Name: in vivo 2-photon calcium imaging in layer 2/3 of mice
Uploaded: 2008-03-13T12:00:00
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<p>我々は、カルシウムの指標のバルクロードを最適化する上で有用な議論をオルガGaraschukに感謝します。 </p>

<ol><li>蛍光カルシウム指示薬溶液を準備します。我々は短いために染料をアセトキシメチルエステルの染料を使用し、またはAM。これらは、細胞外に注入すると細胞に取り込まれることができる色素です。我々は通常、1mMの濃度でオレゴングリーンBAPTA - 1 AMまたはAMにみたFluo - 4を使用してください。 AMの染料は、50マイクログラムのバイアルにInvitrogenから入手できます。まず、DMSOでプルロニックF - 127の20％溶?...

<ol>
	<li>Garaschuk, O., Milos, R. I., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+bulk-loading+of+fluorescent+indicators+for+two-photon+brain+imaging+in+vivo.">Targeted bulk-loading of fluorescent indicators for two-photon brain imaging in vivo.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Protoc</em>. <b>1</b>, (2006).</li><li>Stosiek, C., Garaschuk, O., Holthoff, K., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+two-photon+calcium+imaging+of+neuronal+networks.">In-vivo two-photon calcium imaging of neuronal networks.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci USA</em>. <b>100</b>, 7319-7324 (2003).</li><li>Pologruto, T. A., Sabatini, B. L., Svoboda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ScanImage:+flexible+software+for+operating+laser+scanning+microscopes.&amp;nbsp;&amp;nbsp;+Biomed+Eng+Online+2:13.">ScanImage: flexible software for operating laser scanning microscopes.&amp;nbsp;&amp;nbsp; Biomed Eng Online 2:13.</a> <em style='font-style: italic'>Biomed Eng Online</em>. <b>2</b>, (2003).</li></ol>

<p>電気生理学的記録に比べてこの方法の利点は低侵襲であり、緻密な神経回路網の活動の記録を可能にすることです。この手順を行う際には、硬膜を傷つけないように開頭術を行う際に細心の注意を取ることを覚えておくことが重要S。と硬膜下出血の少量でも非常にイメージングを不明瞭。 </p>

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Oregon Green BAPTA1-AM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>O-6807</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluo 4- AM</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>F-14201</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sulforhodamine 101</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>S-359</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pluronic F-127 in DMSO</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>P-3000MP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifugal Filter (0.45 micron)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Millipore</td>
<td>UFC3 0HV 0S</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

in vivo 2-photon calcium imaging in layer 2/3 of mice

<p class="jove_content">新皮質のマイクロ回路のネットワークのダイナミクスを理解するために、それは同時に、神経細胞の多数のアクティビティを記録することが不可欠です。のin vivo二光子カルシウムイメージングは​​1つが、単一セルの分解能で緻密な神経集団の活動を記録できるようにする唯一の方法です。方法は、神経細胞の多数により取り込まれ、最終的に生体内で二光子顕微鏡を用いて時間経過のカルシウムイメージングによる神経細胞の活動を記録することができる蛍光カルシウム指示薬を注入し、頭蓋イメージングウィンドウを注入で構成されています。アストロサイト特異的染料の同時注入は1つがアストロサイトからニューロンを区別することができます。技術はより良い細胞の異なるグループのネットワークの相互作用を理解するニューロンの特定の亜集団に蛍光分子を発現するマウスで行うことができます。 </p>

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In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

<p class="jove_content">新皮質のマイクロ回路のネットワークのダイナミクスを理解するために、それは同時に、神経細胞の多数のアクティビティを記録することが不可欠です。のin vivo二光子カルシウムイメージングは​​1つが、単一セルの分解能で緻密な神経集団の活動を記録できるようにする唯一の方法です。</p>

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Research

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Biology

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