जैविक अनुसंधान में प्रोटीन का पता लगाना और स्थानीयकरण आवश्यक है। हमारा प्रोटोकॉल आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड टैग का उपयोग करके एक नई ईएम-लेबलिंग तकनीक का वर्णन करता है जो अच्छी तरह से संरक्षित अल्ट्रास्ट्रक्चर के साथ सीटू में एकल-अणु विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है। अति-निर्धारण से बचना महत्वपूर्ण है।
लेबलिंग विधि टैग में सिस्टीन की गतिविधि पर आधारित है, जो एल्डिहाइड क्रॉस-लिंकिंग के प्रति अत्यधिक संवेदनशील हैं। हमारा प्रोटोकॉल एल्डिहाइड फिक्सेटिव के उपयोग से बचता है और टैग गतिविधि और अल्ट्रास्ट्रक्चर को संरक्षित करता है। एक ही समय में।
ईएम लेबलिंग हमेशा चुनौतीपूर्ण रही है, खराब आकृति विज्ञान या अक्षम लेबलिंग से पीड़ित है। हमारे प्रोटोकॉल उच्च सिग्नल-टू-शोर अनुपात, उच्च दक्षता और विशिष्टता के साथ लक्ष्य प्रोटीन के स्पष्ट और सटीक स्थानीयकरण प्रदान करने के लिए व्यक्तिगत प्रोटीन पर सीधे सीटू नैनोकणों को संश्लेषित करते हैं। हमने अब तक पृथक प्रोटीन, ई.कोलाई कोशिकाओं, खमीर कोशिकाओं और हेला कोशिकाओं में उत्कृष्ट लेबलिंग हासिल की है।
हम ऊतक के नमूनों के आवेदन के लिए विधि का पता लगाएंगे और अनुकूलित करेंगे। प्रचलित क्रायो-एफआईबी और क्रायो-ईएम प्रौद्योगिकियों के संयोजन से हमें महत्वपूर्ण जैविक प्रश्नों को संबोधित करने की अनुमति मिलेगी।