Name: Auteur in de schijnwerpers: fotodynamische therapie als een nieuwe benadering om kleine kolonies te induceren in resistente candida voor antischimmelonderzoek
Uploaded: 2024-03-29T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Photodynamic Therapy as a Novel Approach to Induce Petite Colonies in Drug-Resistant Candida for Antifungal Research at JoVE.com

Dit werk heeft financiering ontvangen van het Ministerie van Wetenschap en Technologie, Taiwan [MOST 110-2314-B-006-086-MY3], National Cheng Kung University [K111-B094], [K111-B095], National Cheng Kung University Hospital, Taiwan [NCKUH-11204031], [NCKUMCS2022057].

1. Teelt van C. glabrata
OPMERKING: Een multiresistente C. glabrata (C2-1000907) die resistent is tegen de meeste antischimmelmiddelen, waaronder fluconazol, wordt gebruikt voor de experimenten. Het kan nodig zijn de experimentele omstandigheden aan te passen aan de specifieke stam, aangezien er variaties kunnen bestaan tussen verschillende stammen. Alle experimenten gebruikten log-fase Candida gekweekt bij 25 °C (die een natuurlijke infectie nabootst) voor co...

Analyse van de vorming van kleine kolonies en resistentie tegen geneesmiddelen bij Candida glabrata

<ol>
	<li>Soriano, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+candidiasis:+current+clinical+challenges+and+unmet+needs+in+adult+populations.">Invasive candidiasis: current clinical challenges and unmet needs in adult populations.</a> J Antimicrob Chemother. 78 (7), 1569-1585 (2023).</li><li>Pappas, P. G., Lionakis, M. S., Arendrup, M. C., Ostrosky-Zeichner, L., Kullberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+candidiasis.">Invasive candidiasis.</a> Nat Rev Dis Primers. 4, 18026 (2018).</li><li>Meyahnwi, D., Siraw, B. B., Reingold, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiologic+features,+clinical+characteristics,+and+predictors+of+mortality+in+patients+with+candidemia+in+Alameda+County,+California;+a+2017-2020+retrospective+analysis.">Epidemiologic features, clinical characteristics, and predictors of mortality in patients with candidemia in Alameda County, California; a 2017-2020 retrospective analysis.</a> BMC Infect Dis. 22 (1), 843 (2022).</li><li>Whittaker, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+petite+mutation+in+yeast.">The petite mutation in yeast.</a> Subcell Biochem. 6, 175-232 (1979).</li><li>Hatab, M. A., Whittaker, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+respiration-deficient+mutants+from+the+pathogenic+yeast+Candida+albicans.">Isolation and characterization of respiration-deficient mutants from the pathogenic yeast Candida albicans.</a> Antonie Van Leeuwenhoek. 61 (3), 207-219 (1992).</li><li>Defontaine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vitro+resistance+to+azoles+associated+with+mitochondrial+DNA+deficiency+in+Candida+glabrata.">In-vitro resistance to azoles associated with mitochondrial DNA deficiency in Candida glabrata.</a> J Med Microbiol. 48 (7), 663-670 (1999).</li><li>Brun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+respiration+and+susceptibility+to+azole+antifungals+in+Candida+glabrata.">Relationships between respiration and susceptibility to azole antifungals in Candida glabrata.</a> Antimicrob Agents Chemother. 47 (3), 847-853 (2003).</li><li>Bouchara, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+selection+of+an+azole-resistant+petite+mutant+of+Candida+glabrata.">In-vivo selection of an azole-resistant petite mutant of Candida glabrata.</a> J Med Microbiol. 49 (11), 977-984 (2000).</li><li>Badrane, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotypic+diversity+and+unrecognized+antifungal+resistance+among+populations+of+Candida+glabrata+from+positive+blood+cultures.">Genotypic diversity and unrecognized antifungal resistance among populations of Candida glabrata from positive blood cultures.</a> Nat Commun. 14 (1), 5918 (2023).</li><li>Shantal, C. -. J. N., Juan, C. -. C., Lizbeth, B. -. U. S., Carlos, H. -. G. J., Estela, G. -. P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+glabrata+is+a+successful+pathogen:+An+artist+manipulating+the+immune+response.">Candida glabrata is a successful pathogen: An artist manipulating the immune response.</a> Microbiol Res. 260, 127038 (2022).</li><li>Gamarra, S., Mancilla, E., Dudiuk, C., Garcia-Effron, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+dubliniensis+and+Candida+albicans+differentiation+by+colony+morphotype+in+Sabouraud-triphenyltetrazolium+agar.">Candida dubliniensis and Candida albicans differentiation by colony morphotype in Sabouraud-triphenyltetrazolium agar.</a> Rev Iberoam Micol. 32 (2), 126-128 (2015).</li><li>Hung, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rose+bengal-mediated+photodynamic+therapy+to+inhibit+Candida+albicans.">Rose bengal-mediated photodynamic therapy to inhibit Candida albicans.</a> J Vis Exp. (181), e63558 (2022).</li><li>Cardoso, D. R., Franco, D. W., Olsen, K., Andersen, M. L., Skibsted, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+of+bovine+whey+proteins,+peptides,+and+amino+acids+toward+triplet+riboflavin+as+studied+by+laser+flash+photolysis.">Reactivity of bovine whey proteins, peptides, and amino acids toward triplet riboflavin as studied by laser flash photolysis.</a> J Agric Food Chem. 52 (21), 6602-6606 (2004).</li><li>Hall, R. M., Trembath, M. K., Linnane, A. W., Wheelis, L., Criddle, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+petite+induction+and+the+recovery+of+respiratory+competence+in+yeast+cells+exposed+to+ethidium+bromide.">Factors affecting petite induction and the recovery of respiratory competence in yeast cells exposed to ethidium bromide.</a> Mol Gen Genet. 144 (3), 253-262 (1976).</li><li>Chen, X. J., Clark-Walker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+petite+mutation+in+yeasts:+50+years+on.">The petite mutation in yeasts: 50 years on.</a> Int Rev Cytol. 194, 197-238 (2000).</li><li>Piskur, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inheritance+of+the+yeast+mitochondrial+genome.">Inheritance of the yeast mitochondrial genome.</a> Plasmid. 31 (3), 229-241 (1994).</li><li>Wong, T. W., Wang, Y. Y., Sheu, H. M., Chuang, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bactericidal+effects+of+toluidine+blue-mediated+photodynamic+action+on+Vibrio+vulnificus.">Bactericidal effects of toluidine blue-mediated photodynamic action on Vibrio vulnificus.</a> Antimicrob Agents Chemother. 49 (3), 895-902 (2005).</li><li>Wong, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green-mediated+photodynamic+therapy+reduces+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+drug+resistance.">Indocyanine green-mediated photodynamic therapy reduces methicillin-resistant Staphylococcus aureus drug resistance.</a> J Clin Med. 8 (3), 411 (2019).</li><li>Warrier, A., Mazumder, N., Prabhu, S., Satyamoorthy, K., Murali, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+to+control+microbial+biofilms.">Photodynamic therapy to control microbial biofilms.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 33, 102090 (2021).</li><li>Hung, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+photodynamic+therapy+against+fungal+keratitis.">Recent advances in photodynamic therapy against fungal keratitis.</a> Pharmaceutics. 13 (12), 2011 (2021).</li></ol>

Deze studie onthult PDT als de eerste gerapporteerde methode om de vorming van kleine kolonies in Candida te induceren, en overtreft de gevestigde effecten van ethidiumbromide en fluconazol. Deze nieuwe waarneming vereist verder onderzoek om de implicaties ervan te ontrafelen voor zowel de uitroeiing van schimmels door het verminderen van virulentie als de opkomst van resistentiemechanismen.
RB-gemedieerde PDT remt effectief de groei van C. glabrata, wat een mogelijke alternatieve beh...

Schimmelinfecties, met name die veroorzaakt door Candida albicans en in toenemende mate resistente Candida glabrata, vormen een ernstigewereldwijde bedreiging. Deze infecties kunnen dodelijk zijn, vooral voor gehospitaliseerde patiënten en mensen met een verzwakt immuunsysteem. Toenemende antischimmelresistentie bedreigt de bestrijding van invasieve candidiasis, een ernstige schimmelinfectie met hoge mortaliteit, vooral van Candida albicans2. Resistente stammen belemmeren een effectieve behandeling, waardoor zowel de complexiteit als de sterftecijfers kunnen toenemen. In Alameda County, Californië, VS, is C. glabrata de meest voorkomende invasieve soort geworden3. Deze verschuiving in de prevalentie en verspreiding van Candida-soorten kan worden beïnvloed door lokale gezondheidspraktijken, demografie van patiënten, het gebruik van antischimmelmiddelen en de prevalentie van risicofactoren voor Candida-infecties.
Kleine mutanten in Candida, zonder functionele mitochondriën, laten zien hoe deze organel de geneesmiddelrespons, virulentie en stressbestendigheid beïnvloedt 4,5. C. glabrata vormt deze kolonies gemakkelijk, wordt gevoeliger voor polyenen en verliest het aan azolen6. Azolgevoeligheid en ademhalingsfunctie zijn nauw met elkaar verbonden, waarbij verminderde ademhaling leidt tot resistentie via mitochondriaal DNA-verlies7. Kleine kolonies van C. glabrata met azolresistentie zijn geïsoleerd uit menselijke ontlastingsmonsters van een ontvanger van een beenmergtransplantatie die een behandeling met fluconazol onderging8 en uit bloedkweekflessen van patiënten met bloedbaaninfecties9. Hun mogelijke implicaties voor resistentie tegen geneesmiddelen, virulentie en stressrespons benadrukken hun klinische betekenis. Bovendien maken hun verschillende eigenschappen ze tot waardevolle hulpmiddelen voor het onderzoeken van fundamentele vragen in de mitochondriale biologie5. Naarmate het onderzoek naar kleine mutanten vordert, zullen hun toepassingen in zowel klinisch als fundamenteel onderzoek zich waarschijnlijk uitbreiden.
Deze studie ontdekte dat fotodynamische therapie (PDT) kleine kolonies in C. glabrata kan induceren, waardoor het scala aan methoden wordt uitgebreid buiten de traditionele technieken om C. glabrata bloot te stellen aan ethidiumbromide of fluconazol.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#956;m filter</td>
			<td>Merck, Taipei, Taiwan</td>
			<td>Millex, SLGVR33RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL microfuge tube</td>
			<td>Neptune, San Diego, USA</td>
			<td>#3745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20% Triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, MO, USA</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL polypropylene round bottom tube</td>
			<td>Corning, AZ, USA</td>
			<td>352059</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL round-bottom tube with cell strainer cap</td>
			<td>Corning, AZ, USA</td>
			<td>Falcon, #352235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan</td>
			<td>#16196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>BRS, Tainan, Taiwan</td>
			<td>AG012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blank disk</td>
			<td>Advantec, Tokyo, Japan</td>
			<td>49005040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf, UK</td>
			<td>5415R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethidium bromide solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, MO, USA</td>
			<td>E1510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluconazole, 2 mg/mL</td>
			<td>Pfizer, NY, USA</td>
			<td>BC18790248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Version 7.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Green light emitting diode (LED) strip</td>
			<td>Nanyi electronics Co.,Ltd, Tainan, Taiwan</td>
			<td>5050</td>
			<td>Excitation wave: 500~550 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Temperature. shake Incubators</td>
			<td>Yihder, Taipei, Taiwan</td>
			<td>LM-570D (R)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouth care cotton swabs</td>
			<td>Good Verita Enterprise, Taipei, Taiwan</td>
			<td>161357</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muller Hinton II agar</td>
			<td>BD biosciences, California, USA</td>
			<td>211438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multimode microplate reader</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>SpectraMax i3x</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OD600 spectrophotometer</td>
			<td>Biochrom, London, UK</td>
			<td>Ultrospec 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>330000</td>
			<td>stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilized glass tube</td>
			<td>Sunmei, Tainan, Taiwan</td>
			<td>AK45048-16100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract Peptone Dextrose Medium</td>
			<td>HIMEDIA, India</td>
			<td>M1363</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of petite colonies in candida glabrate via rose bengal-mediated photodynamic therapy

Geconfronteerd met een sterftecijfer van 40% bij candidemiepatiënten, blijven resistente Candida en hun kleine mutanten een grote uitdaging voor de behandeling. Antimicrobiële fotodynamische therapie (aPDT) richt zich op meerdere schimmelstructuren, in tegenstelling tot antibiotica/antischimmelmiddelen, waardoor resistentie mogelijk wordt gedwarsboomd. Traditionele methoden voor het induceren van kleine kolonies zijn gebaseerd op ethidiumbromide of fluconazol, die de gevoeligheid voor geneesmiddelen en stressreacties kunnen beïnvloeden. Deze studie onderzocht de toepassing van groen licht (piek 520 nm) en rozenbengaalse (RB) fotosensibilisator ter bestrijding van een resistent Candida glabrata-isolaat. De bevindingen toonden aan dat aPDT-behandeling de celgroei aanzienlijk remde (≥99,9% reductie) en effectief de vorming van kleine kolonies induceerde, zoals blijkt uit verminderde omvang en verlies van mitochondriale redoxindicatorkleuring. Deze studie levert het eerste bewijs dat aPDT in vitro kleine kolonies kan induceren in een multiresistente C. glabrata-stam, wat een potentieel transformatieve benadering biedt voor het bestrijden van resistente schimmelinfecties.

Fungal infections, particularly those caused by Candida albicans and increasingly drug-resistant Candida glabrata, pose a serious global threat1. These infections can be deadly, especially for hospitalized patients and those with weakened immune systems. Rising antifungal resistance threatens the control of invasive candidiasis, a severe fungal infection with high mortality, especially from Candida albicans2. Resistant strains hinder effective treatment, potentially increasing both complexity and death rates. In Alameda County, California, USA, C. glabrata has become the most prevalent invasive species3. This shift in the prevalence and distribution of Candida species may be influenced by local healthcare practices, patient demographics, the utilization of antifungal agents, and the prevalence of risk factors for Candida infections.
Petite mutants in Candida, lacking functional mitochondria, reveal how this organelle affects drug response, virulence, and stress resistance4,5. C. glabrata readily forms these colonies, gaining sensitivity to polyenes while losing it to azoles6. Azole sensitivity and respiratory function are intricately linked, with diminished respiration leading to resistance via mitochondrial DNA loss7. Petite colonies of C. glabrata with azole resistance have been isolated from human stool samples from a bone marrow transplant recipient undergoing fluconazole treatment8 and from blood culture bottles of patients with bloodstream infections9. Their potential implications in drug resistance, virulence, and stress response highlight their clinical significance. Additionally, their distinct properties make them valuable tools for investigating fundamental questions in mitochondrial biology5. As research into petite mutants continues, their applications in both clinical and basic research are likely to expand.
This study discovered that photodynamic therapy (PDT) can induce petite colonies in C. glabrata, expanding the range of methods beyond the traditional techniques of exposing C. glabrata to ethidium bromide or fluconazole.

Auteur in de schijnwerpers: fotodynamische therapie als een nieuwe benadering om kleine kolonies te induceren in resistente candida voor antischimmelonderzoek

Inductie van kleine kolonies in Candida glabraat via Bengaalse rozengemedieerde fotodynamische therapie

The research aims to use photodynamic therapy, also known as PDT, to fight against drug-resistant Candida infection. In this study, we are trying to answer how effectively PDT kills the fungi, and how the virulence of the fungi changes after the treatment. We found petite colonies from the after PDT.Present methods for inducing petite colonies rely on ethidium bromide or fluconazole, which may work through different pathways on drug resistance and the stress responses, compared to PDT. Recently, petite colonies of Candida have become a significant concern in the clinic because they may resist medication and increase mortality rates. Photodynamic therapy has become one of the antifungal treatments and our finding helps breach the gap between traditional methods used to study petite colonies.Our findings provide evidence that PDT can induce petite colonies in drug resistant Candida in-vitro, presenting a groundbreaking method to study petite colonies. We'll definitely delve deeper into this field. There are many questions to be answered.How and why do petite colonies form after PDT stress? Do different Candida species respond differently? I believe it's a never ending story to be explored.

De gegevens worden gepresenteerd als het gemiddelde met ± standaardfout en zijn verkregen uit drie onafhankelijke experimenten, met ten minste drievouden in elke groep. Experimentele gegevens, waaronder kolonietellingen, OD600-metingen en TTC-kleuringsresultaten, werden in een grafiek weergegeven en statistisch geanalyseerd met behulp van grafische en statistische software (zie Materiaaltabel). Eenrichtings-ANOVA of t-test werd gebruikt om de gegevens te analyseren en een p-waard...

Watch this Scientific Journal Video about Photodynamic Therapy as a Novel Approach to Induce Petite Colonies in Drug-Resistant Candida for Antifungal Research at JoVE.com

De betekenis van kleine kolonies in resistentie tegen geneesmiddelen tegen Candida spp. is nog niet volledig onderzocht. Antimicrobiële fotodynamische therapie (aPDT) biedt een veelbelovende strategie tegen resistente schimmelinfecties. Deze studie toont aan dat roos bengaal-gemedieerde aPDT Candida glabrata effectief deactiveert en kleine kolonies induceert, wat een unieke procedure oplevert.

Facing a 40% mortality rate in candidemia patients, drug-resistant Candida and their petite mutants remain a major treatment challenge. Antimicrobial ...

Het onderzoek is gericht op het gebruik van fotodynamische therapie, ook bekend als PDT, om geneesmiddelresistente Candida-infectie te bestrijden. In deze studie proberen we te beantwoorden hoe effectief PDT de schimmels doodt, en hoe de virulentie van de schimmels verandert na de behandeling. We vonden kleine kolonies uit de na PDT.Huidige methoden voor het induceren van kleine kolonies zijn gebaseerd op ethidiumbromide of fluconazol, die via verschillende routes kunnen werken op resistentie tegen geneesmiddelen en de stressreacties, vergeleken met PDT. Onlangs zijn kleine kolonies van Candida een belangrijk punt van zorg geworden in de kliniek, omdat ze resistent kunnen zijn tegen medicatie en de sterftecijfers kunnen verhogen. Fotodynamische therapie is een van de antischimmelbehandelingen geworden en onze bevinding helpt de kloof te overbruggen tussen traditionele methoden die worden gebruikt om kleine kolonies te bestuderen.Onze bevindingen leveren bewijs dat PDT kleine kolonies kan induceren in geneesmiddelresistente Candida in-vitro, wat een baanbrekende methode is om kleine kolonies te bestuderen. We gaan zeker dieper in op dit vakgebied. Er zijn veel vragen die beantwoord moeten worden.Hoe en waarom vormen kleine kolonies zich na PDT-stress? Reageren verschillende Candida-soorten anders? Ik geloof dat het een nooit eindigend verhaal is dat ontdekt moet worden.

induction-petite-colonies-candida-glabrate-via-rose-bengal-mediated

Research

JoVE Journal

Biology

Induction of Petite Colonies in Candida glabrate via Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy

Facing a 40% mortality rate in candidemia patients, drug-resistant Candida and their petite mutants remain a major treatment challenge. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) targets multiple fungal structures, unlike antibiotics/antifungals, potentially thwarting resistance. Traditional methods for inducing petite colonies rely on ethidium bromide or fluconazole, which can influence drug susceptibility and stress responses. This study investigated the application of green light (peak 520 nm) and rose bengal (RB) photosensitizer to combat a drug-resistant Candida glabrata isolate. The findings revealed that aPDT treatment significantly inhibited cell growth (&#8805;99.9% reduction) and effectively induced petite colony formation, as evidenced by reduced size and loss of mitochondrial redox indicator staining. This study provides initial evidence that aPDT can induce petite colonies in a multidrug-resistant C. glabrata strain in vitro, offering a potentially transformative approach for combating resistant fungal infections.

The significance of petite colonies in Candida spp. drug resistance has not been fully explored. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) offers a promising strategy against drug-resistant fungal infections. This study demonstrates that rose bengal-mediated aPDT effectively deactivates Candida glabrata and induces petite colonies, presenting a unique procedure.