Name: establishing a device for sleep deprivation in mice
Uploaded: 2023-09-22T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra National Natural Science Foundation of China (82230014, 81930007, 82270342), Shanghai Outstanding Academic Leaders Program (18XD1402400), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (22QA1405400, 201409005200, 20YF1426100), Shanghai Pujiang Talent Program (2020PJD030), SHWSRS (2023-62), Shanghai Clinical Research Center for Aging and Medicine (19MC1910500), og Postgraduate Innovation Program of Bengbu Medical College (Byycxz21075).

Alle dyreforsøksprotokoller i denne studien ble godkjent av Laboratory Animal Welfare Ethics Committee of Renji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University. Mannlige C57BL/6J-mus, i alderen 8 til 10 uker, ble brukt i studien. Dyrene ble hentet fra en kommersiell kilde (se Materialfortegnelse). Hoveddelene som kreves for å etablere enheten er oppført i figur 1A.
1. Klargjøring av søvnmangelsenheten
<ol><li>Fe...

<ol>
	<li>Yang, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+sleep+deprivation+exacerbates+systemic+inflammation+and+psychiatry+disorders+through+gut+microbiota+dysbiosis+and+disruption+of+circadian+rhythms.">Acute sleep deprivation exacerbates systemic inflammation and psychiatry disorders through gut microbiota dysbiosis and disruption of circadian rhythms.</a> Microbiological Research. 268, 127292 (2023).</li><li>Alanazi, M. T., Alanazi, N. T., Alfadeel, M. A., Bugis, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+and+quality+of+life+among+uterine+cancer+survivors:+systematic+review.">Sleep deprivation and quality of life among uterine cancer survivors: systematic review.</a> Supportive Care In Cancer : Official Journal of the Multinational Association of Supportive Care In Cancer. 30 (3), 2891-2900 (2022).</li><li>Tobaldini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep,+sleep+deprivation,+autonomic+nervous+system+and+cardiovascular+diseases.">Sleep, sleep deprivation, autonomic nervous system and cardiovascular diseases.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 74, 321-329 (2017).</li><li>Arthaud, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paradoxical+(REM)+sleep+deprivation+in+mice+using+the+small-platforms-over-water+method:+polysomnographic+analyses+and+melanin-concentrating+hormone+and+hypocretin/orexin+neuronal+activation+before,+during+and+after+deprivation.">Paradoxical (REM) sleep deprivation in mice using the small-platforms-over-water method: polysomnographic analyses and melanin-concentrating hormone and hypocretin/orexin neuronal activation before, during and after deprivation.</a> Journal of Sleep Research. 24 (3), 309-319 (2015).</li><li>Sar&#233;, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+sleep+restriction+in+developing+male+mice+results+in+long+lasting+behavior+impairments.">Chronic sleep restriction in developing male mice results in long lasting behavior impairments.</a> Frontiers In Behavioral Neuroscience. 13, 90 (2019).</li><li>Roman, V., Vander Borght, K., Leemburg, S. A., Vander Zee, E. A., Meerlo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+restriction+by+forced+activity+reduces+hippocampal+cell+proliferation.">Sleep restriction by forced activity reduces hippocampal cell proliferation.</a> Brain Research. 1065 (1-2), 53-59 (2005).</li><li>Zhao, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+sleep+restriction+induces+cognitive+deficits+and+cortical+beta-amyloid+deposition+in+mice+via+BACE1-antisense+activation.">Chronic sleep restriction induces cognitive deficits and cortical beta-amyloid deposition in mice via BACE1-antisense activation.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 23 (3), 233-240 (2017).</li><li>Lord, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+life+sleep+disruption+potentiates+lasting+sex-specific+changes+in+behavior+in+genetically+vulnerable+Shank3+heterozygous+autism+model+mice.">Early life sleep disruption potentiates lasting sex-specific changes in behavior in genetically vulnerable Shank3 heterozygous autism model mice.</a> Molecular Autism. 13 (1), 35 (2022).</li><li>Sinton, C. M., Kovakkattu, D., Friese, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+novel+method+to+interrupt+sleep+in+the+mouse.">Validation of a novel method to interrupt sleep in the mouse.</a> Journal of Neuroscience Methods. 184 (1), 71-78 (2009).</li><li>Rotenberg, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+after+immobilization+stress+and+sleep+deprivation:+common+features+and+theoretical+integration.">Sleep after immobilization stress and sleep deprivation: common features and theoretical integration.</a> Critical Reviews in Neurobiology. 14 (3-4), 225-231 (2000).</li><li>Kim, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+modulates+adiponectin+expression+on+murine+colitis+with+sleep+deprivation.">Melatonin modulates adiponectin expression on murine colitis with sleep deprivation.</a> World Journal of Gastroenterology. 22 (33), 7559 (2016).</li><li>Barf, R. P., Scheurink, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+disturbances+and+glucose+homeostasis.">Sleep disturbances and glucose homeostasis.</a> European Endocrinology. 7, 14-18 (2011).</li><li>Rio, D. C., Ares, M., Hannon, G. J., Nilsen, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+RNA+using+TRIzol+(TRI+reagent).">Purification of RNA using TRIzol (TRI reagent).</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2010 (6), (2010).</li><li>Libus, J., &#352;torchov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+cDNA+generated+by+reverse+transcription+of+total+RNA+provides+a+simple+alternative+tool+for+quantitative+RT-PCR+normalization.">Quantification of cDNA generated by reverse transcription of total RNA provides a simple alternative tool for quantitative RT-PCR normalization.</a> Biotechniques. 41 (2), 156-164 (2006).</li><li>Nolan, T., Hands, R. E., Bustin, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+mRNA+using+real-time+RT-PCR.">Quantification of mRNA using real-time RT-PCR.</a> Nature Protocols. 1 (3), 1559-1582 (2006).</li><li>Mang, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+piezoelectric+system+as+an+alternative+to+electroencephalogram/electromyogram+recordings+in+mouse+sleep+studies.">Evaluation of a piezoelectric system as an alternative to electroencephalogram/electromyogram recordings in mouse sleep studies.</a> Sleep. 37 (8), 1383-1392 (2014).</li><li>Maret, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homer1a+is+a+core+brain+molecular+correlate+of+sleep+loss.">Homer1a is a core brain molecular correlate of sleep loss.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104 (50), 20090-20095 (2007).</li><li>Li, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+deprivation+hastens+Alzheimer-like+pathologies+in+a+human+tau-overexpressed+mouse+model+via+activation+of+cdk5.">Olfactory deprivation hastens Alzheimer-like pathologies in a human tau-overexpressed mouse model via activation of cdk5.</a> Molecular neurobiology. 53, 391-401 (2016).</li><li>Sousa, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invariant+Natural+Killer+T+cells+resilience+to+paradoxical+sleep+deprivation-associated+stress.">Invariant Natural Killer T cells resilience to paradoxical sleep deprivation-associated stress.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 90, 208-215 (2020).</li><li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+circadian+rhythms+by+shift+work+exacerbates+reperfusion+injury+in+myocardial+infarction.">Disruption of circadian rhythms by shift work exacerbates reperfusion injury in myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 79 (21), 2097-2115 (2022).</li><li>Miller, M. A., Cappuccio, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation,+sleep,+obesity+and+cardiovascular+disease.">Inflammation, sleep, obesity and cardiovascular disease.</a> Current Vascular Pharmacology. 5 (2), 93-102 (2007).</li><li>Minkel, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+potentiates+HPA+axis+stress+reactivity+in+healthy+adults.">Sleep deprivation potentiates HPA axis stress reactivity in healthy adults.</a> Health Psychology. 33 (11), 1430 (2014).</li><li>Bishir, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+deprivation+and+neurological+disorders.">Sleep deprivation and neurological disorders.</a> BioMed Research International. 2020, 5764017 (2020).</li><li>Franken, P., Tobler, I., Borb&#233;ly, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+temperature+and+EEG+slow-wave+activity+in+the+rat:+analysis+of+vigilance+state+related+changes.">Cortical temperature and EEG slow-wave activity in the rat: analysis of vigilance state related changes.</a> Pflugers Archiv : European Journal of Physiology. 420 (5-6), 500-507 (1992).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chronic+sleep+fragmentation+on+wake-active+neurons+and+the+hypercapnic+arousal+response.">Effects of chronic sleep fragmentation on wake-active neurons and the hypercapnic arousal response.</a> Sleep. 37 (1), 51-64 (2014).</li><li>Jones, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early-life+sleep+disruption+increases+parvalbumin+in+primary+somatosensory+cortex+and+impairs+social+bonding+in+prairie+voles.">Early-life sleep disruption increases parvalbumin in primary somatosensory cortex and impairs social bonding in prairie voles.</a> Science Advances. 5 (1), (2019).</li></ol>

Musemodeller av søvnmangel er avgjørende for å studere effekten av søvnforstyrrelser på ulike sykdommer, inkludert kardiovaskulær sykdom21, psykiatriske tilstander22 og nevrologiske lidelser23. Blant de eksisterende søvnmangelstrategiene hos mus er fysiske tilnærminger som involverer repeterende kortvarig søvnavbrudd de mest brukte 5,7,12. Disse fys...

Sirkadisk rytmeforstyrrelse refererer til desynkroniseringen mellom det ytre miljø eller oppførsel og den endogene biologiske klokken. En av de vanligste årsakene til døgnrytmeforstyrrelser er søvnmangel1. Søvnmangel påvirker ikke bare menneskers helse negativt, men øker også risikoen for mange sykdommer, inkludert kreft2 og kardiovaskulære sykdommer3. Imidlertid forblir mekanismene som ligger til grunn for de skadelige effektene av søvnmangel stort sett ukjente, og etablering av søvnmangelsmodeller er avgjørende for å forbedre vår forståelse i denne forbindelse.
Ulike metoder for søvnmangel hos mus har blitt rapportert, for eksempel bruk av vannplattformer4, skånsom håndtering5, glidende stangkamre6, roterende trommer7 og buragitasjonsprotokoller 5,8,9. Glidende barkamre feier automatisk stenger over bunnen av buret, og tvinger musene til å gå over dem og holde seg våken. Buragitasjonsprotokoller innebærer å plassere bur på laboratorieorbitale shakere, noe som resulterer i effektiv søvnforstyrrelse. Selv om disse metodene er automatiske og effektive, kan de være dyre når flere enheter kreves for å kjøre parallelt, spesielt for spesifikke studiedesign som involverer et stort antall søvnberøvede mus som trengs for sirkadisk genprofilering. På den annen side er vannplattformer og skånsomme håndteringsprotokoller billigere og enklere metoder som ofte brukes til å indusere søvnmangel. Vannplattformen tillater imidlertid ikke automatisk styring av forhåndsspesifiserte deprivasjonshvilesykluser10,11, og skånsom håndtering krever kontinuerlig årvåkenhet fra forskerne for å forstyrre søvnen. I tillegg kan andre modaliteter, som roterende trommer, bli forvirret av sosial isolasjon eller stress12.
Inspirert av den orbitale shaker-baserte metoden, tar vi sikte på å introdusere en protokoll for å etablere en rockerplattformbasert enhet for søvnmangel hos mus. Denne metoden er billig, effektiv, minimalt stressende, kontrollerbar og automatisert. Den nåværende protokollen lar oss lage en rockerplattformbasert enhet til en pris omtrent ti ganger billigere enn orbital shakers, basert på vår tilgjengelighet. Denne enheten forstyrret effektivt søvn i gruppehusmus og induserte karakteristiske endringer i søvnmangel med minimal stressrespons. Det vil være spesielt nyttig for forskere som er interessert i å undersøke effektene og underliggende mekanismer for søvnmangel på patogenesen av flere sykdommer, spesielt når studien involverer multiple-group søvnmangel parallelt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL centrifuge tube</td>
			<td>NEST</td>
			<td>602002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine ELISA kit</td>
			<td>Ruifan technology</td>
			<td>RF8885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal cage</td>
			<td>ZeYa tech</td>
			<td>MJ2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood glucose meter</td>
			<td>YuYue</td>
			<td>580</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J Mice</td>
			<td>JieSiJie Laboratory Animal</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Age: 8-10 weeks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Connecting rod</td>
			<td>ShengXiang Tech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length:&#160; 20 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooling fan</td>
			<td>LiMing</td>
			<td>EFB0805VH</td>
			<td>Supply voltage: 5 V; Power consumption: 1.2 W; Air flow: 26.92 cfm; Dimensions: 40 mm * 40 mm * 56 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corticosterone ELISA kit</td>
			<td>Elabscience</td>
			<td>E-OSEL-M0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EEG/EMG recording and analysis system</td>
			<td>Pinnacle Technology</td>
			<td>8200-K1-iSE3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>20071302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mosquito hemostats</td>
			<td>FST</td>
			<td>13011-12</td>
			<td>Surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Motor and motor mount</td>
			<td>MingYang</td>
			<td>MY36GP-555</td>
			<td>Supply voltage: 24 V dc; Shaft diameter: 8 mm; Maximum output torque: 100 Kgf.cm; Maximum output speed: 10 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop 2000c</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>NanoDrop 2000c</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power brick adapter</td>
			<td>MingYang</td>
			<td>QiYe-0243</td>
			<td>Input voltage: 110-220V ac; Output voltage: 24 V dc; Outputcurrent: 2 A; Cable length: 2 m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>qPCR commercial kit</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>Q711-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>qPCR measurement equipment</td>
			<td>Roche</td>
			<td>480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectangle platform attached with a screw-compatible steel cylinder</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Width: 20 cm; length: 25 cm; length of the cylinder: 30 cm, thickness: 2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reverse RNA to cDNA commercial kit</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>R323-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw and nut</td>
			<td>Guwanji</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Inner diameter: 6 mm, 12 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw-compatible steel cylinder</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length: 300 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slotted steel channels</td>
			<td>Customized</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Length: 400 mm or 500 mm, thickness: 2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Time contactor</td>
			<td>LiXiang</td>
			<td>DH48S-S</td>
			<td>Supply voltage: 110-220 V ac; Units measured: hours, minutes, seconds; Contact configuration: DPDT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>R401-01</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing a device for sleep deprivation in mice

Sirkadisk rytmeforstyrrelse refererer til desynkronisering mellom det ytre miljø eller oppførsel og den endogene molekylære klokken, noe som betydelig svekker helsen. Søvnmangel er en av de vanligste årsakene til døgnrytmeforstyrrelser. Ulike modaliteter (f.eks. plattformer på vannet, skånsom håndtering, glidende barkamre, roterende trommer, orbital shakers, etc.) har blitt rapportert for å indusere søvnmangel hos mus for å undersøke dens effekter på helse. Den nåværende studien introduserer en alternativ metode for søvnmangel hos mus. En automatisert rockerplattformbasert enhet ble designet som er kostnadseffektiv og effektivt forstyrrer søvn i gruppehusmus med justerbare tidsintervaller. Denne enheten induserer karakteristiske endringer i søvnmangel med minimal stressrespons. Følgelig kan denne metoden vise seg nyttig for etterforskere som er interessert i å studere effektene og underliggende mekanismer for søvnmangel på patogenesen av flere sykdommer. Videre tilbyr den en kostnadseffektiv løsning, spesielt når flere søvnmangelenheter kreves for å kjøre parallelt.

Den etablerte enheten for søvnmangel hos mus er vist i figur 1D. På dag 7 etter oppstart av søvnmangel indikerte elektroencefalogram (EEG) og elektromyografi (EMG) overvåking16 at enheten signifikant reduserte søvnvarigheten og økt våkenhetsvarighet hos mus (figur 2A-D). I mellomtiden økte den nåværende protokollen signifikant adenosinoppbygging og mRNA-nivåer av Homer1a i hjernen (<st...

Watch this Scientific Journal Video about Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice at JoVE.com

Establishing a Device for Sleep Deprivation in Mice

Den nåværende protokollen skisserer en metode for å sette opp en kostnadseffektiv vippeplattformbasert enhet som brukes til å indusere søvnmangel hos mus. Denne enheten har vist seg å være effektiv i å forårsake forstyrrelser i elektroencefalogram (EEG) -dokumentert søvnmønster, samt indusere metabolske og molekylære endringer forbundet med søvnmangel.

Etablering av en enhet for søvnmangel hos mus

Circadian rhythm disruption refers to the desynchronization between the external environment or behavior and the endogenous molecular clock, which ...

Mekanismene som ligger til grunn for de skadelige effektene av søvnmangel forblir stort sett ukjente, og etablering av søvnmangelsmodeller er avgjørende for å forbedre vår forståelse i denne forbindelse. Denne metoden, de er billige, effektive, minimalt stressende, kontrollerbare og automatiserte. Den nåværende protokollen lar oss lage en rockerplattformbasert enhet til en pris omtrent 10 ganger billigere enn orbital shakers basert på vår tilgjengelighet.Begynn med å sikre den ene enden av en 50-centimeter slisset stålkanal midt i en 40-centimeter slisset stålkanal med skruer. Dette vil lage en T-formet struktur. Plasser de to T-formede konstruksjonene oppreist 30 centimeter fra hverandre.Koble bunnen av konstruksjoner med en 30-centimeter skruekompatibel stålsylinder ved hjelp av skruer. Plasser deretter en rektangelplattform i stål mellom de to T-formede konstruksjonene. Fest hver ende av en 30-centimeter skruekompatibel stålsylinder med to lagre.Bruk skruer til å feste et motorfeste på en av de T-formede konstruksjonene 25 centimeter ned fra toppen. Installer nå en motor på dette motorfestet med skruer. Fest en kjølevifte med selvlåsende bånd på den T-formede strukturen under motoren.Bruk skruer til å feste lagerenden av en forbindelsesstang til et plattformhjørne som vender mot motoren og den andre enden til motorakselen. Deretter bruker du en elektrisk drill for å lage to fire millimeter hull i hvert hjørne av en plastbeholder. På venstre side av beholderen bor du ytterligere to fire millimeter hull, sammen med et nedre seks millimeter hull.Lås plastbeholderen på rektangelplattformen ved hjelp av selvlåsende bånd gjennom de borede hjørnehullene. Fest vannflasken på venstre side av plastbeholderen ved hjelp av selvlåsende bånd gjennom de to fire millimeterhullene, med dysen som går gjennom det seks millimeter hullet. Koble nå de elektriske ledningene til strømadapteren til de to terminalene på motoren.Koble deretter inngangsledningene til tidskontaktoren. Trykk på signeringsknappene lengst til høyre på henholdsvis venstre og høyre halvdel av tidskontaktoren til M vises på de mekaniske tellerne på begge sider. Følg denne handlingen ved å trykke på de midterste tegnknappene på begge halvdeler av tidskontaktoren til 5M vises på de mekaniske tellerne.Fullfør dette oppsettet ved å trykke på skiltknappen lengst til venstre på venstre halvdel av tidskontaktoren til 15M vises på venstre mekaniske teller. Deretter plasserer du musen i buret. Strøm deretter tidskontaktoren og kjøleviften.På dag syv etter oppstart av søvnmangel indikerte EEG- og EMG-overvåking at søvnmangelenheten signifikant reduserte søvnvarigheten og økt varigheten av våkenhet hos mus. Sammenlignet med kontrollen ble det observert økte nivåer av vellykkede søvndeprivasjonsmarkører som adenosinoppbygging og Homer1a mRNA-nivåer i hjernen. Det ble imidlertid ikke observert signifikante endringer i serumnivåer av kortikosteron.Etter syv dager med søvnmangel ble det observert en signifikant reduksjon i musstørrelse, kropp og tymusvekt. I tillegg ble glukosetoleransen betydelig svekket hos mus etter søvnmangel. Søvnmangel avslørte også en signifikant endring i uttrykksmønstrene til klokkegener i hjernen, noe som indikerer en forstyrrelse av molekylklokken.Balanse mellom forbindelsesstangen og forbindelsesstangens relative posisjon mellom stålrektangelplattformen og motoren er de viktigste tingene. Forskeren kan bruke denne teknikken til å undersøke effektene og underliggende mekanismer for søvnmangel på ulike helsemessige forhold.

Research

JoVE Journal

Medicine

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

Parabiosis i Mus: En detaljert protokoll

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

Vurdere endringer i Volatile Narkose Følsomhet av Mus etter lokale eller systemiske Farmakologisk Intervention

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Carotisar infusjoner for farmakokinetiske og farmakodynamiske Analyse av Taxaner i Mus

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

En enkel Kritisk store Femoral Defect Model i Mus

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glukose deprivasjon og reoksygenering som en<em&gt; In Vitro</em&gt; Iskemi-reperfusjonskade modell for å studere blod-hjernebarrieren Dysfunction

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

En enkel enhet å raskt Forbered Hele Mounts av Mouse Tarm

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

Opprettelse av mage Adheranser i Mus

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Induksjon av akselerert aterosklerose hos mus: "Wire-Injury" Modell

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Drug-Induced Sleep Endoscopy (DISE) with Target Controlled Infusion (TCI) and Bispectral Analysis in Obstructive Sleep Apnea

Drug-Induced Sleep Endoscopy DISE with Target Controlled Infusion TCI and Bispectral Analysis in Obstructive Sleep Apnea

Legemiddelindusert Sleep Endoskopi (dise) med Target Controlled Infusion (TCI) og Bispectral Analyse på obstruktiv søvnapné

The aim of this study was to establish a standardized protocol for drug-induced sleep endoscopy (DISE) to differentiate obstruction patterns in ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

En detaljert protokoll for Svette Monitoring Ved hjelp av en roman, Small, Wireless Device

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...