Name: establishing a device for sleep deprivation in mice
Uploaded: 2023-09-22T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (82230014, 81930007, 82270342), Shanghai Outstanding Academic Leaders Program (18XD1402400), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (22QA1405400, 201409005200, 20YF1426100), Shanghai Pujiang Talent Program (2020PJD030), SHWSRS (2023-62), Shanghai Clinical Research Center for Aging and Medicine (19MC1910500) og Postgraduate Innovation Program of Bengbu Medical College (Byycxz21075).

Alle dyreforsøgsprotokoller i denne undersøgelse blev godkendt af laboratoriedyrets velfærdsetikkomité på Renji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University. C57BL/6J-hanmus i alderen 8 til 10 uger blev anvendt i undersøgelsen. Dyrene blev hentet fra en kommerciel kilde (se materialetabel). De vigtigste dele, der kræves til etablering af udstyret, er anført i figur 1A.
1. Forberedelse af søvnberøvelsesanordningen</st...

<ol>
	<li>Yang, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+sleep+deprivation+exacerbates+systemic+inflammation+and+psychiatry+disorders+through+gut+microbiota+dysbiosis+and+disruption+of+circadian+rhythms.">Acute sleep deprivation exacerbates systemic inflammation and psychiatry disorders through gut microbiota dysbiosis and disruption of circadian rhythms.</a> Microbiological Research. 268, 127292 (2023).</li><li>Alanazi, M. T., Alanazi, N. T., Alfadeel, M. A., Bugis, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+and+quality+of+life+among+uterine+cancer+survivors:+systematic+review.">Sleep deprivation and quality of life among uterine cancer survivors: systematic review.</a> Supportive Care In Cancer : Official Journal of the Multinational Association of Supportive Care In Cancer. 30 (3), 2891-2900 (2022).</li><li>Tobaldini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep,+sleep+deprivation,+autonomic+nervous+system+and+cardiovascular+diseases.">Sleep, sleep deprivation, autonomic nervous system and cardiovascular diseases.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 74, 321-329 (2017).</li><li>Arthaud, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paradoxical+(REM)+sleep+deprivation+in+mice+using+the+small-platforms-over-water+method:+polysomnographic+analyses+and+melanin-concentrating+hormone+and+hypocretin/orexin+neuronal+activation+before,+during+and+after+deprivation.">Paradoxical (REM) sleep deprivation in mice using the small-platforms-over-water method: polysomnographic analyses and melanin-concentrating hormone and hypocretin/orexin neuronal activation before, during and after deprivation.</a> Journal of Sleep Research. 24 (3), 309-319 (2015).</li><li>Sar&#233;, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+sleep+restriction+in+developing+male+mice+results+in+long+lasting+behavior+impairments.">Chronic sleep restriction in developing male mice results in long lasting behavior impairments.</a> Frontiers In Behavioral Neuroscience. 13, 90 (2019).</li><li>Roman, V., Vander Borght, K., Leemburg, S. A., Vander Zee, E. A., Meerlo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+restriction+by+forced+activity+reduces+hippocampal+cell+proliferation.">Sleep restriction by forced activity reduces hippocampal cell proliferation.</a> Brain Research. 1065 (1-2), 53-59 (2005).</li><li>Zhao, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+sleep+restriction+induces+cognitive+deficits+and+cortical+beta-amyloid+deposition+in+mice+via+BACE1-antisense+activation.">Chronic sleep restriction induces cognitive deficits and cortical beta-amyloid deposition in mice via BACE1-antisense activation.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 23 (3), 233-240 (2017).</li><li>Lord, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+life+sleep+disruption+potentiates+lasting+sex-specific+changes+in+behavior+in+genetically+vulnerable+Shank3+heterozygous+autism+model+mice.">Early life sleep disruption potentiates lasting sex-specific changes in behavior in genetically vulnerable Shank3 heterozygous autism model mice.</a> Molecular Autism. 13 (1), 35 (2022).</li><li>Sinton, C. M., Kovakkattu, D., Friese, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+novel+method+to+interrupt+sleep+in+the+mouse.">Validation of a novel method to interrupt sleep in the mouse.</a> Journal of Neuroscience Methods. 184 (1), 71-78 (2009).</li><li>Rotenberg, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+after+immobilization+stress+and+sleep+deprivation:+common+features+and+theoretical+integration.">Sleep after immobilization stress and sleep deprivation: common features and theoretical integration.</a> Critical Reviews in Neurobiology. 14 (3-4), 225-231 (2000).</li><li>Kim, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+modulates+adiponectin+expression+on+murine+colitis+with+sleep+deprivation.">Melatonin modulates adiponectin expression on murine colitis with sleep deprivation.</a> World Journal of Gastroenterology. 22 (33), 7559 (2016).</li><li>Barf, R. P., Scheurink, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+disturbances+and+glucose+homeostasis.">Sleep disturbances and glucose homeostasis.</a> European Endocrinology. 7, 14-18 (2011).</li><li>Rio, D. C., Ares, M., Hannon, G. J., Nilsen, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+RNA+using+TRIzol+(TRI+reagent).">Purification of RNA using TRIzol (TRI reagent).</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2010 (6), (2010).</li><li>Libus, J., &#352;torchov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+cDNA+generated+by+reverse+transcription+of+total+RNA+provides+a+simple+alternative+tool+for+quantitative+RT-PCR+normalization.">Quantification of cDNA generated by reverse transcription of total RNA provides a simple alternative tool for quantitative RT-PCR normalization.</a> Biotechniques. 41 (2), 156-164 (2006).</li><li>Nolan, T., Hands, R. E., Bustin, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+mRNA+using+real-time+RT-PCR.">Quantification of mRNA using real-time RT-PCR.</a> Nature Protocols. 1 (3), 1559-1582 (2006).</li><li>Mang, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+piezoelectric+system+as+an+alternative+to+electroencephalogram/electromyogram+recordings+in+mouse+sleep+studies.">Evaluation of a piezoelectric system as an alternative to electroencephalogram/electromyogram recordings in mouse sleep studies.</a> Sleep. 37 (8), 1383-1392 (2014).</li><li>Maret, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homer1a+is+a+core+brain+molecular+correlate+of+sleep+loss.">Homer1a is a core brain molecular correlate of sleep loss.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104 (50), 20090-20095 (2007).</li><li>Li, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+deprivation+hastens+Alzheimer-like+pathologies+in+a+human+tau-overexpressed+mouse+model+via+activation+of+cdk5.">Olfactory deprivation hastens Alzheimer-like pathologies in a human tau-overexpressed mouse model via activation of cdk5.</a> Molecular neurobiology. 53, 391-401 (2016).</li><li>Sousa, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invariant+Natural+Killer+T+cells+resilience+to+paradoxical+sleep+deprivation-associated+stress.">Invariant Natural Killer T cells resilience to paradoxical sleep deprivation-associated stress.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 90, 208-215 (2020).</li><li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+circadian+rhythms+by+shift+work+exacerbates+reperfusion+injury+in+myocardial+infarction.">Disruption of circadian rhythms by shift work exacerbates reperfusion injury in myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 79 (21), 2097-2115 (2022).</li><li>Miller, M. A., Cappuccio, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation,+sleep,+obesity+and+cardiovascular+disease.">Inflammation, sleep, obesity and cardiovascular disease.</a> Current Vascular Pharmacology. 5 (2), 93-102 (2007).</li><li>Minkel, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+potentiates+HPA+axis+stress+reactivity+in+healthy+adults.">Sleep deprivation potentiates HPA axis stress reactivity in healthy adults.</a> Health Psychology. 33 (11), 1430 (2014).</li><li>Bishir, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+and+neurological+disorders.">Sleep deprivation and neurological disorders.</a> BioMed Research International. 2020, 5764017 (2020).</li><li>Franken, P., Tobler, I., Borb&#233;ly, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+temperature+and+EEG+slow-wave+activity+in+the+rat:+analysis+of+vigilance+state+related+changes.">Cortical temperature and EEG slow-wave activity in the rat: analysis of vigilance state related changes.</a> Pflugers Archiv : European Journal of Physiology. 420 (5-6), 500-507 (1992).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chronic+sleep+fragmentation+on+wake-active+neurons+and+the+hypercapnic+arousal+response.">Effects of chronic sleep fragmentation on wake-active neurons and the hypercapnic arousal response.</a> Sleep. 37 (1), 51-64 (2014).</li><li>Jones, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early-life+sleep+disruption+increases+parvalbumin+in+primary+somatosensory+cortex+and+impairs+social+bonding+in+prairie+voles.">Early-life sleep disruption increases parvalbumin in primary somatosensory cortex and impairs social bonding in prairie voles.</a> Science Advances. 5 (1), (2019).</li></ol>

Musemodeller for søvnmangel er afgørende for at studere virkningerne af søvnforstyrrelser på forskellige sygdomme, herunder hjerte-kar-sygdomme21, psykiatriske tilstande22 og neurologiske lidelser23. Blandt de eksisterende søvnmangelstrategier hos mus er fysiske tilgange, der involverer gentagne kortvarige afbrydelser af søvn, de mest almindeligt anvendte 5,7,12<sup class="xr...

Døgnrytmeforstyrrelse refererer til desynkronisering mellem det ydre miljø eller adfærd og det endogene biologiske ur. En af de mest almindelige årsager til forstyrrelser i døgnrytmen er søvnmangel1. Søvnmangel påvirker ikke kun menneskers sundhed negativt, men øger også risikoen for mange sygdomme, herunder kræft2 og hjerte-kar-sygdomme3. De mekanismer, der ligger til grund for de skadelige virkninger af søvnmangel, er imidlertid stort set ukendte, og etablering af søvnberøvelsesmodeller er afgørende for at øge vores forståelse i denne henseende.
Forskellige metoder til søvnmangel hos mus er blevet rapporteret, såsom brugen af vandplatforme4, skånsom håndtering5, glidende stangkamre6, roterende tromler7 og buromrøringsprotokoller 5,8,9. Glidende stangkamre fejer automatisk stænger over bunden af buret og tvinger musene til at gå over dem og holde sig vågne. Cage agitation protokoller involverer placering bure på laboratorie orbital shakers, hvilket resulterer i effektiv søvnforstyrrelse. Selvom disse metoder er automatiske og effektive, kan de være dyre, når flere enheder skal køre parallelt, især til specifikke undersøgelsesdesign, der involverer et stort antal søvnberøvede mus, der er nødvendige for cirkadisk genprofilering. På den anden side er vandplatforme og skånsomme håndteringsprotokoller billigere og enklere metoder, der almindeligvis bruges til at fremkalde søvnmangel. Vandplatformen tillader imidlertid ikke automatisk styring af forudspecificerede deprivationshvilecyklusser10,11, og skånsom håndtering kræver kontinuerlig årvågenhed fra forskerne for at forstyrre søvnen. Derudover kan andre modaliteter, som roterende trommer, forvirres af social isolation eller stress12.
Inspireret af den orbital shaker-baserede metode sigter vi mod at introducere en protokol til etablering af en vippeplatformbaseret enhed til søvnmangel hos mus. Denne metode er billig, effektiv, minimalt stressende, kontrollerbar og automatiseret. Den nuværende protokol giver os mulighed for at oprette en vippeplatformbaseret enhed til en pris, der er cirka ti gange billigere end orbitalrystere, baseret på vores tilgængelighed. Denne enhed forstyrrede effektivt søvn hos gruppehusede mus og inducerede karakteristiske ændringer af søvnmangel med minimal stressrespons. Det vil især være nyttigt for forskere, der er interesserede i at undersøge virkningerne og de underliggende mekanismer for søvnmangel på patogenesen af flere sygdomme, især når undersøgelsen involverer søvnmangel i flere grupper parallelt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL centrifuge tube</td>
			<td>NEST</td>
			<td>602002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine ELISA kit</td>
			<td>Ruifan technology</td>
			<td>RF8885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal cage</td>
			<td>ZeYa tech</td>
			<td>MJ2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood glucose meter</td>
			<td>YuYue</td>
			<td>580</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J Mice</td>
			<td>JieSiJie Laboratory Animal</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Age: 8-10 weeks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Connecting rod</td>
			<td>ShengXiang Tech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length:&#160; 20 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooling fan</td>
			<td>LiMing</td>
			<td>EFB0805VH</td>
			<td>Supply voltage: 5 V; Power consumption: 1.2 W; Air flow: 26.92 cfm; Dimensions: 40 mm * 40 mm * 56 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kit</td>
			<td>Elabscience</td>
			<td>E-OSEL-M0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EEG/EMG recording and analysis system</td>
			<td>Pinnacle Technology</td>
			<td>8200-K1-iSE3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>20071302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mosquito hemostats</td>
			<td>FST</td>
			<td>13011-12</td>
			<td>Surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Motor and motor mount</td>
			<td>MingYang</td>
			<td>MY36GP-555</td>
			<td>Supply voltage: 24 V dc; Shaft diameter: 8 mm; Maximum output torque: 100 Kgf.cm; Maximum output speed: 10 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop 2000c</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>NanoDrop 2000c</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power brick adapter</td>
			<td>MingYang</td>
			<td>QiYe-0243</td>
			<td>Input voltage: 110-220V ac; Output voltage: 24 V dc; Outputcurrent: 2 A; Cable length: 2 m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>qPCR commercial kit</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>Q711-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>qPCR measurement equipment</td>
			<td>Roche</td>
			<td>480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectangle platform attached with a screw-compatible steel cylinder</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Width: 20 cm; length: 25 cm; length of the cylinder: 30 cm, thickness: 2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reverse RNA to cDNA commercial kit</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>R323-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw and nut</td>
			<td>Guwanji</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Inner diameter: 6 mm, 12 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw-compatible steel cylinder</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length: 300 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slotted steel channels</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length: 400 mm or 500 mm, thickness: 2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Time contactor</td>
			<td>LiXiang</td>
			<td>DH48S-S</td>
			<td>Supply voltage: 110-220 V ac; Units measured: hours, minutes, seconds; Contact configuration: DPDT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>R401-01</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing a device for sleep deprivation in mice

Døgnrytmeforstyrrelse refererer til desynkronisering mellem det ydre miljø eller adfærd og det endogene molekylære ur, hvilket væsentligt forringer helbredet. Søvnmangel er en af de mest almindelige årsager til forstyrrelser i døgnrytmen. Forskellige metoder (f.eks. platforme på vandet, skånsom håndtering, glidende stangkamre, roterende tromler, orbitale ryster osv.) er blevet rapporteret for at fremkalde søvnmangel hos mus for at undersøge dens virkninger på helbredet. Den aktuelle undersøgelse introducerer en alternativ metode til søvnmangel hos mus. En automatiseret vippeplatformbaseret enhed blev designet, der er omkostningseffektiv og effektivt forstyrrer søvn i gruppehusede mus med justerbare tidsintervaller. Denne enhed inducerer karakteristiske ændringer af søvnmangel med minimal stressrespons. Derfor kan denne metode vise sig nyttig for forskere, der er interesserede i at studere virkningerne og de underliggende mekanismer for søvnmangel på patogenesen af flere sygdomme. Desuden tilbyder det en omkostningseffektiv løsning, især når flere søvnberøvelsesenheder skal køre parallelt.

Den etablerede enhed til søvnmangel hos mus er vist i figur 1D. På dag 7 efter påbegyndelse af søvnmangel indikerede elektroencefalogram (EEG) og elektromyografi (EMG) overvågning16, at enheden signifikant reducerede søvnvarigheden og øgede vågenhedsvarigheden hos mus (figur 2A-D). I mellemtiden øgede den nuværende protokol signifikant adenosinopbygning og mRNA-niveauer af Homer1a i hje...

Watch this Scientific Journal Video about Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice at JoVE.com

Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice

Denne protokol skitserer en metode til opsætning af en omkostningseffektiv vippeplatformbaseret enhed, der anvendes til at fremkalde søvnmangel hos mus. Denne enhed har vist sig at være effektiv til at forårsage forstyrrelser i elektroencefalogram (EEG) -dokumenterede søvnmønstre samt fremkalde metaboliske og molekylære ændringer forbundet med søvnmangel.

Etablering af en enhed til søvnmangel hos mus

Circadian rhythm disruption refers to the desynchronization between the external environment or behavior and the endogenous molecular clock, which ...

De mekanismer, der ligger til grund for de skadelige virkninger af søvnmangel, er stort set ukendte, og etablering af søvnberøvelsesmodeller er afgørende for at øge vores forståelse i denne henseende. Denne metode, de er billige, effektive, minimalt stressende, kontrollerbare og automatiserede. Den nuværende protokol giver os mulighed for at oprette en vippeplatformbaseret enhed til en pris, der er cirka 10 gange billigere end orbital shakers baseret på vores tilgængelighed.Begynd med at sikre den ene ende af en 50 centimeter slidset stålkanal midt i en 40 centimeter slidset stålkanal med skruer. Dette vil gøre en T-formet struktur. Placer de to T-formede strukturer lodret 30 centimeter fra hinanden.Forbind bunden af strukturer med en 30 centimeter skruekompatibel stålcylinder ved hjælp af skruer. Placer derefter en stålrektangelplatform mellem de to T-formede strukturer. Fastgør hver ende af en 30 centimeter skruekompatibel stålcylinder med to lejer.Brug skruer til at fastgøre et motorbeslag på en af de T-formede strukturer 25 centimeter ned fra toppen. Installer nu en motor på denne motorholder med skruer. Fastgør en køleventilator med selvlåsende bånd på den T-formede struktur under motoren.Brug skruer til at fastgøre lejeenden af en forbindelsesstang til et platformhjørne mod motoren og den anden ende til motorakslen. Brug derefter en elektrisk boremaskine til at lave to fire millimeter huller i hvert hjørne af en plastbeholder. På venstre side af beholderen bores yderligere to fire millimeter huller sammen med et lavere seks millimeter hul.Lås plastbeholderen på rektangelplatformen ved hjælp af selvlåsende bånd gennem de borede hjørnehuller. Fastgør vandflasken på venstre side af plastbeholderen ved hjælp af selvlåsende bånd gennem de to fire millimeter huller, hvor dysen går gennem hullet på seks millimeter. Tilslut nu strømstenadapterens udgangsledninger til motorens to terminaler.Tilslut derefter indgangsledningerne til tidskontaktoren. Tryk på tegnknapperne længst til højre på henholdsvis venstre og højre halvdel af tidskontaktoren, indtil M vises på de mekaniske tællere på begge sider. Følg denne handling ved at trykke på de midterste tegnknapper på begge halvdele af tidskontaktoren, indtil 5M vises på de mekaniske tællere.Fuldfør denne opsætning ved at trykke på tegnknappen længst til venstre i venstre halvdel af tidskontaktoren, indtil 15M vises på den venstre mekaniske tæller. Placer derefter musen i buret. Tænd derefter tidskontaktoren og køleventilatoren.På dag syv efter søvnberøvelsens begyndelse indikerede EEG- og EMG-overvågning, at søvnberøvelsesenheden signifikant reducerede søvnvarigheden og øgede vågenhedsvarigheden hos mus. Sammenlignet med kontrollen blev der observeret øgede niveauer af vellykkede søvnberøvelsesmarkører såsom adenosinopbygning og Homer1a mRNA-niveauer i hjernen. Der blev imidlertid ikke observeret signifikante ændringer i serumkortikosteronniveauet.Efter syv dages søvnmangel blev der observeret et signifikant fald i musestørrelse, krop og thymusvægt. Derudover var glukosetolerancen signifikant nedsat hos mus efter søvnmangel. Søvnmangel afslørede også en signifikant ændring i ekspressionsmønstrene for urgener i hjernen, hvilket indikerer en forstyrrelse af det molekylære ur.Balancen mellem forbindelsesstangen og forbindelsesstangens relative position mellem stålrektangelplatformen og motoren er de vigtigste ting. Forskeren kan bruge denne teknik til at undersøge virkningerne og de underliggende mekanismer for søvnmangel på forskellige sundhedsmæssige forhold.

Research

JoVE Journal

Medicine

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

Parabiosis i mus: en detaljeret protokol

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

Vurdere ændringer i flygtige narkose Følsomhed af mus efter lokale eller systemiske farmakologisk intervention

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Halspulsåren infusioner farmakokinetisk og farmakodynamisk analyse af Taxaner i mus

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

En simpel kritisk størrelse Femoral Defekt Model i mus

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Ilt-Glucose afsavn og reoxygenering som en<em&gt; In vitro</em&gt; Iskæmireperfusion Skade Model for studere blod-hjerne barrieren dysfunktion

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

En simpel anordning til hurtigt Forbered Hele Monteres i musetarm

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

Oprettelse af Abdominal adhæsioner i mus

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Induktion af accelereret åreforkalkning i Mus: Den "Wire-Skade" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Drug-Induced Sleep Endoscopy (DISE) with Target Controlled Infusion (TCI) and Bispectral Analysis in Obstructive Sleep Apnea

Drug-Induced Sleep Endoscopy DISE with Target Controlled Infusion TCI and Bispectral Analysis in Obstructive Sleep Apnea

Drug-induceret Sleep Endoskopi (dise) med Target Controlled Infusion (TCI) og Bispektralt Analyse i obstruktiv søvnapnø

The aim of this study was to establish a standardized protocol for drug-induced sleep endoscopy (DISE) to differentiate obstruction patterns in ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

En detaljeret protokol for Sved Overvågning Ved hjælp af en roman, Small, trådløs enhed

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...