Name: labeling hescs and hmscs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with mr imaging
Uploaded: 2008-03-31T21:32:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging at JoVE.com

<p> Este projeto foi suportado por uma concessão SEED Leon J. Thal do Instituto de Medicina Regenerativa da Califórnia. Tobias Henning foi financiado por uma bolsa de Pesquisa do alemão Research Association (DFG, HE 4578/1-2). Queremos agradecem Meneses Juanito para o seu conselho sobre a cultura de células estaminais embrionárias humanas. </p>

<p> <strong>Rotulagem de hMSC com Ferucarbotran</strong> </p><p class="jove_content"> Esta é a técnica para a rotulagem de células-tronco mesenquimais com Ferucarbotran, um óxido de ferro agente de contraste para ressonância magnética com base: </p><ol><li> Para começar, a chapa do células 18-24 horas antes do procedimento de rotulagem em frascos de T75 em uma confluência de 80%. Se você usar uma placa de cultura diferente, isso é equivalente a cerca de 10 mil células por cm <sup>2.</sup> </li><li> No dia seguinte, começar a prepar...

<ol>
	<li>Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Oostendorp, R. A. J., Settles, M., Piontek, G., Metz, S., Heinzmann, U., Rummeny, E. J., Schlegel, J., Link, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+of+Hematopoietic+Progenitor+Cells+with+MR+Contrast+Agents.">Targeting of Hematopoietic Progenitor Cells with MR Contrast Agents.</a> <b>228</b>, 760-767 (2003).</li><li>Daldrup-Link, H. E., Rudelius, M., Piontek, G., Metz, S., Brauer, R., Debus, G., Corot, C., Schlegel, J., Link, T. M., Peschel, C., Rummeny, E. J., Oostendorp, R. A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migration+of+iron+oxide+labeled+human+hematopoietic+progenitor+cells+in+a+xenotransplant+model:+in+vivo+monitoring+using+clinical+magnetic+resonance+imaging+equipment.">Migration of iron oxide labeled human hematopoietic progenitor cells in a xenotransplant model: in vivo monitoring using clinical magnetic resonance imaging equipment.</a> <em style='font-style: italic'>Radiology</em>. <b>234</b>, 197-205 (2005).</li><li>Henning, T. D., Saborowski, O., Golovko, D., Boddington, S., Bauer, J. S., Fu, Y., Meier, R., Pietsch, H., Sennino, B., McDonald, D. M., Daldrup-Link, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+labeling+with+the+positive+MR+contrast+agent.">Cell labeling with the positive MR contrast agent.</a> <em style='font-style: italic'>Gadofluorine M. Eur Radiol</em>. <b>17</b>, 1226-1234 (2007).</li></ol>

<p> A representação não-invasivo de células-tronco é fundamental para o monitoramento praticamente qualquer terapia com células-tronco baseado. Uma melhor compreensão da na cinética in vivo de células-tronco rotulados, como visualizado nas imagens de RM, podem liderar o caminho para uma racional e uma utilização mais eficaz da haste terapias baseadas em células. Desde que nós usamos agentes de contraste clinicamente aplicáveis ​​e técnicas de imagem, os nossos protocolos apresentados devem ser facilmente traduzíveis para apl...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>D-MEM High Glucose</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>D5648</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gelatin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1890</td>
<td>dilute Gelatin in PBS to final concentration of 0.1 %</td>
</tr>
<tr>
<td>PBS (Ca++ Mg++ freed)</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td> 14190-144</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA 0.05%</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25300-120</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA 0.25%</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25200-114	</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS characterized</td>
<td>Reagent</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30071.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell Strainer (40 &#x03BC;m Nylon)</td>
<td>Tool</td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352340</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout DMEM</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>10829018</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Knockout Serum Replacer</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>10828028</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>b-Mercaptoethanol</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>7522</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>non-essential amino acids</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>11140050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FGF-2</td>
<td>Reagent</td>
<td>R&D Systems</td>
<td>233-FB-025</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glutamine</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>25030081</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin/Streptomycin</td>
<td>Reagent</td>
<td>GIBCO</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ferumoxides (Endorem)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Guerbet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ferucarbotran (Resovist&#174;)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Bayer Schering AG</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

labeling hescs and hmscs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with mr imaging

<p class="jove_content">Nos últimos anos, investigação em células estaminais tem levado a uma melhor compreensão da biologia do desenvolvimento, várias doenças e seu impacto potencial na medicina regenerativa. Um método não-invasivo para monitorar as células-tronco transplantadas repetidamente in vivo, aumentaria consideravelmente a nossa capacidade de compreender os mecanismos que controlam a morte de células-tronco e identificar fatores tróficos e vias de sinalização que melhoram o enxerto de células-tronco. RM tem sido provado ser uma ferramenta eficaz para a representação em vivo das células-tronco com resolução anatômica perto microscópica. A fim de detectar células-tronco com MR, as células têm de ser rotulados com células agentes de contraste específicos MR. Para este fim, as nanopartículas de óxido de ferro, tais como partículas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIO), são aplicados, por causa de sua alta sensibilidade para a detecção de células e sua excelente biocompatibilidade. SPIO partículas são compostas de um núcleo de óxido de ferro e um casaco de dextran, carboxydextran ou amido, e função, criando inomogeneidades de campo local, que causam uma diminuição do sinal em imagens ponderadas em T2 MR. Esta apresentação vai demonstrar técnicas para a rotulagem de células-tronco com agentes de contraste clinicamente aplicáveis ​​MR para posterior não-invasiva no rastreamento vivo das células marcadas com ressonância magnética.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging at JoVE.com

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

<p class="jove_content">Para a avaliação de terapias com células-tronco é importante não invasiva track as células injetadas in vivo. Este vídeo irá mostrar-lhe como rotular as células-tronco mesenquimais e embrionárias com óxido de ferro agentes de contraste com base in vivo para posterior ressonância magnética in vivo.</p>

Rotulagem e hESCs hMSCs com óxido de ferro nanopartículas para Não-invasiva em Rastreamento vivo com ressonância magnética

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Research

JoVE Journal

Biology

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Biologia

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Não-invasivo 3D Visualization com Sub-micron Resolução Usando Síncrotron-X-ray-tomografia

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Tracking Dynamics of Muscle Engraftment in Small Animals by In Vivo Fluorescent Imaging

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Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

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Metabólica Rotulagem de Leucina rico Repita Kinases 1 e 2 com Radioactive Fosfato

Leucine rich repeat kinases 1 and 2 (LRRK1 and LRRK2) are paralogs which share a similar domain organization, including a serine-threonine kinase domain, ...

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In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

<em>In Vivo</em> Rastreamento 4-Dimensional de tronco hematopoéticas e células progenitoras em adultos mouse na calota craniana de Medula Óssea

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Fluorescence Imaging with One-nanometer Accuracy (FIONA)

Fluorescence Imaging with One-nanometer Accuracy FIONA

Imagens de fluorescência com um nanômetros Precisão (Fiona)

Fluorescence imaging with one-nanometer accuracy (FIONA) is a simple but useful technique for localizing single fluorophores with nanometer precision in ...

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Fecal Análise de glicocorticóides: Non-invasive Monitoring Adrenal em eqüídeos

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