Name: a method for 2-photon imaging of blood flow in the neocortex through a cranial window
Uploaded: 2008-02-25T14:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window at JoVE.com

<p class="jove_step"> Staartader injecties van fluorescerende kleurstoffen dextranen </p><ol><li> Om de afbeelding cerebrale vaatstelsel, moeten de dieren intraveneus geïnjecteerd te worden met een fluorescerende kleurstof. We maken gebruik van dextran-geconjugeerde kleurstoffen, omdat de groep dextraan voorkomt dat de kleurstof van het oversteken van de hersen bloed barrière en uitlekken van de bloedvaten. </li><li> Muizen worden verdoofd met isofluraan (4% voor inductie, 1,5-2% tijdens de injectie). </li><li> Staart is gedesinfecteerd met a...

<ol>
	<li>Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+and+stimulus-induced+changes+in+blood+flow+observed+in+individual+capillaries+in+layers+2+through+4+of+rat+neocortex.">Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Nat Acad Sci</em>. <b>95</b>, 15741-15746 (1998).</li><li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed. Eng. Online</em>. <b>17</b>, 2-13 (2003).</li><li>Zhang, S., Murphy, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+impact+of+cortical+microcirculation+on+synaptic+structure+and+sensory-evoked+hemodynamic+responses+in+vivo.">Imaging the impact of cortical microcirculation on synaptic structure and sensory-evoked hemodynamic responses in vivo.</a> <b>5</b>, (2007).</li><li>Nishimura, N., Schaffer, C. B., Friedman, B., Lyden, P. D., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Penetrating+arterioles+are+a+bottleneck+in+the+perfusion+of+neocortex.">Penetrating arterioles are a bottleneck in the perfusion of neocortex.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Nat Acad Sci</em>. <b>104</b>, 365-370 (2007).</li></ol>

<p> Corticale doorbloeding dynamiek kan worden bestudeerd in vivo door beeldvorming fluorescente kleurstoffen dextran geïnjecteerd in de staartader van knaagdieren met twee-foton microscopie. Deze video toonde een methode voor het afbeelden van de bloedstroom dynamiek in neocortex van muizen door middel van een met glas overdekt craniale venster voorbereiding. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescein isothio-cyanate-dextran</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>FD500S</td>
<td>mol wt 500,000</td>
</tr>
<tr>
<td>Rhodamine B isothio-cyanate-dextran</td>
<td>Reagent</td>
<td>Simga</td>
<td>R9379</td>
<td>mol wt ~70,000
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a method for 2-photon imaging of blood flow in the neocortex through a cranial window

<p class="jove_content">De mogelijkheid om het imago van de cerebrale vaatstelsel (van grote schepen naar capillairen) en neem de bloedstroom dynamiek in de intacte hersenen van levende knaagdieren is een krachtige techniek. Met behulp van in vivo twee-foton microscopie door middel van een craniale raam is het mogelijk om de afbeelding fluorescente kleurstoffen intraveneus geïnjecteerd. Dit laat een om het imago van de corticale vaatstelsel en ook te verkrijgen metingen van de bloedstroom. Deze techniek werd oorspronkelijk ontwikkeld door David Kleinfeld en Winfried Denk. De methode kan worden gebruikt om de bloedstroom dynamiek studie tijdens of na cerebrale ischemie, in neurodegeneratieve aandoeningen, bij hersentumoren, of in de normale hersenen fysiologie. Zo heeft het gebruikt om te bestuderen hoe een beroerte veroorzaakt verschuivingen in de bloedstroom richting en veranderingen in de rode bloedcellen snelheid of flux in en rond het infarct. Hier laten we zien hoe de twee-foton microscopie gebruikt om de afbeelding bloedstroom dynamiek in de neocortex van levende muizen met behulp van fluorescente kleurstoffen ingespoten in de staartader.</p>

Watch this Scientific Journal Video about A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window at JoVE.com

A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window

<p class="jove_content">Corticale doorbloeding dynamiek kan worden bestudeerd in vivo door beeldvorming fluorescente kleurstoffen dextran geïnjecteerd in de staartader van knaagdieren met twee-foton microscopie. Deze video laat zien hoe u foto doorbloeding dynamiek in neocortex van muizen door middel van een met glas overdekt craniale venster voorbereiding.</p>

Een methode voor 2-Photon Imaging van de bloedstroom in de neocortex door middel van een Cranial Window

The ability to image the cerebral vasculature (from large vessels to capillaries) and record blood flow dynamics in the intact brain of living rodents is ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Dissection en 2-Photon Imaging van perifere lymfeklieren in Muizen

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: een eenvoudige methode voor Nauwkeurige Genotyping

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy

In situ beeldvorming van de muis Thymus Met behulp van 2-Photon Microscopie

Two-photon Microscopy (TPM) enables us to image deep into the thymus and document the events that are important for thymocyte development.  To follow the ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

In vivo 2-Photon Imaging Calcium in Layer 2 / 3 van Muizen

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

Generatie van beenmerg afgeleide Murine dendritische cellen voor gebruik in twee-foton Imaging

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

Dendra2 Photoswitching through the Mammary Imaging Window

Dendra2 Photoswitching door de borstklieren Imaging venster

In the last decade, intravital microscopy of breast tumors in mice and rats at single-cell resolution1-4  has resulted in important insights into ...

A Simple Method for Imaging <em>Arabidopsis</em> Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

Een eenvoudige methode voor de Imaging<em> Arabidopsis</em> Met behulp van Leaves Perfluorodecalin als een Infiltratieve Imaging Medium

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

An Explant Assay for Assessing Cellular Behavior of the Cranial Mesenchyme

Een Explantatie Assay voor het beoordelen van cellulair gedrag van de craniale mesenchym

The central nervous system is derived from the neural plate that undergoes a series of complex morphogenetic movements resulting in formation of the ...

Identification of a Murine Erythroblast Subpopulation  Enriched in Enucleating Events by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Identificatie van een Muriene erytroblast subpopulatie verrijkt in Enucleating Events door Multi-spectrale Imaging flowcytometrie

Erythropoiesis in mammals concludes with the dramatic process of enucleation that results in reticulocyte formation. The mechanism of enucleation has not ...

A Method for Screening and Validation of Resistant Mutations Against Kinase Inhibitors

Een werkwijze voor het screenen en Validatie van Resistente Mutaties Tegen kinaseremmers

The discovery of BCR/ABL as a driver oncogene in chronic myeloid leukemia (CML) resulted in the development of Imatinib, which, in fact, demonstrated the ...