Name: an experimental study on colorado potato beetle hibernation under natural conditions
Uploaded: 2023-11-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Experimental Study on Colorado Potato Beetle Hibernation Under Natural Conditions at JoVE.com

Благодарим наших коллег Владимира Шило, Веру Морозову, Ульяну Роцкую, Ольгу Поленогову и Оксану Томилову за помощь в организации и проведении полевых и лабораторных процедур.
Исследование выполнено при поддержке Российского научного фонда, проект No 22-14-00309.

1. Описание клеток для зимней спячки
ПРИМЕЧАНИЕ: В зависимости от целей эксперимента количество клеток варьируется. Используйте не менее трех клеток на одну дату отбора проб. Чтобы оценить количество жуков, которые всплывут, подготовьте не менее трех дополнитель?...

<ol>
	<li>Alyokhin, A., Benkovskaya, G., Udalov, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colorado+potato+beetle.">Colorado potato beetle.</a> Insect Pests of Potato. , 29-43 (2022).</li><li>Alyokhin, A., Kryukov, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecology+of+a+potato+field.">Ecology of a potato field.</a> Insect Pests of Potato. , 451-462 (2022).</li><li>Lee Jr, R. E., Costanzo, J. P., Kaufman, P. E., Lee, M. R., Wyman, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ice-nucleating+active+bacteria+reduce+the+cold-hardiness+of+the+freeze-intolerant+Colorado+potato+beetle+(Coleoptera:+Chrysomelidae).">Ice-nucleating active bacteria reduce the cold-hardiness of the freeze-intolerant Colorado potato beetle (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> Journal of Economic Entomology. 87 (2), 377-381 (1994).</li><li>Ushatinskaja, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diapause+of+insects+and+its+modifications.">Diapause of insects and its modifications.</a> Journal of General Biology. 34, 194-215 (1973).</li><li>Zheng, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+soil+moisture+on+overwintering+pupae+in+Spodopteraexigua+(Lepidoptera:+Noctuidae).">Effect of soil moisture on overwintering pupae in Spodopteraexigua (Lepidoptera: Noctuidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48, 365-371 (2013).</li><li>Hiiesaar, K., Metspalu, L., J&#245;udu, J., J&#245;gar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Over-wintering+of+the+Colorado+potato+beetle+(Leptinotarsa+decemlineata+Say)+in+field+conditions+and+factors+affecting+its+population+density+in+Estonia.">Over-wintering of the Colorado potato beetle (Leptinotarsa decemlineata Say) in field conditions and factors affecting its population density in Estonia.</a> Agronomy Research. 4 (1), 21-30 (2006).</li><li>Yocum, G. D., Rinehart, J. P., Chirumamilla-Chapara, A., Larson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+gene+expression+patterns+during+the+initiation+and+maintenance+phases+of+diapause+in+the+Colorado+potato+beetle,+Leptinotarsa+decemlineata.">Characterization of gene expression patterns during the initiation and maintenance phases of diapause in the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata.</a> Journal of Insect Physiology. 55 (1), 32-39 (2009).</li><li>Yocum, G. D., Buckner, J. S., Fatland, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+internal+and+external+lipids+of+nondiapausing+and+diapause+initiation+phase+adult+Colorado+potato+beetles,+Leptinotarsa+decemlineata.">A comparison of internal and external lipids of nondiapausing and diapause initiation phase adult Colorado potato beetles, Leptinotarsa decemlineata.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part B: Biochemistry and Molecular Biology. 159 (3), 163-170 (2011).</li><li>Nikonorov, Y. M., Syrtlanova, L. A., Kitaev, K. A., Benkovskaya, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcription+activity+of+genes+involved+in+diapause+regulation+in+the+Colorado+Potato+beetle+and+its+change+under+a+fipronil+impact.">Transcription activity of genes involved in diapause regulation in the Colorado Potato beetle and its change under a fipronil impact.</a> Russian Journal of Genetics: Applied Research. 8, 80-86 (2018).</li><li>Govaere, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+and+proteome+analyses+to+investigate+the+molecular+underpinnings+of+cold+response+in+the+Colorado+potato+beetle,+Leptinotarsa+decemlineata.">Transcriptome and proteome analyses to investigate the molecular underpinnings of cold response in the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata.</a> Cryobiology. 88, 54-63 (2019).</li><li>Lehmann, P., Westberg, M., Tang, P., Lindstr&#246;m, L., K&#228;kel&#228;, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diapause+lipidomes+of+three+closely+related+beetle+species+reveal+mechanisms+for+tolerating+energetic+and+cold+stress+in+high-latitude+seasonal+environments.">The diapause lipidomes of three closely related beetle species reveal mechanisms for tolerating energetic and cold stress in high-latitude seasonal environments.</a> Frontiers in Physiology. 11, 576617 (2020).</li><li>Lebenzon, J. E., Torson, A. S., Sinclair, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diapause+differentially+modulates+the+transcriptomes+of+fat+body+and+flight+muscle+in+the+Colorado+potato+beetle.">Diapause differentially modulates the transcriptomes of fat body and flight muscle in the Colorado potato beetle.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part D: Genomics and Proteomics. 40, 100906 (2021).</li><li>Lashomb, J. H., Ng, Y. S., Ghidiu, G., Green, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+of+spring+emergence+by+the+Colorado+potato+beetle,+Leptinotarsa+decemlineata+(Say)+(Coleoptera:+Chrysomelidae),+in+New+Jersey.">Description of spring emergence by the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say) (Coleoptera: Chrysomelidae), in New Jersey.</a> Environmental entomology. 13 (3), 907-910 (1984).</li><li>Cantwell, G. E., Cantelo, W. W., Schroder, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Beauveria+bassiana+on+underground+stages+of+the+Colorado+potato+beetle,+Leptinotarsa+decemlineata+(Coleoptera:+Chrysomelidae).">Effect of Beauveria bassiana on underground stages of the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera: Chrysomelidae).</a> The Great Lakes Entomologist. 19 (2), 6 (1986).</li><li>Fedorko, A., Bajan, C., Kmitowa, K., Wojciehowska, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+the+use+of+selected+microorganisms+to+control+the+Colorado+beetle+during+hibernation.">Effectiveness of the use of selected microorganisms to control the Colorado beetle during hibernation.</a> Ecological Studies. 3 (2), 127-134 (1977).</li><li>Gaugler, R., Costa, S. D., Lashomb, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stability+and+efficacy+of+Beauveria+bassiana+soil+inoculations.">Stability and efficacy of Beauveria bassiana soil inoculations.</a> Environmental Entomology. 18 (3), 412-417 (1989).</li><li>Bajan, C., Kmitowa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+entomopathogenic+fungi+to+the+natural+winter+reduction+of+Colorado+beetle+adults.">Contribution of entomopathogenic fungi to the natural winter reduction of Colorado beetle adults.</a> Polish Ecological Studies. 3 (2), 107-114 (1977).</li><li>Milner, M., Kung, K. S., Wyman, J. A., Feldman, J., Nordheim, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+overwintering+mortality+of+Colorado+potato+beetle+(Coleoptera:+Chrysomelidae)+by+manipulating+the+temperature+of+its+diapause+habitat.">Enhancing overwintering mortality of Colorado potato beetle (Coleoptera: Chrysomelidae) by manipulating the temperature of its diapause habitat.</a> Journal of Economic Entomology. 85 (5), 1701-1708 (1992).</li><li>Do&#287;an, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+calcium+signaling+proteins+from+the+fat+body+of+the+Colorado+Potato+Beetle,+Leptinotarsa+decemlineata+(Coleoptera:+Chrysomelidae):+Implications+for+diapause+and+lipid+metabolism.">Characterization of calcium signaling proteins from the fat body of the Colorado Potato Beetle, Leptinotarsa decemlineata (Coleoptera: Chrysomelidae): Implications for diapause and lipid metabolism.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 133, 103549 (2021).</li><li>Benkovskaya, G. V., Udalov, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colorado+potato+beetle+investigations+in+the+south+Urals.">Colorado potato beetle investigations in the south Urals.</a> Nova Science Publishers. , (2011).</li><li>Short, C. A., Hahn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+enough+for+the+winter?+Does+nutritional+status+affect+diapause.">Fat enough for the winter? Does nutritional status affect diapause.</a> Journal of Insect Physiology. , 104488 (2023).</li><li>McDonald, J. R., Bale, J. S., Walters, K. F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-temperature+mortality+and+overwintering+of+the+western+flower+thrips+Frankliniella+occidentalis+(Thysanoptera:+Thripidae).">Low-temperature mortality and overwintering of the western flower thrips Frankliniella occidentalis (Thysanoptera: Thripidae).</a> Bulletin of Entomological Research. 87 (5), 497-505 (1997).</li></ol>

Проведенное исследование показывает, что предложенный метод изучения зимовки ЦПБ позволяет получить достаточное количество насекомых в разные периоды спячки. Успех представленной техники зависит от нескольких независимых факторов, важнейшим из которых являются погодные условия. В ?...

Колорадский жук Leptinotarsa decemlineata Say (CPB) является важным вредителем пасленовых растений, преимущественно картофеля Solanum tuberosum L. Ареал этого вида составляет более 16 млн.км2 и постояннорасширяется1. У ЦПБ факультативная зимняя диапауза, а зимняя спячка обязательна в умеренном поясе. Диапауза индуцируется фотопериодом короткого дня и модулируется температурой1. Зимуют эти жуки во взрослой стадии, закапываясь в почву. С увеличением широт продолжительность периода спячки увеличивается. В умеренном поясе, особенно на северных территориях ареала, зимовка длится до 9 месяцев: с августа-сентября по май-июнь (Носков и др., личные наблюдения). В этот период КПБ, как и любое другое насекомое умеренного пояса, подвергается воздействию неблагоприятных зимних условий и должен повысить свою холодостойкость. В то же время контакт жуков с почвой повышает риск заражения различными условно-патогенными микроорганизмами2. Поэтому этим жукам необходимо поддерживать определенный уровень активности иммунной системы во время зимней спячки, что также является энергетически затратным. Тем не менее, даже если насекомое переживет инфекцию, болезнь может снизить его морозостойкость3. Следует отметить, что низкая температура – не единственная причина зимней смертности ЦПБ. Немаловажную роль играет и недостаток кислорода, а при некоторых условиях он может быть основным фактором зимней смертности 4,5.
Известно, что естественная зимняя смертность ЦПБ может быть очень высокой, достигая 100% на глинистых суглинистых почвах6. Таким образом, перезимовка является одним из самых ответственных периодов в жизненном цикле ЦПБ. Тем не менее, данные о физиологии, активности иммунной системы, выживаемости и других параметрах спячки КПБ в естественных условиях все еще ограничены. Имеются исследования дифференциальной экспрессии генов и различных физиологических параметров у взрослых с СЛБ в период диапаузы и в ответ на холодовой шок 7,8,9,10,11,12; Тем не менее, эти анализы в основном проводились путем индукции диапаузы или холодового стресса в лабораторных условиях без естественных колебаний температуры, влажности и нативной патогенной нагрузки. Тем не менее, исследования физиологии этих жуков, собранных при выкапывании из почвы в естественных условиях, являются важными. В 1970-1980-е гг. активно изучались различные аспекты зимовки ЦПБ в естественных условиях 13,14,15,16,17,18. С другой стороны, эти исследования не предполагали выемки КПБ из почвы в зимний период. Кроме того, подробно не приведена методика контролируемой спячки КПБ и описание клеток. Таким образом, необходимо изучение физиологии зимовки КПБ в естественных условиях19.
Целью данного исследования являлась разработка и апробация метода контролируемой спячки взрослых особей КПБ в естественных условиях. Предложенный метод позволяет получить желаемое количество особей КПБ для микробиологических, иммунологических и других исследований в период зимней спячки в полевых условиях континентального климата. Этот метод может быть адаптирован и применен к другим видам насекомых, зимующих в почве под снегом.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar-agar bacteriological purified</td>
			<td>diaGene</td>
			<td>1806.5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bile Esculin Agar</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>M972</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endo Agar&#160;</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>M029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose monohydrate-D</td>
			<td>PanReac Applichem</td>
			<td>143140.1000&#934;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactic acid&#160;</td>
			<td>PanReac Applichem</td>
			<td>141034.1211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luria-Bertani liquid medium</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>G009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical centrifuge tubes</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>SCT-15ML-25-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>FBIS SRCAMB</td>
			<td>M<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65862/65862eq01v2.jpg" style="margin: auto;" />030/O61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Medigen</td>
			<td>PBS500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperatutre and humidity datalogger Ecklerk-M-11</td>
			<td>Relsib</td>
			<td></td>
			<td>Waterproof datalogger</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an experimental study on colorado potato beetle hibernation under natural conditions

Одним из основных вредителей картофеля Solanum tuberosum L. в умеренном поясе является насекомое колорадский жук (CPB). Большинство исследований иммунитета и заболеваний КПБ проводятся во время активных фаз кормления. Тем не менее, исследований стадий покоя меньше, хотя большую часть своего жизненного цикла эти жуки проводят в состоянии зимней диапаузы (спячки). В данной работе был разработан и апробирован метод исследования зимней спячки CPB в естественных условиях, дающий возможность собирать достаточное количество особей в зимний период. В данной статье была проведена оценка выживаемости при СЛБ, а также выявлены инфекционные агенты на разных стадиях спячки. Смертность КПБ увеличивалась во время зимней спячки, достигая максимума в апреле-мае. Из мертвых насекомых выделяли энтомопатогенные грибы (Beauveria, Isaria, Lecanicillium) и бактерии Bacillus, Sphingobacterium, Peribacillus, Pseudomonas и Serratia . Выживаемость жуков за весь период зимней спячки составила 61%. Замерзших или высохших жуков обнаружено не было, что свидетельствует об успешности представленного способа.

Приведенные ниже результаты по зимующим КПБ показывают температуру почвы, выживаемость и инфекции.
Динамика температуры почвы. Отрицательные температуры в садках на глубине 30 см регистрировались с конца ноября до начала апреля (рис. 1). Средняя...

Watch this Scientific Journal Video about An Experimental Study on Colorado Potato Beetle Hibernation Under Natural Conditions at JoVE.com

An Experimental Study on Colorado Potato Beetle Hibernation Under Natural Conditions

Здесь мы представляем метод изучения зимней спячки колорадского жука в естественных условиях умеренного пояса, а также методику сбора жуков в зимний период. Этот метод позволяет получить нужное количество зимующих особей для различных анализов на любой стадии зимовки.

Экспериментальное исследование зимовки колорадского жука в естественных условиях

One of the major pests of potato Solanum tuberosum L. in the temperate zone is the insect Colorado potato beetle (CPB). Most studies on the immunity and ...

Колорадский жук – один из самых серьезных вредителей картофеля в умеренном поясе. Исследования иммунитета и патогенеза этого вредителя в основном проводятся на активной стадии. Однако в умеренном поясе этот вредитель большую часть своего жизненного цикла проводит в состоянии спячки.В данном исследовании мы представляем способ зимней спячки колорадского жука и методику сбора жуков зимой. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он позволяет получить любое количество зимующих особей для анализа вируса в любой период зимовки. Используют клетки из жесткого деревянного каркаса размером 25 на 25 на 40 сантиметров.Чтобы соорудить каркас для клетки, используйте деревянные рейки толщиной не менее двух сантиметров и шириной четыре сантиметра. Накройте внутреннюю часть клетки сеткой из нержавеющей стали размером не более пяти на три миллиметра. Зафиксируйте сетку степлером по дереву.Выстелите внутреннюю часть клетки черным синтетическим геотекстилем плотностью 60 грамм на квадратный метр. Плотно прикрепите к верхней части клетки трубку из синтетической полупрозрачной дышащей ткани, высотой примерно 60 сантиметров. Скрестите и закрепите две прочные веревки на дне клетки, чтобы при необходимости вытащить ее из почвы.Выкопайте в почве яму глубиной 40 сантиметров. На лунку постелите сухую траву или сено. Поместите клетку внутрь так, чтобы сено или сухая трава оказались между стенками клетки и почвой.Засыпьте клетки грунтом с того же картофельного поля, где собраны насекомые. Установите водонепроницаемые регистраторы данных температуры и влажности в клетках на необходимой глубине. Высадите рассаду картофеля в клетку за три-четыре недели до появления жука и умеренно полейте.Закрепите трубку из синтетической ткани вертикально к палке из любого материала, установленной с внешней стороны клетки. Вручную собирайте взрослых жуков на картофельных полях, свободных от пестицидов, ближе к концу вегетации картофеля. Собранных жуков перед помещением в клетки хранят в 20-литровых пластиковых ведрах с картофельной ботвой для кормления насекомых.Накройте ведра дышащей тканью. Разместите не более 200 особей жуков на растениях картофеля, покрытые синтетической тканевой сеткой. Когда картофельная ботва будет съедена, добавьте свежую, помещенную в пластиковую банку с водой, и после этого ежедневно меняйте картофельную ботву.Как только все жуки зарылись в почву для зимовки, отвяжите трубку из синтетической ткани от палки и уложите ткань вниз. Уберите снег над поверхностью клетки. Разрыхлите клетку с каждой стороны сильной лопатой.Вытащите клетку из почвы с помощью веревок. Принесите клетку в лабораторию. Снимайте грунт с клетки небольшими порциями, аккуратно разбивайте крупные куски почвы и изолируйте жуков с помощью пинцета.Отделите живых жуков от трупов. Живые, здоровые жуки уплотняют почву вокруг себя, образуя воздушную полость, так называемую колыбель, и поэтому легко отделяются от почвы. Жуки, убитые грибами, мумифицируются или имеют видимый мицелий на поверхности.Бактерионно разлагающиеся насекомые имеют темный цвет. Просейте почву через сито, чтобы убедиться, что все жуки изолированы и не повреждены. Трупы с симптомами грибковой инфекции или бактериального разложения помещают в индивидуальную стерильную пробирку Falcon для последующей идентификации.Хранят живых жуков в холодильнике при температуре 2 градуса Цельсия до анализа в закрытых вентилируемых емкостях, содержащих влажный ватный тампон. Для сбора гемолимфы сделайте прокол в боковой части живота под аортой инсулиновой иглой. Чтобы изолировать кишечник, отрежьте головную капсулу, все содержимое выдавите в чашку Петри с фосфатным буфером.Отделите кишечник и очистите его от жира и мальпигиевых сосудов. Отделите желаемый отдел кишечника, например, переднюю, среднюю или заднюю кишку. Чтобы изолировать жировое тело, отделите его от других тканей после изоляции кишечника.Чтобы изолировать энтомопатогенные грибы от трупов, поместите мумифицированные трупы в стерильную камеру влажности. Используйте воздушные конидии или склероции из внутреннего содержимого жуков для покрытия на декстрозном агаре Сабуро с 0,4%-ной молочной кислотой. Изолируйте бактерии от трупов с симптомами бактериального разложения.Отрежьте голову жука, отожмите внутреннее содержимое и соберите в пробирки для последующего нанесения на носители для бактерий. Минусовые температуры в клетках на глубине 30 сантиметров, регистрировались с конца ноября до начала апреля. Средняя температура в этот период составила 3,3-0,1 градуса по Цельсию.Самая низкая зарегистрированная температура составила 7,9 градуса по Цельсию в середине февраля. Смертность насекомых увеличивалась во время зимней спячки и достигала максимума весной перед всходами. Первоначальное количество жуков составляло 2 000, из которых выжило 1 470 особей.Таким образом, выживаемость жуков во время спячки составила 61%Анализ 530 трупов показал, что в период спячки 53% из них характеризовались симптомами бактериального разложения, а 25% — симптомами грибковой инфекции. Среди выделенных культур энтомопатогенных грибов преобладала боверия. Метаризиум, кордицепс и леканициллиум встречались гораздо реже.Среди бактерий, выделенных из трупов с симптомами бактериального разложения, были идентифицированы виды, принадлежащие к родам Bacillus, Sphingobacterium, Peribacillus, Pseudomonas, Serratia, Rahnella и Glutamicibacter. С помощью этого метода можно решить проблему получения колорадских жуков с поля зимой. Это позволяет получить столько особей, сколько нужно, при низкой смертности насекомых.Изучение различных аспектов зимней спячки жуков важно как с фундаментальной, так и с прикладной точек зрения для совершенствования подхода к борьбе с этим вредителем. И конечно, этот прием можно адаптировать и для других видов насекомых, зимующих в почве.

Research

JoVE Journal

Biology

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Тестирование зрительной чувствительности к скорости и направления движения в Ящерицы

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Computer-Generated Animal Model Stimuli

Компьютерные Стимулы животной модели

Communication between animals is diverse and complex. Animals may communicate using auditory, seismic, chemosensory, electrical, or visual signals. In ...

Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase

Интервью: ВИЧ-1 провирусной Иссечение ДНК Использование Evolved рекомбиназы

HIV-1 integrates into the host chromosome of infected cells and persists as a provirus flanked by long terminal repeats. Current treatment strategies ...

Using Unfixed, Frozen Tissues to Study Natural Mucin Distribution

Использование незаписанные, замороженные ткани для изучения природных распространения Муцин

Mucins are complex and heavily glycosylated O-linked glycoproteins, which contain more than 70% carbohydrate by weight1-3. Secreted mucins, produced by ...

High-throughput Image Analysis of Tumor Spheroids: A User-friendly Software Application to Measure the Size of Spheroids Automatically and Accurately

Высокая пропускная анализ изображений опухолевых сфероидов: Программное обеспечение удобное приложение для измерения размера сфероидов автоматически и точно

The increasing number of applications of three-dimensional (3D) tumor spheroids as an in vitro model for drug discovery requires their adaptation to ...

Larval RNA Interference in the Red Flour Beetle, Tribolium castaneum

Larval RNA Interference in the Red Flour Beetle, Tribolium castaneum

Личинок РНК-интерференция в Red мучного жука<em&gt; Tribolium castaneum</em

The red flour beetle, Tribolium&#160;castaneum, offers a repertoire of experimental tools for genetic and developmental studies, including a fully ...

Applications of the Single-probe: Mass Spectrometry Imaging and Single Cell Analysis under Ambient Conditions

Применения с одним зондом: Масс-спектрометрия и цифровой обработки изображений Single Cell Анализ в условиях окружающей среды

Mass spectrometry imaging (MSI) and in-situ single cell mass spectrometry (SCMS) analysis under ambient conditions are two emerging fields with great ...

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

Experimental Protocol for Using Drosophila As an Invertebrate Model System for Toxicity Testing in the Laboratory

Экспериментальный протокол для использования дрозофилы как система беспозвоночных модель для токсичности тестирования в лаборатории

Emergent properties and external factors (population-level and ecosystem-level interactions, in particular) play important roles in mediating ...

Co-immunoprecipitation Assay Using Endogenous Nuclear Proteins from Cells Cultured Under Hypoxic Conditions

Co Иммунопреципитация Assay с использованием эндогенного ядерных белков из клетки культивировали в гипоксических условиях

Low oxygen levels (hypoxia) trigger a variety of adaptive responses with the Hypoxia-inducible factor 1 (HIF-1) complex acting as a master regulator. ...

An Adipocyte Cell Culture Model to Study the Impact of Protein and Micro-RNA Modulation on Adipocyte Function

Модель культуры клеток адипоцитов для изучения влияния модуляции белка и микро-РНК на функцию адипоцитов

Alteration of adipocyte function contributes to the pathogenesis of metabolic diseases including Type 2 diabetes and insulin resistance. This highlights ...