Name: a method for 2-photon imaging of blood flow in the neocortex through a cranial window
Uploaded: 2008-02-25T14:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window at JoVE.com

<p class="jove_step"> Svansvenen injektioner av fluorescerande dextraner färgämnen </p><ol><li> För att bilden cerebral kärlsystemet skall djuren injiceras intravenöst med fluorescerande färg. Vi använder oss av dextran-konjugerade färgämnen eftersom dextran fraktion hindrar färgen från att korsa barriären hjärnan blod och läcker ut från blodkärlen. </li><li> Möss är sövda med isofluran (4% för induktion, 1,5-2% under injektion). </li><li> Svansen är desinficeras med 70% alkohol. </li><li> Med en 26 gauge kanyl, är 75-100 ...

<ol>
	<li>Kleinfeld, D., Mitra, P. P., Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+and+stimulus-induced+changes+in+blood+flow+observed+in+individual+capillaries+in+layers+2+through+4+of+rat+neocortex.">Fluctuations and stimulus-induced changes in blood flow observed in individual capillaries in layers 2 through 4 of rat neocortex.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Nat Acad Sci</em>. <b>95</b>, 15741-15746 (1998).</li><li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed. Eng. Online</em>. <b>17</b>, 2-13 (2003).</li><li>Zhang, S., Murphy, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+impact+of+cortical+microcirculation+on+synaptic+structure+and+sensory-evoked+hemodynamic+responses+in+vivo.">Imaging the impact of cortical microcirculation on synaptic structure and sensory-evoked hemodynamic responses in vivo.</a> <b>5</b>, (2007).</li><li>Nishimura, N., Schaffer, C. B., Friedman, B., Lyden, P. D., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Penetrating+arterioles+are+a+bottleneck+in+the+perfusion+of+neocortex.">Penetrating arterioles are a bottleneck in the perfusion of neocortex.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Nat Acad Sci</em>. <b>104</b>, 365-370 (2007).</li></ol>

<p> Kortikala blodflödet dynamik kan studeras in vivo genom avbildning fluorescerande dextran färgämnen injiceras i svansvenen av gnagare med två-photon mikroskopi. Denna video visar en metod för hur man bilden blodflödet dynamik i neocortex möss genom en glastäckta kraniell fönster beredning. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescein isothio-cyanate-dextran</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>FD500S</td>
<td>mol wt 500,000</td>
</tr>
<tr>
<td>Rhodamine B isothio-cyanate-dextran</td>
<td>Reagent</td>
<td>Simga</td>
<td>R9379</td>
<td>mol wt ~70,000
</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a method for 2-photon imaging of blood flow in the neocortex through a cranial window

<p class="jove_content">Förmågan att bilden av cerebral kärlsystemet (från stora fartyg till kapillärerna) och spela in blod dynamik flödet i den intakta hjärnan hos levande gnagare är en kraftfull teknik. Med in vivo-2-foton mikroskopi via en kraniell fönster är det möjligt att bilden fluorescerande färger injiceras intravenöst. Detta tillåter en att bilden kortikala kärlsystemet och också få mätningar av blodflödet. Denna teknik utvecklades ursprungligen av David Kleinfeld och Winfried Denk. Metoden kan användas för att studera dynamiken blodflöde under eller efter cerebral ischemi, i neurodegenerativa sjukdomar, i hjärntumörer, eller i hjärnans normala fysiologi. Till exempel har den använts för att studera hur stroke orsakar förändringar i blodflödet riktning och förändringar i röda blodkroppar hastighet eller flöde i och kring infarkt. Här kan vi visa hur man använder 2-foton mikroskopi flöda bild blod dynamiken i hjärnbarken på levande möss med fluorescerande färgämnen injiceras i svansvenen.</p>

Watch this Scientific Journal Video about A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window at JoVE.com

A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window

<p class="jove_content">Kortikala blodflödet dynamik kan studeras in vivo genom avbildning fluorescerande dextran färgämnen injiceras i svansvenen av gnagare med 2-foton mikroskopi. Denna video visar hur man bilden blodflödet dynamik i neocortex möss genom en glastäckta kraniell fönster beredning.</p>

En metod för 2-Photon Imaging av blodflödet i hjärnbarken genom en Kraniell fönster

The ability to image the cerebral vasculature (from large vessels to capillaries) and record blood flow dynamics in the intact brain of living rodents is ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Dissektion och 2-Photon Imaging för perifera lymfkörtlar på möss

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: En enkel metod för noggrann Genotypning

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy

In situ avbildning av Mouse Thymus Använda 2-Photon Mikroskopi

Two-photon Microscopy (TPM) enables us to image deep into the thymus and document the events that are important for thymocyte development.  To follow the ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

In Vivo 2-Photon Kalcium Imaging i Layer 2 / 3 av Möss

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

Generering av benmärg härledda Murine dendritiska celler för användning i 2-fotonen Imaging

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

Dendra2 Photoswitching through the Mammary Imaging Window

Dendra2 Photoswitching genom bröst Imaging Fönster

In the last decade, intravital microscopy of breast tumors in mice and rats at single-cell resolution1-4  has resulted in important insights into ...

A Simple Method for Imaging <em>Arabidopsis</em> Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

En enkel metod för Imaging<em> Arabidopsis</em> Blad Använda Perfluorodecalin som en infiltrativ Imaging Medium

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

An Explant Assay for Assessing Cellular Behavior of the Cranial Mesenchyme

Ett explantat analys för bedömning Cellular Beteende för Kranial mesenkym

The central nervous system is derived from the neural plate that undergoes a series of complex morphogenetic movements resulting in formation of the ...

Identification of a Murine Erythroblast Subpopulation  Enriched in Enucleating Events by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Identifiering av en Murina erytroblast subpopulation Berikad i Enucleating Händelser av Multispektral Imaging flödescytometri

Erythropoiesis in mammals concludes with the dramatic process of enucleation that results in reticulocyte formation. The mechanism of enucleation has not ...

A Method for Screening and Validation of Resistant Mutations Against Kinase Inhibitors

En metod för screening och validering av Resistenta mutationer Against kinashämmare

The discovery of BCR/ABL as a driver oncogene in chronic myeloid leukemia (CML) resulted in the development of Imatinib, which, in fact, demonstrated the ...