Name: normothermic ex vivo liver machine perfusion in mouse
Uploaded: 2023-09-25T14:25:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse at JoVE.com

Gjennom skrivingen av denne artikkelen har jeg fått mye støtte og hjelp. Jeg vil spesielt takke min lagkamerat XinPei Chen for hans fantastiske samarbeid og tålmodige støtte under operasjonen.

Dyreforsøk ble utført i henhold til gjeldende tyske forskrifter og retningslinjer for dyrevelferd og ARRIVEs retningslinjer for rapportering av dyreforsøk. Dyreforsøksprotokollen ble godkjent av Thüringer Landesamt für Verbraucherschutz, Thüringen, Tyskland (godkjenningsnummer: UKJ - 17 - 106).
MERK: Mannlige C57BL/6J-mus som veide 34 ± 4 g (gjennomsnittlig ± standardfeil av gjennomsnittet [SEM]) ble brukt som leverdonorer. De ble vedlikeholdt under kontrollerte miljøforhold (50 % fu...

Kritiske trinn i protokollen De to avgjørende trinnene i levereksplantasjon er kanylering av portalvenen (PV) og den påfølgende kanylering av gallekanalen (BD). Disse trinnene er av avgjørende betydning for å sikre vellykket organuthenting og påfølgende perfusjons- eller transplantasjonsprosedyrer.
Utfordringer og løsninger PV-kanylering gir tre utfordringer: skade på karveggen, forskyvning av kateteret og gjennomførbarhet av innføringsprosess...

Levertransplantasjon representerer gullstandardbehandlingen for personer med leversykdom i sluttstadiet. Dessverre overgår etterspørselen etter donororganer det tilgjengelige tilbudet, noe som fører til en betydelig mangel. I 2021 sto ca. 24 936 pasienter på venteliste for levertransplantasjon, mens kun 9 234 transplantasjoner ble utført1. Den betydelige forskjellen mellom tilbud og etterspørsel av levertransplantater fremhever den presserende nødvendigheten av å undersøke alternative strategier for å utvide donorbassenget og forbedre tilgjengeligheten av levertransplantater. En måte å utvide donorpoolen på er å bruke marginale donorer2. Marginale givere inkluderer de med avansert alder, moderat eller alvorlig steatose. Selv om transplantasjon av marginale organer kan gi gunstige resultater, forblir de samlede resultatene suboptimale. Som et resultat er utviklingen av terapeutiske strategier rettet mot å styrke funksjonen til marginale donorer for tiden i gang 3,4.
En av strategiene er å bruke maskinperfusjon, spesielt normoterm oksygenert maskinperfusjon, for å forbedre funksjonen til disse marginale organene5. Imidlertid er det fortsatt en begrenset forståelse av de molekylære mekanismene som ligger til grunn for de gunstige effektene av normoterm oksygenert maskinperfusjon (NEVLP). Mus, med sin rikelig tilgjengelighet av genetisk modifiserte stammer, tjener som verdifulle modeller for å undersøke molekylære veier. For eksempel har betydningen av autofagibaner for å redusere leveriskemi-reperfusjonsskade blitt stadig mer anerkjent 6,7. En viktig molekylær vei i leveriskemi-reperfusjonsskade er miR-20b-5p / ATG7-banen8. For tiden er det en rekke ATG knockout og betingede knock-out musestammer tilgjengelig, men ingen tilsvarende rottestammer9.
Basert på denne bakgrunnen var målet å generere en miniatyrisert NEVLP-plattform for muselevertransplantater. Denne plattformen vil legge til rette for utforskning og evaluering av potensielle genmodifiserte strategier for å forbedre funksjonaliteten til donorens lever. I tillegg var det viktig at systemet var egnet for langvarig perfusjon, noe som muliggjorde ex vivo-behandling av leveren, ofte referert til som "organreparasjon".
Tatt i betraktning den begrensede tilgjengeligheten av relevante in vitro-data om perfusjon hos mus, fokuserte litteraturgjennomgangen på studier utført på rotter. Et systematisk litteratursøk fra 2010 til 2022 ble utført med søkeord som «normoterm leverperfusjon», «ex vivo eller in vitro» og «rotter». Dette søket hadde som mål å identifisere optimale forhold hos gnagere, slik at vi kunne bestemme den mest hensiktsmessige tilnærmingen.
Perfusjonssystemet består av et forseglet vannkappet glassbufferreservoar, en peristaltisk rullepumpe, en oksygenator, en boblefelle, en varmeveksler, et orgelkammer og et lukket sykkelslangesystem (figur 1). Systemet sikrer presist vedlikehold av en konstant perfusjonstemperatur på 37 °C ved hjelp av en dedikert termostatmaskin. Den peristaltiske rullepumpen driver strømmen av perfusatet gjennom hele kretsløpet. Perfusjonskretsen starter ved det isolerte vannkappede reservoaret. Deretter ledes perfusatet gjennom oksygenatoren, som mottar en gassblanding av 95% oksygen og 5% karbondioksid fra en dedikert gassflaske. Etter oksygenering passerer perfusatet gjennom boblefellen, hvor eventuelle innesluttede bobler blir omdirigert tilbake til reservoaret av den peristaltiske pumpen. Det gjenværende perfusatet strømmer gjennom varmeveksleren og kommer inn i orgelkammeret, hvorfra det vender tilbake til reservoaret.
Her rapporterer vi våre erfaringer med å etablere en NEVLP for muselever og deler de lovende resultatene av et piloteksperiment utført ved bruk av det oksygenerte mediet uten oksygenbærere.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 ml Micro Tube PP</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72699</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 Fr Rubber Cannula</td>
			<td>Vygon</td>
			<td>Sample Cannula</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L Micro Syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>701N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 Fr Rubber Cannula</td>
			<td>Vygon</td>
			<td>Sample Cannula</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 G Butterfly Cannula</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR+OF2419</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 G Butterfly Cannula</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR+DU2619WX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 G Hypodermic Needle</td>
			<td>Sterican</td>
			<td>100246</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml Syringe Pump</td>
			<td>Braun</td>
			<td>110356</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Perma-Hand Seide</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>639H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial Clip</td>
			<td>Braun</td>
			<td>BH014R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclavable Moist Chamber</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik</td>
			<td>73-4733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big Cotton Applicator&#160;</td>
			<td>NOBA Verbandmittel Danz GmbH</td>
			<td>974018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bubble Trap</td>
			<td>Hugo-Sachs-Elektronik</td>
			<td>V83163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenovet (0.3 mg / ml)</td>
			<td>Elanco</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CIDEX OPA solution (2 L)</td>
			<td>Cilag GmbH</td>
			<td>20391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrosurgical Unit for Monopolar Cutting VIO&#174; 50 C</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum(500 ml)&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F7524-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Mixture (95 % oxygen &#38; 5 % carbon dioxide)</td>
			<td>House Supply</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Circulating Baths</td>
			<td>Harvard-Apparatus</td>
			<td>75-0310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin 5000 (I.E. /5 ml)</td>
			<td>Braun</td>
			<td>1708.00.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone (100 mg / 2 ml)</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>15427276</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin(100 IE / ml)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I0516-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors&#160;</td>
			<td>Fine Science Instruments</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran (250 ml)</td>
			<td>Cp-Pharma</td>
			<td>1214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Membrane Oxygenator</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik</td>
			<td>T18728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery Microscope&#160;</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Retractor Set&#160;</td>
			<td>Carfil Quality</td>
			<td>180000056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoZoomer 2.0 HT</td>
			<td>Hamamatsu</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Woven Sponges&#160;</td>
			<td>Kompressen</td>
			<td>866110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin Streptomycin (1 mg / ml)&#160;</td>
			<td>C.C.Pro</td>
			<td>Z-13-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Extension Tube (30 cm)</td>
			<td>Braun</td>
			<td>4256000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump</td>
			<td>Harvard-Apparatus</td>
			<td>P-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri Dishc 100x15 mm</td>
			<td>VWR&#174;</td>
			<td>391-0578</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidon-Jod (Vet-Sep Spray)</td>
			<td>Livisto</td>
			<td>799-416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure Transducer Simulator</td>
			<td>UTAH Medical Products</td>
			<td>650-950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reusable Blood Pressure Transducers</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>MLT-0380/D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S &#38; T Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td>Fine Science Instruments</td>
			<td>00608-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Cotton Applicator</td>
			<td>NOBA Verbandmittel Danz GmbH</td>
			<td>974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Forceps 10 cm&#160;</td>
			<td>Fine Science Instruments</td>
			<td>00632-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Tying Forceps</td>
			<td>Fine Science Instruments</td>
			<td>11063-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 50ml Original Perfusor</td>
			<td>Braun</td>
			<td>8728810F-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UT - 03 Cannula</td>
			<td>Unique Medical, Japan</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Instruments</td>
			<td>15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veterinary Saline (500 ml)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>18X1807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Jacketed Reservoir&#160; 2 L</td>
			<td>Harvard-Apparatus</td>
			<td>73-3441</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>William&#39;s E Medium (500 ML)</td>
			<td>Thermofischer Scientific</td>
			<td>A1217601</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

normothermic ex vivo liver machine perfusion in mouse

Denne protokollen presenterer et optimalisert erytrocyttfritt NEVLP-system ved hjelp av muselever. Ex vivo bevaring av muselever ble oppnådd ved å bruke modifiserte kanyler og teknikker tilpasset konvensjonelt kommersielt ex vivo perfusjonsutstyr. Systemet ble brukt til å evaluere bevaringsresultatene etter 12 timers perfusjon. C57BL/6J-mus fungerte som leverdonorer, og leveren ble eksplantet ved kanylering av portvenen (PV) og gallegangen (BD), og deretter skylling av organet med varmt (37 °C) heparinisert saltvann. Deretter ble de eksplanterte leverene overført til perfusjonskammeret og utsatt for normoterm oksygenert maskinperfusjon (NEVLP). Innløps- og utløpsperfusatprøver ble samlet med 3 timers intervaller for perfusatanalyse. Etter fullført perfusjon ble leverprøver tatt for histologisk analyse, med morfologisk integritet vurdert ved hjelp av modifisert Suzuki-Score gjennom Hematoksylin-Eosin (HE) farging. Optimaliseringsforsøkene ga følgende funn: (1) mus som veide over 30 g ble ansett som mer egnet for forsøket på grunn av den større størrelsen på gallekanalen (BD). (2) en 2 Fr (ytre diameter = 0,66 mm) polyuretankanyle var bedre egnet til kanylering av portvenen (PV) sammenlignet med en polypropylenkanyle. Dette ble tilskrevet polyuretanmaterialets forbedrede grep, noe som resulterte i redusert kateterglidning under overføringen fra kroppen til organkammeret. (3) for kanylering av gallegangen (BD) ble en 1 Fr (ytre diameter = 0,33 mm) polyuretankanyle funnet å være mer effektiv sammenlignet med polypropylen UT - 03 (ytre diameter = 0,30 mm) kanyle. Med denne optimaliserte protokollen ble muselever bevart i en varighet på 12 timer uten signifikant innvirkning på den histologiske strukturen. Farging av hematoksylin-eosin (HE) avslørte en godt bevart morfologisk arkitektur i leveren, karakterisert ved overveiende levedyktige hepatocytter med tydelig synlige kjerner og mild utvidelse av leversinusoider.

Etablering av kirurgisk prosedyre Totalt 17 dyr ble brukt til dette forsøket: 14 mus ble ansatt for å optimalisere organinnkjøpsprosessen, inkludert kanylering av portvenen (PV) og gallegangen (BD), mens 3 mus ble brukt til å validere prosedyren (tabell 1). Histologiske resultater (figur 3) ble sammenlignet for å lette identifiseringen av optimal perfusjonstilstand.
Valg av perfusat Et tidligere brukt h...

Watch this Scientific Journal Video about Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse at JoVE.com

Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse

Et normoterm ex vivo leverperfusjonssystem (NEVLP) ble opprettet for muselever. Dette systemet krever erfaring innen mikrokirurgi, men gir mulighet for reproduserbare perfusjonsresultater. Evnen til å bruke muselever letter undersøkelsen av molekylære veier for å identifisere nye perfusatadditiver og muliggjør utførelse av eksperimenter fokusert på organreparasjon.

Normothermic Ex vivo levermaskinperfusjon i mus

This protocol presents an optimized erythrocytes-free NEVLP system using mouse livers. Ex vivo preservation of mouse livers was achieved by employing ...

Normothermic Ex-vivo levermaskinperfusjon i mus. Normothermic oksygenert lever perfusjon er en lovende strategi for å redde marginale organer og har nylig blitt introdusert i klinisk praksis. Imidlertid er de underliggende molekylære mekanismene ikke godt forstått.En musemodell er nødvendig for å studere molekylære veier videre, og dra nytte av genetisk modifiserte dyr, som transgene mus, og venter derfor på å etablere et normoterm oksygenert maskinperfusjonssystem for muselever. Her er et opplegg for hele systemet vårt. Først styres hele systemet ved 37 grader celsius av en termostatkontroller gjennom vannsirkulasjon.Perfusatet pumpes fra reservoaret av en peristaltisk pumpe inn i en oksygenator. Det er en uavbrutt gasstrøm på 95% oksygen og 5% karbondioksid i oksygenatoren. Perfusatet passerer deretter gjennom en boblefelle.Perfusatet med luftbobler pumpes tilbake til reservoaret under trykk. Det gjenværende perfusatet strømmer til orgelkammeret hvor røret er koblet til portalvenen. Perfusatet dreneres fra leveren gjennom den suprahepatiske cava inn i organkammeret.Parfysatutstrømningen fra orgelkammeret ledes tilbake til reservoaret av den peristaltiske pumpen. Et galledreneringsrør er koblet til orgelkammeret for å samle galle. Dette er vårt operasjonsbord.Alle operasjoner gjøres under et mikroskop. Vi opprettholder semi-sterile driftsforhold gjennom hele det kirurgiske inngrepet. Hold den franske rørkanylen med tang.Penetrer kanyleveggen med en 30G nål i en centimeters avstand fra enden av kanylen. Trykk kanylen gjennom kanylen til kanylespissen blir synlig. Her er et sammenligningsbilde av 26G kateter og selvfremstillet kanyle; Begge er egnet for kanylering av museportaler.Forbered 25 ml heparinisert saltvann med en endelig konsentrasjon på 2.500 internasjonale enheter per milliliter, og plasser sprøyten i inkubatorsettet ved 40 grader celsius. Her er hovedkomponentene i ex-vivo normoterm maskinperfusjonssystem. Komponentene inkluderer hovedsakelig orgelkammeret, termostatmaskinen, rullepumpen, oksygenatoren og reservoaret.Her kan du se et detaljert oppsett av orgelkammeret vårt. I utgangspunktet består den av et organkammerlegeme, en trykksensor, en varmeveksler og en boblefelle. Vi satte opp et parfysatinnløp, et parfysatutløp og en galledreneringsport.Dette er ADI-overvåkingssystemet vi bruker til å overvåke portvenetrykket. ADI-systemet består av en trykksensor, en sentral kontroller og skjermer. Slå på LabChart-programmet for trykkovervåking.Kalibrering og nullstilling kreves før hver bruk av trykksensoren. Bruk null millimeter kvikksølv og 20 millimeter kvikksølv som merker for å kalibrere trykksensoren for totrinnskalibreringen. Basert på konstant overvåking av portaltrykket, kan vi justere portalfluranen i henhold til trykkendringer.Ved like store mengder parfysat til reservoaret og orgelkammeret for å prime systemet, må det tas spesiell oppmerksomhet for å opprettholde steriliteten under fyllingsprosessen. Koble induksjonskammeret til en stikkontakt. Skru oksygen til 0,5 liter per minutt.Skru isofluran til 3%Plasser dyret i kammeret til dyp anestesi er nådd. Bruk mikrosprøyte for å påføre kroppsvekttilpasset dose analgesi. Her syv mikroliter buprenorfin.Nå starter vi operasjonen. Lag et tverrgående snitt i bukområdet av musen. Hudsnittet strekker seg til den bilaterale kjøttaksillærlinjen på begge sider.Lag forsiktig et langsgående snitt langs linea alba. Skjær gjennom bukmuskellaget med elektrokoagulasjon og saks. Legg forsiktig et stykke vått gasbind for å beskytte leveren mot elektrokoagulasjon.Fullstendig eksponere bukhulen i musen. Flytt forsiktig tynntarmen ut av bukhulen med en våt bomullspinne for å fullstendig eksponere hilum. Vist her er et skjematisk diagram av portalvenekanylering og gallekanalkanylering.I utgangspunktet velger vi riktig kanyle i henhold til musens størrelse, og vi bruker 6-0 silkessutur for fiksering av kanylen. Frigjør forsiktig den vanlige gallekanalen ved hjelp av fine buede tang uten tenner. Den vanlige gallekanalen er veldig lett skadet og bryte.Når den går i stykker, kan den ikke kanyleres. På grunn av retningen av den anatomiske posisjonen er buede tang lettere å betjene. Plasser to 6-0 silke suturløkke over den vanlige gallekanalen som forberedelse til neste trinn.Punkter gallegangen forsiktig med en 30G nål. Bruk spisse buede tang for å forstørre de små hullene, slik at den kan mate gallekanalkanylering. Bruk kanyletangen over gallekanalkanylen og skyv den inn i gallegangen. Notat.I øyeblikket av kanylering vil du føle motstanden brakt av galle. Hvis kraften ikke er godt kontrollert, vil kanylen bli presset ut av galdeveiene ved trykket av galleutstrømning. Juster forsiktig dybden på kanylen.Hvis den er for dyp, kan den skade gallegangen, og hvis den ikke er dyp nok, kan den skli ut. Gallestrøm kan observeres i kanylen etter vellykket kanylering. Klem portalvenen med flat tang og frigjør bindevevet forsiktig med buede tang.Ikke trekk hardt her, for ikke å forårsake rive i portalvenen. Når portalvenen er skadet, er det vanskelig å rec kanylere portalvenen. Plasser to 6-0 silke sutur Loop over den frie portalvenen.Bruk en arteriell klips for å lukke den distale portvenen. Meget forsiktig punktering av portalvenen med en av de ovennevnte portalvenekanylene. Blodstrømmen kan tydelig observeres i kanylen etter en vellykket punktering.Ta forvarmet heparin saltoppløsning fra inkubator. Fjern alle luftbobler. Fest sprøyten med forvarmet heparinisert saltvann i sprøytepumpen.Koble forlengelsesrøret til sprøytepumpen til kanylen på portalvenen. Juster hastigheten til to milliliter per minutt og start leverspylingen. Øk isofluran til 5 %og avlive musen med en inhalasjon av isofluran med overdose.Vær oppmerksom på fargen på leveren ved slutten av spylingsprosedyren. Excise leveren når fargen ble til en homogen gul. Overfør leveren forsiktig inn i organkammeret ved hjelp av en petriskål.Hold en liten mengde saltvann i petriskålen for å forhindre at leveren blir knust. Notat. Portalvenen og gallegangen kan lett vrides under denne prosedyren, noe som kan påvirke leverperfusjon og galleoppsamling. Tilfør vanlig saltvann langsomt inn i portalvenekanylen med en sprøyte for å evakuere luftboblene i kanylen.Koble portalvenekanylen inn i perfusatutstrømningsrøret i organkammeret. Musens gallekanalkanyle føres gjennom en ventil i orgelkammeret, som er lukket med en gummihette. Deretter settes gallerøret inn i et ferdig forberedt 0,5 milliliter mikrorør med et lite hull i ledningen.Etter at alt er koblet til, slå på den peristaltiske pumpen. Kontroller portalvenetrykkavlesningen for å justere strømningshastigheten. Oppretthold portalvenetrykket mellom syv til 10 millimeter kvikksølv ved å justere strømningshastigheten. Notat.Nominell strømningshastighet kan variere noe avhengig av alder og plassering av rør. Dette er valg av perfusatmedium, parfysatvolum og perfusjonstrykk basert på litteraturstudie av normoterm oksygenert rottelevermaskinperfusjonsstudier. Dette er en trinnvis prøveversjon for å etablere museperfusjonsmodellen.Det tok omtrent 14 eksperimenter å velge de mest egnede katetrene. I våre hender er bruk av to franske gummikatetre for portvenen, sammen med ett fransk gummikateter for gallegangen, den beste kombinasjonen for å oppnå homogen perfusjon med alle katetre på plass. pH-nivå og kaliumnivå var stabilt gjennom 12-timers perfusjon.pH-nivået varierte fra 7,26 til 7,71, og kaliumnivået varierte fra 5,9 til 6,8 millimol per liter. HE-farging viser at etter 12 timers perfusjon var histologiintegriteten til muselever relativt godt bevart. Samlet demonstrerte vi her den vellykkede etableringen av et normoterm oksygenert maskinperfusjonssystem for museleveren.Perfusjon av muselever i 12 timer resulterte i en god bevaring av levermorfologien, men ikke gjennom hele organet. Ytterligere innsats er nødvendig for å oppnå fullstendig homogen perfusjon over lengre tid. Når dette er oppnådd, kan bruk av genmodifiserte dyr vurderes, for eksempel bruk av IL-2-knockoutmus for å undersøke rollen som betennelse.

Research

JoVE Journal

Engineering

Normothermic Ex Vivo Liver Machine Perfusion in Mouse

High-resolution, High-speed, Three-dimensional Video Imaging with Digital Fringe Projection Techniques

Digital fringe projection (DFP) techniques provide dense 3D measurements of dynamically changing surfaces.&#160;Like the human eyes and brain, DFP uses ...

The Preparation of Electrohydrodynamic Bridges from Polar Dielectric Liquids

Utarbeidelse av Electrohydrodynamic Bridges fra Polar Transformator Liquids

Horizontal and vertical liquid bridges are simple and powerful tools for exploring the interaction of high intensity electric fields (8-20 kV/cm) and ...

In Vitro Culture of Epicardial Cells From Mouse Embryonic Heart

In Vitro Culture of Epicardial Cells From Mouse Embryonic Heart

In Vitro Culture of epikardiell celler fra mus Embryonic Hjerte

During embryogenesis, the epicardial contribution to coronary vasculature development has been very well established. Cells derived from the epicardium ...

Fabrication of Ultra-thin Color Films with Highly Absorbing Media Using Oblique Angle Deposition

Fabrikasjon av ultra tynn farge filmer med svært absorberende Media med skrå vinkel avsetning

Ultra-thin film structures have been studied extensively for use as optical coatings, but performance and fabrication challenges remain.&#160; We present ...

Methods of Ex Situ and In Situ Investigations of Structural Transformations: The Case of Crystallization of Metallic Glasses

Methods of Ex Situ and In Situ Investigations of Structural Transformations: The Case of Crystallization of Metallic Glasses

Ex-Situ og In Situ undersøkelser av strukturelle transformasjoner: tilfelle av krystallisering av metallisk briller

We demonstrate the use of two nuclear-based analytical methods that can follow the modifications of microstructural arrangement of iron-based metallic ...

Application of Design Aspects in Uniaxial Loading Machine Development

Anvendelse av Design aspekter i Uniaxial lasting maskin utvikling

In terms of accurate and precise mechanical testing, machines run the continuum. Whereas commercial platforms offer excellent accuracy, they can be ...

In vitro Assessment of Aortic Regurgitation Using Four-Dimensional Flow Magnetic Resonance Imaging

In vitro Assessment of Aortic Regurgitation Using Four-Dimensional Flow Magnetic Resonance Imaging

Introduksjon Vurdering av aortaoppblomstring ved bruk av magnetisk resonansavbildning med firedimensjonal strømning

Aortic regurgitation (AR) refers to backward blood flow from the aorta into the left ventricle (LV) during ventricular diastole. The regurgitant jet ...

Particle Image Velocimetry Investigation of Hemodynamics via Aortic Phantom

Particle Image Velocimetry Investigation of Hemodynamics via Aortic Phantom

Partikkelbilde velocimetry undersøkelse av hemodynamikk via aortisk fantom

Aortic valve dysfunction and stroke have recently been reported in transcatheter aortic valve implantation (TAVI) patients. Thrombus in the aortic sinus ...

Synthesizing Nanoparticles and Nanostructures via Laser Ablation

Ultrafast Laser-Ablated Nanoparticles and Nanostructures for Surface-Enhanced Raman Scattering-Based Sensing Applications

Advancements and Applications in Nanoparticle Synthesis Through Laser Ablation in Liquids (Video) | JoVE

Ultrafast laser-ablerte nanopartikler og nanostrukturer for overflateforbedrede Raman-spredningsbaserte sensorapplikasjoner

The technique of ultrafast laser ablation in liquids has evolved and matured over the past decade, with several impending applications in various fields ...

Preparation of Free-Surface Hyperbolic Water Vortices

Fremstilling av hyperbolske vannvirvler med fri overflate

Free surface vortices are present in industry in flow regulation, energy dissipation, and energy generation. Although investigated extensively, detailed ...