäße zur Verfügung zu stellen, um I.P.-Studien an einem axialen fasziokutanen Lappenmodell zu ermöglichen. Dieses Modell behält die Integrität der epigastrischen Gefäße bei und manipuliert stattdessen die femoralen Gefäße, die widerstandsfähiger sind. Wir teilen unsere Erfahrungen und Werkzeuge, um die Untersuchung dieses Phänomens zu verbessern und die Reproduzierbarkeit dieses Verfahrens zu erhöhen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe Luer-Lok Tip</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Ethilon 18&#8221; Black Monofilament Nylon suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>ETH-663H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 Ethilon 12&#8221; Black Monofilament Nylon suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>1716G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Atraumatic Forceps</td>
			<td>Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td>BD51R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Akorn Fluorescein Injection USP 10% Single Dose Vial 5 mL&#160;</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>17478025310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Solution 5% Povidone-Iodine Antiseptic Microbicide</td>
			<td>PBS Animal Health</td>
			<td>11205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar Cords</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.ATK26426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine Hydrochloride Injection</td>
			<td>PAR Pharmaceutical</td>
			<td>3003406C</td>
			<td>This concentration needs to be diluted for rodents.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory product &#8211; Nair Hair remover lotion</td>
			<td>Nair</td>
			<td>NC0132811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear tag applier</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>NC0038715</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges</td>
			<td>Curity</td>
			<td>6939</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine&#160;</td>
			<td>E-Z Systems</td>
			<td>EZ-190F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, USP</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>1403-704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jewelers Bipolar Forceps Non-Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.BPNS11223</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone Star elastic stays</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td>3311-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone star Self-retaining retractor&#160;</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td>3304G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metronidazole tablets USP</td>
			<td>Teva</td>
			<td>500111-333-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spring handle scissors&#160;</td>
			<td>AROSurgical</td>
			<td>11.603.14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope (surgical)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M525 F40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical clamp applying forceps</td>
			<td>Ambler Surgical</td>
			<td>31-906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical clamps (x2)&#160;</td>
			<td>Millennium Surgical&#160;</td>
			<td>18-B1V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical Dumont #4 forceps&#160;</td>
			<td>Dumont Swiss made&#160;</td>
			<td>1708-4TM-PO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical needle holder</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>B-14-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501246</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nosecone for Anesthesia&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>EZ-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pixel analysis software</td>
			<td>GNU Image Manipulation Program v2.10</td>
			<td>GIMP</td>
			<td>GNU Open licence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needle 27 G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ragnell Scissors&#160;</td>
			<td>Roboz Surgical</td>
			<td>RS-6015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl (carprofen)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>10000319</td>
			<td>This concentration needs to be diluted for rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scientific Elizabethan collar (e-collar) for Rats</td>
			<td>Braintree Scientific&#160;</td>
			<td>NC9263311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear tag</td>
			<td>National Band &#38; Tag Company</td>
			<td>Style 1005-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)&#160;&#160;</td>
			<td>Peco Services Ltd</td>
			<td>69023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile towel drape</td>
			<td>Dynarex Corporation</td>
			<td>4410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile water for injection and irrigation&#160;</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409488724-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scrub &#8211; BD ChloraPrep Hi-Lite Orange 3 mL applicator with Sterile Solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>930415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV lamp</td>
			<td>UVP</td>
			<td>UVL-56</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcol Alcohol prep pads&#160;</td>
			<td>Simply Medical</td>
			<td>5110</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the superficial inferior epigastric artery axial flap to study ischemic preconditioning effects in a rat model

Fasciokutane Lappen (FCF) haben sich zum Goldstandard für komplexe Defektrekonstruktionen in der plastischen und rekonstruktiven Chirurgie entwickelt. Diese muskelschonende Technik ermöglicht den Transfer von vaskularisiertem Gewebe, um jeden größeren Defekt abzudecken. FCF kann als gestielte Lappen oder als freie Lappen verwendet werden; In der Literatur liegen die Misserfolgsraten für gestielte FCF und freie FCF jedoch bei über 5%, was Raum für Verbesserungen dieser Techniken und eine weitere Wissenserweiterung in diesem Bereich lässt. Die ischämische Präkonditionierung (I.P.) wurde umfassend untersucht, aber die Mechanismen und die Optimierung des I.P.-Regimes müssen noch bestimmt werden. Dieses Phänomen ist in der plastischen und rekonstruktiven Chirurgie in der Tat wenig erforscht. In dieser Arbeit wird ein chirurgisches Modell vorgestellt, um das I.P.-Regime in einem axialen fasziokutanen Lappenmodell der Ratte zu untersuchen und zu beschreiben, wie die Auswirkungen von I.P. auf das Überleben des Lappens sicher und zuverlässig beurteilt werden können. Dieser Artikel beschreibt den gesamten chirurgischen Eingriff mit Vorschlägen zur Verbesserung der Zuverlässigkeit dieses Modells. Ziel ist es, den Forschern ein reproduzierbares und zuverlässiges Modell zur Verfügung zu stellen, um verschiedene ischämische Präkonditionierungsschemata zu testen und ihre Auswirkungen auf die Überlebensfähigkeit des Lappens zu bewerten.

Alle Lappen waren auf POD5 lebensfähig und zeigten eine gute Vaskularisation durch die SIEA allein. Abbildung 5 zeigt den Lappen vor und nach der intravenösen Fluorescein-Injektion und zeigt eine vollständige Vaskularisation.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64980/64980fig05.jpg"> Abbildung 5: Sofortige intravenöse Fluoreszenzangiographie (POD0).</stro...

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The Superficial Inferior Epigastric Artery Axial Flap to Study Ischemic Preconditioning Effects in a Rat Model

Dieses Protokoll beschreibt die Entnahme, das Nähen und die Überwachung von fasziokutanen Lappen bei Ratten, die eine gute Visualisierung und Manipulation des Blutflusses durch die oberflächlichen unteren epigastrischen Gefäße durch Klemmen und Ligieren der Oberschenkelgefäße ermöglichen. Dies ist entscheidend für Studien mit ischämischer Präkonditionierung.

Der oberflächliche axiale Lappen der Arteria epigastrica inferior zur Untersuchung ischämischer Präkonditionierungseffekte in einem Rattenmodell

Fasciocutaneous flaps (FCF) have become the gold standard for complex defect reconstruction in plastic and reconstructive surgery. This muscle-sparing ...

Dieses chirurgische Protokoll bietet ein zuverlässiges Modell, um das ischämische Präkonditionierungsschema in fasziokutanen Lappen zu untersuchen und die Ergebnisse dieser Operationen zu verbessern. Dieses Protokoll ist leicht zu erlernen, reproduzierbar und zuverlässig. Der Hauptunterschied zu anderen Protokollen besteht in der Verwendung von Femurgefäßen, um die ischämische Präkonditionierung zu provozieren und eine Schädigung kleiner Gefäße zu vermeiden.Dies kann schließlich zur Optimierung eines ischämischen Präkonditionierungsprotokolls für die freie und gestielte Lappenrekonstruktion führen, um die Überlebensfähigkeit des Lappens zu verbessern und die kritische Phase der Lappenvulnerabilität zu reduzieren. Diese Methode kann einen Beitrag zur rekonstruktiven Chirurgie leisten und eignet sich gut für die Untersuchung von Ischämie-Reperfusionsverletzungen. Legen Sie das richtig sedierte Tier zunächst in Rückenlage.Rasieren Sie den Bauch von unterhalb der Leistenfalte bis über das Niveau des Processus xiphoideus. Tragen Sie eine Haarentfernungscreme auf die rasierte Stelle auf und warten Sie fünf Minuten, bevor Sie sie reinigen. Markieren Sie mit einem sterilen Hautstift und einem Lineal zuerst die Mittellinie des Bauches des Tieres und dann die Leistenfalte.Bevor Sie den Schnitt machen, geben Sie die Position des gewünschten Lappens am Körper des Tieres an, indem Sie ein Oval oder ein Rechteck mit einer vertikalen Länge von bis zu sechs Zentimetern und einer horizontalen Breite von etwa drei Zentimetern zeichnen, das sich kranial von der Leistenfalte erstreckt. Zeichnen Sie nun fünf oder sechs äquidistante Markierungen senkrecht zu den Klappenbegrenzungen. Machen Sie dann mit einer Ragnell-Schere einen Längsschnitt von drei bis vier Zentimetern in der Leistenfalte.Achten Sie darauf, die Haut nach oben zu ziehen, um eine Beschädigung der Gefäße zu vermeiden. Freilegen und identifizieren Sie die femoralen und epigastrischen Gefäße mit einer mikrochirurgischen Pinzette von 4 Jewelers, indem Sie die Pinzette öffnen und schließen, um die Faszien zu trennen und Zugang zu den Gefäßen unter dem Leistenfettpolster zu erhalten. Verwenden Sie den Leistenschnitt, um den Lappenschnitt mit der Ragnell-Schere zu beginnen.Achten Sie darauf, die volle Dicke der Haut und des Bindegewebes über dem Bauchmuskel zu untergraben. Da die Spitze des Lappens zunächst von der umgebenden Haut befreit ist, setzen Sie die Lappenbeschaffung fort, indem Sie den Lappen vom distalen zum proximalen Teil mit den Ragnell-Scherenspitzen untergraben, um den Lappen vom Muskel zu trennen, während alle Perforationsgefäße und dermalen Plexusgefäße um den Lappen herum verätzt werden. Sobald der Lappen vollständig entnommen ist, versuchen Sie, die Gesamtheit beider Äste der oberflächlichen Arteria epigastrica inferior oder SIEA mit dem Lappen einzukapseln, indem Sie den Lappen vorsichtig nach oben heben, um die Gefäße sichtbar zu machen.Als nächstes trennen Sie die Fettpolster auf der unteren Seite sowohl auf der medialen als auch auf der lateralen Seite des Lappens. Verwenden Sie den bipolaren Kauter, um die Fettpolster in der Nähe des Schnittrandes vorsichtig zu kauterisieren, ohne den oberflächlichen unteren epigastrischen Pedikel zu beschädigen. Bevor Sie nach Abschluss der Lappenentnahme mit der Vorbereitung der Hüftgefäße fortfahren, injizieren Sie dem Tier eine Einzeldosis von 17,5 internationalen Einheiten Natriumheparin über die Penisvene.Um eine bessere Sicht auf die Gefäße zu ermöglichen, legen Sie das Tier in einen einsamen Stern mit selbsthaltendem Retraktor. Arbeiten Sie nun unter einem Operationsmikroskop mit einer 40-fachen Vergrößerung und verwenden Sie ein paar 4 mikrochirurgische Pinzetten, um die Femurgefäße sowohl proximal als auch distal zu präparieren, bis die oberflächlichen epigastrischen Gefäße entstehen. Reinigen Sie an den distalen Femurgefäßen die Faszie und befreien Sie den Nerv sanft von Arterie und Vene.Mit einem 8-0 Nylonnaht, ligieren Sie die distalen Femurgefäße, indem Sie den mikrochirurgischen Nadelhalter unter Arterie und Vene umgehen, die Naht umschließen und diese Gefäße direkt nach dem Auftauchen der epigastrischen Gefäße abbinden, wobei ein Abstand von einem Millimeter nach dem Pedikelursprung verbleibt. Wiederholen Sie an den proximalen Femurgefäßen den gleichen Vorgang der Reinigung des Bindegewebes. Trennen Sie jedoch die Arterie und die Vene voneinander, um eine effiziente Abklemmung zu ermöglichen.Um eine intermittierende Ischämie zu induzieren, platzieren Sie mikrochirurgische Klemmen separat an jeder proximalen Femurarterie und -vene. Wenn die ischämischen Verletzungen abgeschlossen sind, wird der Lappen in seine ursprüngliche Position vernäht, wobei die präoperativ gezeichneten Markierungen ausgekleidet sind. Nähen Sie den Lappen mit einer Laufnaht mit 3-0 Nylon an der Leistenfalte medial, um den Lappen herum und enden Sie seitlich an der Leistenfalte.Um die Blutversorgung des Lappens zu überprüfen, injizieren Sie 0,25 Milliliter 10%iges steriles Fluorescein-Natrium in die Penisvene mit der gleichen Technik und den gleichen Werkzeugen, die für die vorherige Injektion beschrieben wurden. Leuchten Sie nach drei Minuten mit einer langwelligen UV-Lampe bei 366 Nanometern, um die fluoreszierenden Bereiche freizulegen, die den durchbluteten Bereichen entsprechen. Verteilen Sie nach dem Verschluss und der Überprüfung zerkleinertes Metronidazol entlang der Nähte, um eine Selbstverstümmelung zu verhindern, und sprühen Sie einen flüssigen Verband auf denselben Bereich.Um den Lappen am Ende der ischämischen Präkonditionierungsphase aus der epigastrischen Blutversorgung zu entfernen, kauterisieren Sie unterhalb des Fettpolsters entlang des unteren Randes des Lappens. Die unmittelbare intravenöse Fluoreszenzangiographie am postoperativen Tag Null oder POD0 zeigte eine vollständige Vaskularisation des Lappens durch die SIEA allein. Das Gewebe, einschließlich des gesamten Klappenpaddels, war gut durchblutet.Die Angiographie der Negativkontrolle auf POD5 und POD10 zeigte die volle Viabilität des Klappenpaddels. Alle Tiere dieser Gruppe, bei denen keine Ligatur an den Fressgefäßen durchgeführt wurde, blieben gesund. Für die Positivkontrollgruppe zeigte das Fehlen von grüner Fluoreszenz unmittelbar nach der Ligatur keine Perfusion des Lappens, was das Fehlen einer Neovaskularisation beweist.Dies wurde bei POD10 mit einer beobachteten Nekrose von 85% des Hautpaddels bestätigt. Interessanterweise war die distale Spitze lebensfähig und neovaskularisiert. Die statistische Analyse der Viabilität der Lappenoberfläche auf POD10 ergab eine Überlebensfähigkeit von 99,5 % in der Negativkontrollgruppe, während die Positivkontrollgruppe eine Überlebensfähigkeit von 11,25 % aufwies.Eine Beispiel-Experimentalgruppe, die die ischämische Präkonditionierung untersuchen sollte, zeigte eine Überlebensfähigkeit von 13,67 %, was zeigt, dass das spezielle ischämische Präkonditionierungsprotokoll in diesem Modell ineffizient war. Die beiden Hauptschritte sind die Lappenentnahme und die Gefäßdissektion unter dem Mikroskop. Der wichtigste Ratschlag ist, Mikroinstrumente von guter Qualität zu haben.Das nächste Ziel besteht darin, verschiedene ischämische Präkonditionierungsprotokolle auszuprobieren, indem die Dauer und der Rhythmus der Ischämie variiert werden, um das Schema auszuwählen, das die beste Überlebensfähigkeit des Lappens nach einer frühen Flussunterbrechung ermöglicht. Diese Technik kann durch die Bereitstellung eines guten Modells für Ischämiefusionsverletzungen zu neuen Erkenntnissen über die ischämische Präkonditionierung führen, die auf die moderne rekonstruktive Chirurgie und rekonstruktive Transplantation angewendet wird.

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