L'iniezione retroorbitale è un metodo di iniezione specializzato utilizzato per somministrare composti nella circolazione venosa. La ricerca sugli animali è un passo importante verso il lavoro clinico. Nell'ambito della ricerca sugli animali, c'è la necessità di somministrare diversi tipi di composti attraverso vie diverse.
Alcune di queste vie includono quella sottocutanea, intraperitoneale e endovenosa. L'iniezione endovenosa è la via più comunemente utilizzata nei neonati che si trovano nell'unità di terapia intensiva neonatale. Tuttavia, nella ricerca sui roditori, in particolare nei roditori adulti, le iniezioni endovenose vengono eseguite di routine sulla vena caudale.
Nei neonati, è estremamente difficile eseguire un'iniezione della vena caudale con successo e in modo riproducibile. Pertanto, la via retro-orbitale può essere utilizzata come alternativa più semplice. Innanzitutto, dimostreremo l'utilizzo di un colorante, il blu tripano, in modo che lo spettatore possa vedere chiaramente il colorante che entra nella circolazione venosa.
Il ratto neonatale viene posto in anestesia completa, con la testa sdraiata su un fianco, appoggiata sopra una fonte di luce, in modo che l'occhio e la vascolarizzazione laterale siano esposti e visibili. L'ago viene inserito nella parte anteriore dell'orbita oculare, l'equivalente del canto mediale. Iniettare la soluzione con un movimento delicato, fluido e fluido.
Per riprodurre al meglio questa procedura, è importante comprendere l'anatomia venosa orbitaria. Nel ratto c'è una rete di diverse vene appena sotto l'occhio, che consentono un accesso facile e diretto al plesso venoso. Nel ratto albino neonatale è visibile anche sia la vena temporale superficiale che quella facciale.
Questa procedura può essere eseguita esattamente nello stesso modo. Nei topi neonatali. Usa un ago con calibro da 29 a 31 intorno a 0,30 millimetri.
Per ottenere volumi accurati, prelevare la soluzione da iniettare da un volume pipettato. Posizionare gli animali su una superficie piana in decubito laterale. Indurre l'anestesia con isoflurano per tutto il corpo.
5% induzione, 3% mantenimento. Controllare la profondità dell'anestesia utilizzando il metodo del riflesso di ritiro della trazione. Con la testa rivolta verso destra, somministrare l'iniezione nel seno retroorbitale destro.
Inserire lo smusso dell'ago verso il basso nella parte anteriore dell'orbita dell'occhio, l'equivalente del canto medio, con un angolo di circa 40 gradi. Questo angolo consente di dirigere l'ago verso la parte posteriore dell'orbita dell'occhio. Iniettare con un movimento delicato, fluido e fluido.
Attendere un breve istante prima di estrarre l'ago, lentamente, per evitare il riflusso. Utilizzare una nuova siringa sterile per ogni animale per evitare contaminazioni. Metti il cucciolo nella scatola di recupero, appoggiato su un dispositivo di riscaldamento protetto, a circa 35-37 gradi Celsius.
Attendi il recupero e controlla eventuali segni di sofferenza prima di riportare il cucciolo alla madre. Questa tecnica è stata utilizzata per somministrare il tracciante biotina-destrano nel sistema vascolare del cervello di animali che hanno subito un'emorragia della matrice germinale. Gli animali che hanno ricevuto un'iniezione salina come controllo non mostrano alcuna colorazione visibile della vascolarizzazione all'interno del cervello.
Il successo dell'iniezione retro-orbitale del tracciante biotina-destrano ha permesso di valutare la sua presenza nel sistema vascolare cerebrale entro 10 minuti dalla somministrazione retro-orbitale. Questa tecnica è stata quindi utilizzata per rilevare la perdita vascolare del tracciante a livello dei singoli vasi sanguigni negli animali feriti da GMH. Questo risultato consente, ad esempio, di quantificare la lesione quantificando la quantità di vasi sanguigni che fuoriescono a seguito di una lesione cerebrale GMH.
Inoltre, questa procedura può essere eseguita anche senza una fonte di luce, rendendola una tecnica semplice, diretta e riproducibile che consente la somministrazione del composto direttamente nella circolazione venosa di ratti e topi neonatali. Se eseguita correttamente, questa procedura non dovrebbe causare effetti negativi. Questa radice di somministrazione consente iniezioni di anticorpi, cellule e altri composti direttamente nella circolazione venosa degli animali neonatali.
Questa via è di maggiore rilevanza clinica rispetto ad altre vie, come le iniezioni intraperitoneali o sottocutanee.
