Name: تسليط الضوء على المؤلف: تقنية محسنة للكشف عن ثلاثي ميثيل أمين في الطب المشتق من عن طريق كروماتوغرافيا غاز الرأس - قياس الطيف الكتلي الرباعي الترادفي
Uploaded: 2023-03-10T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry at JoVE.com

تم دعم هذا العمل بمنح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82173991) ، وبرنامج سيتشوان للعلوم والتكنولوجيا (2022YFS0442).

انظر الجدول 1 للحصول على معلومات حول المواد الطبية لفيرتيما وبيريبلانيتا أمريكانا وهيرودو. تم التعرف عليها من قبل البروفيسور شو رونتشون ، جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي ، على أنها أجسام مجففة من Pheretima aspergillum (E.Perrier) و Periplaneta americana L. و Whitmania pigra Whitman.
...

الكشف عن ثلاثي ميثيل أمين في الطب المشتق من بواسطة Headspace GC-MS

<ol>
	<li>Fan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Material+basis+of+stench+of+animal+medicine:+a+review.">Material basis of stench of animal medicine: a review.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 47 (20), 5452-5459 (2022).</li><li>Deng, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+on+formation+and+taste-masking+technology+of+stench+of+animal+medicines.">Progress on formation and taste-masking technology of stench of animal medicines.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (10), 2353-2359 (2020).</li><li>Casaburi, A., Piombino, P., Nychas, G. J., Villani, F., Ercolini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+populations+and+the+volatilome+associated+to+meat+spoilage.">Bacterial populations and the volatilome associated to meat spoilage.</a> Food Microbiology. 45 (Pt A), 83-102 (2015).</li><li>Rouger, A., Tresse, O., Zagorec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+contaminants+of+poultry+meat:+sources,+species,+and+dynamics.">Bacterial contaminants of poultry meat: sources, species, and dynamics.</a> Microorganisms. 5 (3), 50 (2017).</li><li>Bali&#241;o-Zuazo, L., Barranco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+liquid+chromatography-mass+spectrometric+method+for+the+simultaneous+determination+of+trimethylamine,+dimethylamine+and+methylamine+in+fishery+products.">A novel liquid chromatography-mass spectrometric method for the simultaneous determination of trimethylamine, dimethylamine and methylamine in fishery products.</a> Food Chemistry. 196, 1207-1214 (2016).</li><li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-efficient+trimethylamine+gas+sensor+based+on+Au+nanoparticles+sensitized+WO3+nanosheets+for+rapid+assessment+of+seafood+freshness.">Ultra-efficient trimethylamine gas sensor based on Au nanoparticles sensitized WO3 nanosheets for rapid assessment of seafood freshness.</a> Food Chemistry. 392, 133318 (2022).</li><li>Bota, G. M., Harrington, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+detection+of+trimethylamine+in+meat+food+products+using+ion+mobility+spectrometry.">Direct detection of trimethylamine in meat food products using ion mobility spectrometry.</a> Talanta. 68 (3), 629-635 (2006).</li><li>Neyer, P., Bernasconi, L., Fuchs, J. A., Allenspach, M. D., Steuer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivatization-free+determination+of+short-chain+volatile+amines+in+human+plasma+and+urine+by+headspace+gas+chromatography-mass+spectrometry.">Derivatization-free determination of short-chain volatile amines in human plasma and urine by headspace gas chromatography-mass spectrometry.</a> Journal of Clinical Laboratory Analysis. 34 (2), e23062 (2020).</li><li>Mitsubayashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trimethylamine+biosensor+with+flavin-containing+monooxygenase+type+3+(FMO3)+for+fish-freshness+analysis.">Trimethylamine biosensor with flavin-containing monooxygenase type 3 (FMO3) for fish-freshness analysis.</a> Sensors &amp; Actuators B: Chemical. 103 (1-2), 463-467 (2004).</li><li>National Health and Family Planning Commission of the People's Republic of China. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> GB 5009. 179-2016. , 12 (2016).</li><li>Liu, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+on+material+basis+and+processing+principle+of+fishy+smell+of+Pheretima+aspergillum+by+electronic+nose+and+HS-GC-MS.">Study on material basis and processing principle of fishy smell of Pheretima aspergillum by electronic nose and HS-GC-MS.</a> Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 26 (12), 154-161 (2020).</li><li>Zheng, X., Sun, F., Du, L., Huang, Y., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+on+changes+of+volatile+components+in+Gecko+before+and+after+processing+by+HS-SPME-GC-MS.">Comparison on changes of volatile components in Gecko before and after processing by HS-SPME-GC-MS.</a> Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 28 (15), 145-152 (2022).</li><li>Yoshiharu, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Odor olfactory measurement. , (2004).</li><li>Jia, Z. W., Mao, B. P., Miao, S., Mao, X. H., Ji, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+sulfur+dioxide+residues+in+sulfur+fumigated+Chinese+herbs+with+headspace+gas+chromatography.">Determination of sulfur dioxide residues in sulfur fumigated Chinese herbs with headspace gas chromatography.</a> Acta Pharmaceutica Sinica. 49 (2), 277-281 (2014).</li></ol>

تأتي الأدوية المشتقة من الحيوانات من الجسم كله أو الأعضاء أو الأنسجة أو المنتجات الفسيولوجية أو المرضية أو الإفرازات أو الإفرازات والمنتجات المصنعة للحيوانات. يعد التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) مصدرا مهما للرائحة السمكية في الأدوية المشتقة من الحيوانات. إنها مادة كريهة الرائحة نموذجية ...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65291">An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry</a>. The Authors section was updated from:
Hui Ye1 
Xuemei Liu1 
Haozhou Huang2 
Lin Huang1 
Yang Bao1 
Hongyan Ma1 
Junzhi Lin3 
Xiaoming Bao4 
Dingkun Zhang1 
Runchun Xu1 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
3TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
4Shimadzu (China) Co., Ltd
to:
Hui Ye1 
Xuemei Liu1 
JiaBao Liao2 
Haozhou Huang3 
Lin Huang1 
Yang Bao1 
Hongyan Ma1 
Junzhi Lin4 
Xiaoming Bao5 
Dingkun Zhang1 
Runchun Xu1 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
2China Resources Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd 
3Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
4TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine 
5Shimadzu (China) Co., Ltd

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65291">An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry</a>. The Authors section was updated.

Erratum: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry

يحظى علاج الأمراض البشرية باستخدام المنتجات المشتقة من أجزاء الحيوانات و / أو منتجاتها الثانوية (المشار إليها هنا باسم الأدوية المشتقة من الحيوانات) باهتمام متزايد. يلعبون دورا مهما في علاج السرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية وتليف الكبد والتهاب الضرع وأمراض أخرى ، مع مزايا التأثير القوي والجرعة الصغيرة والفعالية السريرية الهامة والمحددة. ومع ذلك ، فإن الأدوية المشتقة من الحيوانات لها عموما رائحة سمكية بارزة ، مما يؤثر بشكل كبير على امتثال المرضى ، وهي غير مواتية بشكل خاص للأطفال 1,2. تأتي الرائحة السمكية بشكل أساسي من البروتينات والأحماض الأمينية والدهون والمواد الأخرى الموجودة في الدواء ، والتي تتحلل من خلال أكسدة الأحماض الدهنية وتدهور الأحماض الأمينية وطرق أخرى لإنتاج مجموعة متنوعة من المواد ذات الرائحة السمكية2،3،4. من بينها ، ثلاثي ميثيل أمين (TMA) هو غاز متطاير ذو رائحة مريبة موجودة على نطاق واسع في الأطعمة المشتقة من الحيوانات المتعفنةأو الفاسدة 5.
حتى الآن، يشيع استخدام كروماتوغرافيا الغاز (GC)، والكروماتوغرافيا السائلة (LC)، والكروماتوغرافيا الأيونية، والقياس الطيفي، وقياس الطيف اللوني السائل - قياس الطيف الكتلي (LC-MS)، وطرق الاستشعار للكشف عن التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) في البيئة والغذاء والبول6،7،8،9. نظرا للتلوث المنخفض لعمود GC ونظام الحقن ، فضلا عن الحساسية العالية ، وقابلية التكاثر ، وحد الكشف المنخفض (0.1-1 مجم / كجم) ، تم تفضيل طريقة كروماتوغرافيا الغاز الرأسي - قياس الطيف الكتلي (HS-GC-MS) للتحليل الغذائيوالبيولوجي 8. في الوقت الحاضر ، وضعت الصين فقط معيارا وطنيا ل TMA في الغذاء ، و HS-GC-MS هي الطريقة الأولى في معيار GB5009.179-201610. لذلك ، تم اختيار طريقة HS-GC-MS المذكورة أعلاه للكشف عن TMA في الطب المشتق من الحيوانات. في المرحلة المبكرة ، وجدت مجموعتنا البحثية أن معيار الكشف HS-GC-MS ل TMA في الغذاء يمكن أن يكتشف الرائحة السمكية في العديد من الأدوية المشتقة من الحيوانات. بالاقتران مع نتائج الدراسات11،12 ، يمكن إثبات أن TMA هي المادة الرئيسية الشائعة للرائحة السمكية في الأدوية المشتقة من الحيوانات. ومع ذلك ، فقد وجد أن استنساخ النتائج التجريبية كان ضعيفا ، وكانت هناك مشاكل مثل هروب TMA وضعف الاستقرار ، والتي لا يمكن التحقق منها من خلال المنهجية. قد يكون هذا بسبب حقيقة أن الغسول قد تم حقنه في قارورة فراغ الرأس وأدى التفاعل السريع للحمض القاعدي إلى زيادة الضغط في القارورة ، وبالتالي هرب TMA من مسام الحقن ، مما منع الكشف المستقر والدقيق عن TMA. لذلك ، اقترحت هذه الدراسة طريقة محسنة للكشف عن كروماتوغرافيا غاز الفضاء الرأسي - قياس الطيف الكتلي الرباعي الترادفي (HS-GC-MS / MS) لمعالجة هذه المشاكل.
يعمل البروتوكول على تحسين المعالجة المسبقة للعينة عن طريق فصل المواد المتفاعلة الحمضية القاعدية في المعالجة المسبقة بمساعدة البارافين الصلب ، وهو مادة جيدة لتغيير الطور الصلب والسائل. نظرا لأن البارافين يسيل ببطء مع ارتفاع درجة حرارة الفرن الثرموستاتي ، فقد تم أيضا إطلاق TMA ببطء في قارورة فراغ الرأس المختومة ، وتجنب زيادة الضغط الناتجة عن التفاعل العنيف والسريع للحمض القاعدي وضمان اكتشاف TMA بشكل مستقر ودقيق. علاوة على ذلك ، فإن حقن مساحة الرأس جنبا إلى جنب مع أوضاع مراقبة التفاعل المتعدد (MRM)) في GC-MS / MS قمع بشكل فعال التداخل الكيميائي للمصفوفة وضمان موثوقية النتائج. أثبتت نتائج التحقق المنهجي أن الخطية واختبار الدقة ومعدل الاسترداد لطريقة الكشف المحسنة يمكن أن تلبي المتطلبات ، مع قابلية استنساخ جيدة وحساسية عالية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter Trading (China) Co.</td>
			<td>SSC-2-0213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chinese herbal medicine grinder</td>
			<td>Zhejiang Yongkang Xi&#39;an Hardware and Pharmaceutical Factory</td>
			<td>HX-200K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Convection oven</td>
			<td>Sanyo Electric Co., Ltd</td>
			<td>MOV-112F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Decapper for 20 mm Aluminum caps</td>
			<td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc</td>
			<td>V1750004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>Shimadzu Corporation Japan</td>
			<td>AUW220D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatography mass spectrometry</td>
			<td>Shimadzu Corporation Japan</td>
			<td>TQ-8050 NX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Headspace Vial</td>
			<td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc</td>
			<td>25760200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homogenizer</td>
			<td>Shanghai biaomo Factory</td>
			<td>FJ200-SH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Preassembled Cap</td>
			<td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc</td>
			<td>L4150050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sample sieve</td>
			<td>Zhenxing Sieve Factory</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SH-Volatile Amine</td>
			<td>Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd</td>
			<td>227-3626-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd</td>
			<td>2022101401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solid paraffin wax</td>
			<td>Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory</td>
			<td>20221112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloroacetic acid</td>
			<td>Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd</td>
			<td>2022102001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimethylamine hydrochloride</td>
			<td>Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>AF22022108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-pure water system</td>
			<td>Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd</td>
			<td>UPR-11-5T</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an improved technique for trimethylamine detection in animal-derived medicine by headspace gas chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry

الأدوية المشتقة من الحيوانات لها خصائص مميزة وتأثيرات علاجية كبيرة ، ولكن معظمها له رائحة مريبة واضحة ، مما يؤدي إلى ضعف امتثال المرضى السريريين. ثلاثي ميثيل أمين (TMA) هو أحد مكونات الرائحة السمكية الرئيسية في الطب المشتق من الحيوانات. من الصعب تحديد التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) بدقة باستخدام طريقة الكشف الحالية بسبب الضغط المتزايد في قارورة فراغ الرأس الناجم عن التفاعل السريع للحمض القاعدي بعد إضافة الغسول، مما يؤدي إلى هروب التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) من قارورة فراغ الرأس، مما يوقف التقدم البحثي للرائحة السمكية للطب المشتق من الحيوانات. في هذه الدراسة ، اقترحنا طريقة كشف خاضعة للرقابة أدخلت طبقة البارافين كطبقة عزل بين الحمض والغسول. يمكن التحكم في معدل إنتاج التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) بشكل فعال عن طريق تسييل طبقة البارافين ببطء من خلال تسخين الفرن الثرموستاتي. أظهرت هذه الطريقة خطية مرضية ، وتجارب دقيقة ، وعمليات استرداد مع قابلية استنساخ جيدة وحساسية عالية. وقدمت الدعم التقني لإزالة الروائح الكريهة من الأدوية المشتقة من الحيوانات.

Treating human diseases by utilizing products derived from animal parts and/or their by-products (referred to here as animal-derived medicines) is receiving increased attention. They play an important role in treating cancer, cardiovascular disease, liver cirrhosis, mastitis, and other diseases, with the advantages of a strong effect, small dosage, and significant and specific clinical efficacy. However, animal-derived medicines generally have a prominent fishy odor, which greatly affects patients&#39; compliance, and are especially unfavorable for children1,2. The fishy odor mainly comes from the proteins, amino acids, fats, and other substances contained in the medicine, which are decomposed through fatty acid oxidation, amino acid degradation, and other ways to produce a variety of substances with a fishy odor2,3,4. Among them, trimethylamine (TMA) is a volatile gas with a fishy odor that widely exists in rotting or rotten animal-derived foods5.
Until now, gas chromatography (GC), liquid chromatography (LC), ion chromatography, spectrophotometry, liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), and sensor methods have commonly been used to detect TMA in the environment, food, and urine6,7,8,9. In view of the low contamination of the GC column and injection system, as well as the high sensitivity, reproducibility, and low detection limit (0.1-1 mg/kg), the headspace gas chromatography-mass spectrometry (HS-GC-MS) method was preferred for food and biological analysis8. At present, only China has established a national standard for TMA in food, and HS-GC-MS is the first method in the GB5009.179-2016 standard10. Therefore, the above HS-GC-MS method was selected to detect TMA in animal-derived medicine. In the early stage, our research group found that the HS-GC-MS detection standard for TMA in food could detect the fishy odor in several animal-derived medicines. Combined with the results of the studies11,12, it could be proved that TMA is the common key substance of fishy odor in animal-derived medicines. However, it was found that the reproducibility of the experimental results was poor, and there were problems such as TMA escape and poor stability, which could not be verified by the methodology. This could be due to the fact that the lye was injected into the headspace vial and the rapid acid-base reaction led to increased pressure in the vial, thus TMA escaped from the injection pore, preventing the stable and accurate detection of TMA. Therefore, this study proposed an improved headspace gas chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry (HS-GC-MS/MS) detection method to address these problems.
The protocol improves the sample pretreatment by separating the acid-base reactants in the pretreatment with the help of solid paraffin, a good solid-liquid phase change material. As the paraffin slowly liquefied with the temperature rise of the thermostatic furnace, TMA was also slowly released in the sealed headspace vial, avoiding the pressure increase caused by the violent and rapid acid-base reaction and ensuring stable and accurate TMA detection. Further, the headspace injection combined with multiple reaction monitoring (MRM) modes) in GC-MS/MS effectively suppressed matrix chemical interference and ensured the reliability of the results. The results of the methodological validation proved that the linearity, precision test, and recovery rate of the improved detection method could meet the requirements, with good reproducibility and high sensitivity.

تسليط الضوء على المؤلف: تقنية محسنة للكشف عن ثلاثي ميثيل أمين في الطب المشتق من عن طريق كروماتوغرافيا غاز الرأس - قياس الطيف الكتلي الرباعي الترادفي  

تقنية محسنة للكشف عن ثلاثي ميثيل أمين في الطب المشتق من الحيوانات بواسطة كروماتوغرافيا غاز الفضاء الرأسي - قياس الطيف الكتلي الرباعي الترادفي

The scope of our research is a material basis in the variation of fish odor in animal medicine. This protocol provides a simple pretreatment method and accurate detection of trimethylamine in animal medicines. The simple pretreatment methods and the programmed parameters of HS-GC mass/mass of this protocol, need to be further optimized, and we still have a lot of work to do.Our protocol adopts the multi-direction monitoring mode of GC mass/mass, combined with a unique, simple pretreatment, which is not only the first pretreatment for trimethylamine analysis, but also the first analytical mode to be used.

يتم عرض الرسوم البيانية التخطيطية لمبدأ المعالجة المسبقة وتشغيل هذا البروتوكول في الشكل 1 والشكل 2 ، على التوالي. كان وقت الذروة للتحليل الحراري الميكانيكي (TMA) 2.3 دقيقة، مع شكل ذروة حاد وعدم وجود تداخل من الشوائب الأخرى (الشكل 3). بقياس النطاق...

Watch this Scientific Journal Video about An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry at JoVE.com

هنا ، يتم وصف طريقة كروماتوغرافيا غاز الرأس - قياس الطيف الكتلي الرباعي الترادفي (HS-GC-MS / MS) المناسبة لتحديد ثلاثي ميثيل أمين (TMA) في الأدوية المشتقة من الحيوانات. يتضمن البروتوكول المعالجة المسبقة للعينات، ومعالجة فراغ الرأس، وظروف التحليل، والتحقق المنهجي، وتحديد التحليل الحراري الميكانيكي (TMA) في الأدوية المشتقة من الحيوانات.

Animal-derived medicines have distinctive characteristics and significant curative effects, but most of them have an obvious fishy odor, resulting in the ...

نطاق بحثنا هو أساس مادي في اختلاف رائحة الأسماك في الطب الحيواني. يوفر هذا البروتوكول طريقة معالجة بسيطة وكشفا دقيقا عن ثلاثي ميثيل أمين في الأدوية الحيوانية. تحتاج طرق المعالجة المسبقة البسيطة والمعلمات المبرمجة لكتلة / كتلة HS-GC لهذا البروتوكول إلى مزيد من التحسين ، ولا يزال أمامنا الكثير من العمل للقيام به.يعتمد بروتوكولنا وضع المراقبة متعدد الاتجاهات لكتلة / كتلة GC ، جنبا إلى جنب مع معالجة مسبقة فريدة وبسيطة ، وهي ليست فقط المعالجة المسبقة الأولى لتحليل ثلاثي ميثيل أمين ، ولكنها أيضا أول طريقة تحليلية يتم استخدامها.

an-improved-technique-for-trimethylamine-detection-animal-derived

Research

JoVE Journal

Chemistry

An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry

Animal-derived medicines have distinctive characteristics and significant curative effects, but most of them have an obvious fishy odor, resulting in the poor compliance of clinical patients. Trimethylamine (TMA) is one of the key fishy odor components in animal-derived medicine. It is difficult to identify TMA accurately using the existing detection method due to the increased pressure in the headspace vial caused by the rapid acid-base reaction after the addition of lye, which causes TMA to escape from the headspace vial, stalling the research progress of the fishy odor of animal-derived medicine. In this study, we proposed a controlled detection method that introduced a paraffin layer as an isolation layer between acid and lye. The rate of TMA production could be effectively controlled by slowly liquefying the paraffin layer through thermostatic furnace heating. This method showed satisfactory linearity, precision experiments, and recoveries with good reproducibility and high sensitivity. It provided technical support for the deodorization of animal-derived medicine.

Here, a headspace gas chromatography-tandem quadrupole mass spectrometry (HS-GC-MS/MS) method suitable for the determination of trimethylamine (TMA) in animal-derived medicines is described. The protocol includes sample pretreatment, headspace treatment, analysis conditions, methodological validation, and the determination of TMA in animal-derived medicines.

Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace GC-MS

To begin, crush the medicinal materials Pheretima, Periplaneta americana, and Hirudo with an herbal grinder. Sift the medicinal powder through standard drug sieves of number two and number four. Collect the powder between the two sieves to obtain the required sample powder.Take one gram of the powder in a 50 milliliter plastic centrifuge tube. Add 20 milliliters of 5%trichloroacetic acid solution and homogenize at 1, 000 RPM for one minute with a high speed dispersion homogenizer. After homogenization, centrifuge the homogenate at 1, 717 G for five minutes at room temperature and filter the supernatant through an absorbent cotton-dipped glass funnel into a 50 milliliter volumetric flask.After repeating the extraction process twice with 15 and 10 milliliters of 5%trichloroacetic acid solution, combine the filtrates and make up the volume to 50 milliliters with 5%trichloroacetic acid solution. Next, accurately add two milliliters of sodium hydroxide solution and 0.5 grams of solid paraffin in 20 milliliter headspace vials. Then place them in an oven at 70 degrees Celsius for about 30 minutes.Take the vials out and let them cool down to room temperature so that the paraffin solidifies. To process the sample headspace, add two milliliters of each sample extraction solution to the solidified paraffin containing vials. Press the cap and seal the vial.Put the sealed headspace vials on the GCMS for measurement. To obtain the standard curve, aspirate a series of two milliliters of trimethylamine standard solution on top of the solidified paraffin layer. Put the sealed headspace vials on the machine for trimethylamine measurement.To perform the precision test, aspirate two milliliters of 0.1 micrograms per milliliter trimethylamine standard solution on top of the solidified paraffin layer. Carry out six parallel tests in the machine following the manufacturer's instructions. For the recovery rate experiment, bake several batches of the sample powder in an oven until no triethylamine is detected in GCMS as demonstrated previously.Next, take each one gram of oven baked and fineable powder into separate 50 milliliter plastic centrifuge tubes. Add 50 microliters of trimethylamine standard solution to all the tubes and extract with 5%trichloroacetic acid solution as demonstrated previously. The retention time of trimethylamine was found to be 2.3 minutes with a sharp peak and no interference from other impurities.Pheretima, Periplaneta americana, and Hirudo samples subjected to spiked recovery tests by drying to reduce triethylamine in the herbs showed average recovery rates of 84.49, 94.66, and 85.67%respectively. Triethylamine was detected in nine batches of herbs with concentrations ranging from 13.23 to 271.63 milligrams per kilogram.