Name: neutrophil lifespan extension with clon-g and an in vitro spontaneous death assay
Uploaded: 2023-05-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an In Vitro Spontaneous Death Assay at JoVE.com

تم دعم هذا المشروع من قبل مختبر Haihe لصندوق ابتكار النظام البيئي للخلايا (22HHXBSS00036 ، 22HHXBSS00019) ، وصندوق الابتكار للعلوم الطبية التابع للأكاديمية الصينية للعلوم الطبية (CAMS) (2021-I2M-1-040،2022-I2M-JB-015) ، وصندوق البحوث الخاص للجامعات المركزية ، وكلية الطب في اتحاد بكين (3332022062) ، وبرنامج دعم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (رقم 2021YJ0480).

وافقت لجنة رعاية واستخدام الحيوان في مستشفى بوسطن للأطفال والمختبر الرئيسي لأمراض الدم التجريبية (SKLEH) على جميع الإجراءات وراقبتها. يصور الشكل 1 مخططا انسيابيا لزراعة العدلات باستخدام CLON-G ومقايسة الموت في المختبر .
1. تمديد عمر العدلات مع CLON-G
<...

تلعب العدلات أدوارا حيوية في المناعة الفطرية والتكيفية، وينظم توازنها بإحكام. العدلات هي الكريات البيض الأكثر وفرة في الدم المحيطي البشري ، ولها دوران قوي وسريع. يمكن للبالغين الأصحاء إطلاق 1 × 109 عدلات / كجم يوميا من نخاع العظم28. وبالتالي أصبح موت العدلات أحد الألغاز ال?...

من المعروف أن العدلات تتكون من ترسانة من حبيبات السيتوبلازم الوفيرة ، نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد فوسفات (NADPH) أوكسيديز ، الإنزيمات المضادة للميكروبات ، والعضيات المختلفة التي تدافع ضد الميكروبات الغازية. بالإضافة إلى ذلك ، فهي شديدة الحركة وهي الخلايا الأولى التي يتم تجنيدها إلى موقع الالتهاب ، مما يعني أن العدلات هي خط الدفاع الأول لجهاز المناعة الفطري 1,2. وبالتالي أصبح العلاج بنقل الخلايا المحببة علاجا سريريا واعدا للعدوى المرتبطة بقلة العدلات لتعزيز مناعة العدلات بشكل عابر3،4،5. أظهرت الاكتشافات الحديثة بوضوح أن العدلات تعمل أيضا كمستجيبات متعددة الأوجه في العديد من السيناريوهات الفسيولوجيةالمرضية 6. متوسط عمر العدلات أقل من 24 ساعة ، وبالتالي ، فإن الأبحاث الأساسية حول العدلات وتطبيق دراسات العدلات صعبة للغاية بسبب القيود المتعلقة بالتلاعب الجيني المستقر والتخزين طويل الأجل7،8،9،10،11. هناك بعض خطوط الخلايا التي يمكن أن تعرض جزئيا بعض وظائف العدلات ، مثل HL-60 و PLB-985 و NB4 و Kasumi-1 والخلايا الجذعية المستحثةمتعددة القدرات 12. يمكن أن تحقق خطوط الخلايا هذه تحريرا فعالا للجينات وحفظها بالتبريد. ومع ذلك ، فإنها لا تزال تختلف اختلافا كبيرا عن العدلات الأولية ، وبالتالي ، لا يمكنها تلخيص وظائف العدلات بأمانة13. وبالتالي ، فإن معظم الأبحاث في هذا المجال لا تزال تعتمد على العدلات الأولية المعزولة حديثا. لا يزال المجال يعتمد على توليد فئران مشروطة مكلفة وتستغرق وقتا طويلا للتحقيق في وظائف جينية محددة في العدلات ، ولكن لا توجد نماذج بشرية حاليا.
بعد أن بذلنا جهودنا في استكشاف العمليات غير المتجانسة التي ينطوي عليها موت العدلات والمسارات المتعددة التي تنظم هذه العمليات 14,15 ، تم الإبلاغ مؤخرا عن علاج جديد يسمى CLON-G (نفاذية الغشاء الليزوزومي - المؤكسد - تثبيط التنخر بالإضافة إلى عامل تحفيز مستعمرة المحببات) 16. يتكون CLON-G من Q-VD-oph (كينوليل - فاليل-O-ميثيل أسبارتيل- [-2،6-ثنائي فلورو فينوكسي] - ميثيل كيتون) ، Hsp70 (بروتين الصدمة الحرارية 70) ، DFO (ديفيروكسامين) ، NAC (N-أسيتيل سيستئين) ، Nec-1s (نيكروستاتين -1s) ، و G-CSF (عامل تحفيز مستعمرة المحببات). يتم التوسط في الموت التلقائي للعدلات من خلال مسارات متعددة ، بما في ذلك موت الخلايا المبرمج ، والتنخر ، والبيروبتوس. Q-VD-oph يثبط موت الخلايا المبرمج للعدلات كمثبط لعموم الكاسباز عن طريق استهداف الكاسباز 1 ، الكاسباز 3 ، الكاسباز 8 ، والكاسباز 917. يعتمد نخر العدلات على مسار إشارات يتضمن بروتين كيناز -1 المتفاعل مع المستقبلات (RIPK1) وبروتين شبيه بمجال كيناز مختلط السلالة (MLKL)18. كمثبط ل RIPK1 ، تمنع Nec-1s نخر العدلات. يمكن أن يمنع Hsp70 و DFO نفاذية الغشاء الليزوزومي (LMP) ، والتي يمكن أن تحفز موت الخلايا المبرمجالعدلات 19 و pyroptosis20. تلعب أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) أدوارا حيوية في موت العدلات عن طريق التوسط في LMP19 وموت الخلايا المبرمج21 وتثبيط إشارات البقاء على قيد الحياة22. كمضاد للأكسدة يمكن أن يقلل من تراكم أنواع الأكسجين التفاعلية ، يؤخر NAC موت العدلات. كعامل نمو ، ينشط G-CSF إشارات بقاء العدلات ويمنع موت الخلايا المبرمج الناجم عن كالبين23,24. من خلال استهداف مسارات الموت العفوية المتعددة للعدلات في وقت واحد ، يمكن تمديد عمر العدلات بشكل فعال إلى أكثر من 5 أيام دون المساس بوظيفتها. يوسع علاج CLON-G إمكانيات الحفاظ على العدلات ونقلها والتلاعب بالجينات ، والتي يمكن أن تسرع البحث في مجتمع العدلات. وفي الوقت نفسه ، بناء على معرفة موت العدلات ، يمكن أن تسبب البروتوكولات المعتمدة حاليا لمقايسات موت الخلايا أضرارا غير متوقعة للعدلات14 ، لذلك تم تحسين هذه البروتوكولات لتكون أكثر ملاءمة لدراسات العدلات. يقدم هذا التقرير بروتوكولات مفصلة لزراعة العدلات باستخدام CLON-G ومقايسة موت الخلايا في المختبر لعدلات الفئران باستخدام قياس التدفق الخلوي والتصوير الفلوري. CLON-G فعال على كل من العدلات الفأر والإنسان. ومع ذلك ، يتم عرض عينات الماوس هنا لتبسيط هذا البروتوكول. تركيز NAC هو 1 mM للعدلات الفئران و 10 μM للعدلات البشرية. Hsp70 خاص بالأنواع ، وبالتالي ، يجب استخدامه وفقا لمصدر العدلات. بالنسبة لهذا البروتوكول ، لا يهم ما إذا كانت العدلات معزولة عن الدم المحيطي أو نخاع العظم وكيف يتم عزلها.
بالنسبة للدراسة الحالية ، تم عزل العدلات من نخاع عظم الفأر لتحقيق ما يكفي من العدلات للتجارب ، حيث يمكن الحصول على حوالي 1 × 10 7-1.5 × 107 عدلات من نخاع العظم ، بينما يمكن عزل 1 × 10 6 عدلات فقط من الدم المحيطي لفأر واحد عمره 8-12 أسبوعا C57BL /6 (من أي من الجنسين). تم إجراء الطرد المركزي المتدرج لتجنب الضرر المحتمل والتنشيط من التحفيز الميكانيكي لفرز FACS أو فرز MACS.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4612</td>
			<td>Filtrate prepared CLON-G components.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL micro centrifuge tube</td>
			<td>LABSELECT</td>
			<td>MCT-001-150</td>
			<td>Lab consumable.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Centrifuge Tubes</td>
			<td>LABSELECT</td>
			<td>CT-002-15</td>
			<td>Lab consumable.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well cell culture plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>351147</td>
			<td>Neutrophil culture plate.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Centrifuge Tubes</td>
			<td>LABSELECT</td>
			<td>CT-002-50</td>
			<td>Lab consumable.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSRII</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>Instrument for flow cytometry analysis of neutrophil death.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride (CaCl2)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C4901</td>
			<td>Assitant of Annexin-V binding&#160; to phosphatidylserine.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Perkinelmer</td>
			<td>UltraVIEW VOX</td>
			<td>Instrument for fluorescent analysis of neutrophil death.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal plate</td>
			<td>NEST</td>
			<td>801001-20mm</td>
			<td>Lab consumable for fluorescent image assay.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Counting beads</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>C36950</td>
			<td>Quantification in flow cytometry analysis of neutrophil death.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DFO</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D9533</td>
			<td>Component of CLON-G. LMP inhibitor.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide ( DMSO)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td>Solvent for Q-VD-oph and Nec-1s.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099141C</td>
			<td>Component of neutrophil culture basic medium. Nutrition supply.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-Annexin-V</td>
			<td>BD</td>
			<td>51-65874X</td>
			<td>Annexin-V can bind to phosphatidylserine of aged cells.This is at FITC channel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hsp70</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab113187</td>
			<td>Component of CLON-G. LMP inhibitor.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAC</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A9165</td>
			<td>Component of CLON-G. Antioxidant.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nec-1s</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>852391-15-2</td>
			<td>Component of CLON-G. Necroptosis inhibitor.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin Solution (PS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td>Component of neutrophil culture basic medium. Antibiotics to protect cells from bacteria comtamination.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium Iodide (PI)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>421301</td>
			<td>For neutrophil death assay. A small fluorescent molecule that binds to DNA&#160; but cannot passively traverse into cells that possess an intact plasma membrane.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-VD-oph</td>
			<td>Selleck chem</td>
			<td>S7311</td>
			<td>Component of CLON-G. Pan-caspase inhibitor.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor for Injection (CHO cell)(G-CSF)</td>
			<td>Chugai Pharma China</td>
			<td>GRANOCYTE</td>
			<td>Component of CLON-G.&#160; Promote neutrophil survival through Akt pathway.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round-Bottom Polystyrene Tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>100-0102</td>
			<td>Lab consumable for flow cytometry analysis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI1640</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11875500BT</td>
			<td>Component of neutrophil culture basic medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>LEAGENE</td>
			<td>R00641</td>
			<td>Solution for flow cytometry analysis of neutrophil death.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td>FENG CHUAN</td>
			<td>13-011-00029</td>
			<td>pH adjustion for NAC.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wright-Giemsa Stain Solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1020</td>
			<td>Neutrophil cytospin staining.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

neutrophil lifespan extension with clon-g and an in vitro spontaneous death assay

متوسط عمر العدلات أقل من 24 ساعة ، مما يحد من الأبحاث الأساسية حول العدلات وتطبيق دراسات العدلات. أشار بحثنا السابق إلى أن المسارات المتعددة يمكن أن تتوسط في الموت التلقائي للعدلات. تم تطوير كوكتيل من خلال استهداف هذه المسارات في وقت واحد ، وتثبيط نفاذية غشاء الكاسباس - الليزوزومي - المؤكسد - التنخر بالإضافة إلى عامل تحفيز مستعمرة المحببات (CLON-G) ، والذي يطيل عمر العدلات إلى أكثر من 5 أيام دون المساس بشكل كبير بوظيفة العدلات. في الوقت نفسه ، تم تطوير بروتوكول موثوق ومستقر لتقييم وتقييم موت العدلات. في هذا العمل ، نظهر أن CLON-G يمكن أن يطيل عمر العدلات في المختبر إلى أكثر من 5 أيام ، ونعرض إطالة عمر العدلات باستخدام FACS والفحص المجهري الفلوري متحد البؤر. يقدم هذا التقرير إجراءات لإعداد CLON-G ويعرض مقايسة الموت التلقائي في المختبر للعدلات ، والتي يمكن استخدامها لدراسة العدلات ولاستجواب موت العدلات لاحقا ، وبالتالي توفير مورد موثوق لمجتمع العدلات.

لم يتأثر مورفولوجيا رايت جيمسا الملطخة (الشكل 2A-D) والأنماط الظاهرية FACS (الشكل 2E-J) للعدلات المعالجة CLON-G. كانت صلاحية العدلات المعالجة ب CLON-G عند 24 ساعة حوالي 90٪ + بناء على تحليل قياس التدفق الخلوي (الشكل 3) و?...

Watch this Scientific Journal Video about Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an In Vitro Spontaneous Death Assay at JoVE.com

Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an In Vitro Spontaneous Death Assay

يفصل هذا البروتوكول إعداد CLON-G لإطالة عمر العدلات إلى أكثر من 5 أيام ويوفر إجراء موثوقا به لتقييم موت العدلات باستخدام قياس التدفق الخلوي والفحص المجهري الفلوري متحد البؤر.

تمديد عمر العدلات مع CLON-G ومقايسة الموت التلقائي في المختبر

The average lifespan of a neutrophil is less than 24 h, which limits basic research on neutrophils and the application of neutrophil studies. Our previous ...

يوفر بروتوكولنا وسيط كوكتيل لإطالة عمر العدلات إلى أكثر من خمسة أيام دون المساس بوظائف العدلات. كما أنه يوفر غسيل الكلى الموثوق به في المختبر للعدلات. يوسع علاج CLON-G إمكانيات الحفاظ على العدلات ونقلها والتلاعب بالجينات ، والتي يمكن أن تسرع البحث في مجتمع العدلات.للبدء ، قم بإعداد الوسيط الأساسي عن طريق إضافة RPMI 1640 FBS و pen-strep إلى أنبوب سعة 50 ملليلتر. في الوقت نفسه ، قم بإذابة جميع حلول المخزون لمكونات CLON-G على الجليد. ثم تمييع HSP 70 و 200 ميكروغرام لكل ملليلتر من G-CSF في الوسط الأساسي.نقل 976 ميكرولتر من الوسط الأساسي إلى أنبوب طرد مركزي 15 ملليلتر. لهذا ، أضف مكونات CLON-G لتحضير ملليلتر واحد من 2x وسط CLON-G كما هو موضح في المخطوطة. بعد ذلك ، قم بإعداد ثقافة العدلات عن طريق تعليق العدلات الفأر المعزولة في الوسط الأساسي.أضف وسط CLON-G ، متبوعا بالوسط الأساسي إلى 24 صفيحة مستزرعة جيدا غير الأنسجة. ثم أضف 100 ميكرولتر من تعليق الخلية المحضر واسحب بلطف ثلاث إلى أربع مرات. احتضان طبق الاستزراع عند 37 درجة مئوية مع إمداد 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.تلطيخ العدلات المستزرعة مع cytospin وتحليلها باستخدام المجهر الضوئي. لتحليل قياس التدفق الخلوي ، أضف ملليلتر واحد من وسط الخلية إلى مزرعة خلايا العدلات المزروعة بين عشية وضحاها. امزج وسط زراعة الخلايا عن طريق سحبه برفق من خمس إلى سبع مرات ونقل 100 ميكرولتر من هذا الخليط إلى أنبوب قياس التدفق الخلوي في النقاط الزمنية المطلوبة.في نفس الوقت ، دوامة حبات العد وماصة 10 ميكرولتر من محلول حبة لنفس أنبوب قياس التدفق الخلوي الذي يحتوي على وسط الخلية. أضف 10 ميكرولتر من مزيج التلوين المعد مسبقا إلى أنبوب قياس التدفق الخلوي هذا واحتضانه لمدة خمس دقائق في الثلاجة تحت الظلام. ثم أضف 100 ميكرولتر من المياه المالحة إلى الأنبوب واخلطها جيدا للتوزيع المتساوي لخرز العد والخلايا.أخيرا ، قم بإجراء تحليل قياس التدفق الخلوي لتعليق الخلية كما هو موضح في مخطوطة النص. لمقايسة الصور الفلورية ، أضف ملليلتر من تعليق الخلية لكل لوحة متحدة البؤر واحتضانها عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون. وفي الوقت نفسه ، قم بإذابة غرام واحد من كلوريد الكالسيوم في 45 ملليلتر من المياه المالحة وقم بترشيحه بوحدة ترشيح 0.2 ميكرومتر.قم بإزالة اللوحة البؤرية برفق في النقطة الزمنية المطلوبة. تلطيخ الخلايا مع 10 ميكرولتر من FITC-Annexin-V ، PI وكلوريد الكالسيوم لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة. ثم باستخدام مجهر مضان متحد البؤر ، التقط الصور باستخدام القنوات المطلوبة.في الدراسة الحالية ، لم يتأثر مورفولوجيا العدلات في وسط CLON-G حتى بعد خمسة أيام. علاوة على ذلك ، أظهرت الأنماط الظاهرية للفاكس خلايا سليمة بعد العلاج. أظهر تحليل قياس التدفق الخلوي وجود عدد إيجابي من العدلات غير المعالجة في Annexin-V ويمكن أن يكون فقدان السكان بسبب حمض رباعي الخليك ثنائي الأمين في وسط الخلية.ومع ذلك ، فإن صلاحية العدلات المعالجة CLON-G في 24 ساعة كانت أكثر من 90٪ تقريبا أكدت مقايسات الصور الفلورية أيضا صلاحية الخلية للعدلات المعالجة CLON-G. أظهرت العدلات المستزرعة في الوسط الأساسي لمدة 24 ساعة خلايا منتفخة وقد يكون فقدان هذه الخلايا ناتجا عن اهتزاز أو سحب الصفيحة متحدة البؤر. يمكن أن تؤثر تركيزات وتأثيرات مركب CLON-G بشكل كبير على اختبارات العدلات.إذا كان ذلك ممكنا ، تجنب تعديلها. فحوصات العدلات شاقة ومكلفة ومحدودة للغاية في التطبيق السريري بسبب عمرها القصير. هذه الطريقة تتغلب جزئيا على هذه العقبات.

Research

JoVE Journal

Biology

Neutrophil Lifespan Extension with CLON-G and an In Vitro Spontaneous Death Assay

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis Extension Response PER Assay in Drosophila

خرطوم ملحق مواجهتها (PER) الفحص في ذبابة الفاكهة

Proboscis extension response (PER) is a taste behavior assay that has been used in flies as well as in honeybees.
On the surface of the fly's mouth ...

An In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

An In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

و في المختبر غزو الورم FluoroBlok الفحص

The hallmark of metastatic cells is their ability to invade through the basement membrane and migrate to other parts of the body. Cells must be able to ...

A &#946;-glucuronidase (GUS) Based Cell Death Assay

A ÃƒÅ½Ã‚Â²-glucuronidase GUS Based Cell Death Assay

A β غلوكورونيداز (GUS) موت الخلية استنادا الفحص

We have developed a novel transient plant expression system that simultaneously expresses the reporter gene, &beta;-glucuronidase (GUS), with putative ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

قياس عمر في<em&gt; ذبابة الفاكهة الدروسوفيلا</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

Isolation of Native Soil Microorganisms with Potential for Breaking Down Biodegradable Plastic Mulch Films Used in Agriculture

عزل الكائنات الدقيقة في التربة الأصلية مع المحتملة لتحطيم القابلة للتحلل أفلام الجرثومة البلاستيكية المستخدمة في الزراعة

Fungi native to agricultural soils that colonized commercially available biodegradable mulch (BDM) films were isolated and assessed for potential to ...

In Vitro SUMOylation Assay to Study SUMO E3 Ligase Activity

In Vitro SUMOylation Assay to Study SUMO E3 Ligase Activity

في المختبر تحليل سومويليشن لدراسة النشاط ليجاسى E3 السومو

Small ubiquitin-like modifier (SUMO) modification is an important post-translational modification (PTM) that mediates signal transduction primarily ...

Optimized Scratch Assay for In Vitro Testing of Cell Migration with an Automated Optical Camera

Optimized Scratch Assay for In Vitro Testing of Cell Migration with an Automated Optical Camera

محسن المقايسة الصفر للاختبار في المختبر للهجرة الخلية مع كاميرا بصرية الآلي

Cell migration is an important process that influences many aspects of health, such as wound healing and cancer, and it is, therefore, crucial for ...

Imaging Molecular Adhesion in Cell Rolling by Adhesion Footprint Assay

التصوير الالتصاق الجزيئي في الخلية المتداول بواسطة Adhesion بصمة المقايسة

Rolling adhesion, facilitated by selectin-mediated interactions, is a highly dynamic, passive motility in recruiting leukocytes to the site of ...

Histology Basics and Cell Death Detection in Honeybee Tissue

أساسيات الأنسجة واكتشاف موت الخلايا في أنسجة نحل العسل

Honeybees (Apis mellifera L.) inside the hive (nurse workers and other hive bees) and outside the hive (foragers) are exposed to climate and weather ...

Real-Time Detection of Reactive Oxygen Species Production in Immune Response in Rice with a Chemiluminescence Assay

الكشف في الوقت الحقيقي عن إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية في الاستجابة المناعية في الأرز باستخدام مقايسة التلألؤ الكيميائي

Reactive oxygen species (ROS) play vital roles in a variety of biological processes, including the sensing of abiotic and biotic stresses. Upon pathogen ...