Name: neuronal cell cultures from aplysia for high-resolution imaging of growth cones
Uploaded: 2008-02-20T18:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones at JoVE.com

हम विच्छेदन वीडियो संपादन के साथ सहायता के लिए हमारे प्रक्रिया और रॉडने McPhail (जीव विज्ञान विभाग, पर्ड्यू विश्वविद्यालय) फिल्माने के लिए रयान Maneri (Oystercatcher प्रोडक्शंस, LLC) धन्यवाद देना चाहूंगा. Suter प्रयोगशाला में अनुसंधान डीएमएस (NS049233 R01) NIH और पर्ड्यू विश्वविद्यालय में Bindley Bioscience केंद्र से अनुदान द्वारा समर्थित है

समाधान <ul><li> L15 ASW सेल संस्कृति माध्यम (1l) <ul><li> L15 पाउडर के 1 बैग </li><li> एच 2 हे ultrapure की 800 मिलीलीटर जोड़ें </li><li> 400 मिमी NaCl </li><li> चार 27 मिमी MgSO </li><li> MgCl 2 28 मिमी </li><li> एल Glutamine 4 मिमी </li><li> Gentamicin 50 μg मिलीलीटर / </li><li> HEPES 5 मिमी </li><li> 7.9 पी?...

<ol>
	<li>Forscher, P., Kaczmarek, L. K., Buchanan, J. A., Stephen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+AMP+induces+changes+in+distribution+and+transport+of+organelles+within+growth+cones+of+Aplysia+bag+cell+neurons.">Cyclic AMP induces changes in distribution and transport of organelles within growth cones of Aplysia bag cell neurons.</a> J. Neurosci. 7, 3600-3611 (1987).</li><li>Suter, D. M., Errante, L. D., Belotserkovsky, V., Forscher, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ig+superfamily+cell+adhesion+molecule,+apCAM,+mediates+growth+cone+steering+by+substrate-cytoskeletal+coupling.">The Ig superfamily cell adhesion molecule, apCAM, mediates growth cone steering by substrate-cytoskeletal coupling.</a> J. Cell. Biol. 141, 227-240 (1998).</li><li>Schaefer, A. W., Kabir, N., Forscher, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filopodia+and+actin+arcs+guide+the+assembly+and+transport+of+two+populations+of+microtubules+with+unique+dynamic+parameters+in+neuronal+growth+cones.">Filopodia and actin arcs guide the assembly and transport of two populations of microtubules with unique dynamic parameters in neuronal growth cones.</a> J. Cell. Biol. 158, 139-152 (2002).</li><li>Suter, D. M., Schaefer, A. W., Forscher, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microtubule+dynamics+are+necessary+for+SRC+family+kinase-dependent+growth+cone+steering.">Microtubule dynamics are necessary for SRC family kinase-dependent growth cone steering.</a> Curr. Biol. 14, 1194-1199 (2004).</li></ol>

Aplysia बैग सेल न्यूरॉन्स बहुत कुछ गैर neuronal कोशिकाओं के साथ एक सीरम मुक्त neuronal सेल संस्कृति प्रणाली प्रदान करते हैं. इन न्यूरॉन्स बहुत बड़ी महत्वपूर्ण सेल जैविक सवालों का एक नंबर का पता करने के लिए उपयुक्त के विकास श?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>#1 glass coverslips 22x22 mm</td>
<td>Tool</td>
<td>VWR</td>
<td>48366067</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>#1.5 glass coverslips 22x22 mm</td>
<td>Tool</td>
<td>Corning</td>
<td>2870-22</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>35 mm Petri dishes</td>
<td>Tool</td>
<td>Falcon</td>
<td>353001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Filters for medium filtration</td>
<td>Tool</td>
<td>Millipore</td>
<td>SVGV010RS</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>High vacuum grease</td>
<td>Tool</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>1597418</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Osmometer</td>
<td>Tool</td>
<td>Wescor</td>
<td>5520</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plastic shims</td>
<td>Tool</td>
<td>Small Parts Inc </td>
<td>SHSP-200</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Calcium chloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>C79-500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gentamicin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15750-060</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>H4030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L15 medium</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>41300-039</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G8540</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnesium chloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mallinckrodt</td>
<td>5958-04</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnesium sulfate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mallinckrodt</td>
<td>6070-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Poly-L-lysine (70-150 kD) </td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium chloride</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mallinckrodt </td>
<td>7581</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neutral Protease (Dispase)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Worthington</td>
<td>LS02111</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

neuronal cell cultures from aplysia for high-resolution imaging of growth cones

Neuronal विकास शंकु axons कि वातावरण में मार्गदर्शन cues का पता लगाने और उपयुक्त लक्ष्य कक्ष की दिशा में दिशात्मक आंदोलन में इस जानकारी transduce कर सकते हैं की नोक पर अत्यधिक गतिशील संरचनाओं हैं. पूरी तरह से समझ कैसे मार्गदर्शन जानकारी कोशिका की सतह से अंतर्निहित गतिशील cytoskeletal नेटवर्क फैलता है, एक उच्च अस्थायी और स्थानिक संकल्प पर प्रोटीन गतिशीलता का जीना सेल इमेजिंग के लिए उपयुक्त एक मॉडल प्रणाली की जरूरत है. ठेठ हड्डीवाला विकास शंकु भी मात्रात्मक एफ actin और microtubule गतिशीलता का विश्लेषण करने के लिए छोटे हैं. समुद्र खरगोश Aplysia californica से न्यूरॉन्स 5-10 बार हड्डीवाला न्यूरॉन्स से बड़ा हैं, आसानी से कमरे के तापमान पर रखा जा सकता है और micromanipulation और biophysical माप के लिए बहुत मजबूत कोशिकाओं रहे हैं. उनके विकास शंकु बहुत cytoplasmic क्षेत्रों और एक अच्छी तरह से वर्णित cytoskeletal प्रणाली को परिभाषित किया है. neuronal सेल निकायों विकास शंकु गतिशीलता और मार्गदर्शन के अध्ययन के लिए जांच की एक किस्म के साथ microinjected किया जा सकता है है. वर्तमान प्रोटोकॉल में हम पेट नाड़ीग्रन्थि, बैग सेल न्यूरॉन्स की संस्कृति और विकास शंकु का जीना सेल इमेजिंग के लिए एक इमेजिंग कक्ष की स्थापना के विच्छेदन के लिए एक प्रक्रिया प्रदर्शित करता है.

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Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones

Aplysia californica न्यूरॉन्स संस्कृति में बड़ी वृद्धि शंकु कि विकास शंकु गतिशीलता और मार्गदर्शन के उच्च संकल्प इमेजिंग के लिए उत्कृष्ट रहे हैं विकसित करना. यहाँ, हम विच्छेदन और Aplysia बैग सेल न्यूरॉन्स के चढ़ाना के रूप में के रूप में अच्छी तरह से जीना सेल इमेजिंग के लिए एक कक्ष की स्थापना के लिए के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं.

Aplysia से ग्रोथ कोन के उच्च संकल्प इमेजिंग के लिए neuronal सेल संस्कृतियों

Neuronal growth cones are the highly motile structures at the tip of axons that can detect guidance cues in the environment and transduce this information ...

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Neuronal Cultures from the Brains of Late Stage Drosophila Pupae

स्वर्गीय स्टेज ड्रोसोफिला pupae के दिमाग से प्राथमिक Neuronal संस्कृति

In this video, we demonstrate the preparation of primary neuronal cultures from the brains of late stage Drosophila pupae. The procedure begins with the ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Midgastrula स्टेज ड्रोसोफिला भ्रूण से Neuronal संस्कृति की तैयारी

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes

चूहा Splenocytes से टी सेल ग्रोथ फैक्टर की तैयारी

Maintenance of antigen-specific T cell lines or clones in culture requires rounds of antigen-induced activation separated by phases of cell expansion 1,2. ...

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

प्राथमिक electroporation के लिए murine अस्थि मज्जा से hematopoietic सेल संस्कृतियों की तैयारी

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

उच्च संकल्प प्रौढ़ ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में हरकत की वीडियो ट्रैकिंग

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

की तैयारी Aplysia संवेदी मोटर neuronal सेल संस्कृतियों

The nervous system of the marine mollusk Aplysia californica is relatively simple, consisting of approximately 20,000 neurons.  The neurons are large (up ...

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

प्राथमिक सेल संस्कृति से ड्रोसोफिला गेसट्रुला भ्रूण

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

Generation of Dispersed Presomitic Mesoderm Cell Cultures for Imaging of the Zebrafish Segmentation Clock in Single Cells

एकल कक्षों में Zebrafish विभाजन घड़ी की इमेजिंग के लिए बिखरे Presomitic mesoderm सेल संस्कृतियों की पीढ़ी

Segmentation is a  periodic and sequential morphogenetic process in vertebrates. This rhythmic  formation of blocks of tissue called somites along the ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

कृंतक श्वासनली epithelia में सिलिया गतिशीलता के उच्च संकल्प इमेजिंग के लिए पूर्व vivo विधि

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

Using plusTipTracker Software to Measure Microtubule Dynamics in Xenopus laevis Growth Cones

में microtubule गतिशीलता उपाय plusTipTracker सॉफ्टवेयर का उपयोग<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; विकास शंकु

Microtubule (MT) plus-end-tracking proteins (+TIPs) localize to the growing plus-ends of MTs and regulate MT dynamics1,2. One of the most well-known and ...