Name: Decoding Metastasis-to-Metastasis Seeding Using a New In Vivo Technique for Tracking Breast Cancer Spread (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-07-07T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Decoding Metastasis-to-Metastasis Seeding Using a New In Vivo Technique for Tracking Breast Cancer Spread at JoVE.com

लेखक माइक्रो कंप्यूटेड टोमोग्राफी (S10RR029545), वेरा डेसमारैस और एनालिटिकल इमेजिंग फैसिलिटी की हिलेरी गुज़िक के साथ उनकी सहायता के लिए वेड कोबा को माइक्रोस्कोपी के साथ उनके प्रशिक्षण और सहायता के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं, आइंस्टीन मोंटेफियोर कैंसर सेंटर, नेशनल कैंसर इंस्टीट्यूट (P30CA013330, R01CA21248, R01CA255153), ग्रस लिपर बायोफोटोनिक्स सेंटर, कैंसर रिसर्च के लिए एकीकृत इमेजिंग प्रोग्राम, एक सर हेनरी वेलकम पोस्टडॉक्टोरल फैलोशिप (221647/Z/20/Z), और एक METAvivor कैरियर डेवलपमेंट अवार्ड।

इस प्रोटोकॉल में वर्णित सभी प्रक्रियाओं कशेरुक जानवरों के उपयोग के लिए दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार प्रदर्शन किया गया है, चिकित्सा संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति के अल्बर्ट आइंस्टीन कॉल...

Examining Tumor Cell Dissemination from Lung Metastases

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	<li>Dillek&#229;s, H., Rogers, M. S., Straume, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+90%+of+deaths+from+cancer+caused+by+metastases.">Are 90% of deaths from cancer caused by metastases.</a> Cancer Medicine. 8 (12), 5574-5576 (2019).</li><li>Gupta, G. P., Massagu&#233;, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+metastasis:+building+a+framework.">Cancer metastasis: building a framework.</a> Cell. 127 (4), 679-695 (2006).</li><li>Nguyen, D. X., Bos, P. D., Massagu&#233;, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastasis:+from+dissemination+to+organ-specific+colonization.">Metastasis: from dissemination to organ-specific colonization.</a> Nature Reviews. 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R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+node+metastases+can+invade+local+blood+vessels,+exit+the+node,+and+colonize+distant+organs+in+mice.">Lymph node metastases can invade local blood vessels, exit the node, and colonize distant organs in mice.</a> Science. 359 (6382), 1403-1407 (2018).</li><li>Coste, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematogenous+dissemination+of+breast+cancer+cells+from+lymph+nodes+is+mediated+by+tumor+microenvironment+of+metastasis+doorways.">Hematogenous dissemination of breast cancer cells from lymph nodes is mediated by tumor microenvironment of metastasis doorways.</a> Frontiers in Oncology. 10, 571100 (2020).</li><li>Borriello, L., Condeelis, J., Entenberg, D., Oktay, M. 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P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massively+parallel+clonal+analysis+using+CRISPR/Cas9+induced+genetic+scars.">Massively parallel clonal analysis using CRISPR/Cas9 induced genetic scars.</a> bioRxiv. , 056499 (2017).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bone+microenvironment+invigorates+metastatic+seeds+for+further+dissemination.">The bone microenvironment invigorates metastatic seeds for further dissemination.</a> Cell. 184 (9), 2471.e20-2486.e20 (2021).</li><li>Kedrin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+metastatic+behavior+through+a+mammary+imaging+window.">Intravital imaging of metastatic behavior through a mammary imaging window.</a> Nature Methods. 5 (12), 1019-1021 (2008).</li><li>Grau, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatiotemporally+controlled+induction+of+gene+expression+in+vivo+allows+tracking+the+fate+of+tumor+cells+that+traffic+through+the+lymphatics.">Spatiotemporally controlled induction of gene expression in vivo allows tracking the fate of tumor cells that traffic through the lymphatics.</a> International Journal of Cancer. 147 (4), 1190-1198 (2020).</li><li>Riihim&#228;ki, M., Thomsen, H., Sundquist, K., Sundquist, J., Hemminki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+landscape+of+cancer+metastases.">Clinical landscape of cancer metastases.</a> Cancer Medicine. 7 (11), 5534-5542 (2018).</li><li>Gurskaya, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+of+a+monomeric+green-to-red+photoactivatable+fluorescent+protein+induced+by+blue+light.">Engineering of a monomeric green-to-red photoactivatable fluorescent protein induced by blue light.</a> Nature Biotechnology. 24 (4), 461-465 (2006).</li><li>Zhang, G. -. L., Zhang, Y., Cao, K. -. X., Wang, X. -. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+injection+of+breast+cancer+cells+into+the+mice+mammary+fat+pad.">Orthotopic injection of breast cancer cells into the mice mammary fat pad.</a> Journal of Visualized Experiments. (143), (2019).</li><li>Pavese, J., Ogden, I. M., Bergan, R. 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W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EZ+Clear+for+simple,+rapid,+and+robust+mouse+whole+organ+clearing.">EZ Clear for simple, rapid, and robust mouse whole organ clearing.</a> eLife. 11, e77419 (2022).</li><li>Entenberg, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Setup+and+use+of+a+two-laser+multiphoton+microscope+for+multichannel+intravital+fluorescence+imaging.">Setup and use of a two-laser multiphoton microscope for multichannel intravital fluorescence imaging.</a> Nature Protocols. 6 (10), 1500-1520 (2011).</li><li>Gambotto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunogenicity+of+enhanced+green+fluorescent+protein+(EGFP)+in+BALB/c+mice:+identification+of+an+H2-Kd-restricted+CTL+epitope.">Immunogenicity of enhanced green fluorescent protein (EGFP) in BALB/c mice: identification of an H2-Kd-restricted CTL epitope.</a> Gene Therapy. 7 (23), 2036-2040 (2000).</li><li>Han, W. G. H., Unger, W. W. J., Wauben, M. H. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elimination+of+fluorescent+protein+immunogenicity+permits+modeling+of+metastasis+in+immune-competent+settings.">Elimination of fluorescent protein immunogenicity permits modeling of metastasis in immune-competent settings.</a> Cancer Cell. 40 (1), 1-2 (2022).</li><li>Fluegen, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+heterogeneity+of+disseminated+tumour+cells+is+preset+by+primary+tumour+hypoxic+microenvironments.">Phenotypic heterogeneity of disseminated tumour cells is preset by primary tumour hypoxic microenvironments.</a> Nature Cell Biology. 19 (2), 120-132 (2017).</li><li>Yan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+engrafted+human+cancer+and+therapy+responses+in+immunodeficient+zebrafish.">Visualizing engrafted human cancer and therapy responses in immunodeficient zebrafish.</a> Cell. 177 (7), 1903.e14-1914.e14 (2019).</li><li>Borriello, L., Traub, B., Coste, A., Oktay, M. 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S., Yuan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+promotes+epithelial-to-mesenchymal+transition+and+metastasis+of+bladder+cancer+cells+through+HIF-1&#945;-&#946;-catenin/Notch1+pathways.">Isoflurane promotes epithelial-to-mesenchymal transition and metastasis of bladder cancer cells through HIF-1&#945;-&#946;-catenin/Notch1 pathways.</a> Life Sciences. 258, 118154 (2020).</li><li>Jiao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+volatile+anesthetics+and+tumor+progression:+unveiling+the+mystery.">Relationship between volatile anesthetics and tumor progression: unveiling the mystery.</a> Current Medical Science. 38 (6), 962-967 (2018).</li></ol>

इस पत्र में, हम फेफड़ों में ट्यूमर कोशिकाओं के चयनात्मक फोटोकोनवर्जन के लिए एक सर्जिकल प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। यह तकनीक शोधकर्ताओं को फेफड़ों में ट्यूमर कोशिकाओं को चुनिंदा रूप से चिह्नित करने ?...

मेटास्टेसिस कैंसर से संबंधित मौतों का प्रमुख कारण है1. मेटास्टैटिक कैंसर तब उत्पन्न होता है जब प्राथमिक ट्यूमर से कोशिकाएं पूरे शरीर में फैल जाती हैं और दूर के अंगों में नैदानिक रूप से पता लगाने योग्य ट्यूमर में फैल जाती हैं 2,3.
हालांकि मेटास्टेसिस को आमतौर पर एक यूनिडायरेक्शनल प्रक्रिया के रूप में माना जाता है जिसमें ट्यूमर कोशिकाएं प्राथमिक ट्यूमर से फैलती हैं और दूरके अंगों को उपनिवेशित करती हैं, नैदानिक और प्रयोगात्मक साक्ष्य बढ़ने से पता चलता है कि एक अधिक जटिल, बहु-दिशात्मक प्रक्रिया खेल में है। यह दिखाया गया है कि ट्यूमर कोशिकाओं परिसंचारी प्राथमिक ट्यूमर (यदि अभी भी जगह में है)5,6,7,8,9 reseed कर सकते हैं, और मौजूदा मेटास्टैटिक foci से ट्यूमर कोशिकाओं तृतीयक साइटों के लिए यात्रा और नए घावों10,11,12,13 को जन्म दे सकते हैं. दरअसल, हाल के जीनोमिक विश्लेषणों के साक्ष्य से पता चलता है कि कुछ मेटास्टैटिक घाव प्राथमिक ट्यूमर से नहीं, बल्कि अन्य मेटास्टेस से उत्पन्न होते हैं-एक घटना जिसे "मेटास्टेसिस-से-मेटास्टेसिस" या "मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग"14,15,16के रूप में जाना जाता है। मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग प्राथमिक ट्यूमर को हटाने, मेटास्टेटिक बोझ बढ़ाने और जीवन और अस्तित्व की रोगी गुणवत्ता को कम करने के बाद भी रोग प्रक्रिया को बनाए रख सकती है। इसलिए, मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग के पीछे की प्रक्रियाओं को समझना मेटास्टेटिक बीमारी वाले रोगियों के लिए उपचार रणनीतियों को परिष्कृत करने के लिए महत्वपूर्ण है।
संभावित गंभीर नैदानिक निहितार्थों के बावजूद, मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग के बारे में बहुत कम जानकारी है, जो कि तार्किक और तकनीकी सीमाओं के कारण है। मानव अध्ययन नैदानिक नमूनों की कमी से सीमित हैं। मेटास्टैटिक घावों की नैदानिक लकीर और बायोप्सी असामान्य हैं, जैसा कि प्रतीत होता है कि स्वस्थ अंगों की बायोप्सी है, जहां एकल प्रसारित ट्यूमर कोशिकाएं दुबक सकती हैं। इसका मतलब यह है कि मानव अध्ययन आमतौर पर केवल उन व्यक्तियों से शव परीक्षा के नमूनों का उपयोग करके संभव होता है जिनके प्राथमिक ट्यूमर या तो अभी भी जगह में हैं या पहले से उच्छेदित थे लेकिन अभी भी शोधकर्ताओं के लिए उपलब्ध हैं। जब इस तरह के नमूने उपलब्ध हैं, कैंसर की प्रगति के वंश विश्लेषण अनुक्रमण तरीकों14 का उपयोग कर प्रदर्शन किया जाना चाहिए. हालांकि, मिलान किए गए प्राथमिक ट्यूमर और मेटास्टेस के थोक अनुक्रमण में व्यापक वंश अनुरेखण के लिए आवश्यक संवेदनशीलता नहीं है। उदाहरण के लिए, एक घाव के थोक अनुक्रमण से एक सबक्लोन प्रकट हो सकता है जो इसके किसी भी मिलान वाले घावों में ज्ञानी नहीं है। इस मामले में, कोई इस उपक्लोन की उत्पत्ति का निर्धारण करने में असमर्थ होगा। यह प्राथमिक ट्यूमर या किसी अन्य मेटास्टेसिस में पता लगाने की सीमा से नीचे की आवृत्ति पर मौजूद हो सकता है, या यह मेटास्टैटिक घाव के प्रारंभिक उपनिवेशण के बाद उत्पन्न हो सकता है। एकल-कोशिका अनुक्रमण संवेदनशीलता में वृद्धि प्रदान करता है, लेकिन इसकी उच्च लागत इस तकनीक के बड़े पैमाने पर अनुप्रयोग को सीमित करती है। इन अध्ययनों की पूर्वव्यापी प्रकृति का अर्थ यह भी है कि वे अलग-अलग समय बिंदुओं पर क्षणिक मेटास्टेटिक घटनाओं और रोग परिदृश्य में सीमित अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं।
पशु मॉडल में, हाल ही में तकनीकी प्रगति अब उच्च स्थानिक और लौकिक संकल्प 17,18,19,20 के साथ भावी phylogenetic मानचित्रण के लिए अनुमति देते हैं. ये तकनीकें CRISPR/Cas9 जीनोम एडिटिंग का उपयोग एक विकसित बारकोड के साथ इंजीनियर कोशिकाओं के लिए करती हैं - आनुवांशिक उत्परिवर्तन जो समय के साथ जमा होते हैं। अनुक्रमण पर, प्रत्येक कोशिका के वंश का पता उसके बारकोड 17,18,19,20 के उत्परिवर्ती प्रोफ़ाइल के आधार पर लगाया जा सकता है। दरअसल, इस तरह की तकनीक का उपयोग पहले से ही मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग को मैप करने के लिए किया जा रहा है। हाल के एक पेपर में, झांग एट अल ने प्रदर्शित किया कि हड्डी मेटास्टेस में स्तन और प्रोस्टेट कैंसर कोशिकाएं हड्डी से कई अंगों में बीज माध्यमिक मेटास्टेस तक पुन: प्रसारित होती हैं21.
हालांकि इन उपन्यास विधियों में कैंसर की प्रगति के विस्तृत, उच्च-रिज़ॉल्यूशन फ़ाइलोजेनेटिक मानचित्र उत्पन्न करने की बड़ी क्षमता है, वे मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग घटनाओं के सटीक समय का अध्ययन करने वालों के लिए अत्यधिक अव्यावहारिक हैं और जो उन्हें बढ़ावा देता है या रोकता है। मेटास्टैटिक कैंसर की हमारी समझ और उपचार को परिष्कृत करने के लिए इन ज्ञान अंतरालों को भरना महत्वपूर्ण है, लेकिन इस तरह के अध्ययनों को सुविधाजनक बनाने के लिए प्रौद्योगिकियों की उल्लेखनीय कमी है। इस आवश्यकता को पूरा करने के लिए, हमने हाल ही में विकसित किया है - और यहां मौजूद है - एक उपन्यास तकनीक जो हमें विशेष रूप से मेटास्टैटिक साइट (फेफड़े) में फोटोकोनवर्जन के माध्यम से ट्यूमर कोशिकाओं को चिह्नित करने की अनुमति देती है और बाद में उन्हें तृतीयक अंगों में फिर से पहचानती है। इस तकनीक का उपयोग करते हुए, हमने हाल ही में दिखाया है कि स्तन कैंसर कोशिकाएं फेफड़े के मेटास्टेस और बीज तृतीयक अंगों13 से पुन: प्रसार करती हैं। इस तकनीक का उपयोग एक संकीर्ण खिड़की के भीतर पुनर्प्रसार की घटनाओं के समय को निर्धारित करने और पुनर्प्रसारित ट्यूमर कोशिकाओं को निर्धारित करने के लिए भी किया जा सकता है, जिससे पुनर्प्रसारित कोशिकाओं के ऑर्गेनोट्रोपिज्म के अध्ययन की सुविधा मिलती है और जो पुनर्प्रसार को बढ़ावा देता है / रोकता है।
जबकि फोटोकोनवर्सन और स्थानीय रूप से इंड्यूसिबल क्रे / लॉक्स सिस्टम जो स्थायी रूप से एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन को दूसरे के साथ प्रतिस्थापित करते हैं, पहले ट्यूमर कोशिकाओं को चिह्नित करने और ट्रैक करने के लिए उपयोग किया जाता है 11,22,23, हमारे ज्ञान के लिए, ट्यूमर कोशिकाओं के स्पैटिओटेम्पोरल अंकन के लिए कोई दृष्टिकोण फेफड़ों को लक्षित करने के लिए अनुकूलित नहीं किया गया है - 14 सबसे आम कैंसर 24 में से किसी एक का निदान करने वाले पुरुषों और महिलाओं के बीच मेटास्टेसिस की सबसे आम साइटों में से एक. किसी भी कैंसर सेल प्रकार और फेफड़े के मेटास्टेसिस पीढ़ी के लिए किसी भी प्रोटोकॉल का उपयोग हमारी प्रक्रिया के साथ किया जा सकता है, जिससे यह मेटास्टेसिस शोधकर्ताओं के लिए व्यापक रूप से उपयोगी हो जाता है। फेफड़े के मेटास्टेस उत्पन्न करने के लिए उपयोग की जाने वाली सभी कैंसर कोशिकाओं को एक फोटोकन्वर्टिबल या फोटो-स्विचेबल प्रोटीन व्यक्त करना चाहिए, और शोधकर्ता यह चुन सकते हैं कि उनकी विशिष्ट आवश्यकताओं और संसाधनों के आधार पर किस प्रोटीन का उपयोग करना है। इस अध्ययन में, हमने 6DT1 स्तन कैंसर कोशिकाओं का उपयोग किया जो फोटोकन्वर्टिबल ग्रीन-टू-रेड फ्लोरोसेंट प्रोटीन Dendra2 (6DT1-Dendra2 कोशिकाओं)25 को हिस्टोन H2B से टैग किए गए थे। हमने 5.0 × 104 6DT1-Dendra2 कोशिकाओं को मादा Rag2-/- चूहों के चौथे स्तन वसा पैड में इंजेक्ट किया। प्राथमिक ट्यूमर इंजेक्शन के बाद 12 से 16 दिनों के बीच स्पष्ट थे और प्रयोग की अवधि के लिए उच्छेदित नहीं थे। सहज फेफड़े मेटास्टेस ट्यूमर सेल इंजेक्शन के बाद 19 से 26 दिनों के बीच विकसित हुए। ट्यूमर सेल इंजेक्शन के बाद 26 से 29 दिनों के बीच फोटोकोनवर्जन सर्जरी की गई। फेफड़ों के मेटास्टेसिस बोझ के कारण सर्जरी के बाद 72 घंटे द्वारा चूहों की बलि दी गई थी।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0-30 V, 0-3 A Power Supply</td>
			<td>MPJA</td>
			<td>9616 PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 VDC, 1.2 A Unregulated Plug Supply</td>
			<td>MPJA</td>
			<td>17563 PD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>28 G 1 mL BD Insulin Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>329410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>400 nm light emitting diode array lamp</td>
			<td>LedEngin Inc.</td>
			<td>897-LZPD0UA00</td>
			<td>Photoconversion lamp, custom-built (individual parts included below)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 braided silk suture with RB-1 cutting needle</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>774B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>9 cm 2-0 silk tie</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>LA55G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril 100 (enrofloxacin)</td>
			<td>Bayer (Santa Cruz Biotechnology)</td>
			<td>sc-362890Rx</td>
			<td>Antibiotic used in drinking water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-2012-32</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cables (Cable Assemblies) 2.1 DC JACK-STRAIGHT 72&#34;&#160; BLACK/ZIP CORD</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>172-7426-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cables (Cable Assemblies) 2.5 JK-ST 72&#34; ZIP CD</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>172-0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine solution</td>
			<td>Durvet</td>
			<td>7-45801-10258-3</td>
			<td>Chlorhexidine Disinfectant Solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compressed air canister</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>DPSJB-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra Fine Micro Dissecting Scissors 4&#34; Straight Sharp/Sharp 24 mm</td>
			<td>Roboz Surgical</td>
			<td>RS-5912</td>
			<td>Sharp Micro Dissecting Scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-optic illuminator</td>
			<td>O.C. White Company</td>
			<td>FL3000</td>
			<td>Used during mouse intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gemini Cautery Kit</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>726067</td>
			<td>Cautery pen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td>GER&#160;5287-120V</td>
			<td>Bead Sterilizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High power LEDs - single color ultraviolet 90 watts</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>LZP-D0UA00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared heat lamp</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>HL-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane SOL 250 mL PVL</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>29405</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane vaporizer</td>
			<td>SurgiVet</td>
			<td>VCT302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jacobson needle holder with lock</td>
			<td>Kalson Surgical</td>
			<td>T1-140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labeling tape</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S68702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED Lighting Reflectors CREE MP-L SNGL LENS REFLECTOR &#38; LOC PIN</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>928-C11395TM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Long cotton tip applicators</td>
			<td>Medline Industries</td>
			<td>MDS202055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masscool / Soccket 478 / Intel Pentium 4/Celeron up to 3.4GHz / Ball Bearing / Copper Core / CPU Cooling Fan</td>
			<td>CompUSA</td>
			<td>#S457-1023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors 4&#34; Straight Blunt/Blunt</td>
			<td>Roboz Surgical</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>Blunt Micro Dissecting Scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine ventilator</td>
			<td>Kent Scientific&#160;</td>
			<td>PS-02</td>
			<td>PhysioSuite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair Hair Removal Lotion</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001RVMR7K</td>
			<td>Depilatory cream</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Personnet mini retractor</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6504</td>
			<td>Retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline 1x</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14190144</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pLenti.CAG.H2B-Dendra2.W</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>51005</td>
			<td>Dendra2 lentivirus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>008897</td>
			<td>Eye Lubricant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent intubation stand</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RIS 100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal lung inflation bulb</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-9083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SurgiSuite Multi-Functional Surgical Platform for Mice, with Warming</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SURGI-M02</td>
			<td>Heated surgical platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Test Leads 48&#34; TEST LEAD BANANA - Black</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>565-1440-48-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Test Leads 48&#34; TEST LEAD BANANA - Red</td>
			<td>Mouser</td>
			<td>565-1440-48-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tracheal catheter&#160;</td>
			<td>Exelint International</td>
			<td>26746</td>
			<td>22 G catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound closing system veterinary kit</td>
			<td>Clay Adams</td>
			<td>IN015</td>
			<td>Veterinary surgical stapling kit</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tracking tumor cell dissemination from lung metastases using photoconversion

मेटास्टेसिस - कैंसर का प्रणालीगत प्रसार - कैंसर से संबंधित मौतों का प्रमुख कारण है। यद्यपि मेटास्टेसिस को आमतौर पर एक यूनिडायरेक्शनल प्रक्रिया के रूप में माना जाता है जिसमें प्राथमिक ट्यूमर से कोशिकाएं फैलती हैं और बीज मेटास्टेस होती हैं, मौजूदा मेटास्टेस में ट्यूमर कोशिकाएं भी "मेटास्टेसिस-से-मेटास्टेसिस" या "मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग" नामक प्रक्रिया में तृतीयक साइटों में नए घावों को फिरसे प्रसारित कर सकती हैं और जन्म दे सकती हैं। मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग मेटास्टेटिक बोझ को बढ़ा सकती है और रोगी के जीवन और अस्तित्व की गुणवत्ता को कम कर सकती है। इसलिए, मेटास्टैटिक कैंसर वाले रोगियों के लिए उपचार रणनीतियों को परिष्कृत करने के लिए इस घटना के पीछे की प्रक्रियाओं को समझना महत्वपूर्ण है।
मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग के बारे में बहुत कम जानकारी है, जो कि तार्किक और तकनीकी सीमाओं के कारण है। मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग पर अध्ययन मुख्य रूप से अनुक्रमण विधियों पर निर्भर करता है, जो मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग घटनाओं के सटीक समय का अध्ययन करने वाले शोधकर्ताओं के लिए व्यावहारिक नहीं हो सकता है या जो उन्हें बढ़ावा देता है या रोकता है। यह उन पद्धतियों की कमी को उजागर करता है जो मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग के अध्ययन की सुविधा प्रदान करते हैं। इसे संबोधित करने के लिए, हमने विकसित किया है - और यहां वर्णन किया है - फेफड़े के मेटास्टेस के चयनात्मक फोटोकोनवर्जन के लिए एक म्यूरिन सर्जिकल प्रोटोकॉल, फेफड़े से तृतीयक साइटों तक पुन: प्रसार करने वाले ट्यूमर कोशिकाओं के विशिष्ट अंकन और भाग्य ट्रैकिंग की अनुमति देता है। हमारे ज्ञान के लिए, फेफड़ों से ट्यूमर सेल रीडिसेमिनेशन और मेटास्टेसिस-टू-मेटास्टेसिस सीडिंग का अध्ययन करने का यही एकमात्र तरीका है जिसमें जीनोमिक विश्लेषण की आवश्यकता नहीं होती है।

Tracking Tumor Cell Dissemination from Lung Metastases Using Photoconversion

इस प्रोटोकॉल में वर्णित सर्जरी के कदम चित्रा 1 में सचित्र हैं. संक्षेप में, माउस को संवेदनाहारी किया जाता है, और बालों को बाएं वक्ष से हटा दिया जाता है। माउस तो intubated और हवादार, जो माउस ऑक्सीजन प्...

Watch this Scientific Journal Video about Decoding Metastasis-to-Metastasis Seeding Using a New In Vivo Technique for Tracking Breast Cancer Spread at JoVE.com

Decoding Metastasis-to-Metastasis Seeding Using a New In Vivo Technique for Tracking Breast Cancer Spread (Video) | JoVE

हम फेफड़े के मेटास्टेस के चयनात्मक फोटोकोनवर्जन के लिए एक सर्जिकल प्रोटोकॉल से जुड़े फेफड़े के मेटास्टेस से ट्यूमर सेल रीडिसेमिनेशन का अध्ययन करने के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं, इसके बाद तृतीयक अंगों में पुन: प्रसारित ट्यूमर कोशिकाओं की पहचान होती है।

फोटोकोनवर्जन का उपयोग करके फेफड़े के मेटास्टेस से ट्यूमर सेल प्रसार को ट्रैक करना

Metastasis - the systemic spread of cancer - is the leading cause of cancer-related deaths. Although metastasis is commonly thought of as a unidirectional ...

हाल के साक्ष्य बताते हैं कि मौजूदा मेटास्टैटिक घाव ट्यूमर कोशिकाओं के प्रसार के स्रोत के रूप में कार्य कर सकते हैं जो नए घावों को जन्म देते हैं। इस प्रक्रिया को मेटास्टेसिस सीडिंग के लिए मेटास्टेसिस कहा जाता है और ट्यूमर के बोझ को बढ़ा सकता है और कैंसर रोगियों के जीवन की गुणवत्ता और अस्तित्व को कम कर सकता है। हमारी विधि मेटास्टेसिस से मेटास्टेसिस सीडिंग और इसे प्रभावित करने वाले कारकों का अध्ययन करने के लिए विकसित की गई थी।इस तकनीक ने हमारी प्रयोगशाला को यह स्थापित करने में मदद की है कि स्तन कैंसर की कोशिकाएं फेफड़ों के मेटास्टेस से फैल सकती हैं और हमें मेटास्टेसिस को बढ़ावा देने या रोकने वाले कारकों की जांच करने में सक्षम बनाती हैं। ये निष्कर्ष मेटास्टैटिक कैंसर की प्रगति को धीमा करने पर भविष्य के शोध का मार्गदर्शन कर सकते हैं। फेफड़े मेटास्टेसिस की एक सामान्य साइट हैं, लेकिन बहुत कम तकनीकें विवो में ट्यूमर सेल की गतिशीलता के अध्ययन की अनुमति देती हैं।यह तकनीक जीवित चूहों में ट्यूमर कोशिकाओं की ट्रैकिंग को सक्षम बनाती है, जिससे फेफड़े के मेटास्टेसिस विशिष्ट प्रसार मार्ग और उपचारों का अध्ययन होता है। मेटास्टैटिक कैंसर अक्सर एक लाइलाज और घातक बीमारी है। इस तकनीक का उपयोग इसके प्रसार को कम करने के तरीकों का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है जिससे रोगियों के जीवन का विस्तार होता है।