Name: A Precise and Quantifiable Method for Collecting Hemolymph from Small Arthropods (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-04-28T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Precise and Quantifiable Method for Collecting Hemolymph from Small Arthropods at JoVE.com

Bu çalışma, Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (No. 2022YFD1401700) ve Çin Ulusal Bilim Vakfı (No. 32090013 ve No. 32072385) tarafından desteklenmiştir.

1. Böcek yetiştiriciliği
<ol><li>Bu deneyde kullanılan SBPH'leri pirinç fidelerinde yükseltin (Oryza sativa cv. Nipponbare). Bir inkübatöre (65 mm x 200 mm) 20 pirinç fidesi dikin ve 16 saat ışık / 8 saat karanlık fotoperiyot altında 25 ° C'de büyütün.</li>
</ol>2. Hemolenf toplanması için SBPH'lerin diseksiyonu
<ol><li>SBPH'leri bir santrifüj tüpüne koyun ve 10-30 dakika boyunca bir buz banyosuna yerleştirin. NOT: SBPH'leri...

Collecting Hemolymph from Small Arthropods

<ol>
	<li>Hogenhout, S. A., Ammar el, D., Whitfield, A. E., Redinbaugh, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+vector+interactions+with+persistently+transmitted+viruses.">Insect vector interactions with persistently transmitted viruses.</a> Annual Review of Phytopathology. 46, 327-359 (2008).</li><li>Ray, S., Casteel, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effector-mediated+plant-virus-vector+interactions.">Effector-mediated plant-virus-vector interactions.</a> Plant Cell. 34 (5), 1514-1531 (2022).</li><li>Islam, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant-insect+vector-virus+interactions+under+environmental+change.">Plant-insect vector-virus interactions under environmental change.</a> Science of the Total Environment. 701, 135044 (2020).</li><li>Cory, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+virus+transmission:+Different+routes+to+persistence.">Insect virus transmission: Different routes to persistence.</a> Current Opinion in Insect Science. 8, 130-135 (2015).</li><li>Wang, X. W., Blanc, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+transmission+of+plant+single-stranded+DNA+viruses.">Insect transmission of plant single-stranded DNA viruses.</a> Annual Review of Entomology. 66, 389-405 (2021).</li><li>Yi, H. Y., Chowdhury, M., Huang, Y. D., Yu, X. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+antimicrobial+peptides+and+their+applications.">Insect antimicrobial peptides and their applications.</a> Applied Microbiology and Biotechnology. 98 (13), 5807-5822 (2014).</li><li>Liu, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+analysis+of+interaction+between+a+plant+virus+and+its+vector+insect+reveals+new+functions+of+hemipteran+cuticular+protein.">Proteomic analysis of interaction between a plant virus and its vector insect reveals new functions of hemipteran cuticular protein.</a> Molecular &amp; Cellular Proteomics. 14 (8), 2229-2242 (2015).</li><li>Wang, L., Van Meulebroek, L., Vanhaecke, L., Smagghe, G., Meeus, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bee+hemolymph+metabolome:+A+window+into+the+impact+of+viruses+on+bumble+bees.">The bee hemolymph metabolome: A window into the impact of viruses on bumble bees.</a> Viruses. 13 (4), 600 (2021).</li><li>Jia, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vector+mediated+transmission+of+persistently+transmitted+plant+viruses.">Vector mediated transmission of persistently transmitted plant viruses.</a> Current Opinion in Virology. 28, 127-132 (2018).</li><li>Anderson, J. F., Main, A. J., Ferrandino, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Horizontal+and+vertical+transmission+of+West+Nile+Virus+by+Aedes+vexans+(Diptera:+Culicidae).">Horizontal and vertical transmission of West Nile Virus by Aedes vexans (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. 57 (5), 1614-1618 (2020).</li><li>Gadhave, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+frequency+of+horizontal+and+vertical+transmission+of+cucurbit+leaf+crumple+virus+in+whitefly+Bemisia+tabaci+Gennadius.">Low frequency of horizontal and vertical transmission of cucurbit leaf crumple virus in whitefly Bemisia tabaci Gennadius.</a> Phytopathology. 110 (6), 1235-1241 (2020).</li><li>Logan, R. A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertical+and+horizontal+transmission+of+cell+fusing+agent+virus+in+Aedes+aegypti.">Vertical and horizontal transmission of cell fusing agent virus in Aedes aegypti.</a> Applied and Environmental Microbiology. 88 (18), e0106222 (2022).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transovarial+transmission+of+a+plant+virus+is+mediated+by+vitellogenin+of+its+insect+vector.">Transovarial transmission of a plant virus is mediated by vitellogenin of its insect vector.</a> PLoS Pathogens. 10 (3), e1003949 (2014).</li><li>Wei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vector+development+and+vitellogenin+determine+the+transovarial+transmission+of+begomoviruses.">Vector development and vitellogenin determine the transovarial transmission of begomoviruses.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (26), 6746-6751 (2017).</li><li>Medzhitov, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptors+and+innate+immunity.">Toll-like receptors and innate immunity.</a> Nature Reviews Immunology. 1 (2), 135-145 (2001).</li><li>Kingsolver, M. B., Huang, Z., Hardy, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+antiviral+innate+immunity:+Pathways,+effectors,+and+connections.">Insect antiviral innate immunity: Pathways, effectors, and connections.</a> Journal of Molecular Biology. 425 (24), 4921-4936 (2013).</li><li>Pei, R. J., Chen, X. W., Lu, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+hepatitis+B+virus+replication+by+interferons+and+Toll-like+receptor+signaling+pathways.">Control of hepatitis B virus replication by interferons and Toll-like receptor signaling pathways.</a> World Journal of Gastroenterology. 20 (33), 11618-11629 (2014).</li><li>Kao, Y. T., Lai, M. M. C., Yu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+dengue+virus+circumvents+innate+immunity.">How dengue virus circumvents innate immunity.</a> Frontiers in Immunology. 9, 2860 (2018).</li><li>Gilliam, M., Shimanuki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coagulation+of+hemolymph+of+the+larval+honey+bee+(Apis+mellifera+L).">Coagulation of hemolymph of the larval honey bee (Apis mellifera L).</a> Experientia. 26 (8), 908-909 (1970).</li><li>Huo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+tissue-specific+vitellogenin+facilitates+transmission+of+plant+virus.">Insect tissue-specific vitellogenin facilitates transmission of plant virus.</a> PLoS Pathogens. 14 (2), e1006909 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+plant+virus+ensures+viral+stability+in+the+hemolymph+of+vector+insects+through+suppressing+prophenoloxidase+activation.">A plant virus ensures viral stability in the hemolymph of vector insects through suppressing prophenoloxidase activation.</a> mBio. 11 (4), e01453 (2020).</li><li>Vidano, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phases+of+maize+rough+dwarf+virus+multiplication+in+the+vector+Laodelphax+striatellus+(Fall&#233;n).">Phases of maize rough dwarf virus multiplication in the vector Laodelphax striatellus (Fall&#233;n).</a> Virology. 41 (2), 218-232 (1970).</li><li>Yu, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laodelphax+striatellus+Atg8+facilitates+Rice+stripe+virus+infection+in+an+autophagy-independent+manner.">Laodelphax striatellus Atg8 facilitates Rice stripe virus infection in an autophagy-independent manner.</a> Journal of Insect Science. 28 (2), 315-329 (2021).</li><li>Zhang, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytochrome+P450+monooxygenases+CYP6AY3+and+CYP6CW1+regulate+Rice+black-streaked+dwarf+virus+replication+in+Laodelphax+striatellus+(Fallen).">Cytochrome P450 monooxygenases CYP6AY3 and CYP6CW1 regulate Rice black-streaked dwarf virus replication in Laodelphax striatellus (Fallen).</a> Viruses. 13 (8), 1576 (2021).</li><li>Ribeiro, C., Brehelin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+haemocytes:+What+type+of+cell+is+that.">Insect haemocytes: What type of cell is that.</a> Journal of Insect Physiology. 52 (5), 417-429 (2006).</li><li>Butolo, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high+quality+method+for+hemolymph+collection+from+honeybee+larvae.">A high quality method for hemolymph collection from honeybee larvae.</a> PLoS One. 15 (6), e0234637 (2020).</li><li>Nesa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+potential+of+a+ponericin-like+peptide+isolated+from+Bombyx+mori+L.+hemolymph+in+response+to+Pseudomonas+aeruginosa+infection.">Antimicrobial potential of a ponericin-like peptide isolated from Bombyx mori L. hemolymph in response to Pseudomonas aeruginosa infection.</a> Scientific Reports. 12 (1), 15493 (2022).</li><li>Mahmoud, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curcumin-injected+Musca+domestica+larval+hemolymph:+Cecropin+upregulation+and+potential+anticancer+effect.">Curcumin-injected Musca domestica larval hemolymph: Cecropin upregulation and potential anticancer effect.</a> Molecules. 27 (5), 1570 (2022).</li><li>Patton, T. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=salivary+gland,+and+hemolymph+collection+from+Ixodes+scapularis+ticks.">salivary gland, and hemolymph collection from Ixodes scapularis ticks.</a> Journal of Visualized Experiments. (60), e3894 (2012).</li><li>Piyankarage, S. C., Augustin, H., Featherstone, D. E., Shippy, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolymph+amino+acid+variations+following+behavioral+and+genetic+changes+in+individual+Drosophila+larvae.">Hemolymph amino acid variations following behavioral and genetic changes in individual Drosophila larvae.</a> Amino Acids. 38 (3), 779-788 (2010).</li><li>Fiorotti, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disclosing+hemolymph+collection+and+inoculation+of+metarhizium+blastospores+into+Rhipicephalus+microplus+ticks+towards+invertebrate+pathology+studies.">Disclosing hemolymph collection and inoculation of metarhizium blastospores into Rhipicephalus microplus ticks towards invertebrate pathology studies.</a> Journal of Visualized Experiments. (148), e59899 (2019).</li></ol>

Hemolenf, eklembacaklılardaki dolaşım sisteminin ortamıdır ve arbovirüsler ancak düşmanca hemolenf ortamında hayatta kalabiliyorlarsa diğer eklembacaklı dokuları istila edebilirler. Yüksek kaliteli bir hemolenf örneği toplamak, hemolenfte meydana gelen vektör-virüs etkileşimlerini incelemenin ilk adımıdır. Böcek hemolenfinin, ön bacakta bir yara, baş bölgesinde küçük bir kesi veya karın bölgesinde bir gözyaşı yarası 26,27,28,29 dahil olmak üzere böceğin vücudundaki çeşitli bölgele...

Hem hayvan hem de bitki virüsleri eklembacaklılar tarafından bulaşabilir ve bu virüsler insan sağlığı için ciddi bir tehdit oluşturmakta ve tarımda muazzam ekonomik kayıplara neden olmaktadır 1,2,3. Önemli olarak, eklembacaklılarda dolaşım sistemi ve bağışıklık sisteminin hayati bir unsuru olarak görev yapan eklembacaklı hemolenfi, arboviral bulaşmanın düzenlenmesinde önemli bir rol oynar. Eklembacaklı bağırsaklardan edinilen virüsler, ancak olumsuz hemolenf ortamından başarıyla kaçtıktan sonra diğer dokulara taşınır 4,5,6,7. Eklembacaklı hemolenfteki virüslerin yaşam döngüsü, sıvı plazmasında virüs sağkalımını, hemosit içine girişi ve diğer dokulara taşınmasını içerir ve hemolenf 8,9,10,11,12'de çeşitli virüs-vektör etkileşim mekanizmaları meydana gelir. Örneğin, RSV'nin SBPH tarafından dikey iletimi, SBPH vitellogenin proteini ile RSV (pirinç şeridi virüsü) kapsid proteini13,14 arasındaki moleküler etkileşime bağlıdır. Bazı virüsler, spesifik vektör faktörlerini15,16,17,18 bağlayarak hemolenfin bağışıklık tepkisinden kaçabilir. Bu nedenle, eklembacaklıların hemolenfindeki vektör-virüs etkileşimlerinin araştırılması, arbovirüs iletiminin daha iyi anlaşılması için önemlidir.
Planthoppers, leafhoppers ve bazı sivrisinekler gibi bazı küçük böceklerin hemolenfi, büyüklükleri nedeniyle toplanması zordur. Bu sorunu çözmek için, hemolenfin mikro hacmini çıkarmak için doğrudan böcek gövdesine bir şırınga iğnesi sokmak, ince uçlu cımbızla yara bölgesinden eksüda toplamak ve doğrudan santrifüjleme dahil olmak üzere hemolenf toplamak için çeşitli yöntemler geliştirilmiştir. Bu yöntemler, hemolenf 19,20,21 içindeki göreceli gen ekspresyon seviyelerinin ve viral titrelerin ölçülmesini sağlamıştır. Bununla birlikte, hemosit sayımı, protein nicelleştirme ve enzim aktivitesi analizi için gerekli olan hemolenf hacmini ölçmek için etkili bir yöntem şu anda bu küçük böcekler için mevcut değildir.
SBPH (küçük kahverengi planthopper), vücut uzunluğu yaklaşık 2-4 mm olan bir tür küçük böcek vektörüdür. SBPH, RSV, mısır kaba cüce virüsü ve pirinç siyah çizgili cüce virüsü22,23,24 dahil olmak üzere çeşitli bitki virüslerini iletebilir. SBPH ve RSV arasındaki etkileşim son on yılda derinlemesine incelenmiştir. SBPH'lerle çalışmayı kolaylaştırmak için, hemolenf toplamak için yeni ve basit bir yöntem geliştirdik. Kılcal kuvvetler prensibine dayanan bu yöntem, böceğin hemolenfini kesin ve ölçülebilir bir şekilde elde etmek için ölçek işaretli bir kılcal damar kullanır. Bu, küçük böceklerden belirli bir hemolenf hacmini verimli bir şekilde toplamamıza ve küçük vektörlerin hemolenf ortamını daha ayrıntılı olarak incelememize olanak tanır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% SDS-PAGE protein gel</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>4561035</td>
			<td>Protein separation and detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1110</td>
			<td>For fixation of the cells or tissues&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bradford dye reagent</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>5000205</td>
			<td>Protein concentration detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary</td>
			<td>Hirschmann</td>
			<td>9000101</td>
			<td>For collecting hemolymph</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell counting chamber</td>
			<td>ACMEC</td>
			<td>AYA0810</td>
			<td>Hemocytes counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide</td>
			<td>Gitoglas</td>
			<td>10127105A</td>
			<td>For holding insects</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide coated with silane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S4651-72EA</td>
			<td>For holding microscope samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36935</td>
			<td>Nucleus staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass</td>
			<td>Gitoglas</td>
			<td>10212424C</td>
			<td>For microscopic observation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette bulb</td>
			<td>Hirschmann</td>
			<td>9000101</td>
			<td>For collecting hemolymph</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism 8.0 software</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>/</td>
			<td>Statistical analyses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope&#160;</td>
			<td>Motic</td>
			<td>SMZ-168</td>
			<td>For insect dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Tianld</td>
			<td>P5622</td>
			<td>For insect dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss inverted microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Observer Z1</td>
			<td>Hemocytes observation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a precise and quantifiable method for collecting hemolymph from small arthropods

Artropodların, virüs bulaşması için gerekli olan hemolenfleri aracılığıyla tıbbi ve tarımsal öneme sahip çeşitli virüsleri ilettiği bilinmektedir. Hemolenf koleksiyonu, virüs-vektör etkileşimlerini incelemek için temel teknolojidir. Burada, Laodelphax striatellus'u (küçük kahverengi planthopper, SBPH) bir araştırma modeli olarak kullanarak küçük eklembacaklılardan hemolenfin nicel toplanması için yeni ve basit bir yöntem açıklıyoruz, çünkü bu eklembacaklı pirinç şeritli virüsün (RSV) ana vektörüdür. Bu protokolde, işlem, donmuş eklembacaklıların bir bacağını ince uçlu cımbızla hafifçe sıkıştırarak ve hemolenfin yaradan dışarı bastırılmasıyla başlar. Daha sonra, kılcal kuvvetler prensibine göre transüdatif hemolenfin yaradan toplanması için bir kılcal damar ve bir pipet ampulünden oluşan basit bir mikropipet kullanılır. Son olarak, toplanan hemolenf daha fazla çalışma için belirli bir tampon içinde çözülebilir. Küçük eklembacaklılardan hemolenf toplamak için kullanılan bu yeni yöntem, arbovirüsler ve vektör-virüs etkileşimleri hakkında daha fazla araştırma yapmak için yararlı ve etkili bir araçtır.

A Precise and Quantifiable Method for Collecting Hemolymph from Small Arthropods

Mikropipet modeli ve hemolenf koleksiyonu Eylemi kılcal borunun kılcal kuvvetlerine dayanan basit bir mikropipet geliştirdik. Mikropipet, kılcal bir tüp ve bir pipet ampulünden oluşur (Şekil 1A). Kılcal borular 1 μL ila 20 μL arasında değişen farklı hacim boyutlarında mevcuttur ve kılcal boru hacimleri gereksinimlere göre seçilir. Daha küçük hacimli kılcal tüpler önerilmez, çünkü daha küçük hacimli tüplerin ekstra ince açıklıkları hemol...

Watch this Scientific Journal Video about A Precise and Quantifiable Method for Collecting Hemolymph from Small Arthropods at JoVE.com

A Precise and Quantifiable Method for Collecting Hemolymph from Small Arthropods (Video) | JoVE 

Daha sonraki analizler için ölçülebilir hemolenfleri küçük eklembacaklılardan verimli bir şekilde toplamak için bir yöntem tarif ediyoruz.

Küçük Eklembacaklılardan Hemolenf Toplamak için Kesin ve Ölçülebilir Bir Yöntem

Arthropods are known to transmit a variety of viruses of medical and agricultural importance through their hemolymph, which is essential for virus ...

Araştırmamız arbovirüslere, böceklere ve bitki etkileşimlerine odaklanmaktadır. Küçük eklembacaklılardan hemolenf örnekleri elde etmek, böcek kaynaklı hastalıklar üzerine yapılan araştırmalar için teknik bir zorluk teşkil etmektedir. Bu protokol, bu soruna karşı koymak için kesin ve ölçülebilir bir teknik göstermektedir.Arbovirüslerin iletimindeki son araştırma gelişmeleri, virüslerin konakçı bariyerini kırmak için birkaç önemli vektör faktörünü manipüle edebileceğini keşfetmiştir. Bu protokol, hemolenfin hassas bir şekilde ölçülmesini sağlayan basit, uygun maliyetli ve değerli bir tekniktir. Bu yöntem aynı zamanda virüsler ve vektörler arasındaki etkileşimleri başlatmak için değerli bir teknoloji sunar.Yaklaşan araştırmamız, vektör-böcekler tarafından virüs bulaşmasının moleküler mekanizmalarını anlamaya odaklanırken, yeni operasyonel teknikleri keşfedecek ve geliştirecektir.