Name: a model of long-term ventricular fibrillation in isolated rat hearts
Uploaded: 2023-02-17T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts at JoVE.com

Bu çalışma Kardiyovasküler Cerrahi, İlk Tıp Merkezi, Çin PLA Genel Hastanesi ve Laboratuvar Hayvanları Merkezi, Çin PLA Genel Hastanesi'nin desteğiyle gerçekleştirilmiştir.

Bu araştırmada kullanılan tüm deneysel prosedürler ve protokoller PLA Genel Hastanesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.
1. Langendorff aparatının hazırlanması
<ol><li>Krebs-Henseleit (K-H) arabelleğini hazırlayın. K-H tamponunu hazırlamak için damıtılmış suya aşağıdakileri ekleyin: 118,0 mM NaCl, 4,7 mM KCl, 1,2 mM MgSO 4, 1,2 mM NaH 2 PO4, 1,8 mM CaCl 2,</s...

<ol>
	<li>Kilic, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+outcomes+of+mitral+valve+reoperations+in+the+United+States:+An+analysis+of+the+society+of+thoracic+surgeons+national+database.">Clinical outcomes of mitral valve reoperations in the United States: An analysis of the society of thoracic surgeons national database.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 107 (3), 754-759 (2019).</li><li>Akins, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+of+reoperative+valve+replacement+for+failed+mitral+and+aortic+bioprostheses.">Risk of reoperative valve replacement for failed mitral and aortic bioprostheses.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 65 (6), 1551-1542 (1998).</li><li>Jamieson, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reoperation+for+bioprosthetic+mitral+structural+failure:+risk+assessment.">Reoperation for bioprosthetic mitral structural failure: risk assessment.</a> Circulation. 108 (Suppl 1), 98 (2003).</li><li>Seeburger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+mitral+valve+surgery+after+previous+sternotomy:+Experience+in+181+patients.">Minimally invasive mitral valve surgery after previous sternotomy: Experience in 181 patients.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 87 (3), 709-714 (2009).</li><li>Arcidi, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifteen-year+experience+with+minimally+invasive+approach+for+reoperations+involving+the+mitral+valve.">Fifteen-year experience with minimally invasive approach for reoperations involving the mitral valve.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 143 (5), 1062-1068 (2012).</li><li>Cox, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+of+induced+ventricular+fibrillation+during+cardiopulmonary+bypass+in+nonhypertrophied+hearts.">The safety of induced ventricular fibrillation during cardiopulmonary bypass in nonhypertrophied hearts.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 74 (3), 423-432 (1977).</li><li>Schraut, W., Lamberti, J. J., Kampman, K., Glagov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+fibrillation+during+cardiopulmonary+bypass:+Long-term+effects+on+myocardial+morphology+and+function.">Ventricular fibrillation during cardiopulmonary bypass: Long-term effects on myocardial morphology and function.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 27 (3), 230-234 (1979).</li><li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pravastatin+attenuates+cardiac+dysfunction+induced+by+lysophosphatidylcholine+in+isolated+rat+hearts.">Pravastatin attenuates cardiac dysfunction induced by lysophosphatidylcholine in isolated rat hearts.</a> European Journal of Pharmacology. 640 (1-3), 139-142 (2010).</li><li>Lang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXCL10/IP-10+neutralization+can+ameliorate+lipopolysaccharide-induced+acute+respiratory+distress+syndrome+in+rats.">CXCL10/IP-10 neutralization can ameliorate lipopolysaccharide-induced acute respiratory distress syndrome in rats.</a> PLoS One. 12 (1), e0169100 (2017).</li><li>Lubbe, W. F., Bricknell, O. L., Marzagao, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+fibrillation+threshold+and+vulnerable+period+in+the+isolated+perfused+rat+heart.">Ventricular fibrillation threshold and vulnerable period in the isolated perfused rat heart.</a> Cardiovascular Research. 9 (5), 613-620 (1975).</li><li>Hottentrott, C. E., Towers, B., Kurkji, H. J., Maloney, J. V., Buckberg, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hazard+of+ventricular+fibrillation+in+hypertrophied+ventricles+during+cardiopulmonary+bypass.">The hazard of ventricular fibrillation in hypertrophied ventricles during cardiopulmonary bypass.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 66 (5), 742-753 (1973).</li><li>Hottenrott, C., Maloney, J. V., Buckberg, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+of+the+effects+of+ventricular+fibrillation+on+the+adequacy+of+regional+myocardial+flow.+I.+Electrical+vs.+spontaneous+fibrillation.">Studies of the effects of ventricular fibrillation on the adequacy of regional myocardial flow. I. Electrical vs. spontaneous fibrillation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 68 (4), 615-625 (1974).</li><li>Buckberg, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+of+the+effects+of+hypothermia+on+regional+myocardial+blood+flow+and+metabolism+during+cardiopulmonary+bypass.+I.+The+adequately+perfused+beating,+fibrillating,+and+arrested+heart.">Studies of the effects of hypothermia on regional myocardial blood flow and metabolism during cardiopulmonary bypass. I. The adequately perfused beating, fibrillating, and arrested heart.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 73 (1), 87-94 (1977).</li><li>Gazmuri, R. J., Berkowitz, M., Cajigas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+effects+of+ventricular+fibrillation+in+the+isolated+rat+heart.">Myocardial effects of ventricular fibrillation in the isolated rat heart.</a> Critical Care Medicine. 27 (8), 1542-1550 (1999).</li><li>Clasen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+approach+for+programmed+electrical+stimulation+in+mice:+Inducibility+of+ventricular+arrhythmias.">A modified approach for programmed electrical stimulation in mice: Inducibility of ventricular arrhythmias.</a> PLoS One. 13 (8), e0201910 (2018).</li><li>Diaz-Maue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+cardiac+rhythm+management+by+applying+optogenetic+multi-site+photostimulation+in+murine+hearts.">Advanced cardiac rhythm management by applying optogenetic multi-site photostimulation in murine hearts.</a> Journal of Visualized Experiments. (174), e62335 (2021).</li><li>Jungen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+intracardiac+neurons+on+cardiac+electrophysiology+and+arrhythmogenesis+in+an+ex+vivo+Langendorff+system.">Impact of intracardiac neurons on cardiac electrophysiology and arrhythmogenesis in an ex vivo Langendorff system.</a> Journal of Visualized Experiments. 135, e57617 (2018).</li><li>Koretsune, Y., Marban, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+calcium+in+the+pathophysiology+of+ventricular+fibrillation+and+in+the+pathogenesis+of+postarrhythmic+contractile+dysfunction.">Cell calcium in the pathophysiology of ventricular fibrillation and in the pathogenesis of postarrhythmic contractile dysfunction.</a> Circulation. 80 (2), 369-379 (1989).</li><li>Brazier, J. R., Cooper, N., McConnell, D. H., Buckberg, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+of+the+effects+of+hypothermia+on+regional+myocardial+blood+flow+and+metabolism+during+cardiopulmonary+bypass.+III.+Effects+of+temperature,+time,+and+perfusion+pressure+in+fibrillating+hearts.">Studies of the effects of hypothermia on regional myocardial blood flow and metabolism during cardiopulmonary bypass. III. Effects of temperature, time, and perfusion pressure in fibrillating hearts.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 73 (1), 102-109 (1977).</li><li>von Planta, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiopulmonary+resuscitation+in+the+rat.">Cardiopulmonary resuscitation in the rat.</a> Journal of Applied Physiology. 65 (6), 2641-2647 (1988).</li><li>Luo, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ageing+increases+cardiac+electrical+remodelling+in+rats+and+mice+via+NOX4/ROS/CaMKII-mediated+calcium+signalling.">Ageing increases cardiac electrical remodelling in rats and mice via NOX4/ROS/CaMKII-mediated calcium signalling.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2022, 8538296 (2022).</li><li>Hohnloser, S., Weirich, J., Antoni, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+direct+current+on+the+electrical+activity+of+the+heart+and+on+its+susceptibility+to+ventricular+fibrillation.">Influence of direct current on the electrical activity of the heart and on its susceptibility to ventricular fibrillation.</a> Basic Research in Cardiology. 77 (3), 237-249 (1982).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-energy+defibrillation+increases+the+severity+of+postresuscitation+myocardial+dysfunction.">High-energy defibrillation increases the severity of postresuscitation myocardial dysfunction.</a> Circulation. 96 (2), 683-688 (1997).</li><li>Manoach, M., Netz, H., Erez, M., Weinstock, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+self-defibrillation+in+mammals:+Age+and+drug+dependence.">Ventricular self-defibrillation in mammals: Age and drug dependence.</a> Age and Ageing. 9 (2), 112-116 (1980).</li><li>Filippi, S., Gizzi, A., Cherubini, C., Luther, S., Fenton, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insights+into+hypothermic+ventricular+fibrillation:+The+role+of+temperature+and+tissue+size.">Mechanistic insights into hypothermic ventricular fibrillation: The role of temperature and tissue size.</a> Europace. 16 (3), 424-434 (2014).</li></ol>

Bu protokol, daha önce bildirilmemiş olan izole sıçan kalplerinde uzun süreli VF'nin bir hayvan modelini oluşturur. Ayrıca bu çalışmada farklı elektriksel stimülasyon koşulları karşılaştırılmıştır. Bu çalışma, kalp cerrahisi sırasında ventriküler fibrilasyon durması ile ilgili çalışmalar için bir model sunmaktadır.
Modelin başarı oranı, personel, zaman ve ekonomik maliyetlerle ilgili çok önemli bir göstergedir. VF modellerinde başarı oranı, VF'nin kal...

Kalp cerrahisi genellikle torakotomi yoluyla, aortun bloke edilmesi ve kalbi tutuklamak için kardiyoplejik bir solüsyonla perfüzyon ile gerçekleştirilir. Tekrarlayan kalp cerrahisi ilk ameliyattan daha zor olabilir, komplikasyon ve mortalite oranları daha yüksektir 1,2,3. Ayrıca, konvansiyonel medyan sternotomi yaklaşımı, sternumun arkasındaki köprü damarlarına, yükselen aorta, sağ ventriküle ve diğer önemli yapılara zarar verebilir. Bağ dokusunun ayrılmasına bağlı yaygın kanama, sternal yara enfeksiyonu ve sternotomiye bağlı sternal osteomiyelit olası komplikasyonlardır. Kapsamlı diseksiyon vital kardiyak yapılarda lezyon ve kanama riskini arttırır.
Minimal invaziv kalp cerrahisinin gelişmesiyle birlikte, insizyonlar küçülmüştür ve kalp durması bazen zordur. Ventriküler fibrilasyon (VF)4,5 altında tekrarlanan kalp cerrahisi güvenli, uygulanabilir ve daha iyi miyokard koruması sağlayabilir. Bu nedenle, bu protokol minimal invaziv ekstrakorporeal dolaşım ile cerrahide VF kardiyak arrest yöntemini tanıtmaktadır. Kalp, VF sırasında etkili kasılmayı kaybeder ve bu nedenle, ameliyat sırasında artan aortu dikmeye ve bloke etmeye gerek yoktur, bu da prosedürü basitleştirir. Bununla birlikte, kalp sürekli perfüze edilse bile, uzun süreli VF hala kalbe zararlı olabilir.
Bu yöntem daha yaygın olarak kullanılmaya başlandıkça, VF sırasında kalbin nasıl korunacağı sorusu giderek daha fazla önem kazanmaktadır. Bu, uzun vadeli VF'nin hayvan modellerini kullanarak kapsamlı ve derinlemesine çalışmalar gerektirecektir. Geçmişte, bu alandaki araştırmalar çoğunlukla büyük hayvanlar6,7 kullanmış ve cerrahlar, anestezistler, perfüzyonistler ve diğer araştırmacılar arasında işbirliği gerektirmiştir. Bu çalışmalar çok uzun sürdü, örneklem büyüklükleri genellikle küçüktü ve çalışmalar genellikle kardiyak fonksiyona odaklandı ve mekanik ve moleküler değerlendirmelere daha az odaklandı. Bugüne kadar, hiçbir çalışma uzun vadeli bir VF modeli oluşturmak için ayrıntılı bir protokol bildirmemiştir.
Bu protokol, Langendorff aparatını kullanarak uzun vadeli bir VF sıçan modeli geliştirmek için gereken ayrıntıları sağlar. Protokol basit, ekonomik, tekrarlanabilir ve kararlıdır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0 Non-absorbable suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>95% O2 + 5% CO2</td>
			<td>Beijing BeiYang United Gas Co., Ltd.&#160;</td>
			<td></td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AcqKnowledge software</td>
			<td>BIOPAC Systems Inc.</td>
			<td>Version 4.2.1</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic biochemistry analyzer</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>Chemray 800</td>
			<td>CK-MB assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BIOPAC research systems</td>
			<td>BIOPAC Systems Inc.</td>
			<td>MP150</td>
			<td>Hardware</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt needle (20 G, TWLB)</td>
			<td>Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.</td>
			<td>H-113AP-S</td>
			<td>Modified Langendorff perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>10005861</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CK-MB assay kits&#160;</td>
			<td>Changchun Huili Biotech Co., Ltd.</td>
			<td>C060</td>
			<td>CK-MB assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forcep</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>10009717</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical stimulator</td>
			<td>BIOPAC Systems Inc.</td>
			<td>STEMISOC</td>
			<td>Hardware</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter</td>
			<td>Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.</td>
			<td>H-113AP-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>63005518</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Tianjin Biochem Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>H120200505</td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co.,LTD</td>
			<td>21082201</td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>20025118</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle electrodes</td>
			<td>BIOPAC Systems Inc.</td>
			<td>EL452</td>
			<td>Hardware</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic clamp</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion tube</td>
			<td>Tianjin Hanaco MEDICAL Co., Ltd.</td>
			<td>H-113AP-S</td>
			<td>Modified Langendorff perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>10016318</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>10018960</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>10019318</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium dihydrogen phosphate dihydrate</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Ltd</td>
			<td>20040718</td>
			<td>K-H buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague-Dawley (SD) rats</td>
			<td>SPF (Beijing) biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>Male, 300-350g</td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermometer</td>
			<td>Jiangsu Jingchuang Electronics Co., Ltd.</td>
			<td>GSP-6</td>
			<td>Modified Langendorff perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissueforceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toothed forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instrument (Group) Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Chengdu Instrument Factory</td>
			<td>DKX-150</td>
			<td>Preparation of the isolated heart</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath1</td>
			<td>Ningbo Scientz Biotechnology Co.,Ltd.</td>
			<td>SC-15</td>
			<td>Modified Langendorff perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath2</td>
			<td>Shanghai Yiheng Technology Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>DK-8D</td>
			<td>Modified Langendorff perfusion system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of long-term ventricular fibrillation in isolated rat hearts

Ventriküler fibrilasyon (VF) kalp hastalarında görülme sıklığı yüksek olan ölümcül bir aritmidir, ancak perfüzyon altında VF arresti kalp cerrahisi alanında ihmal edilen bir intraoperatif arrest yöntemidir. Kalp cerrahisindeki son gelişmelerle birlikte, perfüzyon altında uzun süreli VF çalışmalarına olan talep artmıştır. Bununla birlikte, alan kronik ventriküler fibrilasyonun basit, güvenilir ve tekrarlanabilir hayvan modellerinden yoksundur. Bu protokol, epikardın alternatif akım (AC) elektriksel stimülasyonu yoluyla uzun süreli VF'yi indükler. VF'yi indüklemek için, uzun süreli VF'yi indüklemek için düşük veya yüksek voltajla sürekli stimülasyon ve spontan uzun süreli VF'yi indüklemek için düşük veya yüksek voltajla 5 dakika boyunca stimülasyon dahil olmak üzere farklı koşullar kullanılmıştır. Farklı durumların başarı oranlarının yanı sıra miyokard yaralanması ve kardiyak fonksiyonların iyileşme oranları karşılaştırıldı. Sonuçlar, sürekli düşük voltajlı stimülasyonun uzun süreli VF'yi indüklediğini ve 5 dakikalık düşük voltajlı stimülasyonun hafif miyokard hasarı ve yüksek oranda kardiyak fonksiyon iyileşmesi ile spontan uzun süreli VF'yi indüklediğini göstermiştir. Bununla birlikte, düşük voltajlı, sürekli uyarılan uzun vadeli VF modeli daha yüksek bir başarı oranına sahipti. Yüksek voltajlı stimülasyon daha yüksek VF indüksiyon oranı sağladı, ancak düşük defibrilasyon başarı oranı, kardiyak fonksiyonun zayıf iyileşmesi ve ciddi miyokard hasarı gösterdi. Bu sonuçlara dayanarak, yüksek başarı oranı, stabilitesi, güvenilirliği, tekrarlanabilirliği, kardiyak fonksiyon üzerindeki düşük etkisi ve hafif miyokard hasarı nedeniyle sürekli düşük voltajlı epikardiyal AC stimülasyonu önerilmektedir.

Deneylerde toplam 57 sıçan kullanıldı ve bunların 30'u dahil etme kriterlerini karşıladı. Dahil edilen hayvanlar, her grupta altı hayvan olmak üzere beş gruba ayrıldı: kontrol grubu (Grup C), düşük voltajlı sürekli uyarılmış uzun süreli VF grubu (Grup LC), yüksek voltajlı sürekli uyarılmış uzun süreli VF grubu (Grup HC), düşük voltaja bağlı spontan uzun süreli VF grubu (Grup LI) ve yüksek voltaja bağlı spontan uzun vadeli VF grubu (Grup HI). Her grup için deneysel süreç <strong cl...

Watch this Scientific Journal Video about A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts at JoVE.com

A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts

Bu protokol, düşük voltajlı alternatif akımla sürekli stimülasyonla indüklenen sıçan kalplerinde uzun süreli ventriküler fibrilasyon modeli sunmaktadır. Bu model yüksek bir başarı oranına sahiptir, stabil, güvenilir ve tekrarlanabilir, kardiyak fonksiyon üzerinde düşük bir etkiye sahiptir ve sadece hafif miyokard hasarına neden olur.

İzole Sıçan Kalplerinde Uzun Süreli Ventriküler Fibrilasyon Modeli

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of ...

Bu protokol, Langendorff aparatını kullanarak uzun süreli bir ventriküler fibrilasyon sıçan modeli geliştirmek için ayrıntılı bir ihtiyaç sağlar. Küçük hayvan modelinde uzun süreli ventriküler fibrilasyon boşluğunu doldurur. Teknik basit, ekonomik, tekrarlanabilir ve kararlıdır.Bu teknik, kalp cerrahisi seansları ve operasyonları alanında belirli klinik durumlarda gerçekleştirilen perfüzyon altında ventriküler fibrilasyon durması çalışmasında kullanılabilir. Başlamak için, Krebs-Henseleit veya KH tamponunu, damıtılmış suya 118 milimolar sodyum klorür, 4.7 milimolar potasyum klorür, 1.2 milimolar magnezyum klorür, 1.2 milimolar sodyum dihidrojen fosfat, 1.8 milimolar kalsiyum klorür, 25 milimolar sodyum bikarbonat, 11.1 milimolar glikoz ve 0.5 milimolar EDTA ekleyerek hazırlayın. Daha sonra modifiye Langendorff perfüzyon sistemini hazırlayın.KH tamponu içeren şişeyi yaklaşık 80 milimetre cıva basıncında %95 oksijen ve %5 karbondioksit ile sürekli olarak gazlayın. Perfüzyon tüpünün bir ucunu KH tamponuna yerleştirin, perfüzyon tüpünün ortasını su banyosundan geçirin ve perfüzyon tüpünün diğer ucuna künt bir 20 gauge iğne takın. İğneyi bir tel stand üzerinde askıya aldıktan sonra, su banyosunun sıcaklığını, perfüzyon sisteminin sonundan KH tamponunun sıcaklığı 37 santigrat derece olacak şekilde ayarlayın.Tüm analog sinyalleri dijitalleştirmek ve kaydetmek için fizyolojik bir sinyal kaydedici kullanın. Bipolar elektrokardiyogram veya EKG kaydetmek için iki paslanmaz çelik iğne elektrodu ve elektriksel stimülasyon için iki paslanmaz çelik iğne elektrodu kullanın. Dört elektrotun bir ucunu fizyolojik sinyal kaydediciye, diğer ucunu ise cihaza bağlandıktan sonra kalbin konumlandırılacağı alana yakın bir yere bağlayın.Ardından, bipolar EKG ve hemodinamik parametreleri otomatik olarak tanımak, ayarlamak ve kaydetmek için dizüstü bilgisayar yazılımını kullanın. Elektrik stimülatör parametrelerini, düşük voltaj grubu 2 volt ve yüksek voltaj grubu 6 volt alırken 30 hertz alternatif akıma ayarlayın. Servikal diseksiyon ve trakeal entübasyondan sonra ventilatöre bağlanan anestezili sıçan ile, cildi dişli forsepslerle ksifoid süreçten kaldırın ve doku makası ile deride üç santimetrelik enine bir kesi yapın.Deri ve kaburga insizyonlarını V şeklinde her iki taraftaki aksillaya uzatın. Brakiyosefalik gövdeyi çevreleyen dokudan ayırmak için künt diseksiyon kullanın. Daha sonra kalbin çıkarılmasını kolaylaştırmak için brakiyosefalik gövdeyi kavisli forsepslerle kelepçeleyin.Kalan kanı yıkamak ve pompalamak için kalbi derhal 0 ila 4 santigrat derecede KH tamponlu bir Petri kabına daldırın. Kalbi ikinci bir Petri kabına aktarın. Gereksiz dokuyu kesin ve aortu tanımlayın.Aortu kaldırmak ve aortu Langendorff aparatının künt iğnesine sokmak için iki oftalmik forseps kullanın. Sonra bir asistanın yardımıyla, 0 dikiş ipliği ile bir düğüm bağlayın. Perfüzyon akış regülatörünü açın.Balonu mitral kapaktan sol ventriküle doğru itin. 5 ila 10 milimetre cıva son diyastolik basıncı elde etmek için balonu damıtılmış suyla doldurun. EKG ve elektriksel stimülasyon elektrotlarını kalbe bağlayın.Kalbi, 37 santigrat derecede tutulan ceketli cam odanın ortasına yerleştirin. Kalbin odanın içinde 20 dakika boyunca dengelenmesine izin verin. Ardından, ceketli cam haznesindeki sıcaklığı 30 santigrat derecede tutmak için su banyosu sıcaklığını ayarlayın.Sıcaklık istenen seviyeye ulaştıktan sonra, dizüstü bilgisayar yazılımındaki elektriksel stimülasyon anahtarını etkinleştirin. Hayvan sürekli olarak uyarılan uzun süreli ventriküler fibrilasyon veya VF grubunun bir parçasıysa, 90 dakikalık elektriksel stimülasyona izin verin. 90 dakikalık VF'den sonra, 0.1 joule doğru akım defibrilasyonu vermek için elektrotlar kullanın.Aynı zamanda, ceketli cam oda içindeki sıcaklığın 10 dakika boyunca 37 santigrat dereceye yavaşça yükselmesini sağlamak için su banyosu sıcaklığını düzenleyin. Defibrilasyondan sonra, kalbin 60 dakika boyunca atmasına izin verin ve daha sonra yaklaşık 37 santigrat derecede% 10 potasyum klorür ile yavaş perfüzyonla atışı durdurun. Kreatin kinaz veya CK-MB testi ve histolojik analiz için kalbi çıkarın.Burada VF oranları, defibrilasyonun başarı oranı ve VF modelinin başarı oranı gösterilmektedir. Grup LC ve Grup HC sürekli elektriksel stimülasyon aldı ve böylece VF %100 başarı oranı ile gerçekleşti. Ancak grup HC, defibrilasyon için daha düşük başarı oranları göstermiştir.Elektriksel stimülasyonun beş dakika sonra kapatıldığı Grup LI ve Grup HI farklı VF oranlarına sahipti, ancak VF oranı her iki grupta da Grup LC ve Grup HC ile karşılaştırıldığında daha yavaştı. Hem Grup LC hem de Grup LI daha iyi defibrilasyon başarı oranlarına sahipti. Ancak genel olarak, Grup LC en yüksek model başarı oranına sahipken, Grup LI daha düşük bir model başarı oranına sahipti. Kalp hızı veya HR, koroner akım veya CF ve sol ventrikül basıncı farkı veya LVPD iyileşme oranları burada gösterilmektedir.Grup C'nin hemodinamiği deney sırasında stabil kaldı ve HR, CF ve LVPD'de hafif bir düşüş gösterdi. Düşük voltaj kaynaklı VF'ye sahip iki grup benzer performansa ve iyi bir iyileşme oranına sahipti. HR ve LVPD, bu gruplarda Grup C'ye kıyasla anlamlı olarak farklı değildi.Ancak KF'nin iyileşme oranı, Grup C.In kontrastına göre anlamlı derecede daha iyiydi, uzun süreli VF'ye indüklenen yüksek voltajlı iki grubun hemodinamik iyileşme oranı zayıftı ve yüksek voltajlı sürekli uyarılmış uzun süreli VF grubu en kötü iyileşme oranını gösterdi.Koroner efüzyon sıvılarının analizi, her iki yüksek voltaj grubunda da CK-MB düzeylerinin daha yüksek olduğunu göstermiştir. İki alçak gerilim grubu ile Grup C arasında fark saptanmadı.Hematoksilin ve eozin boyamasında Grup HC'de elektrot yanık bölgesi saptandı. Bu protokol kardiyovasküler cerrahide ventriküler fibrilasyon durması ve perfüzyon ile ilgili çalışmalar için uygundur.

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy

Kalp Fonksiyonu ve Enerji Kullanımı İzole Fare Kalpler Değerlendirilmesi 31 P NMR Spektroskopisi

Bioengineered mouse models have become powerful research tools in determining causal relationships between molecular alterations and models of ...

NADH Fluorescence Imaging of Isolated Biventricular Working Rabbit Hearts

İzole Biventriküler ve NADH Floresans Görüntüleme Tavşan Kalpler Çalışma

Since its inception by Langendorff1, the isolated perfused heart remains a prominent tool for studying cardiac physiology2. However, it is not well-suited ...

Reduction in Left Ventricular Wall Stress and Improvement in Function in Failing Hearts using Algisyl-LVR

Algisyl-LVR kullanarak Hearts başarısız Fonksiyon Sol Ventrikül Duvar Stres ve İyileştirme azalma

Injection of  Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat  patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

İzole Yöntemi<em&gt; Ex vivo</emBir Rat Modelinde&gt; Akciğer Perfüzyon: Sıçan EVLP Programı Geliştirme Öğrenilmiş Dersler

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique

Konvansiyonel Kapalı göğüs Tekniği ile Rat Ventriküler Fibrilasyon Modeli ve Resüsitasyon

A rat model of electrically-induced ventricular fibrillation followed by cardiac resuscitation using a closed chest technique that incorporates the basic ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Langendorff-perfüze sıçan Hearts indüksiyon ve İskemi-reperfüzyon Hasarı Değerlendirilmesi

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Domuz uzun süreli Kardiyovasküler Egzersiz Testi için Kateter Cerrahi Yerleştirme

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Telemetri kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Uzun süreli Tansiyon Ölçümü

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

İzole edilen fare kalpten interstisyel transüdao toplanması için ters kalp modeli

The present protocol describes a unique approach that enables the collection of cardiac transudate (CT) from the isolated, saline-perfused rat heart. ...

Standardized Model of Ventricular Fibrillation and Advanced Cardiac Life Support in Swine

Domuzda Standart Ventriküler Fibrilasyon Ve İleri Kardiyak Yaşam Desteği Modeli

Cardiopulmonary resuscitation after cardiac arrest, independent of its origin, is a regularly encountered medical emergency in hospitals as well as ...