Generering av bruna fettspecifika knockoutmöss med hjälp av ett kombinerat Cre-LoxP-, CRISPR-Cas9- och adenoassocierat virus med en guide RNA-system

I detta protokoll beskriver vi de tekniska procedurerna för att generera bruna fettvävnadsspecifika knockoutmöss (BAT) som utnyttjar ett kombinerat Cre-LoxP-, CRISPR-Cas9- och adenoassocierat virus (AAV) single-guide RNA (sgRNA) system. De beskrivna stegen innefattar utformningen av sgRNA, beredningen av AAV-sgRNA-partiklarna och mikroinjektionen av AAV i BAT-loberna.