DD PCR är en allmänt använd teknik för att bestämma AAV-genomtitern, men ett konsensusprotokoll saknas för närvarande. Vårt protokoll är en validerad steg-för-steg-guide om hur man förbereder prover och utför DD PCR för korrekt genomtitrering. Jämfört med QPCR erbjuder DD PCR flera fördelar, inklusive ökad precision, större robusthet och en mer absolut och direkt kvantifiering av målsekvenser utan behov av standardkurvor.
Dessutom, med en väldesignad primer-sonduppsättning, möjliggör DD PCR specifik tragedi vid detektion, i motsats till andra tekniker som detekterar allt DNA. Att utveckla ett standardiserat konsensusprotokoll för kvantifiering av vektorgenom kommer att förbättra tillförlitligheten och enhetligheten i rekombinant AAV-kvalitetskontroll över olika laboratorier. Detta kommer att underlätta både forskning och kliniska tillämpningar av rekombinanta AAV-vektorer för samhället i stort.
