Name: Developing a Tool for Using Inverted Confocal Microscopes for In Vivo Intravital Imaging (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-06-30T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Developing a Tool for Using Inverted Confocal Microscopes for In Vivo Intravital Imaging at JoVE.com

Vi takker Valentina Greco for K14-mCherry-H2B-musene. Vi er takknemlige for Emory University Physics Department Machine Shop for å generere glassdekselskivene. Dette arbeidet ble finansiert av Career Development Award #IK2 BX005370 fra US Department of Veterans Affairs BLRD Service til LS, NIH Awards RF1-AG079269 og R56-AG072473 til MJMR, og I3 Emory SOM / GT Computational and Data Analysis Award til MJMR.

Denne undersøkelsen ble utført i samsvar med Emory University og Atlanta Veterans Affairs Medical Center retningslinjer for dyrepleie og bruk og er godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC).
1. Installere live imaging innsatsen på det inverterte mikroskopstadiet
<ol><li>Konstruer innsatsen ved hjelp av STL-filer (tilleggsfil 1, tilleggsfil 2 og tilleggsfil 3) som angir 3D-dimensjoner og utforming (se figur 1</str...

Intravital Imaging Using an Inverted Microscope to Track Skin Cell Dynamics

<ol>
	<li>Babes, L., Yipp, B. G., Senger, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+of+the+metastatic+pulmonary+environment.">Intravital microscopy of the metastatic pulmonary environment.</a> Methods in Molecular Biology. , 383-396 (2023).</li><li>Nal Chen, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+promote+glioblastoma+tumor+cell+migration+after+biopsy.">Neutrophils promote glioblastoma tumor cell migration after biopsy.</a> Cells. 11 (14), 2196 (2022).</li><li>Courson, J. A., Langlois, K. W., Lam, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+to+study+platelet-leukocyte-endothelial+interactions+in+the+mouse+liver.">Intravital microscopy to study platelet-leukocyte-endothelial interactions in the mouse liver.</a> Journal of Visualized Experiments. 188 (188), (2022).</li><li>Rios, A. C., van Rheenen, J., Scheele, C. L. G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidimensional+imaging+of+breast+cancer.">Multidimensional imaging of breast cancer.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 13 (5), (2022).</li><li>Fischer, M., Edelblum, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+to+visualize+murine+small+intestinal+intraepithelial+lymphocyte+migration.">Intravital microscopy to visualize murine small intestinal intraepithelial lymphocyte migration.</a> Current Protocols. 2 (8), (2022).</li><li>Pineda, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+hair+follicle+regeneration+in+the+mouse.">Intravital imaging of hair follicle regeneration in the mouse.</a> Nature Protocols. 10 (7), 1116-1130 (2015).</li><li>Entenberg, D., Oktay, M. H., Condeelis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+to+study+cancer+progression+and+metastasis.">Intravital imaging to study cancer progression and metastasis.</a> Nature Reviews. Cancer. 23 (1), 25-42 (2023).</li><li>Turk, M., Biernaskie, J., Mahoney, D. J., Jenne, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+techniques+to+image+wound+healing+in+mouse+skin.">Intravital microscopy techniques to image wound healing in mouse skin.</a> Methods in Molecular Biology. , 165-180 (2022).</li><li>Pal Arndt, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+3D+intravital+look+at+the+juxtaglomerular+renin-cell-niche+reveals+an+individual+intra/extraglomerular+feedback+system.">A quantitative 3D intravital look at the juxtaglomerular renin-cell-niche reveals an individual intra/extraglomerular feedback system.</a> Frontiers in Physiology. 13, 980787 (2022).</li><li>Oal Yam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+conversion+to+a+tumor-killing+phenotype+underpins+effective+microbial+therapy.">Neutrophil conversion to a tumor-killing phenotype underpins effective microbial therapy.</a> Cancer Research. 83 (8), 1315-1328 (2023).</li><li>Huang, S., Rompolas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+microscopy+for+intracutaneous+imaging+of+stem+cell+activity+in+mice.">Two-photon microscopy for intracutaneous imaging of stem cell activity in mice.</a> Experimental Dermatology. 26 (5), 379-383 (2017).</li><li>Durr, N. J., Weisspfennig, C. T., Holfeld, B. A., Ben-Yakar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maximum+imaging+depth+of+two-photon+autofluorescence+microscopy+in+epithelial+tissues.">Maximum imaging depth of two-photon autofluorescence microscopy in epithelial tissues.</a> Journal of Biomedical Optics. 16 (2), 026008 (2011).</li><li>Tauer, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advantages+and+risks+of+multiphoton+microscopy+in+physiology.">Advantages and risks of multiphoton microscopy in physiology.</a> Experimental Physiology. 87 (6), 709-714 (2002).</li><li>Yoshitake, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+comparison+between+confocal+and+multiphoton+microscopy+for+rapid+histopathological+evaluation+of+unfixed+human+breast+tissue.">Direct comparison between confocal and multiphoton microscopy for rapid histopathological evaluation of unfixed human breast tissue.</a> Journal of Biomedical Optics. 21 (12), 126021 (2016).</li><li>Mesa, K., Rompolas, P., Zito, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Niche-induced+cell+death+and+epithelial+phagocytosis+regulate+hair+follicle+stem+cell+pool.">Niche-induced cell death and epithelial phagocytosis regulate hair follicle stem cell pool.</a> Nature. 522, 94-97 (2015).</li><li>Ral Li, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pdgfra+marks+a+cellular+lineage+with+distinct+contributions+to+myofibroblasts+in+lung+maturation+and+injury+response.">Pdgfra marks a cellular lineage with distinct contributions to myofibroblasts in lung maturation and injury response.</a> eLife. 7, (2018).</li><li>Tal Tumbar, ., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+epithelial+stem+cell+niche+in+skin.">Defining the epithelial stem cell niche in skin.</a> Science. 303 (5656), 359-363 (2004).</li><li>Ewald, A. J., Werb, Z., Egeblad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+of+vital+signs+for+long-term+survival+of+mice+under+anesthesia.">Monitoring of vital signs for long-term survival of mice under anesthesia.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2 (2), 5563 (2011).</li><li>Sanderson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-photon+microscopy.">Multi-photon microscopy.</a> Current Protocols. 3 (1), 634 (2023).</li></ol>

I denne studien presenterer vi et nytt verktøy som muliggjør stabil, langsiktig intravital avbildning av intakt musehudepitel på inverterte konfokale mikroskoper. Denne oppfinnelsen er laget av PLA, som er det vanligste og billigste 3D-utskrivbare materialet; alle interne 3D-utskriftskostnader for denne innsatsen utgjør < $ 5. De to separate innsatsstykkene (figur 1, tilleggsfil 1 og tilleggsfil 2) kan enkelt settes sammen ved hjelp av settskruer (se <st...

Intravital mikroskopi er et kraftig verktøy som gjør det mulig å overvåke celleadferd i deres uforstyrrede in vivo-miljøer. Denne unike metoden har gitt viktig innsikt i den indre driften av komplekse pattedyrs organsystemer, inkludert lunge1, hjerne2, lever3, brystkjertel4, tarm5 og hud6. Videre har denne tilnærmingen avslørt celleadferdsendringer under tumorutvikling7, sårheling8,9, betennelse10 og andre forskjellige patologier in situ. I denne studien fokuserer vi på å forbedre tilgjengeligheten til intravital mikroskopi for å avbilde levende epitel- og stromaldynamikk i intakt musehud. Forståelse av celleadferd i pattedyrhud er av høy klinisk betydning på grunn av den bemerkelsesverdige regenerative og tumorigene kapasiteten til dette vevet.
Intravital avbildning hos mus har primært blitt utført ved bruk av stående multifotonmikroskop på grunn av deres evne til å gi høyoppløselig avbildning på vevsdybder >100 μm11,12. Ikke desto mindre mangler disse instrumentene arbeidshestens allsidighet og mer generelle tilgjengelighet av inverterte konfokale mikroskoper, som er mer brukervennlige og kostnadseffektive, gir muligheten til å avbilde dyrkede celler, krever ikke fullstendig mørke under bildeopptak, og er generelt tryggere, blant andre bemerkelsesverdige fordeler13,14. I denne studien presenterer vi et nytt verktøy som betydelig forbedrer intravital bildetilgjengelighet ved å tilpasse denne tilnærmingen for inverterte konfokale mikroskoper.
Her presenterer vi en 3D-trykt tilpasset sceneinnsatsdesign som inneholder flere viktige funksjoner for å lette stabil, langsiktig intravital avbildning av museørehud på et invertert konfokalmikroskop (figur 1, figur 2, figur 3, figur 4 og figur 5). Disse spesialiserte funksjonene inkluderer et forskjøvet objektivt hull som gjør at hele kroppen til en voksen mus kan ligge helt flatt under avbildning. Dette minimerer vibrasjonsforstyrrelsen av musens kroppsbevegelser på bildebehandling og eliminerer behovet for å administrere ketamin og xylazin for å dempe pusten, en praksis ofte kombinert med intravital avbildning6. I tillegg plasserer hjørnebraketter på innsatsen riktig en isofluran nesekegle for å justere seg med musens ansikt, en metalløreklemme immobiliserer museøret til en spesialbygd dekselskive, og en valgfri avtakbar biofeedback-varmeplate med lukket sløyfe ligger flush i innsatsen for å støtte musens kroppstemperatur under lange bildebehandlingsøkter. Den tilpassede coverslip-disken, som gir en flat overflate som er avgjørende for at musehodet og øret skal ligge flatt, ble generert i et maskinverksted ved å fjerne veggene i en generisk dekkslipholdig cellekulturfat. Bruken av en 40x silikonolje nedsenkingslinse (1,25 numerisk blenderåpning [N.A.], 0,3 mm arbeidsavstand) sammen med coverslip-disken og tilpasset sceneinnsats gir bilder med høy oppløsning >50 μm dypt inn i øredermis.
For å teste funksjonaliteten til denne nye inverterte mikroskopsceneinnsatsen, fanget vi z-stabler som spenner over alle epidermale epitellag over et 3-timers tidsforløp i øret til en levende transgen K14-H2B-mCherry15 voksen mus (epitelkjerner i denne muselinjen inneholder en rød fluorescerende etikett) (figur 6A-A'). Vi fanget også z-stabler som spenner over flere fibroblastlag i huden dermis over et 3 timers tidsforløp i øret til en levende transgen Pdgfra-rtTA16; pTRE-H2B-GFP17 voksen mus (fibroblastkjerner i denne muselinjen inneholder en grønn fluorescerende etikett etter doksysyklininduksjon) (figur 6B-D'). Våre høyoppløselige data viser konsistent stabilitet ved mangel på drift i x-, y- og z-planene, og viser dermed effektiviteten til dette nye intravitale bildeverktøyet for bruk på inverterte mikroskoper. Det er viktig at dimensjonene til denne 3D-printede sceneinnsatsen kan justeres, som beskrevet i tilleggsfil 1, tilleggsfil 2 og tilleggsfil 3, for å passe til ethvert omvendt mikroskop, og plasseringen av objektivåpningen kan flyttes til alternative steder i innsatsen for å bedre passe til avbildning av en bestemt vevs- og/eller dyremodell av interesse. Denne oppfinnelsen kan dermed gi individuelle laboratorier, eller etterforskere med konfokal tilgang til kjernefasiliteter, mulighet til å tilpasse dette verktøyet for deres unike intravitale bildebehov, og dermed strømlinjeforme evalueringen av ulike in vivo cellebiologi.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3D Printer</td>
			<td>Qudi Tech</td>
			<td>i-Fast</td>
			<td>3D prints using PLA material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40x 1.25NA silicone objective lens</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AxR Laser Scanning Confocal Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Tipped Swab</td>
			<td>VWR</td>
			<td>76337-046</td>
			<td>Cream/ointment application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxycycline hyclate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9891</td>
			<td>Induces GFP labeling of fibroblast nuclei in Pdgfra-rtTA; pTRE-H2B-GFP mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flathead Screwdriver (2.5 mm)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Affiix insert to microscope stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flathead Screws x 4 (#6-32)</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Screw insert into microscope stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Bottom Culture Dish</td>
			<td>chemglass Life Sciences</td>
			<td>CLS-1811-002</td>
			<td>Modified by removing walls of dish for use as coverslip disk compatible with live insert; 35 mm wide disk contains 20 mm wide glass coverslip; dish walls were removed by machine shop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat Plate controller</td>
			<td>Physitemp</td>
			<td>TCAT-2LV</td>
			<td>Animal Temperature Controller - Low Voltage; anal prob attachment for mouse body temperature monitoring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hex Wrench (1.5 mm)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For M3 setscrew adjustments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hex Wrench (2.5 mm)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Adjust tension on metal ear clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravital Imaging Insert</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>HPA030782-100uL</td>
			<td>Mouse anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labeling Tape (or Scotch Tape)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10127-458</td>
			<td>Alternative to metal ear clip to immobilize ear to coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal fastener</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>used as ear clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: C57BL/6-Pdgfraem1(rtTA)Xsun/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>RRID: IMSR_JAX:034459</td>
			<td>Fibrroblast-specific promoter driving doxycycline-inducible rtTA expression</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: K14-H2BPAmCherry</td>
			<td>Courtesy of Dr. Valentina Greco at Yale University</td>
			<td></td>
			<td>Labels epidermal epithelial cell nuclei with mCherry; referred to in text as &#34;K14-H2B-mCherry&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: pTRE-H2B-GFP: STOCK 
			Tg(tetO-HIST1H2BJ/GFP)47Efu/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>RRID: IMSR_JAX:005104</td>
			<td>&#160;Labels fibroblast nuclei with GFP when combined with Pdgfra-rtTA and induced with doxycycline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multipurpose Sealing Wrap</td>
			<td>Glad</td>
			<td></td>
			<td>Enhance mouse warmth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optixcare</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MSPP-078932779</td>
			<td>Eye lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Set screws x 3 (M3; 6 mm)</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>SS3M6</td>
			<td>Attachment for heatplate module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone Immersion Oil</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Applied to 40x silicone objective</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Heating Plate</td>
			<td>Physitemp</td>
			<td>HP-4M</td>
			<td>Provides heat to animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Somnoflow Low-Flow Electronic Vaporizer</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SF-01</td>
			<td>Mouse anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Grease</td>
			<td>Flinn Scientific</td>
			<td>AP1095</td>
			<td>Seals coverslip disk to insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>hair removal&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water circulating heat pad</td>
			<td>Stryker Medical</td>
			<td>TP700</td>
			<td>for mouse revival post-imaging</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

streamlined intravital imaging approach for long-term monitoring of epithelial tissue dynamics on an inverted confocal microscope

Forståelse av normal og avvikende in vivo celleatferd er nødvendig for å utvikle kliniske intervensjoner for å hindre sykdomsinitiering og progresjon. Det er derfor viktig å optimalisere bildebehandlingsmetoder som letter observasjonen av celledynamikk in situ, hvor vevsstruktur og sammensetning forblir uforstyrret. Den epidermis er kroppens ytterste barriere, samt kilden til de mest utbredte menneskelige kreftformer, nemlig kutane hudkarsinomer. Tilgjengeligheten av hudvev gir en unik mulighet til å overvåke epitel- og dermale celleadferd hos intakte dyr ved bruk av ikke-invasiv intravital mikroskopi. Likevel har denne sofistikerte bildebehandlingsmetoden primært blitt oppnådd ved hjelp av stående multifotonmikroskoper, som representerer en betydelig barriere for oppføring for de fleste etterforskere. Denne studien presenterer en spesialdesignet, 3D-trykt mikroskopsceneinnsats egnet for bruk med inverterte konfokale mikroskoper, som strømlinjeformer den langsiktige intravitale avbildningen av ørehud i levende transgene mus. Vi tror at denne allsidige oppfinnelsen, som kan tilpasses for å passe til det inverterte mikroskopmerket og den valgte modellen og tilpasset bildet av flere organsystemer, vil vise seg å være uvurderlig for det større vitenskapelige forskningsmiljøet ved å forbedre tilgjengeligheten til intravital mikroskopi betydelig. Denne teknologiske utviklingen er avgjørende for å styrke vår forståelse av levende celledynamikk i normale og sykdomskontekster.

Streamlined Intravital Imaging Approach for Long-Term Monitoring of Epithelial Tissue Dynamics on an Inverted Confocal Microscope

Riktig montering av live-bildeinnsatsen på et invertert konfokalmikroskop og passende orientering av en transgen mus på toppen av innsatsen valideres ved å anskaffe z-stabler av fluorescerende merket, levende ørevev over et tidsforløp ≥1 time med minimal bevis på drift i x-, y- og z-aksene. Bilder bør tas med jevne intervaller (intervalltiden vil avhenge av det biologiske spørsmålet, styrken til fluorescenssignalet, etc.) slik at celledynamikk og bildedrift kan spores over tid. Gjennom hele tidsforløpet avsl?...

Watch this Scientific Journal Video about Developing a Tool for Using Inverted Confocal Microscopes for In Vivo Intravital Imaging at JoVE.com

Developing a Tool for Using Inverted Confocal Microscopes for In Vivo Intravital Imaging (Video) | JoVE

Protokollen presenterer et nytt verktøy for å forenkle intravital avbildning ved hjelp av invertert konfokalmikroskopi.

Strømlinjeformet intravital bildebehandlingstilnærming for langsiktig overvåking av epitelvevsdynamikk på et invertert konfokalmikroskop

Understanding normal and aberrant in vivo cell behaviors is necessary to develop clinical interventions to thwart disease initiation and progression. It ...

Vi utviklet et verktøy for å utføre intravital avbildning på levende mus ved hjelp av et invertert konfokalmikroskop. Dette gjør det mulig for oss å spore hudcelledynamikk gjennom homeostase og sammenligne celleadferd under sykdomsutbrudd og progresjon. Multifotonmikroskopi er den primære tilnærmingen som brukes for å oppnå intravital cellesporing.Ulempene med disse mikroskopene inkluderer imidlertid begrenset allsidighet i den daglige bildebehandlingen, høye kostnader og teknisk kompleksitet. Vårt nye verktøy muliggjør bruk av allsidige inverterte konfokalmikroskoper for in vivo intravital avbildning. Ved å endre designfilen kan sceneinnsatsdimensjonene tilpasses for å passe til ethvert merke av invertert mikroskop.Objektivhullet kan endres og flyttes for å passe til hvilken som helst dyremodell og vev du velger.