Name: Autor destacado: Terapia fotodinámica como un enfoque novedoso para inducir pequeñas colonias en Candida resistente a los medicamentos para la investigación antifúngica
Uploaded: 2024-03-29T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Photodynamic Therapy as a Novel Approach to Induce Petite Colonies in Drug-Resistant Candida for Antifungal Research at JoVE.com

Este trabajo ha recibido financiación del Ministerio de Ciencia y Tecnología de Taiwán [MOST 110-2314-B-006-086-MY3], la Universidad Nacional Cheng Kung [K111-B094], [K111-B095], el Hospital Universitario Nacional Cheng Kung, Taiwán [NCKUH-11204031], [NCKUMCS2022057].

1. Cultivo de C. glabrata
NOTA: Para los experimentos se utiliza un C. glabrata multirresistente (C2-1000907) que es resistente a la mayoría de los agentes antifúngicos, incluido el fluconazol. Es posible que sea necesario adaptar las condiciones experimentales a la cepa específica, ya que pueden existir variaciones entre las diferentes cepas. Todos los experimentos utilizaron Candida en fase logarítmica cultivada a 25 °C (imitando la infección natural) p...

Análisis de la formación de pequeñas colonias y la resistencia a los medicamentos en Candida glabrata

<ol>
	<li>Soriano, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+candidiasis:+current+clinical+challenges+and+unmet+needs+in+adult+populations.">Invasive candidiasis: current clinical challenges and unmet needs in adult populations.</a> J Antimicrob Chemother. 78 (7), 1569-1585 (2023).</li><li>Pappas, P. G., Lionakis, M. S., Arendrup, M. C., Ostrosky-Zeichner, L., Kullberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+candidiasis.">Invasive candidiasis.</a> Nat Rev Dis Primers. 4, 18026 (2018).</li><li>Meyahnwi, D., Siraw, B. B., Reingold, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiologic+features,+clinical+characteristics,+and+predictors+of+mortality+in+patients+with+candidemia+in+Alameda+County,+California;+a+2017-2020+retrospective+analysis.">Epidemiologic features, clinical characteristics, and predictors of mortality in patients with candidemia in Alameda County, California; a 2017-2020 retrospective analysis.</a> BMC Infect Dis. 22 (1), 843 (2022).</li><li>Whittaker, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+petite+mutation+in+yeast.">The petite mutation in yeast.</a> Subcell Biochem. 6, 175-232 (1979).</li><li>Hatab, M. A., Whittaker, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+respiration-deficient+mutants+from+the+pathogenic+yeast+Candida+albicans.">Isolation and characterization of respiration-deficient mutants from the pathogenic yeast Candida albicans.</a> Antonie Van Leeuwenhoek. 61 (3), 207-219 (1992).</li><li>Defontaine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vitro+resistance+to+azoles+associated+with+mitochondrial+DNA+deficiency+in+Candida+glabrata.">In-vitro resistance to azoles associated with mitochondrial DNA deficiency in Candida glabrata.</a> J Med Microbiol. 48 (7), 663-670 (1999).</li><li>Brun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+respiration+and+susceptibility+to+azole+antifungals+in+Candida+glabrata.">Relationships between respiration and susceptibility to azole antifungals in Candida glabrata.</a> Antimicrob Agents Chemother. 47 (3), 847-853 (2003).</li><li>Bouchara, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+selection+of+an+azole-resistant+petite+mutant+of+Candida+glabrata.">In-vivo selection of an azole-resistant petite mutant of Candida glabrata.</a> J Med Microbiol. 49 (11), 977-984 (2000).</li><li>Badrane, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotypic+diversity+and+unrecognized+antifungal+resistance+among+populations+of+Candida+glabrata+from+positive+blood+cultures.">Genotypic diversity and unrecognized antifungal resistance among populations of Candida glabrata from positive blood cultures.</a> Nat Commun. 14 (1), 5918 (2023).</li><li>Shantal, C. -. J. N., Juan, C. -. C., Lizbeth, B. -. U. S., Carlos, H. -. G. J., Estela, G. -. P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+glabrata+is+a+successful+pathogen:+An+artist+manipulating+the+immune+response.">Candida glabrata is a successful pathogen: An artist manipulating the immune response.</a> Microbiol Res. 260, 127038 (2022).</li><li>Gamarra, S., Mancilla, E., Dudiuk, C., Garcia-Effron, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+dubliniensis+and+Candida+albicans+differentiation+by+colony+morphotype+in+Sabouraud-triphenyltetrazolium+agar.">Candida dubliniensis and Candida albicans differentiation by colony morphotype in Sabouraud-triphenyltetrazolium agar.</a> Rev Iberoam Micol. 32 (2), 126-128 (2015).</li><li>Hung, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rose+bengal-mediated+photodynamic+therapy+to+inhibit+Candida+albicans.">Rose bengal-mediated photodynamic therapy to inhibit Candida albicans.</a> J Vis Exp. (181), e63558 (2022).</li><li>Cardoso, D. R., Franco, D. W., Olsen, K., Andersen, M. L., Skibsted, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivity+of+bovine+whey+proteins,+peptides,+and+amino+acids+toward+triplet+riboflavin+as+studied+by+laser+flash+photolysis.">Reactivity of bovine whey proteins, peptides, and amino acids toward triplet riboflavin as studied by laser flash photolysis.</a> J Agric Food Chem. 52 (21), 6602-6606 (2004).</li><li>Hall, R. M., Trembath, M. K., Linnane, A. W., Wheelis, L., Criddle, R. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+petite+mutation+in+yeasts:+50+years+on.">The petite mutation in yeasts: 50 years on.</a> Int Rev Cytol. 194, 197-238 (2000).</li><li>Piskur, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inheritance+of+the+yeast+mitochondrial+genome.">Inheritance of the yeast mitochondrial genome.</a> Plasmid. 31 (3), 229-241 (1994).</li><li>Wong, T. W., Wang, Y. Y., Sheu, H. M., Chuang, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bactericidal+effects+of+toluidine+blue-mediated+photodynamic+action+on+Vibrio+vulnificus.">Bactericidal effects of toluidine blue-mediated photodynamic action on Vibrio vulnificus.</a> Antimicrob Agents Chemother. 49 (3), 895-902 (2005).</li><li>Wong, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green-mediated+photodynamic+therapy+reduces+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+drug+resistance.">Indocyanine green-mediated photodynamic therapy reduces methicillin-resistant Staphylococcus aureus drug resistance.</a> J Clin Med. 8 (3), 411 (2019).</li><li>Warrier, A., Mazumder, N., Prabhu, S., Satyamoorthy, K., Murali, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+to+control+microbial+biofilms.">Photodynamic therapy to control microbial biofilms.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 33, 102090 (2021).</li><li>Hung, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+photodynamic+therapy+against+fungal+keratitis.">Recent advances in photodynamic therapy against fungal keratitis.</a> Pharmaceutics. 13 (12), 2011 (2021).</li></ol>

Este estudio revela que la PDT es el primer método reportado para inducir la formación de colonias pequeñas en Candida, superando los efectos establecidos del bromuro de etidio y el fluconazol. Esta nueva observación requiere una mayor exploración para desentrañar sus implicaciones tanto para la erradicación de hongos mediante la disminución de la virulencia como para la aparición de mecanismos de resistencia.
La TFD mediada por RB inhibe eficazmente el crecimiento de C. glabrata<...

Las infecciones fúngicas, en particular las causadas por Candida albicans y Candida glabrata, cada vez más resistente a los medicamentos, representan una grave amenaza mundial1. Estas infecciones pueden ser mortales, especialmente para los pacientes hospitalizados y aquellos con sistemas inmunitarios debilitados. El aumento de la resistencia a los antifúngicos amenaza el control de la candidiasis invasiva, una infección fúngica grave con alta mortalidad, especialmente de Candida albicans2. Las cepas resistentes dificultan el tratamiento eficaz, lo que puede aumentar tanto la complejidad como las tasas de mortalidad. En el condado de Alameda, California, EE.UU ., C. glabrata se ha convertido en la especie invasora más prevalente3. Este cambio en la prevalencia y distribución de las especies de Candida puede estar influenciado por las prácticas de atención médica locales, la demografía de los pacientes, la utilización de agentes antifúngicos y la prevalencia de factores de riesgo para las infecciones por Candida.
Pequeños mutantes en Candida, que carecen de mitocondrias funcionales, revelan cómo este orgánulo afecta la respuesta a los medicamentos, la virulencia y la resistencia al estrés 4,5. C. glabrata forma fácilmente estas colonias, ganando sensibilidad a los polienos mientras la pierde ante los azoles6. La sensibilidad a los azoles y la función respiratoria están estrechamente relacionadas, y la disminución de la respiración conduce a la resistencia a través de la pérdida de ADN mitocondrial7. Se han aislado pequeñas colonias de C. glabrata con resistencia a los azoles a partir de muestras de heces humanas de un receptor de trasplante de médula ósea sometido a tratamiento con fluconazol8 y de frascos de hemocultivo de pacientes con infecciones del torrente sanguíneo9. Sus posibles implicaciones en la resistencia a los fármacos, la virulencia y la respuesta al estrés ponen de manifiesto su importancia clínica. Además, sus propiedades distintivas los convierten en herramientas valiosas para investigar cuestiones fundamentales en la biología mitocondrial5. A medida que continúa la investigación sobre mutantes pequeños, es probable que se amplíen sus aplicaciones tanto en la investigación clínica como en la básica.
Este estudio descubrió que la terapia fotodinámica (TFD) puede inducir colonias pequeñas en C. glabrata, ampliando la gama de métodos más allá de las técnicas tradicionales de exposición de C. glabrata al bromuro de etidio o fluconazol.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#956;m filter</td>
			<td>Merck, Taipei, Taiwan</td>
			<td>Millex, SLGVR33RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL microfuge tube</td>
			<td>Neptune, San Diego, USA</td>
			<td>#3745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20% Triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, MO, USA</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL polypropylene round bottom tube</td>
			<td>Corning, AZ, USA</td>
			<td>352059</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL round-bottom tube with cell strainer cap</td>
			<td>Corning, AZ, USA</td>
			<td>Falcon, #352235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan</td>
			<td>#16196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>BRS, Tainan, Taiwan</td>
			<td>AG012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blank disk</td>
			<td>Advantec, Tokyo, Japan</td>
			<td>49005040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf, UK</td>
			<td>5415R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethidium bromide solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich, MO, USA</td>
			<td>E1510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluconazole, 2 mg/mL</td>
			<td>Pfizer, NY, USA</td>
			<td>BC18790248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Version 7.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Green light emitting diode (LED) strip</td>
			<td>Nanyi electronics Co.,Ltd, Tainan, Taiwan</td>
			<td>5050</td>
			<td>Excitation wave: 500~550 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Temperature. shake Incubators</td>
			<td>Yihder, Taipei, Taiwan</td>
			<td>LM-570D (R)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouth care cotton swabs</td>
			<td>Good Verita Enterprise, Taipei, Taiwan</td>
			<td>161357</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muller Hinton II agar</td>
			<td>BD biosciences, California, USA</td>
			<td>211438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multimode microplate reader</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>SpectraMax i3x</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OD600 spectrophotometer</td>
			<td>Biochrom, London, UK</td>
			<td>Ultrospec 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>330000</td>
			<td>stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilized glass tube</td>
			<td>Sunmei, Tainan, Taiwan</td>
			<td>AK45048-16100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract Peptone Dextrose Medium</td>
			<td>HIMEDIA, India</td>
			<td>M1363</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of petite colonies in candida glabrate via rose bengal-mediated photodynamic therapy

Frente a una tasa de mortalidad del 40% en pacientes con candidemia, la Candida resistente a los medicamentos y sus pequeños mutantes siguen siendo un desafío importante para el tratamiento. La terapia fotodinámica antimicrobiana (aPDT) se dirige a múltiples estructuras fúngicas, a diferencia de los antibióticos/antifúngicos, lo que puede frustrar la resistencia. Los métodos tradicionales para inducir colonias pequeñas se basan en el bromuro de etidio o el fluconazol, que pueden influir en la susceptibilidad a los medicamentos y en las respuestas al estrés. Este estudio investigó la aplicación de luz verde (pico 520 nm) y fotosensibilizador de rosa bengala (RB) para combatir un aislado de Candida glabrata resistente a los medicamentos. Los hallazgos revelaron que el tratamiento con aPDT inhibió significativamente el crecimiento celular (reducción del ≥99,9%) e indujo eficazmente la formación de colonias pequeñas, como lo demuestra la reducción del tamaño y la pérdida de la tinción del indicador redox mitocondrial. Este estudio proporciona evidencia inicial de que aPDT puede inducir colonias pequeñas en una cepa de C. glabrata multirresistente in vitro, ofreciendo un enfoque potencialmente transformador para combatir las infecciones fúngicas resistentes.

Fungal infections, particularly those caused by Candida albicans and increasingly drug-resistant Candida glabrata, pose a serious global threat1. These infections can be deadly, especially for hospitalized patients and those with weakened immune systems. Rising antifungal resistance threatens the control of invasive candidiasis, a severe fungal infection with high mortality, especially from Candida albicans2. Resistant strains hinder effective treatment, potentially increasing both complexity and death rates. In Alameda County, California, USA, C. glabrata has become the most prevalent invasive species3. This shift in the prevalence and distribution of Candida species may be influenced by local healthcare practices, patient demographics, the utilization of antifungal agents, and the prevalence of risk factors for Candida infections.
Petite mutants in Candida, lacking functional mitochondria, reveal how this organelle affects drug response, virulence, and stress resistance4,5. C. glabrata readily forms these colonies, gaining sensitivity to polyenes while losing it to azoles6. Azole sensitivity and respiratory function are intricately linked, with diminished respiration leading to resistance via mitochondrial DNA loss7. Petite colonies of C. glabrata with azole resistance have been isolated from human stool samples from a bone marrow transplant recipient undergoing fluconazole treatment8 and from blood culture bottles of patients with bloodstream infections9. Their potential implications in drug resistance, virulence, and stress response highlight their clinical significance. Additionally, their distinct properties make them valuable tools for investigating fundamental questions in mitochondrial biology5. As research into petite mutants continues, their applications in both clinical and basic research are likely to expand.
This study discovered that photodynamic therapy (PDT) can induce petite colonies in C. glabrata, expanding the range of methods beyond the traditional techniques of exposing C. glabrata to ethidium bromide or fluconazole.

Autor destacado: Terapia fotodinámica como un enfoque novedoso para inducir pequeñas colonias en Candida resistente a los medicamentos para la investigación antifúngica

Inducción de pequeñas colonias en Candida glabrate a través de la terapia fotodinámica mediada por Rose Bengal

The research aims to use photodynamic therapy, also known as PDT, to fight against drug-resistant Candida infection. In this study, we are trying to answer how effectively PDT kills the fungi, and how the virulence of the fungi changes after the treatment. We found petite colonies from the after PDT.Present methods for inducing petite colonies rely on ethidium bromide or fluconazole, which may work through different pathways on drug resistance and the stress responses, compared to PDT. Recently, petite colonies of Candida have become a significant concern in the clinic because they may resist medication and increase mortality rates. Photodynamic therapy has become one of the antifungal treatments and our finding helps breach the gap between traditional methods used to study petite colonies.Our findings provide evidence that PDT can induce petite colonies in drug resistant Candida in-vitro, presenting a groundbreaking method to study petite colonies. We'll definitely delve deeper into this field. There are many questions to be answered.How and why do petite colonies form after PDT stress? Do different Candida species respond differently? I believe it's a never ending story to be explored.

Los datos se presentan como la media con ± error estándar y se obtuvieron de tres experimentos independientes, con al menos triplicados en cada grupo. Los datos experimentales, incluidos los recuentos de colonias, las mediciones de OD600 y los resultados de tinción con TTC, se graficaron y analizaron estadísticamente utilizando gráficos y software estadístico (ver Tabla de Materiales). Para el análisis de los datos se utilizó un ANOVA de un factor o prueba t , y se consideró ...

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La importancia de las colonias pequeñas en la resistencia a los medicamentos de Candida spp. no se ha explorado completamente. La terapia fotodinámica antimicrobiana (aPDT) ofrece una estrategia prometedora contra las infecciones fúngicas resistentes a los medicamentos. Este estudio demuestra que la aPDT mediada por rosa de bengala desactiva eficazmente la Candida glabrata e induce colonias pequeñas, presentando un procedimiento único.

Facing a 40% mortality rate in candidemia patients, drug-resistant Candida and their petite mutants remain a major treatment challenge. Antimicrobial ...

La investigación tiene como objetivo utilizar la terapia fotodinámica, también conocida como PDT, para luchar contra la infección por Candida resistente a los medicamentos. En este estudio, estamos tratando de responder qué tan efectivamente la PDT mata los hongos y cómo cambia la virulencia de los hongos después del tratamiento. Encontramos colonias pequeñas de la PDT posterior.Los métodos actuales para inducir colonias pequeñas se basan en el bromuro de etidio o fluconazol, que pueden actuar a través de diferentes vías sobre la resistencia a los medicamentos y las respuestas al estrés, en comparación con la PDT. Recientemente, las pequeñas colonias de Candida se han convertido en una preocupación importante en la clínica porque pueden resistirse a la medicación y aumentar las tasas de mortalidad. La terapia fotodinámica se ha convertido en uno de los tratamientos antifúngicos y nuestro hallazgo ayuda a romper la brecha entre los métodos tradicionales utilizados para estudiar colonias pequeñas.Nuestros hallazgos proporcionan evidencia de que la PDT puede inducir colonias pequeñas en Candida resistente a los medicamentos in vitro, presentando un método innovador para estudiar colonias pequeñas. Definitivamente profundizaremos en este campo. Hay muchas preguntas por responder.¿Cómo y por qué se forman las colonias pequeñas después del estrés PDT? ¿Las diferentes especies de Candida responden de manera diferente? Creo que es una historia interminable por explorar.

induction-petite-colonies-candida-glabrate-via-rose-bengal-mediated

Research

JoVE Journal

Biology

Induction of Petite Colonies in Candida glabrate via Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy

Facing a 40% mortality rate in candidemia patients, drug-resistant Candida and their petite mutants remain a major treatment challenge. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) targets multiple fungal structures, unlike antibiotics/antifungals, potentially thwarting resistance. Traditional methods for inducing petite colonies rely on ethidium bromide or fluconazole, which can influence drug susceptibility and stress responses. This study investigated the application of green light (peak 520 nm) and rose bengal (RB) photosensitizer to combat a drug-resistant Candida glabrata isolate. The findings revealed that aPDT treatment significantly inhibited cell growth (&#8805;99.9% reduction) and effectively induced petite colony formation, as evidenced by reduced size and loss of mitochondrial redox indicator staining. This study provides initial evidence that aPDT can induce petite colonies in a multidrug-resistant C. glabrata strain in vitro, offering a potentially transformative approach for combating resistant fungal infections.

The significance of petite colonies in Candida spp. drug resistance has not been fully explored. Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) offers a promising strategy against drug-resistant fungal infections. This study demonstrates that rose bengal-mediated aPDT effectively deactivates Candida glabrata and induces petite colonies, presenting a unique procedure.